T-YNZYC 0122-2024 綠色藥材 仙茅組培苗生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程

ICS66.020.20CCSB00/09YNZYC云南省中藥材種植養(yǎng)殖行業(yè)協(xié)會(huì)團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)GreenMedicinalMaterialsTechnicalregulationsfortheproductionoftissuecultureseedlingofCurculigoorchioidesIT/YNZYC0122—2024本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。請注意本文件的某些內(nèi)容有可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別專利的責(zé)任。本文件由云南省中藥材種植養(yǎng)殖行業(yè)協(xié)會(huì)提出并歸口。本文件起草單位：云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院藥用植物研究所、云南昊晨農(nóng)業(yè)有限公司、云南植蟲藥生物科技有限公司。本文件主要起草人：起明菊、楊美權(quán)、張金渝、曾祥飛、楊維澤、楊天梅、左應(yīng)梅、趙露琴、許宗亮、王麗、李紀(jì)潮、朱新焰。1T/YNZYC0122—2024綠色藥材仙茅組培苗生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程本文件規(guī)定了仙茅組培苗培養(yǎng)準(zhǔn)備、外植體采集和處理、組織培養(yǎng)、馴化、包裝、標(biāo)識(shí)和運(yùn)輸。本文件適用于云南省仙茅組培苗的生產(chǎn)。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。NY/T496肥料合理使用準(zhǔn)則通則NY/T2306花卉種苗組培快繁技術(shù)規(guī)程3術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。3.1組織培養(yǎng)利用植物細(xì)胞的全能性，采集仙茅幼嫩葉，通過無菌操作，在人工控制條件下進(jìn)行培養(yǎng)以獲得再生的完整仙茅植株。3.2外植體從健壯鮮活植物體上獲取的用于植物組織培養(yǎng)的組織或器官。3.3馴化組培苗從人工控制的培養(yǎng)條件到自然適應(yīng)的過渡過程。4培養(yǎng)準(zhǔn)備4.1生產(chǎn)場地與設(shè)備應(yīng)符合“NY/T2306”的規(guī)定要求。4.2接種室消毒按照每15m2配置1根30w紫外燈的標(biāo)準(zhǔn)，每天用紫外燈照射殺菌1h,每周用臭氧發(fā)生器消毒2次~3次，臭氧濃度≥20mg/m3,時(shí)間≥30min。4.3培養(yǎng)基配制以MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，添加瓊脂4.0g/L～4.5g/L，蔗糖30g/L，調(diào)節(jié)pH值為5.8，激素和添加物配方見附錄A。4.4培養(yǎng)基消毒分裝并密封好的培養(yǎng)基放入121℃下高壓滅菌20min，自然冷卻至壓力表指針降至0時(shí)，開鍋取出備用。5外植體的采集和處理2T/YNZYC0122—20245.1外植體選擇取生長旺盛，無病蟲害的植株。5.2采集時(shí)間4月～6月，用75%多菌靈粉劑500倍液噴施植株，每隔3d噴施一次，連續(xù)噴施5次。5.3采集方法取幼嫩葉，采集后加標(biāo)簽，標(biāo)明母株編號(hào)、采集地點(diǎn)、采集時(shí)間等。若葉片30min內(nèi)不能處理，則需裝入自封袋中，排除空氣后密封保存；若需長途運(yùn)輸2d～3d,需冷藏保存。5.4表面清潔用肥皂液清洗10min～15min，滴加3滴～4滴吐溫-80振搖10min～15min，置于自來水下沖洗50min～70min。5.5消毒外植體消毒按以下步驟進(jìn)行：a在超凈工作臺(tái)上，用75%酒精消毒10s～15s，無菌水沖洗2次～3次。b用飽和漂白粉溶液消毒20min～30min，無菌水沖洗4次～5次。c用0.05%升汞溶液消毒10min～15min，無菌水沖洗8次～9次。5.6消毒廢液的處理使用過的氯化汞溶液按照國家有關(guān)劇毒化學(xué)品使用的法規(guī)進(jìn)行回收處理。6組織培養(yǎng)6.1初代培養(yǎng)將消毒好的仙茅葉片，剪去接觸消毒液的傷口，剪成長約0.5cm～1.0cm的小段，將剪好材料平鋪于培養(yǎng)基中，接種材料與培養(yǎng)基充分接觸，分布均勻，接種完畢立即蓋好瓶蓋并作好標(biāo)記，注明材料名稱、接種日期等事項(xiàng)，先暗培養(yǎng)20d～30d再轉(zhuǎn)光培養(yǎng)30d～40d，形成增殖苗。6.2增殖培養(yǎng)取誘導(dǎo)或繼代獲得叢生芽，將叢生芽剪成單芽，將單芽從基部剪成葉片和莖段。莖段基部接種于繼代培養(yǎng)基中，葉片剪成長約0.5cm～1cm的小段，平鋪于繼代培養(yǎng)基中，轉(zhuǎn)接周期為50d～60d。6.3生根培養(yǎng)將增殖的叢芽切割成單個(gè)完整的幼芽，按極性接種于生根培養(yǎng)基中，培養(yǎng)50d～60d可煉苗。6.4培養(yǎng)條件培養(yǎng)溫度為25℃±2℃,光照強(qiáng)度為2000lux～3000lux，每日光照12h。6.5生根苗質(zhì)量要求植株生長健壯，苗高5cm以上，根系多于3條。7馴化7.1馴化棚搭建與栽培環(huán)境相近的設(shè)施大棚或小拱棚，遮光率40%～60%，架設(shè)噴灌或滴灌。移植前擰松瓶蓋放置在馴化棚內(nèi)培養(yǎng)5d～7d。3T/YNZYC0122—20247.3移植取出組培苗，用清水洗凈培養(yǎng)基，按5cm×10cm的密度栽植于泥炭土：壤土：珍珠巖（1:1;1）的混合基質(zhì)中。7.4馴化管理7.4.1溫度要求苗床溫度應(yīng)控制在15℃~30℃,當(dāng)溫度高于30℃時(shí)，兩側(cè)通風(fēng)或揭膜降溫。7.4.2空氣濕度1個(gè)月內(nèi)，保持空氣濕度在80%以上。2月后，保持空氣濕度在60%～80%。7.4.3施肥管理移植2個(gè)月后，每隔10d噴施0.2%氮磷鉀為15:15:15的水溶肥1次；定植3個(gè)月后，每隔15d噴施0.3%氮磷鉀為15:15:15的水溶肥1次。肥料的使用應(yīng)符合NY/T496的要求。7.5病蟲害防控采用75%的百菌清600倍液或65%的代森錳鋅500倍液交替使用，每月噴藥1次～2次。7.6出圃培育90d以上，株高12cm以上可出苗。8包裝、標(biāo)識(shí)和運(yùn)輸8.1包裝以100株為單位捆綁，用塑料袋或無紡布袋包裹根部，放入箱內(nèi)包裝。8.2標(biāo)識(shí)外包裝箱上需貼上標(biāo)識(shí)，注明品種（含品系）、規(guī)格、等級、數(shù)量、生產(chǎn)