第47講　動(dòng)物細(xì)胞工程-2025年高考生物一輪復(fù)習(xí)練習(xí)（新人教新高考）

第47講動(dòng)物細(xì)胞工程課標(biāo)內(nèi)容(1)闡明動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是從動(dòng)物體獲得相關(guān)組織，分散成單個(gè)細(xì)胞后，在適宜的培養(yǎng)條件下讓細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖的過(guò)程。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)。(2)闡明動(dòng)物細(xì)胞核移植一般是將動(dòng)物一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入去核的卵母細(xì)胞中，并使重組細(xì)胞發(fā)育成新胚胎，繼而發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體的過(guò)程。(3)闡明動(dòng)物細(xì)胞融合是指通過(guò)物理、化學(xué)或生物學(xué)等手段，使兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過(guò)程。(4)概述細(xì)胞融合技術(shù)是單克隆抗體制備的重要技術(shù)。(5)簡(jiǎn)述干細(xì)胞在生物醫(yī)學(xué)工程中有廣泛的應(yīng)用價(jià)值。考點(diǎn)一動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)1.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)原理：細(xì)胞增殖(1)地位：動(dòng)物細(xì)胞工程常用的技術(shù)有動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞核移植、動(dòng)物細(xì)胞融合等。其中動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)。(2)培養(yǎng)條件一般用液體培養(yǎng)基(3)培養(yǎng)過(guò)程(1)區(qū)分原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)的關(guān)鍵是看用胰蛋白酶處理的對(duì)象和是否分瓶。①分瓶前，第一次用胰蛋白酶對(duì)動(dòng)物組織進(jìn)行處理后的培養(yǎng)是原代培養(yǎng)。②第二次用胰蛋白酶處理，使細(xì)胞從瓶壁上脫離下來(lái)，分瓶后的細(xì)胞培養(yǎng)為傳代培養(yǎng)。(2)細(xì)胞貼壁和接觸抑制：懸液中分散的細(xì)胞很快就貼附在瓶壁上，稱(chēng)為細(xì)胞貼壁。細(xì)胞數(shù)目不斷增多，當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到表面相互接觸時(shí)，細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱(chēng)為細(xì)胞的接觸抑制。2.干細(xì)胞培養(yǎng)及其應(yīng)用【情境推理·探究】1.進(jìn)行動(dòng)物傳代培養(yǎng)時(shí)用胰蛋白酶分散細(xì)胞，可以用胃蛋白酶替代胰蛋白酶嗎？說(shuō)明原因。提示不可以，胃蛋白酶作用的適宜pH約為1.5，當(dāng)pH大于6時(shí)，胃蛋白酶就會(huì)失活。胰蛋白酶作用的適宜pH為7.2～8.4。多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的適宜pH為7.2～7.4，胃蛋白酶在此環(huán)境中失活，而胰蛋白酶在此環(huán)境中活性較高，因此胰蛋白酶適宜用于傳代培養(yǎng)時(shí)分散細(xì)胞。2.若將病人的皮膚成纖維細(xì)胞誘導(dǎo)成iPS細(xì)胞，再使它轉(zhuǎn)化為需要的細(xì)胞，用這些細(xì)胞給病人治病，不會(huì)產(chǎn)生免疫排斥反應(yīng)，嘗試解釋其中的原因。提示iPS細(xì)胞來(lái)源于病人自身的體細(xì)胞。3.利用iPS細(xì)胞治療鐮狀細(xì)胞貧血的過(guò)程是首先制備患者的iPS細(xì)胞，再將其誘導(dǎo)形成造血干細(xì)胞，最終輸給患者使其產(chǎn)生健康的血細(xì)胞。判斷該過(guò)程是否能治療鐮狀細(xì)胞貧血？并闡述理由。提示不能。因?yàn)榛颊唧w細(xì)胞的相應(yīng)基因是突變的，制成iPS細(xì)胞仍然是突變的，分化成的細(xì)胞也是突變的，因此無(wú)法通過(guò)該方法治療。【重點(diǎn)難點(diǎn)·透析】動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)的比較考向1結(jié)合動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)，考查生命觀(guān)念1.(2023·東北師大附中)實(shí)驗(yàn)小鼠皮膚細(xì)胞培養(yǎng)的基本過(guò)程如圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是()實(shí)驗(yàn)小鼠eq\o(→,\s\up7(甲))皮膚組織eq\o(→,\s\up7(乙))皮膚細(xì)胞懸液eq\o(→,\s\up7(丙))細(xì)胞群體1eq\o(→,\s\up7(丁))細(xì)胞群體2A.甲過(guò)程需要對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠進(jìn)行消毒B.乙過(guò)程需要用胰蛋白酶等處理皮膚組織，使細(xì)胞分散開(kāi)C.丙過(guò)程表示原代培養(yǎng)，該過(guò)程中會(huì)出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象D.丁過(guò)程表示傳代培養(yǎng)，此過(guò)程中的細(xì)胞分瓶后能無(wú)限增殖答案D解析離體動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境，甲過(guò)程表示從實(shí)驗(yàn)小鼠身上取下皮膚組織，該過(guò)程需要對(duì)小鼠進(jìn)行消毒，A正確；皮膚細(xì)胞培養(yǎng)前需用胰蛋白酶等處理皮膚組織使細(xì)胞分散開(kāi)，并制成細(xì)胞懸液，B正確；丁過(guò)程表示傳代培養(yǎng)，但分瓶后，細(xì)胞并非都能無(wú)限增殖，D錯(cuò)誤。2.(2023·山東德州期末)如圖所示為動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的基本過(guò)程，下列關(guān)于甲、乙、丙、丁四個(gè)操作過(guò)程的敘述，正確的是()A.甲過(guò)程可選取動(dòng)物個(gè)體的任何組織細(xì)胞B.乙過(guò)程可用纖維素酶和果膠酶處理細(xì)胞C.丙過(guò)程所用培養(yǎng)液中需添加動(dòng)物血清D.丁過(guò)程中的細(xì)胞因接觸抑制而大量死亡答案C解析甲過(guò)程可選取幼齡動(dòng)物的器官或組織，A錯(cuò)誤；乙過(guò)程可用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理細(xì)胞，B錯(cuò)誤；由于人們對(duì)細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)尚未完全研究清楚，因此在使用合成培養(yǎng)基時(shí)，通常需要加入血清等一些天然成分，C正確；丁過(guò)程中的細(xì)胞因接觸抑制而影響細(xì)胞增殖，并不會(huì)大量死亡，D錯(cuò)誤。考向2圍繞干細(xì)胞的培養(yǎng)及其應(yīng)用，考查社會(huì)責(zé)任3.(2023·重慶巴蜀中學(xué)質(zhì)檢)胚胎干細(xì)胞必須從胚胎中獲取，但這涉及倫理問(wèn)題，因而限制了它在醫(yī)學(xué)上的應(yīng)用?？茖W(xué)家通過(guò)體外誘導(dǎo)成纖維細(xì)胞，獲得了類(lèi)似于胚胎干細(xì)胞的一種細(xì)胞，稱(chēng)為誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(簡(jiǎn)稱(chēng)iPS細(xì)胞)。因?yàn)檎T導(dǎo)過(guò)程無(wú)須破壞胚胎，而且iPS細(xì)胞可來(lái)源于病人自身的體細(xì)胞，因此iPS細(xì)胞的應(yīng)用前景優(yōu)于胚胎干細(xì)胞。如圖為iPS細(xì)胞的獲得及用其培育不同種細(xì)胞的示意圖(c-Myc、Klf4、Sox2和Oct3/4等基因與細(xì)胞的脫分化有關(guān))?；卮鹣铝袉?wèn)題：(1)在對(duì)成纖維細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)時(shí)，常用胰蛋白酶處理使之分散成單個(gè)細(xì)胞，這說(shuō)明細(xì)胞間的物質(zhì)為_(kāi)_______，________(填“能”或“不能”)用胃蛋白酶處理成纖維細(xì)胞，原因是________________________________________________________________________________________________________________________。(2)在培養(yǎng)iPS細(xì)胞的過(guò)程中，培養(yǎng)基中應(yīng)含有細(xì)胞所需的各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，并定期更換培養(yǎng)液。定期更換培養(yǎng)液的目的是_______________________________________________________________________________________________________。(3)過(guò)程③④為iPS細(xì)胞提供的條件不同，分化得到的細(xì)胞不同，可知細(xì)胞分化是________________________的結(jié)果。若iPS細(xì)胞來(lái)源于病人自身體細(xì)胞的誘導(dǎo)，再將其分化出的細(xì)胞移入患者體內(nèi)的優(yōu)勢(shì)是__________________________________________________________________________________________________。(4)如果誘導(dǎo)iPS細(xì)胞定向分化為原始生殖細(xì)胞，該技術(shù)可能的應(yīng)用是________________________________________________________________________________________________________________________________________。答案(1)蛋白質(zhì)不能多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的適宜pH為7.2～7.4，胃蛋白酶在此環(huán)境中變性失活(2)清除代謝物，防止細(xì)胞代謝物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害(3)基因與環(huán)境共同作用避免了免疫排斥問(wèn)題(4)解決不育問(wèn)題考點(diǎn)二動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)與單克隆抗體1.動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)2.單克隆抗體及其應(yīng)用制備過(guò)程原理：細(xì)胞膜的流動(dòng)性和細(xì)胞增殖①用特定抗原對(duì)小鼠進(jìn)行免疫的原因：B淋巴細(xì)胞要經(jīng)過(guò)免疫過(guò)程，即接觸抗原，增殖分化為有特異性免疫功能的B淋巴細(xì)胞，才能產(chǎn)生相應(yīng)的抗體，所以，與骨髓瘤細(xì)胞融合的B淋巴細(xì)胞實(shí)際上是經(jīng)過(guò)特定抗原免疫的B淋巴細(xì)胞。②雜交細(xì)胞：在誘導(dǎo)因素的作用下進(jìn)行細(xì)胞的誘導(dǎo)融合，形成的雜交細(xì)胞有多種，若僅考慮兩兩融合的情況，形成的雜交細(xì)胞有三種，AA型、BB型、AB型。只有AB型才是我們所需要的雜交細(xì)胞，所以需要用選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選。③兩次篩選的目的：第一次是在誘導(dǎo)融合之后，利用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞。第二次是對(duì)上述雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行篩選，利用96孔板培養(yǎng)，采用專(zhuān)一抗體檢測(cè)的方法篩選出能產(chǎn)生所需特定抗體的雜交瘤細(xì)胞。

【情境推理·探究】1.制備的單克隆抗體在臨床上不能直接用于人體，還需要對(duì)抗體進(jìn)行人源化，即對(duì)鼠源單克隆抗體進(jìn)行改造，使其大部分氨基酸序列為人源序列所替代，該過(guò)程的意義是____________________________________________________________。提示鼠源單克隆抗體對(duì)人而言可能是異種抗原，經(jīng)人源化后能保留抗體的特異性，降低其異源性2.dMAb技術(shù)是一種通過(guò)DNA編碼產(chǎn)生單克隆抗體的技術(shù)，比傳統(tǒng)的單克隆抗體制備方法有更多的發(fā)展?jié)摿?。下圖是dMAb技術(shù)在埃博拉病毒感染疾病的臨床研究中的操作流程。與傳統(tǒng)利用雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生單克隆抗體的技術(shù)相比，dMAb技術(shù)在抗體的制備上有何優(yōu)勢(shì)？(請(qǐng)列舉兩點(diǎn))________________________________________________________________________________________________________________。提示抗體的產(chǎn)生在生物體內(nèi)進(jìn)行，不需要進(jìn)行細(xì)胞體外培養(yǎng)；產(chǎn)生抗體的細(xì)胞種類(lèi)不局限于免疫細(xì)胞(漿細(xì)胞)；可制備成DNA“疫苗”，便于存儲(chǔ)和運(yùn)輸；抗體直接由DNA編碼產(chǎn)生，省去抗原刺激免疫細(xì)胞、細(xì)胞融合和篩選的步驟3.請(qǐng)根據(jù)以下信息，設(shè)計(jì)一方法(不考慮機(jī)械方法)，從培養(yǎng)液中篩選出雜交瘤細(xì)胞，并寫(xiě)出其依據(jù)的原理。已知細(xì)胞合成DNA有D和S兩條途徑，其中D途徑能被氨基嘌呤阻斷。人淋巴細(xì)胞中有這兩種DNA的合成途徑，但一般不分裂增殖。小鼠骨髓瘤細(xì)胞中盡管只有D途徑，但能不斷分裂增殖，將這兩種細(xì)胞在試管中混合，加入聚乙二醇促融，獲得雜種細(xì)胞。提示為了篩選出雜交瘤細(xì)胞，除去其他細(xì)胞，可向培養(yǎng)液中加入氨基嘌呤，收集增殖的細(xì)胞，因?yàn)榧尤氚被堰屎?，使D合成途徑阻斷，僅有D合成途徑的骨髓瘤細(xì)胞及其彼此融合的細(xì)胞就不能增殖，但人的淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合后的雜種細(xì)胞可以利用淋巴細(xì)胞中的S途徑合成DNA而增殖?？枷蚪Y(jié)合單克隆抗體的制備及應(yīng)用，考查科學(xué)探究能力1.(2022·山東卷，15)如圖所示，將由2種不同的抗原分別制備的單克隆抗體分子，在體外解偶聯(lián)后重新偶聯(lián)可制備雙特異性抗體，簡(jiǎn)稱(chēng)雙抗。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是()A.雙抗可同時(shí)與2種抗原結(jié)合B.利用雙抗可以將蛋白類(lèi)藥物運(yùn)送至靶細(xì)胞C.篩選雙抗時(shí)需使用制備單克隆抗體時(shí)所使用的2種抗原D.同時(shí)注射2種抗原可刺激B細(xì)胞分化為產(chǎn)雙抗的漿細(xì)胞答案D解析根據(jù)抗原和抗體發(fā)生特異性結(jié)合的原理推測(cè)，雙抗可同時(shí)與2種抗原結(jié)合，A正確；根據(jù)抗原與抗體能夠發(fā)生特異性結(jié)合的特性，利用雙抗可以將蛋白類(lèi)藥物運(yùn)送至靶細(xì)胞，從而使藥物發(fā)揮相應(yīng)的作用，B正確；由于雙抗是在兩種不同的抗原刺激下，B細(xì)胞增殖、分化產(chǎn)生不同的漿細(xì)胞分泌形成的單抗，自體偶聯(lián)后重新偶聯(lián)制備成的，因此，篩選雙抗時(shí)需使用制備單克隆抗體時(shí)所使用的2種抗原來(lái)進(jìn)行抗原—抗體檢測(cè)，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)雙抗的篩選，C正確；同時(shí)注射2種抗原可刺激B細(xì)胞分化形成不同的漿細(xì)胞，而不是分化成產(chǎn)雙抗的漿細(xì)胞，D錯(cuò)誤。2.(2023·中原名校聯(lián)盟)S蛋白是新冠病毒表面的一種抗原蛋白，能引起機(jī)體的特異性免疫反應(yīng)。下圖是國(guó)產(chǎn)腺病毒載體疫苗的生產(chǎn)流程，該疫苗可以有效預(yù)防新冠病毒感染?；卮鹣铝袉?wèn)題：(1)構(gòu)建重組腺病毒載體基因組需要用到的酶是________________。培養(yǎng)擴(kuò)增細(xì)胞時(shí)，細(xì)胞常出現(xiàn)貼壁生長(zhǎng)現(xiàn)象，分瓶前應(yīng)____________________________________________________________________________________________________。(2)腺病毒疫苗進(jìn)入人體后，S蛋白基因利用人體細(xì)胞的蛋白質(zhì)表達(dá)系統(tǒng)指導(dǎo)S蛋白的合成，其過(guò)程是_________________________________________________(用文字和箭頭表示)。(3)新冠抗體是人體產(chǎn)生的能直接攻擊新冠病毒的蛋白質(zhì)，直接給患者注射抗體能起到很好的治療效果。一般可以通過(guò)________、細(xì)胞培養(yǎng)和蛋白質(zhì)提取技術(shù)制備單克隆抗體。若要制備針對(duì)新冠病毒的單克隆抗體，需要用________多次注射小鼠，之后再?gòu)男∈笃⑴K中分離出________，與小鼠骨髓瘤細(xì)胞共同制備雜交瘤細(xì)胞。要得到滿(mǎn)足生產(chǎn)需要的雜交瘤細(xì)胞至少需要篩選________次。答案(1)限制酶和DNA連接酶用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理，分散細(xì)胞，并加入新培養(yǎng)液配成細(xì)胞懸液(2)S蛋白DNAeq\o(→,\s\up7(轉(zhuǎn)錄))mRNAeq\o(→,\s\up7(翻譯))S蛋白(3)(動(dòng)物)細(xì)胞融合S蛋白已免疫的B淋巴細(xì)胞2考點(diǎn)三動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物1.動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)動(dòng)物胚胎細(xì)胞分化程度低，表現(xiàn)全能性相對(duì)容易；而動(dòng)物體細(xì)胞分化程度高，表現(xiàn)全能性十分困難。因此動(dòng)物體細(xì)胞核移植的難度明顯高于胚胎細(xì)胞核移植。2.體細(xì)胞核移植的過(guò)程

3.體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景及存在的問(wèn)題【情境推理·探究】1.若通過(guò)核移植等技術(shù)獲得的克隆動(dòng)物與供體動(dòng)物性狀不完全相同，從遺傳物質(zhì)的角度分析其原因是_____________________________________________。提示卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)會(huì)對(duì)克隆動(dòng)物的性狀產(chǎn)生影響。2.科學(xué)家利用CRISPR/Cas9基因編輯系統(tǒng)，成功改造了獼猴基因組中與某病癥(Z癥)相關(guān)的SHANK3基因，獲得了Z癥獼猴。由此技術(shù)獲得的Z癥獼猴，可通過(guò)體細(xì)胞核移植技術(shù)得到克隆Z癥獼猴，請(qǐng)寫(xiě)出基本程序(用流程圖表示)。提示3.2018年，中國(guó)科學(xué)家成功培育全球首個(gè)體細(xì)胞克隆猴“中中”和“華華”?？寺『锏某晒榘柎暮ＤY、自閉癥等腦疾病以及免疫缺陷、腫瘤等疾病機(jī)理研究、干預(yù)、診治帶來(lái)前所未有的光明前景。與以往用普通猴子做實(shí)驗(yàn)相比，克隆猴作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型的兩大優(yōu)勢(shì)在哪里？提示一是體細(xì)胞克隆猴遺傳背景相同，避免個(gè)體間差異對(duì)實(shí)驗(yàn)的干擾，大大減少實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的使用數(shù)量；二是體細(xì)胞克隆猴制備時(shí)間縮短，基因編輯等可在體外培養(yǎng)的細(xì)胞進(jìn)行?？枷蚪Y(jié)合動(dòng)物核移植技術(shù)與克隆動(dòng)物，考查社會(huì)責(zé)任1.(2023·山東濰坊期末)研究人員采用體細(xì)胞克隆技術(shù)培育克隆羊，其操作流程如圖所示。下列敘述正確的是()A.X不能直接發(fā)育為個(gè)體的原因是細(xì)胞中的遺傳物質(zhì)不能表達(dá)B.重組細(xì)胞要進(jìn)行分裂和發(fā)育需經(jīng)振蕩或用滅活的病毒、PEG等激活C.早期胚胎在丙體內(nèi)能正常孕育是因?yàn)榕咛タ膳c母體建立正常的生理和組織聯(lián)系D.經(jīng)培育得到的丁羊，其細(xì)胞內(nèi)的遺傳物質(zhì)與甲完全相同答案C解析X不能直接發(fā)育為個(gè)體的原因是動(dòng)物體細(xì)胞表現(xiàn)全能性十分困難，A錯(cuò)誤；重組細(xì)胞要進(jìn)行分裂和發(fā)育需用物理或化學(xué)方法(如電刺激、Ca2＋載體、乙醇、蛋白酶合成抑制劑等)激活，B錯(cuò)誤；經(jīng)培育得到的丁羊，其細(xì)胞核遺傳物質(zhì)來(lái)自甲，而細(xì)胞質(zhì)遺傳物質(zhì)大部分來(lái)自乙，因此其細(xì)胞內(nèi)的遺傳物質(zhì)與甲不完全相同，D錯(cuò)誤。2.(2023·山東聊城期中)“中中”和“華華”是兩只在我國(guó)出生的克隆獼猴，它們也是國(guó)際上首例利用體細(xì)胞克隆技術(shù)獲得的非人靈長(zhǎng)類(lèi)動(dòng)物。如圖表示培育“中中”和“華華”的流程。下列相關(guān)敘述正確的是()A.圖示過(guò)程中利用的技術(shù)有核移植和干細(xì)胞移植技術(shù)等B.這兩只克隆獼猴是由同一受精卵發(fā)育而成的雙胞胎C.融合細(xì)胞的培養(yǎng)過(guò)程需要無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境和營(yíng)養(yǎng)等條件D.利用A猴的胚胎干細(xì)胞核移植獲得克隆獼猴的難度更大些答案C解析圖示過(guò)程包括核移植和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)等技術(shù)，沒(méi)有干細(xì)胞移植技術(shù)，A錯(cuò)誤；這兩只克隆獼猴是通過(guò)核移植、胚胎移植產(chǎn)生的，沒(méi)有用到受精卵，B錯(cuò)誤；胚胎干細(xì)胞的全能性比體細(xì)胞的全能性高，所以利用A猴的胚胎干細(xì)胞核移植獲得克隆獼猴的難度要小些，D錯(cuò)誤。重溫真題經(jīng)典再現(xiàn)1.(2020·天津卷，1)在克隆哺乳動(dòng)物過(guò)程中，通常作為核移植受體細(xì)胞的是去核的()A.卵原細(xì)胞 B.初級(jí)卵母細(xì)胞C.次級(jí)卵母細(xì)胞 D.卵細(xì)胞答案C解析克隆哺乳動(dòng)物時(shí)，一般將動(dòng)物的一個(gè)體細(xì)胞的細(xì)胞核移入到一個(gè)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體。通常作為核移植受體細(xì)胞的是去核的次級(jí)卵母細(xì)胞，C正確。2.(2021·遼寧卷，13)下圖是利用體細(xì)胞核移植技術(shù)克隆優(yōu)質(zhì)奶牛的簡(jiǎn)易流程圖，有關(guān)敘述正確的是()A.后代丁的遺傳性狀由甲和丙的遺傳物質(zhì)共同決定B.過(guò)程①需要提供95%空氣和5%CO2的混合氣體C.過(guò)程②常使用顯微操作去核法對(duì)受精卵進(jìn)行處理D.過(guò)程③將激活后的重組細(xì)胞培養(yǎng)至原腸胚后移植答案B解析圖示過(guò)程為體細(xì)胞克隆過(guò)程，取甲牛體細(xì)胞，對(duì)處于減數(shù)第二次分裂中期的卵母細(xì)胞去核，然后進(jìn)行細(xì)胞核移植；融合后的重組細(xì)胞激活后培養(yǎng)得到早期胚胎，再進(jìn)行胚胎移植，最終得到克隆牛。后代丁的細(xì)胞核中的遺傳物質(zhì)主要來(lái)自甲，細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)主要來(lái)自于乙，則丁的遺傳性狀由甲和乙的遺傳物質(zhì)共同決定，A錯(cuò)誤；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中需要提供95%空氣(保證細(xì)胞的有氧呼吸)和5%CO2(維持培養(yǎng)液的pH)的混合氣體，B正確；過(guò)程②常使用顯微操作去核法對(duì)卵母細(xì)胞進(jìn)行處理，C錯(cuò)誤；過(guò)程③將激活后的重組細(xì)胞培養(yǎng)至囊胚或桑葚胚后移植，D錯(cuò)誤。3.(2021·江蘇卷，11)下列關(guān)于哺乳動(dòng)物胚胎工程和細(xì)胞工程的敘述，錯(cuò)誤的是()A.細(xì)胞培養(yǎng)和早期胚胎培養(yǎng)的培養(yǎng)液中通常需要添加血清等物質(zhì)B.早期胚胎需移植到經(jīng)同期發(fā)情處理的同種雌性動(dòng)物體內(nèi)發(fā)育成個(gè)體C.猴的核移植細(xì)胞通過(guò)胚胎工程已成功地培育出了克隆猴D.將骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞混合，經(jīng)誘導(dǎo)后融合的細(xì)胞即為雜交瘤細(xì)胞答案D解析我國(guó)利用核移植技術(shù)成功培育出克隆猴“中中”和“華華”，C正確；將骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞混合，經(jīng)誘導(dǎo)融合后的細(xì)胞不都是雜交瘤細(xì)胞，還有B細(xì)胞自身融合的細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞自身融合的細(xì)胞等，D錯(cuò)誤。4.(2020·全國(guó)卷Ⅰ，38)為研制抗病毒A的單克隆抗體，某同學(xué)以小鼠甲為實(shí)驗(yàn)材料設(shè)計(jì)了以下實(shí)驗(yàn)流程?；卮鹣铝袉?wèn)題：(1)上述實(shí)驗(yàn)前必須給小鼠甲注射病毒A，該處理的目的是___________________________________________________________________。(2)寫(xiě)出以小鼠甲的脾臟為材料制備單細(xì)胞懸液的主要實(shí)驗(yàn)步驟：________________________________________________________________________________________________________________________________________。(3)為了得到能產(chǎn)生抗病毒A的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞，需要進(jìn)行篩選。圖中篩選1所采用的培養(yǎng)基屬于________，使用該培養(yǎng)基進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)的結(jié)果是________________________________________________________________________________________________________________________________________。圖中篩選2含多次篩選，篩選所依據(jù)的基本原理是___________________________________________________________________。(4)若要使能產(chǎn)生抗病毒A的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞大量增殖，可采用的方法有_______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________(答出2點(diǎn)即可)。答案(1)誘導(dǎo)小鼠甲產(chǎn)生能夠分泌抗病毒A抗體的B淋巴細(xì)胞(2)取小鼠甲脾臟剪碎，用胰蛋白酶處理使其分散成單個(gè)細(xì)胞，加入培養(yǎng)液制成單細(xì)胞懸液(3)選擇培養(yǎng)基只有雜交瘤細(xì)胞能夠生存抗原與抗體的結(jié)合具有特異性(4)將雜交瘤細(xì)胞注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖；將雜交瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)解析(1)實(shí)驗(yàn)前給小鼠甲注射病毒A，其目的是刺激機(jī)體發(fā)生免疫反應(yīng)，從而產(chǎn)生能夠分泌抗病毒A抗體的B淋巴細(xì)胞。(2)制備單細(xì)胞懸液的主要實(shí)驗(yàn)步驟：從健康動(dòng)物體內(nèi)取出組織塊，剪碎，用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理一段時(shí)間，這樣組織就會(huì)分散成單個(gè)細(xì)胞，然后用培養(yǎng)液將分散的細(xì)胞稀釋制成單細(xì)胞懸液。(3)圖中篩選1采用特定的選擇培養(yǎng)基，在該培養(yǎng)基上，未融合的細(xì)胞和融合的具有同種核的細(xì)胞都會(huì)死亡，只有融合的雜種細(xì)胞(雜交瘤細(xì)胞)才能生存。圖中篩選2含多次篩選，利用抗原與抗體特異性結(jié)合的原理，就可獲得能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞。(4)要使能產(chǎn)生抗病毒A的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞大量增殖，可將雜交瘤細(xì)胞在體外條件下做大規(guī)模培養(yǎng)，或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖。限時(shí)強(qiáng)化練(時(shí)間：30分鐘)【對(duì)點(diǎn)強(qiáng)化】考點(diǎn)一動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)1.(2023·廣東惠州調(diào)研)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的基本過(guò)程如圖所示，下列敘述正確的是()皮膚組織eq\o(→,\s\up7(甲))皮膚細(xì)胞eq\o(→,\s\up7(乙))細(xì)胞培養(yǎng)1eq\o(→,\s\up7(丙))細(xì)胞培養(yǎng)2A.應(yīng)選擇幼齡動(dòng)物的皮膚組織進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)B.甲過(guò)程需要用纖維素酶和果膠酶處理C.丙過(guò)程是傳代培養(yǎng)，所有細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)D.乙過(guò)程是原代培養(yǎng)，一般不會(huì)出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象答案A解析應(yīng)選擇幼齡動(dòng)物的皮膚組織進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)，因?yàn)橛g動(dòng)物細(xì)胞分裂能力較強(qiáng)，A正確；甲過(guò)程需要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理，B錯(cuò)誤；丙過(guò)程是傳代培養(yǎng)，體外培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞除貼壁生長(zhǎng)外，有的細(xì)胞還可以懸浮在培養(yǎng)液中生長(zhǎng)增殖，C錯(cuò)誤；原代培養(yǎng)會(huì)出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象，D錯(cuò)誤。2.(2023·河北石家莊期中)美國(guó)和日本的兩個(gè)研究小組分別宣布，其研究人員成功地將人體皮膚細(xì)胞改造成了幾乎可以和胚胎干細(xì)胞相媲美的誘導(dǎo)多能干細(xì)胞——iPS細(xì)胞，人類(lèi)“iPS細(xì)胞”可以形成神經(jīng)元等人體多種組織細(xì)胞。以下有關(guān)“iPS細(xì)胞”的說(shuō)法正確的是()A.“iPS細(xì)胞”分化為人體多種組織細(xì)胞的過(guò)程體現(xiàn)了細(xì)胞的全能性B.“iPS細(xì)胞”既可分化形成神經(jīng)元，也可用于分化形成心肌細(xì)胞，說(shuō)明“iPS細(xì)胞”在分裂時(shí)很容易發(fā)生突變C.“iPS細(xì)胞”有細(xì)胞周期，它分化形成的神經(jīng)細(xì)胞沒(méi)有細(xì)胞周期D.“iPS細(xì)胞”只能分化成人體多種組織細(xì)胞，是因?yàn)樗痪哂腥梭w細(xì)胞的全部遺傳物質(zhì)答案C解析全能性的體現(xiàn)需發(fā)育為完整的個(gè)體或分化成其他各種細(xì)胞，A錯(cuò)誤；“iPS細(xì)胞”分化為多種細(xì)胞是基因的選擇性表達(dá)的結(jié)果，B錯(cuò)誤；“iPS細(xì)胞”具有連續(xù)分裂能力，有細(xì)胞周期，而其分化形成的神經(jīng)細(xì)胞無(wú)增殖能力，沒(méi)有細(xì)胞周期，C正確；“iPS細(xì)胞”與人體內(nèi)其他細(xì)胞的遺傳物質(zhì)相同，其只能分化成人體多種組織細(xì)胞是因?yàn)槠浞只芰τ邢?，D錯(cuò)誤?？键c(diǎn)二動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)和單克隆抗體3.(2023·北京延慶區(qū)模擬)抗體—藥物偶聯(lián)物(ADC)通過(guò)將細(xì)胞毒素與單克隆抗體結(jié)合，實(shí)現(xiàn)了對(duì)腫瘤細(xì)胞的選擇性殺傷，過(guò)程如圖所示。下列表述正確的是()A.ADC可通過(guò)主動(dòng)運(yùn)輸進(jìn)入腫瘤細(xì)胞B.抗體進(jìn)入細(xì)胞后激活溶酶體酶，導(dǎo)致細(xì)胞凋亡C.單克隆抗體攜帶細(xì)胞毒素與腫瘤細(xì)胞特異性結(jié)合D.腫瘤細(xì)胞凋亡是細(xì)胞主動(dòng)死亡的過(guò)程，所以不會(huì)產(chǎn)生新的蛋白質(zhì)答案C解析據(jù)圖分析可知，ADC可通過(guò)胞吞的方式進(jìn)入腫瘤細(xì)胞，A錯(cuò)誤；據(jù)圖分析可知，抗體進(jìn)入細(xì)胞后被溶酶體裂解，釋放的藥物導(dǎo)致細(xì)胞凋亡，B錯(cuò)誤；腫瘤細(xì)胞凋亡是細(xì)胞主動(dòng)死亡的過(guò)程，細(xì)胞凋亡過(guò)程中基因進(jìn)行選擇性表達(dá)，因此會(huì)產(chǎn)生新的蛋白質(zhì)，D錯(cuò)誤。4.(2023·黑龍江黑河市一模)人乳頭瘤病毒(HPV)是一種DNA病毒，可誘發(fā)細(xì)胞癌變。抗HPV的單克隆抗體可以準(zhǔn)確檢測(cè)出HPV，從而及時(shí)監(jiān)控宮頸癌的發(fā)生。以HPV衣殼蛋白為抗原制備出單克隆抗體的過(guò)程如下圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是()A.在HAT培養(yǎng)基上存活的雜交瘤細(xì)胞既能無(wú)限增殖又可以分泌抗體B.單克隆抗體的特點(diǎn)是靈敏度高、特異性強(qiáng)，可以大量制備C.可用HPV衣殼蛋白檢測(cè)篩選出能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞D.單克隆抗體制備過(guò)程涉及的生物學(xué)原理有細(xì)胞增殖和細(xì)胞膜的選擇透過(guò)性答案D解析單克隆抗體的制備過(guò)程主要運(yùn)用的細(xì)胞工程技術(shù)包括動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞融合，原理依次是細(xì)胞的增殖、細(xì)胞膜的流動(dòng)性，D錯(cuò)誤。考點(diǎn)三動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物5.(2023·江西南昌質(zhì)檢)2018年1月國(guó)際頂尖學(xué)術(shù)期刊《Cell》雜志報(bào)道，我國(guó)科學(xué)家以一只雌性獼猴胎兒成纖維細(xì)胞為核供體成功克隆兩只獼猴，成為全球首例體細(xì)胞克隆靈長(zhǎng)類(lèi)動(dòng)物。相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.這項(xiàng)技術(shù)證明高度分化的動(dòng)物體細(xì)胞具有全能性B.研究中需要使用成熟卵母細(xì)胞作為移植核的受體C.培育出的兩只雌性獼猴的基因組成幾乎完全相同D.克隆獼猴的成功為大量培育靈長(zhǎng)類(lèi)遺傳病模型動(dòng)物提供了可能答案A解析因?yàn)榭寺〉膬芍猾J猴是以一只雌性獼猴胎兒成纖維細(xì)胞為核供體發(fā)育而來(lái)的，該過(guò)程經(jīng)過(guò)了細(xì)胞核移植，只能說(shuō)明分化的動(dòng)物體細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性，A錯(cuò)誤；卵母細(xì)胞含有豐富的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，且體積比較大，容易操作。同時(shí)卵細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中存在促進(jìn)核基因表達(dá)的物質(zhì)，因此研究中需要使用成熟卵母細(xì)胞作為移植核的受體，B正確；克隆的兩只獼猴是以一只雌性獼猴胎兒成纖維細(xì)胞為核供體，同一個(gè)體的細(xì)胞的細(xì)胞核的基因組是相同的，因此培育出的兩只雌性獼猴的基因組成幾乎完全相同，C正確。6.(2023·東北師大附中檢測(cè))有部分人體內(nèi)缺乏乳糖酶，飲用鮮牛奶后會(huì)導(dǎo)致腸胃不適、消化不良?！暗腿樘悄膛！钡恼Q生，有望給乳糖不耐受癥患者提供“放心奶”。如圖是“低乳糖奶?！钡呐嘤^(guò)程，相關(guān)敘述正確的是()A.犢牛的性狀和黑白花奶牛的性狀完全一致B.去核的卵母細(xì)胞可用去核的乳腺細(xì)胞代替C.犢牛的出生體現(xiàn)了動(dòng)物細(xì)胞的全能性D.體細(xì)胞核移植技術(shù)可用于提供人類(lèi)器官移植所需的供體和保護(hù)瀕危動(dòng)物答案D解析犢牛的細(xì)胞質(zhì)基因來(lái)自卵母細(xì)胞，且其細(xì)胞核基因經(jīng)過(guò)重組，因此其性狀與黑白花奶牛的性狀不完全一致，A錯(cuò)誤；卵母細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)中有促進(jìn)細(xì)胞核表現(xiàn)全能性的物質(zhì)，因此去核的卵母細(xì)胞不可用去核的乳腺細(xì)胞代替，B錯(cuò)誤；犢牛的出生體現(xiàn)了動(dòng)物體細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性，C錯(cuò)誤?！揪C合提升】7.(2023·河南名校聯(lián)盟)2022年春天，新冠病毒的變異株傳播性更強(qiáng)，給人們的日常生產(chǎn)、生活帶來(lái)很大的影響，因此研發(fā)更有效的新冠疫苗受到廣泛關(guān)注。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：(1)新冠病毒感染人體后，其S蛋白識(shí)別人體細(xì)胞膜蛋白ACE2并與之結(jié)合，使病毒侵入細(xì)胞，同時(shí)會(huì)引起人體發(fā)生相應(yīng)的免疫反應(yīng)。所以在用小鼠作為實(shí)驗(yàn)材料制備雜交瘤細(xì)胞時(shí)，可以給小鼠注射____________或____________作為抗原，一段時(shí)間后從小鼠的脾臟中獲取B淋巴細(xì)胞，將其與小鼠的________細(xì)胞融合。(2)進(jìn)行細(xì)胞融合操作后，用特定的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，在該培養(yǎng)基上不能存活的細(xì)胞是______________________________________________________________________________________________________________________________，能夠存活下來(lái)的細(xì)胞的特點(diǎn)是______________________________________________________________________________________________________。篩選出的細(xì)胞再進(jìn)行________培養(yǎng)和抗體檢測(cè)，經(jīng)過(guò)多次篩選就可得到所需的細(xì)胞群。選取檢測(cè)抗體陽(yáng)性的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng)時(shí)需要的氣體環(huán)境是___________________________________________________________________。(3)有人也用類(lèi)似的技術(shù)研究植物，想利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)培育“番茄—馬鈴薯”，結(jié)果并沒(méi)有預(yù)想中的“地上結(jié)番茄，地下長(zhǎng)馬鈴薯”，可能的原因是________________________________________________________________________________________________________________________________________；培育該雜種植物的過(guò)程中，遺傳物質(zhì)的傳遞________(填“遵循”或“不遵循”)孟德?tīng)栠z傳規(guī)律。答案(1)純化的新冠病毒的S蛋白滅活的新冠病毒(前兩空順序可互換)骨髓瘤(2)未融合的親本細(xì)胞和融合的具有同種核的細(xì)胞既能迅速大量繁殖，又能產(chǎn)生專(zhuān)一的抗體克隆化95%空氣加5%CO2(3)兩個(gè)物種之間的基因相互影響，導(dǎo)致某些基因無(wú)法正常表達(dá)(或生物基因的表達(dá)不是孤立的，它們之間是相互調(diào)控、相互影響的)不遵循解析(1)若用小鼠來(lái)制備抗新冠病毒的單克隆抗體，制備過(guò)程中需向小鼠注入的抗原是滅活的新冠病毒或純化的新冠病毒的S蛋白，一段時(shí)間后，提取B淋巴細(xì)胞和小鼠骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合。(2)進(jìn)行細(xì)胞融合操作后，要經(jīng)過(guò)篩選才能得到所需的雜交瘤細(xì)胞，第一次用特定的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，在該培養(yǎng)基上不能存活的是未融合的親本細(xì)胞和融合的具有同種核的細(xì)胞，只有融合的雜種細(xì)胞才能生長(zhǎng)，這種雜種細(xì)胞的特點(diǎn)是既能迅速大量繁殖，又能產(chǎn)生專(zhuān)一的抗體。雜交瘤細(xì)胞再進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)，經(jīng)多次篩選就能得到能產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群。選取檢測(cè)抗體陽(yáng)性的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng)時(shí)需要的氣體環(huán)境是95%空氣加5%CO2。(3)由于原材料番茄、馬鈴薯兩個(gè)物種之間的基因相互影響，導(dǎo)致某些基因無(wú)法正常表達(dá)，所以沒(méi)有得到預(yù)想中的“地上結(jié)番茄，地下長(zhǎng)馬鈴薯”；孟德?tīng)柕倪z傳規(guī)律發(fā)生在有性生殖過(guò)程中，培育該雜種植物的過(guò)程屬于無(wú)性繁殖，遺傳物質(zhì)的傳遞不遵循孟德?tīng)栠z傳規(guī)律。8.(2023·湖北武漢質(zhì)檢)2017年11月27日，世界上首例體細(xì)胞克隆猴“中中”誕生；12月5日，第二例克隆猴“華華”誕生。我國(guó)科學(xué)家攻克了與人類(lèi)相近的靈長(zhǎng)類(lèi)動(dòng)物獼猴的體細(xì)胞克隆的難題。獲得克隆猴的流程如圖所示，據(jù)圖回答問(wèn)題：(1)“中中”“華華”的性狀與________(填“核供體”“卵母細(xì)胞供體”或“代孕”)動(dòng)物的性狀基本無(wú)關(guān)。(2)圖示