生物一同步自我小測(cè)：蛋白質(zhì)的提取和分離

學(xué)必求其心得，業(yè)必貴于專精學(xué)必求其心得，業(yè)必貴于專精學(xué)必求其心得，業(yè)必貴于專精自我小測(cè)1．下列關(guān)于蛋白質(zhì)的分離方法的敘述，錯(cuò)誤的是（）A．分離主要是根據(jù)蛋白質(zhì)以及蛋白質(zhì)與其他物質(zhì)之間的理化性質(zhì)的差異進(jìn)行的B．透析技術(shù)可去除小分子化合物雜質(zhì),原理是不同分子所攜帶凈電荷不同C．通過控制離心速率可使分子大小、密度不同的蛋白質(zhì)沉降分層，從而分離不同的蛋白質(zhì)D．不同的物質(zhì)在同一電場(chǎng)中的泳動(dòng)速度不同，因此可用電泳法分離蛋白質(zhì)2．離心技術(shù)是分離蛋白質(zhì)的方法之一,在這一過程中蛋白質(zhì)會(huì)分層,這一現(xiàn)象與蛋白質(zhì)的何種性質(zhì)有關(guān)？（）A．酸堿性 B．所帶電荷多少C．分子大小和密度 D．種類3．下列有關(guān)電泳現(xiàn)象的敘述,錯(cuò)誤的是（）A．相同蛋白質(zhì)的溶液，經(jīng)過同一個(gè)電場(chǎng)電泳后，會(huì)在支持物凝膠上形成相同的帶紋B．不同蛋白質(zhì)的混合溶液，經(jīng)過同一個(gè)電場(chǎng)電泳后,會(huì)在支持物凝膠上形成不同的帶紋C．每一種帶紋可能就是一種蛋白質(zhì)D．每一種帶紋一定不是一種蛋白質(zhì)4．下列關(guān)于聚丙烯酰胺凝膠電泳的敘述,錯(cuò)誤的是（）A．是最早使用的電泳技術(shù)B．是區(qū)帶電泳的一種C．凝膠上層加濃縮膠可提高分離效果D．分離血清蛋白質(zhì)可以得到20種以上的組分5．電泳過程中，什么樣的分子遷移速度最快？(）A．纖維狀、大分子 B．纖維狀、小分子C．球狀、大分子 D．球狀、小分子6．在血清蛋白的提取和分離過程中，所使用的染色液是（）A．新制血清5μLB．質(zhì)量濃度為0。4g/mL的蔗糖溶液C．質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0。05%的考馬斯亮藍(lán)R250染色液D．質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1%的溴酚藍(lán)指示劑7．下面說法不正確的是（)A．分離膠和濃縮膠單獨(dú)存在時(shí)具有神經(jīng)毒性，應(yīng)避免接觸皮膚B．電泳需要支持物，常用的是聚丙烯酰胺凝膠C．電泳是指帶電粒子在電場(chǎng)的作用下發(fā)生遷移的過程D．蛋白質(zhì)是兩性電解質(zhì)，不帶電荷8．電泳法分離蛋白質(zhì)時(shí),應(yīng)保證凝膠的pH（)A．不斷降低 B．不斷升高C．先降低后升高 D．不變且適宜9．下面說法不正確的是(）A．在一定范圍內(nèi)，緩沖溶液能夠抵制外界的酸、堿對(duì)溶液pH的影響，維持pH基本不變B．緩沖溶液通常由1~2種緩沖劑溶解于水中配制而成C．電泳是指帶電粒子在電場(chǎng)的作用下發(fā)生遷移的過程D．透析袋能使大分子自由進(jìn)出，而將小分子保留在袋內(nèi)10．有一混合蛋白質(zhì)溶液，各種蛋白質(zhì)的pH分別為4.5、5.2、6。6、7.2,電泳時(shí)欲使其中三種泳向正極，緩沖液的pH應(yīng)該是（)A．2.0 B．5.0C．6。0 D．7.011．下列關(guān)于“血清蛋白的提取和分離"的活動(dòng)順序正確的是（）①染色②電泳③點(diǎn)樣④脫色⑤制干膠板A．①②③⑤④ B．⑤②①③④C．④①②③⑤ D．③②①④⑤12．各種動(dòng)物血清內(nèi)乳酸脫氫酶同工酶的組成是不同的.可以通過比較各種動(dòng)物乳酸脫氫酶同工酶差異的大小來判斷動(dòng)物之間親緣關(guān)系的遠(yuǎn)近。下列各種實(shí)驗(yàn)方法中,不能采用的方法是（）A．測(cè)乳酸脫氫酶同工酶的氨基酸序列B．測(cè)控制乳酸脫氫酶同工酶合成的基因堿基序列C．用電泳法比較各種動(dòng)物乳酸脫氫酶同工酶的電泳帶D．檢測(cè)不同動(dòng)物的乳酸脫氫酶同工酶的pH13．下圖為某些氨基酸在pH＝6時(shí)進(jìn)行電泳的結(jié)果，請(qǐng)回答下列問題。(1）由圖示可知，pH＝6時(shí)帶正電荷的氨基酸是______，帶負(fù)電荷的氨基酸是______.請(qǐng)說明理由：___________________________________________________________________.（2）假設(shè)谷氨酸和賴氨酸所帶電荷數(shù)相同,它們到達(dá)兩極的速度一樣嗎?______，為什么？________________________________________________________________________。（3）若把氨基酸換成蛋白質(zhì)，會(huì)出現(xiàn)什么現(xiàn)象?_____________________________________________________________________________________________________.14．我們可以選用豬、牛、羊或其他脊椎動(dòng)物的血液進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，來提取和分離血紅蛋白。根據(jù)材料回答下列問題。（1）實(shí)驗(yàn)前取新鮮血液,要在采血器中預(yù)先加入檸檬酸鈉，取血回來，馬上進(jìn)行離心，收集血紅蛋白溶液。加入檸檬酸鈉的目的是______________________________________________________________________________________________________________。(2)在對(duì)樣品進(jìn)行處理時(shí),主要包括紅細(xì)胞的洗滌、血紅蛋白的釋放、分離血紅蛋白溶液、透析等步驟.其中透析技術(shù)的原理是__________________________________________________________________________________________________________________.（3）同學(xué)甲利用瓊脂糖凝膠電泳技術(shù)將得到的蛋白質(zhì)進(jìn)行分離，在電泳過程中，影響蛋白質(zhì)遷移速率的因素包括蛋白質(zhì)分子的______以及分子的______、形狀等。(4）SDS凝膠電泳主要取決于蛋白質(zhì)分子量的大小，與電荷無關(guān)。圖一、圖二分別是某同學(xué)利用同一種樣品分離得到的結(jié)果，則圖二中與圖一中蛋白質(zhì)P對(duì)應(yīng)的是______。圖一SDS凝膠電泳結(jié)果圖二SpephadexG75，凝膠色譜分離結(jié)果

參考答案1．解析：透析技術(shù)分離蛋白質(zhì)是因?yàn)榈鞍踪|(zhì)分子大,不能透過半透膜。答案：B2．解析：根據(jù)蛋白質(zhì)之間或蛋白質(zhì)與其他分子之間在分子大小和密度上的不同，采用離心技術(shù)，使其分層而分離。答案：C3．解析：不同蛋白質(zhì)的混合溶液,在經(jīng)過同一個(gè)電場(chǎng)電泳后，會(huì)在支持物凝膠上形成不同的帶紋,每一種帶紋可能是一種蛋白質(zhì)，也可能是多種蛋白質(zhì)，還須洗脫確定。答案：D4．解析：聚丙烯酰胺凝膠電泳是最近開始使用的。答案：A5．解析：電泳就是利用了連續(xù)分離樣品中各種分子帶電性質(zhì)的差異以及分子本身的大小、形狀的不同。一般來說，球形分子比纖維狀分子易移動(dòng)，小分子比大分子易移動(dòng)。答案:D6．解析：染色液用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0。05%的考馬斯亮藍(lán)R250染色液.答案：C7．解析：蛋白質(zhì)是兩性電解質(zhì)，在一定pH條件下帶有電荷。答案:D8．解析：pH的變化會(huì)使蛋白質(zhì)的電泳速度發(fā)生改變，因此，為了使蛋白質(zhì)勻速遷移，應(yīng)保證凝膠的pH不變且適宜,可用緩沖溶液穩(wěn)定pH。答案：D9．解析：透析袋一般是用硝酸纖維素（又叫玻璃紙）制成的.透析袋能使小分子自由進(jìn)出，而將大分子保留在袋內(nèi)。透析可以除去樣品中相對(duì)分子質(zhì)量較小的雜質(zhì).答案:D10．解析：在緩沖液的pH為7.0的溶液中，pH分別為4。5、5.2、6。6的蛋白質(zhì)均帶負(fù)電荷，在電泳時(shí)移向正極。答案:D11．解析：血清蛋白的提取和分離的過程,第一步是用微量加樣器吸取樣品加到電泳樣品槽的膠面上,即點(diǎn)樣。第二步是打開電泳儀的電源，進(jìn)行電泳.第三步是用考馬斯亮藍(lán)R250染液進(jìn)行染色。第四步是用醋酸溶液脫色。第五步是將已脫色的凝膠板浸泡后，自然干燥即獲得血清蛋白的電泳譜帶.答案：D12．解析：生物是由共同的原始祖先進(jìn)化而來的。各種生物之間具有或近或遠(yuǎn)的親緣關(guān)系。親緣關(guān)系越近，則其對(duì)應(yīng)的基因的堿基序列相似程度就越高，而基因控制蛋白質(zhì)的合成，故其對(duì)應(yīng)的蛋白質(zhì)的氨基酸序列相似程度也高。因此,可以采用測(cè)定基因或蛋白質(zhì)序列的方法進(jìn)行判斷。若蛋白質(zhì)的相似程度高，則進(jìn)行電泳時(shí)，電泳帶的相似程度也高。不同動(dòng)物的乳酸脫氫酶同工酶組成雖不同，但不能說明其pH就一定不同。答案：D13．解析：氨基酸是一種兩性電解質(zhì)，在一定pH條件下帶電荷，作為帶電粒子,氨基酸向與其自身所帶電荷相反的電極運(yùn)動(dòng),即向正極運(yùn)動(dòng)的氨基酸帶負(fù)電荷，向負(fù)極運(yùn)動(dòng)的氨基酸帶正電荷，在原點(diǎn)不動(dòng)的氨基酸，所帶正電荷和負(fù)電荷相等。蛋白質(zhì)也是一種兩性電解質(zhì).答案:（1）賴氨酸谷氨酸氨基酸是一種兩性電解質(zhì)，在一定pH條件下帶電荷，作為帶電粒子，在進(jìn)行電泳時(shí)氨基酸向與其自身所帶電荷相反的電極方向運(yùn)動(dòng)(2)不一樣進(jìn)行電泳時(shí)，若氨基酸帶相同的電荷數(shù)，相對(duì)分子質(zhì)量越小，則移動(dòng)越快。由于兩者相對(duì)分子質(zhì)量不相等，因此到達(dá)兩極的速度不同(3)蛋白質(zhì)同氨基酸一樣,在一定pH條件下帶電荷，也會(huì)向與其自身所帶電荷相反的電極方向運(yùn)動(dòng)14．解析：（1）加入檸檬酸鈉的目的是防止血液凝固.（2）透析的原理是小分子可以透出透析袋(半透膜），而大分子不能通過。（3）電泳時(shí),影響蛋白質(zhì)遷移速率的因素有蛋白質(zhì)分子的帶電性質(zhì)及分子的大小、形狀等。(4）SDS凝膠電泳主要取決于蛋白質(zhì)分子量的大小,與電荷無關(guān)，同時(shí)加樣在“－”極,通電后,樣品蛋白質(zhì)向“＋”極移動(dòng)，分子量相對(duì)小的，移動(dòng)距離大，因此從圖一的電泳結(jié)果分析，P比N、M移向“＋”距離大，符合圖二中的丙.答案：（1）防止血液凝固（2)小分子可以透出透析袋（半透膜），而大分子不能通過（3）帶電荷數(shù)多少大?。?）丙教學(xué)建議教師可從教材入手導(dǎo)入本節(jié)，也可以列舉其他實(shí)例，說明蛋白質(zhì)提取和分離的重要性.電泳技術(shù)廣泛應(yīng)用于生化實(shí)驗(yàn)，在分離酶、蛋白質(zhì)、核酸等生物大分子方面具有較高的分辨率。教師可以通過一個(gè)簡(jiǎn)單的實(shí)驗(yàn)使學(xué)生理解電泳現(xiàn)象，比如在盛有紅褐色Fe（OH）3膠體的U形管的兩個(gè)管口，各插入一個(gè)電極。通直流電后，發(fā)現(xiàn)陰極附近的顏色逐漸變深，陽極附近的顏色逐漸變淺。這表明Fe（O