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文檔簡(jiǎn)介
課時(shí)4動(dòng)物細(xì)胞工程
課標(biāo)要求核心考點(diǎn)五年考情核心素養(yǎng)對(duì)接
2023:遼寧T7、海南T7、湖
1.闡明動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是從動(dòng)物
南T21(4);1.生命觀念一一深入理
體獲得相關(guān)組織,分散成單個(gè)
動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)2022:海南T20(1)(3)解動(dòng)物細(xì)胞核移植和
細(xì)胞后,在適宜的培養(yǎng)條件下
和干細(xì)胞的應(yīng)(4)、湖北T7、江蘇T14;克隆技術(shù),理解生命
讓細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖的過程。動(dòng)
用2021:湖南T22(2)、重慶的發(fā)生、發(fā)展過程。
物細(xì)胞培養(yǎng)是動(dòng)物細(xì)胞工程的
T5、浙江1月T18;2.科學(xué)思維一一分析動(dòng)
基礎(chǔ);
2020:江蘇T23物細(xì)胞培養(yǎng)的條件、
2.闡明動(dòng)物細(xì)胞核移植一般是
2023:北京T12、湖北T22細(xì)胞融合和單克隆抗
將體細(xì)胞核移入一個(gè)去核的卵
(1)(2)⑶;體制備的原理,形成
母細(xì)胞中,并使重組細(xì)胞發(fā)育
2022:浙江1月T29(二)科學(xué)思維的習(xí)慣。
成新胚胎,繼而發(fā)育成動(dòng)物個(gè)
動(dòng)物細(xì)胞融合(3)、遼寧T24II、江蘇3.科學(xué)探究一一通過動(dòng)
體的過程;
技術(shù)和單克隆T19、山東T15;物細(xì)胞培養(yǎng)操作,培
3.闡明動(dòng)物細(xì)胞融合是指通過
抗體2021:山東T15;養(yǎng)科學(xué)探究能力。
物理、化學(xué)或生物學(xué)等手段,
2020:江蘇T28(4)、全國(guó)4.社會(huì)責(zé)任一一了解生
使兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形
IT38;物工程技術(shù)在生產(chǎn)上
成一個(gè)細(xì)胞的過程;
2019:江蘇T23的應(yīng)用,認(rèn)同生物技
4.概述細(xì)胞融合技術(shù)是單克隆
2023:天津T7;術(shù)對(duì)社會(huì)發(fā)展的影
抗體制備的重要技術(shù);動(dòng)物體細(xì)胞核
2021:遼寧T13、湖南T22響,承擔(dān)應(yīng)有的社會(huì)
5.簡(jiǎn)述干細(xì)胞在生物醫(yī)學(xué)工程移植技術(shù)和克
(3);責(zé)任
中有廣泛的應(yīng)用價(jià)值隆動(dòng)物
2020:天津T1
1.高考對(duì)本部分的考查常以生產(chǎn)或科研實(shí)踐為情境,也可以圖為載體,主要考查動(dòng)物細(xì)胞
培養(yǎng)、動(dòng)植物細(xì)胞融合的異同、單克隆抗體的制備等,既有選擇題,也有非選擇題。
命題分析預(yù)測(cè)
2.預(yù)計(jì)2025年高考仍可能延續(xù)往年的考查形式及特點(diǎn),與基因工程、胚胎工程等其他知
識(shí)相結(jié)合進(jìn)行命題
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考點(diǎn)1動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和干細(xì)胞的應(yīng)用
【敕材借;接送敕材n叁貫通、1學(xué)生用書
P333
1:■■攸材謾月I
1.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)
(1)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的原理、條件和過程
從動(dòng),體中取出w關(guān)的tn稅.尊它分史國(guó)k,?
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辨析細(xì)胞貼壁和接觸抑制
(1)細(xì)胞貼壁是指體外培養(yǎng)的細(xì)胞貼附在培養(yǎng)瓶的瓶壁上生長(zhǎng)的現(xiàn)象;接觸抑制是指當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生
長(zhǎng)到表面相互接觸時(shí),細(xì)胞通常會(huì)停止分裂增殖的現(xiàn)象。
(2)細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)對(duì)培養(yǎng)瓶的要求:培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿的內(nèi)表面光滑、無毒、易于貼附。
(3)應(yīng)對(duì)接觸抑制現(xiàn)象的方法是將貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶等處理,然后分瓶繼續(xù)培養(yǎng),讓細(xì)胞
繼續(xù)增殖。
(2)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)
比較項(xiàng)目動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)
理論基礎(chǔ)細(xì)胞增殖植物細(xì)胞的全能性
取材新鮮的組織植物的器官、組織或細(xì)胞
培養(yǎng)基狀態(tài)[10]液體固體
培養(yǎng)基成分糖、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素、動(dòng)物血清等礦質(zhì)元素、蔗糖、維生素、植物激素等
過程原代培養(yǎng)、傳代培養(yǎng)脫分化、再分化
細(xì)胞分裂、
生長(zhǎng)、分化貼壁生長(zhǎng)、接觸抑制脫分化形成愈傷組織,再分化形成根、芽等
特點(diǎn)
結(jié)果[11]子代細(xì)胞產(chǎn)生新個(gè)體
①都需人工條件下的無菌操作;②都需要適宜的溫度、pH等條件;③都進(jìn)行有絲分裂,都
相同點(diǎn)
不涉及減數(shù)分裂
2.干細(xì)胞的類型及其應(yīng)用
(1)干細(xì)胞的類型
類型胚胎干細(xì)胞(ES細(xì)胞)成體干細(xì)胞誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPS細(xì)胞)
成體組織或器官中,包括最初通過體外誘導(dǎo)小鼠成纖
分布或
[12]早期胚胎造血干細(xì)胞、神經(jīng)干細(xì)維細(xì)胞獲得,也可誘導(dǎo)已分
來源
胞、精原干細(xì)胞等化的B細(xì)胞、T細(xì)胞產(chǎn)生
具有組織特異性,只能分
具有分化為成年動(dòng)物體內(nèi)的任何
化為
一種類型的細(xì)胞,并進(jìn)一步形成不涉及倫理問題,可以避免
特點(diǎn)[14]特定的細(xì)胞或組
機(jī)體的所有組織和器官甚至[13]免疫排斥反應(yīng)
織,不具有發(fā)育成完整
個(gè)體的潛能
個(gè)體的能力
分化程度胚胎干細(xì)胞(ES細(xì)胞)〈成體干細(xì)胞〈誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPS細(xì)胞)
(2)干細(xì)胞的應(yīng)用
類型應(yīng)用
造血干細(xì)胞治療白血病及一些惡性腫瘤放療或化療后引起的造血系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)功能障礙等疾病
神經(jīng)干細(xì)胞治療神經(jīng)組織損傷和神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病,如帕金森病、阿爾茨海默病等
治療小鼠的鐮狀細(xì)胞貧血,在治療阿爾茨海默病、心血管疾病等領(lǐng)域的研究也取得新
誘導(dǎo)多能干細(xì)胞
進(jìn)展
基礎(chǔ)自測(cè)
1.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)選用的培養(yǎng)材料大多為動(dòng)物的受精卵。(X)
2.多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中,其培養(yǎng)液所需的適宜pH為6.8?7.0。(X)
3.幼齡動(dòng)物的細(xì)胞比老齡動(dòng)物的細(xì)胞更容易進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)。(4)
4.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的原理是動(dòng)物細(xì)胞的全能性。(X)
5.培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞的第一代(即第一次細(xì)胞增殖)被稱為原代培養(yǎng)。(X)
6.肝細(xì)胞培養(yǎng)過程中通常在培養(yǎng)液中通入5%的CCh刺激細(xì)胞呼吸。(X)
7.在一定條件下,胚胎干細(xì)胞能分化成成年動(dòng)物體內(nèi)任何一種類型的細(xì)胞。(4)
8.干細(xì)胞存在于早期胚胎、骨髓和臍帶血等多種組織和器官中。(4)
情境應(yīng)用
自身皮膚移植是治療創(chuàng)傷、燒傷及其他因素所致皮膚缺損的常用方法。這種治療方式,需要先取患者自身
細(xì)胞,經(jīng)體外培養(yǎng)獲得自體健康皮膚,再移植到創(chuàng)面上。培養(yǎng)自身細(xì)胞時(shí),需要進(jìn)行原代培養(yǎng)和傳代培
養(yǎng),進(jìn)行傳代培養(yǎng)的原因是什么?
提示貼壁細(xì)胞在生長(zhǎng)增殖時(shí)會(huì)發(fā)生接觸抑制現(xiàn)象,因此需要進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
深度思考
1.在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中,合成培養(yǎng)基中加入血清的原因是什么?用胰蛋白酶處理組織塊使其分散成單個(gè)
細(xì)胞的目的是什么?
提示加入血清的原因是血清中含有多種未知的促細(xì)胞生長(zhǎng)因子以及其他活性物質(zhì),可以補(bǔ)充合成培養(yǎng)基
中缺乏的物質(zhì)。用胰蛋白酶處理組織塊使其分散成單個(gè)細(xì)胞,可以使細(xì)胞與培養(yǎng)液充分接觸,保證細(xì)胞所
需的營(yíng)養(yǎng)供應(yīng),以及細(xì)胞內(nèi)代謝物及時(shí)排出。
2.傳代培養(yǎng)時(shí)為什么不選用胃蛋白酶分散細(xì)胞?
提示多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的適宜pH為7.2?7.4,此環(huán)境下胃蛋白酶失去活性。
3.為什么說iPS細(xì)胞的應(yīng)用前景要優(yōu)于ES細(xì)胞?
提示ES細(xì)胞必須從胚胎中獲取,涉及倫理問題,限制了其在醫(yī)學(xué)上的應(yīng)用。iPS細(xì)胞的誘導(dǎo)過程無須破
壞胚胎,而且iPS細(xì)胞可以來自病人自身的體細(xì)胞,將它移植回病人體內(nèi)后,理論上可以避免免疫排斥反
應(yīng)。
4.科學(xué)家已嘗試采用多種方法來制備iPS細(xì)胞,嘗試說出幾種獲取iPS細(xì)胞的方法。
提示借助載體將特定基因?qū)爰?xì)胞中,直接將特定蛋白導(dǎo)入細(xì)胞中或者用小分子化合物等來誘導(dǎo)形成
iPS細(xì)胞。iPS細(xì)胞最初是由成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)化而來的,后來發(fā)現(xiàn)已分化的T細(xì)胞、B細(xì)胞等也能被誘導(dǎo)為
iPS細(xì)胞。
fI?峋So,\學(xué)生用書
P335
命題點(diǎn)1動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的應(yīng)用
1.[2022湖北]某興趣小組開展小鼠原代神經(jīng)元培養(yǎng)的研究,結(jié)果發(fā)現(xiàn)其培養(yǎng)的原代神經(jīng)元生長(zhǎng)緩慢,其原
因不可能是(A)
A.實(shí)驗(yàn)材料取自小鼠胚胎的腦組織
B.為了防止污染將培養(yǎng)瓶瓶口密封
C.血清經(jīng)過高溫處理后加入培養(yǎng)基
D.所使用的培養(yǎng)基呈弱酸性
解析小鼠胚胎的腦組織中含有豐富的神經(jīng)元,這些神經(jīng)元增殖能力強(qiáng),在體外培養(yǎng)的條件下一般不會(huì)生
長(zhǎng)緩慢,A符合題意;將培養(yǎng)瓶瓶口密封會(huì)使培養(yǎng)液中缺氧,影響細(xì)胞進(jìn)行有氧呼吸,從而造成供能不
足,可能會(huì)使原代神經(jīng)元生長(zhǎng)緩慢甚至死亡,B不符合題意;血清經(jīng)過高溫處理后,其活性成分會(huì)因變性
而失去原有功能,因此,將血清經(jīng)過高溫處理后加入培養(yǎng)基,可能會(huì)使原代神經(jīng)元生長(zhǎng)緩慢,C不符合題
意;小鼠內(nèi)環(huán)境呈弱堿性,若使用呈弱酸性的培養(yǎng)基培養(yǎng)小鼠原代神經(jīng)元,可能會(huì)導(dǎo)致原代神經(jīng)元生長(zhǎng)緩
慢,D不符合題意。
2.[2021浙江1月改編]如圖為動(dòng)物成纖維細(xì)胞的培養(yǎng)過程示意圖。下列敘述正確的是(C)
①切取組織②制備細(xì)③原代培養(yǎng)④傳代培養(yǎng)
胞懸浮液
A.步驟①的操作不需要在無菌環(huán)境中進(jìn)行
B.步驟②中用鹽酸溶解細(xì)胞間物質(zhì)使細(xì)胞分離
C.步驟③到④的分瓶操作前常用胰蛋白酶處理
D.步驟④培養(yǎng)過程中遺傳物質(zhì)不會(huì)發(fā)生改變
解析為避免雜菌污染,步驟①的切取組織操作需要在無菌、無毒的環(huán)境條件下進(jìn)行,A錯(cuò)誤。步驟②需
要用胰蛋白酶處理,使細(xì)胞分離,B錯(cuò)誤。步驟③到④的分瓶操作前常用胰蛋白酶處理貼壁細(xì)胞,使細(xì)胞
分離,以便分瓶進(jìn)行傳代培養(yǎng),C正確。步驟④為傳代培養(yǎng)過程,該過程中部分細(xì)胞的遺傳物質(zhì)會(huì)發(fā)生改
變,D錯(cuò)誤。
命題點(diǎn)2干細(xì)胞的培養(yǎng)和應(yīng)用分析
3.[2023海南]某團(tuán)隊(duì)通過多代細(xì)胞培養(yǎng),將小鼠胚胎干細(xì)胞的Y染色體去除,獲得XO胚胎干細(xì)胞,再經(jīng)
過一系列處理,使之轉(zhuǎn)變?yōu)橛泄δ艿穆涯讣?xì)胞。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是(A)
A.營(yíng)養(yǎng)供應(yīng)充足時(shí),傳代培養(yǎng)的胚胎干細(xì)胞不會(huì)發(fā)生接觸抑制
B.獲得XO胚胎干細(xì)胞的過程發(fā)生了染色體數(shù)目變異
C.XO胚胎干細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)橛泄δ艿穆涯讣?xì)胞的過程發(fā)生了細(xì)胞分化
D.若某瀕危哺乳動(dòng)物僅存雄性個(gè)體,可用該法獲得有功能的卵母細(xì)胞用于繁育
解析營(yíng)養(yǎng)供應(yīng)充足時(shí),傳代培養(yǎng)的胚胎干細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到一定程度時(shí)會(huì)發(fā)生接觸抑制,A錯(cuò)誤;據(jù)題干
“將小鼠胚胎干細(xì)胞XO胚胎干細(xì)胞”可知,獲得XO胚胎干細(xì)胞的過程發(fā)生了染色體數(shù)目變異,B正
確;依據(jù)細(xì)胞分化的概念可知,XO胚胎干細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)橛泄δ艿穆涯讣?xì)胞的過程發(fā)生了細(xì)胞分化,C正確;
若某瀕危哺乳動(dòng)物僅存雄性個(gè)體,可以通過一系列處理獲得有功能的卵母細(xì)胞,用于繁育,D正確。
4.[2024大慶質(zhì)檢]誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPS細(xì)胞)在許多方面類似于胚胎干細(xì)胞(ES細(xì)胞),科學(xué)家直接將
特定蛋白導(dǎo)入成年體細(xì)胞誘導(dǎo)出iPS細(xì)胞,如圖所示。下列說法正確的是(B)
--T
成年iEBld?界弱叫
W
A.人工誘導(dǎo)細(xì)胞核重編程過程中細(xì)胞中的遺傳物質(zhì)會(huì)發(fā)生改變
B.iPS細(xì)胞分化產(chǎn)生多種細(xì)胞的實(shí)質(zhì)是基因的選擇性表達(dá)
C.人體的骨髓造血干細(xì)胞屬于iPS細(xì)胞的一種
D.表皮細(xì)胞衰老時(shí),其細(xì)胞核體積變小,呼吸速率減慢
解析人工誘導(dǎo)細(xì)胞核重編程過程導(dǎo)致細(xì)胞分化,形成iPS細(xì)胞,細(xì)胞分化是基因選擇性表達(dá)的結(jié)果,細(xì)
胞中的遺傳物質(zhì)沒有發(fā)生改變,因此,人工誘導(dǎo)細(xì)胞核重編程過程中細(xì)胞中的遺傳物質(zhì)不會(huì)發(fā)生改變,A
錯(cuò)誤;細(xì)胞分化是基因選擇性表達(dá)的結(jié)果,iPS細(xì)胞分化產(chǎn)生多種細(xì)胞的實(shí)質(zhì)是基因的選擇性表達(dá),B正
確;人體的骨髓造血干細(xì)胞不是全能干細(xì)胞,其分裂和分化只能形成血細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等,而iPS細(xì)胞類
似于胚胎干細(xì)胞,可以分化出各種細(xì)胞,故人體的骨髓造血干細(xì)胞不屬于iPS細(xì)胞的一種,C錯(cuò)誤;表皮
細(xì)胞衰老時(shí),其細(xì)胞核體積變大,D錯(cuò)誤。
考點(diǎn)2動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)和單克隆抗體
f----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------V學(xué)生用書
P336
時(shí)乩周岫麗
1.動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)
(1)動(dòng)物細(xì)胞融合
健11]向t盤—個(gè)南..■西—121個(gè)舲段小
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國(guó)—,h'化"金:可■;?令帙
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(2)辨析動(dòng)物細(xì)胞融合和植物體細(xì)胞雜交
項(xiàng)目動(dòng)物細(xì)胞融合植物體細(xì)胞雜交
原理細(xì)胞膜的流動(dòng)性、細(xì)胞增殖細(xì)胞膜的流動(dòng)性、細(xì)胞的全能性
前處理使細(xì)胞分散開除去細(xì)胞壁
相關(guān)酶胰蛋白酶和膠原蛋白酶纖維素酶和果膠酶
物理法:電融合法;化學(xué)法:PEG融合物理法:電融合法、離心法等;化學(xué)法:PEG
誘導(dǎo)方法
法;生物法:滅活病毒誘導(dǎo)法融合法、高Ca2+—高pH融合法
目的獲得雜交細(xì)胞獲得雜種植株
制備單克隆抗體,診斷、治療、預(yù)防疾打破生殖隔離,實(shí)現(xiàn)遠(yuǎn)緣雜交育種,培育植物
意義和用途
病新品種
2.單克隆抗體及其應(yīng)用
技術(shù)手段動(dòng)物細(xì)胞融合和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)
原理細(xì)胞膜的流動(dòng)性和細(xì)胞增殖
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價(jià)”碼荔器誨癡琵Jr
制備流程<FZ¥—色■介(SU)
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(色產(chǎn)生特定抗體J,小盤熱L殖,一廠
篩選目的第一次:獲得目]雜交瘤細(xì)胞;第二次:獲得能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞
雜交瘤細(xì)胞:既能迅速大量增殖,又能產(chǎn)生[7]特異性抗體
特點(diǎn)單克隆抗體:能準(zhǔn)確地識(shí)別抗原的細(xì)微差別,與特定抗原發(fā)生特異性結(jié)合,并且可以大量
制備
飛)作為診斷試劑:利用同位素或熒光標(biāo)記的單克隆抗體可定位診斷腫瘤、心血管H奇形等疾
應(yīng)用
病。②運(yùn)載藥物[如抗體一藥物偶聯(lián)物(ADC)]。③用于治療疾病
基礎(chǔ)自測(cè)
1.動(dòng)物細(xì)胞融合過程中既有細(xì)胞膜融合也有核的融合。(Y)
2.動(dòng)物細(xì)胞融合的結(jié)果是形成單核的雜種細(xì)胞,植物體細(xì)胞雜交的結(jié)果是得到雜種植株。(4)
3.用特定的抗原對(duì)小鼠進(jìn)行免疫后,從小鼠脾臟中只能得到一種B淋巴細(xì)胞。(義)
4.單克隆抗體是單個(gè)B淋巴細(xì)胞增殖并產(chǎn)生的抗體。(X)
5.單克隆抗體制備過程中的兩次篩選目的相同。(義)
6.雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行體內(nèi)培養(yǎng),是為了獲得能產(chǎn)生單克隆抗體的胚胎。(X)
深度思考。
1.為什么誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合時(shí)要用滅活的病毒,而不用活病毒?誘導(dǎo)細(xì)胞融合的原理是什么?
提示活病毒可能會(huì)感染細(xì)胞,而滅活的病毒不會(huì)感染細(xì)胞。誘導(dǎo)細(xì)胞融合的原理是病毒表面含有的糖蛋
白和一些酶能夠與細(xì)胞膜上的糖蛋白發(fā)生作用,使細(xì)胞互相凝聚,細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)分子重新
排布,細(xì)胞膜打開,細(xì)胞發(fā)生融合。
2.ADC在臨床應(yīng)用上的作用機(jī)理是什么?
提示其作用機(jī)理是通過單克隆抗體的靶向作用特異性地識(shí)別并結(jié)合腫瘤細(xì)胞表面的抗原,然后利用細(xì)胞
本身具備的內(nèi)吞作用使化學(xué)藥物進(jìn)入腫瘤細(xì)胞內(nèi)發(fā)揮作用,從而達(dá)到殺死腫瘤細(xì)胞的目的。
f--------------------------噬靦---------------------------------------------,。學(xué)生用書
P337
命題點(diǎn)1動(dòng)物細(xì)胞融合的過程分析
1.細(xì)胞融合技術(shù)是研究細(xì)胞遺傳、細(xì)胞免疫等的重要手段,如圖A、B表示兩種動(dòng)物細(xì)胞。下列有關(guān)說法
錯(cuò)誤的是(D)
.
A.圖示過程與植物原生質(zhì)體融合的基本原理相同
B.仙臺(tái)病毒需要用紫外線等滅活使其失去感染能力
C.圖中C細(xì)胞進(jìn)行的細(xì)胞分裂方式為有絲分裂
D.將A、B細(xì)胞等量混合誘導(dǎo)得到的融合細(xì)胞即為雜交細(xì)胞
解析圖示過程為動(dòng)物細(xì)胞的融合,該過程與植物原生質(zhì)體融合的基本原理相同,都依賴于細(xì)胞膜的流動(dòng)
性,A正確;用來誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的病毒,需要用紫外線等滅活使其失去感染能力,B正確;圖中C細(xì)
胞進(jìn)行的細(xì)胞分裂方式為有絲分裂,C正確;將A、B細(xì)胞等量混合誘導(dǎo)得到的融合細(xì)胞可能有三種類型:
AA型、BB型、AB型(雜交細(xì)胞),D錯(cuò)誤。
2.[2022江蘇,多選]如圖表示利用細(xì)胞融合技術(shù)進(jìn)行基因定位的過程,在人一鼠雜種細(xì)胞中人的染色體會(huì)
以隨機(jī)方式丟失,通過分析基因產(chǎn)物進(jìn)行基因定位?,F(xiàn)檢測(cè)細(xì)胞I、II、III中人的4種酶活性,只有H具
有芳燒羥化酶活性,只有III具有胸背激酶活性,I、III都有磷酸甘油酸激酶活性,I、II、III均有乳酸脫
氫酶活性。下列相關(guān)敘述正確的有(ACD)
A.加入滅活仙臺(tái)病毒的作用是促進(jìn)細(xì)胞融合
B.細(xì)胞I、II、III分別為人一人、人一鼠、鼠一鼠融合細(xì)胞
C.芳煌羥化酶基因位于2號(hào)染色體上,乳酸脫氫酶基因位于11號(hào)染色體上
D.胸背激酶基因位于17號(hào)染色體上,磷酸甘油酸激酶基因位于X染色體上
解析加入滅活仙臺(tái)病毒的作用是促進(jìn)細(xì)胞融合,A正確。細(xì)胞I、II、III均是在選擇培養(yǎng)基上進(jìn)行篩選
過的細(xì)胞,所以均是人一鼠雜交細(xì)胞,B錯(cuò)誤。由題意可知,只有n具有芳燒羥化酶活性,分析題圖可
知,相關(guān)基因位于2號(hào)染色體上;I、II、iii均有乳酸脫氫酶活性,I、II、m均含有11號(hào)染色體,故乳
酸脫氫酶基因位于11號(hào)染色體上,c正確。只有m具有胸普激酶活性,III含有17號(hào)染色體,而I、n不
含有17號(hào)染色體,故相關(guān)基因位于17號(hào)染色體上;I、III都有X染色體和11號(hào)染色體,都有磷酸甘油酸
激酶活性,而n不具有磷酸甘油酸激酶活性,故磷酸甘油酸激酶基因位于x染色體上,D正確。
命題點(diǎn)2單克隆抗體的制備和應(yīng)用分析
3.[2023北京]甲狀旁腺激素(PTH)水平是人類多種疾病的重要診斷指標(biāo)。研究者制備單克隆抗體用于快
速檢測(cè)PTH,有關(guān)制備過程的敘述不正確的是(D)
A.需要使用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)
B.需要制備用PTH免疫的小鼠
C.利用抗原一抗體結(jié)合的原理篩選雜交瘤細(xì)胞
D.篩選能分泌多種抗體的單個(gè)雜交瘤細(xì)胞
解析在單克隆抗體制備過程中需要用到動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù),還需要制備用PTH免疫的小鼠,A、B正
確;若要篩選能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞,需要利用抗原一抗體結(jié)合的原理進(jìn)行篩選,C正確;一般
來說,單個(gè)雜交瘤細(xì)胞只能分泌一種抗體,D錯(cuò)誤。
4.[2023湖北節(jié)選,11分]某病毒對(duì)動(dòng)物養(yǎng)殖業(yè)危害十分嚴(yán)重。我國(guó)學(xué)者擬以該病毒外殼蛋白A為抗原來
制備單克隆抗體,以期快速檢測(cè)該病毒,其主要技術(shù)路線如圖所示。
一”HUM?心---fOWJwfSl
回答下列問題:
(1)添加脂溶性物質(zhì)PEG可促進(jìn)細(xì)胞融合,該過程中PEG對(duì)細(xì)胞膜的作用是改變細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)(使兩個(gè)
細(xì)胞接觸處質(zhì)膜的脂類分子發(fā)生疏散和重組)。
(2)在雜交瘤細(xì)胞篩選過程中,常使用特定的選擇培養(yǎng)基(如HAT培養(yǎng)基),該培養(yǎng)基對(duì)未融合的
(親本)細(xì)胞和融合的具有同種核的細(xì)胞生長(zhǎng)具有抑制作用o
(3)單克隆抗體篩選中,將抗體與該病毒外殼蛋白進(jìn)行雜交,其目的是篩選能分泌與該病毒外殼蛋白
A特異性結(jié)合的抗體的雜交瘤細(xì)胞。
解析(1)聚乙二醇(PEG)分子能改變膜結(jié)構(gòu),使兩個(gè)細(xì)胞接觸處質(zhì)膜的脂類分子發(fā)生疏散和重組,從
而導(dǎo)致質(zhì)膜相互親和、融合。(2)淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞混合后,有的細(xì)胞未融合,有的細(xì)胞已融合;
融合細(xì)胞中有的是具有同種核的細(xì)胞,有的是具有不同種核的細(xì)胞(雜交瘤細(xì)胞)。使用選擇培養(yǎng)基的目
的是篩選出能分泌特定抗體的雜交瘤細(xì)胞;在該培養(yǎng)基上,未融合的親本細(xì)胞和融合的具有同種核的細(xì)胞
的生長(zhǎng)受到抑制,只有融合的雜交瘤細(xì)胞才能生長(zhǎng)。(3)將抗體與該病毒外殼蛋白進(jìn)行雜交的目的是從
雜交瘤細(xì)胞中篩選出能分泌特定抗體的雜交瘤細(xì)胞。
考點(diǎn)3動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物
《-----------------------------------r貌W需;.叁貫.--------------------------M學(xué)生用書
P338
時(shí)乩面放材螃
1.動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)
"動(dòng)物f問||—使
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僮■整.?俯一與左,爆乙神
的過程
生出。供體.傳,_______
成事公付舊的全體■收牛世體—牛岬曲
(1)[選必3P52“相關(guān)信息”]減數(shù)分裂II中期(Mil期)卵母細(xì)胞中的“核”其實(shí)是紡錘體一
染色體復(fù)合物。文中所說的“去核”是去除該復(fù)合物。
(2)[選必3P54“相關(guān)信息”]目前動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)中普遍使用的去核方法是顯微操作法。也有人采
用梯度離心、紫外線短時(shí)間照射和化學(xué)物質(zhì)處理等方法。這些方法是在沒有穿透卵母細(xì)胞透明帶的情況下
去核或使其中的DNA變性。
2.應(yīng)用前景及存在的問題
畜牧生產(chǎn)加速家畜[6]遺傳改良進(jìn)程,促進(jìn)優(yōu)良畜群繁育
醫(yī)藥衛(wèi)生轉(zhuǎn)基因克隆動(dòng)物可作為生物反應(yīng)器,生產(chǎn)珍貴的醫(yī)用蛋白
治療人類疾?。?]轉(zhuǎn)基因克隆動(dòng)物的細(xì)胞、組織、器官可作為異種移植的供體
應(yīng)用前景
使人類更深入地了解胚胎發(fā)育及衰老過程;克隆動(dòng)物分析致病基因,為研究疾
科研
病的致病機(jī)制和開發(fā)相應(yīng)藥物提供幫助
保護(hù)瀕危物種有望增加瀕危物種的存活數(shù)量
體細(xì)胞核移植成功轉(zhuǎn)8r非常低;絕大多數(shù)克隆動(dòng)物存在?r健康問
存在的問題
題,許多克隆動(dòng)物表現(xiàn)出遺傳和生理缺陷
卜話:后-m1立材遣活?
基礎(chǔ)自測(cè)
1.動(dòng)物細(xì)胞核移植的受體細(xì)胞必須是卵母細(xì)胞。(X)
2.經(jīng)體細(xì)胞核移植培育出的新個(gè)體只有一個(gè)親本的遺傳性狀。(X)
3.克隆動(dòng)物的產(chǎn)生體現(xiàn)了動(dòng)物體細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性。(4)
4.重構(gòu)胚的激活可用Ca2+載體、蛋白酶合成抑制劑等方法。(4)
5.克隆特定疾病模型的動(dòng)物可用于疾病的研究和藥物開發(fā)。(Y)
6.動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)中普遍使用的去核方法是顯微操作法。(4)
7.克隆牛技術(shù)涉及體細(xì)胞核移植、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、胚胎移植等過程[2022江蘇,T4C]。)
深度思考:
1.動(dòng)物體細(xì)胞核移植過程中為什么選擇MII期的卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞?
提示①細(xì)胞大,易于操作;②卵黃多,營(yíng)養(yǎng)豐富,為胚胎發(fā)育提供充足的營(yíng)養(yǎng);③此時(shí)具備受精能力,
細(xì)胞質(zhì)中含有促使細(xì)胞核表現(xiàn)全能性的物質(zhì)。
2.通過核移植技術(shù)獲得的克隆動(dòng)物為什么與供核動(dòng)物的性狀不完全相同?
提示①克隆動(dòng)物絕大部分DNA來自供核細(xì)胞的細(xì)胞核,但其細(xì)胞質(zhì)中的DNA主要來自去核的卵母細(xì)
胞。②性狀是基因與環(huán)境共同作用的結(jié)果,供核動(dòng)物生活的環(huán)境與克隆動(dòng)物生活的環(huán)境不完全相同,其性
狀也可能和供核動(dòng)物不完全相同。③克隆動(dòng)物在個(gè)體發(fā)育過程中有可能發(fā)生基因突變,產(chǎn)生供核動(dòng)物沒有
的性狀。
f------------------------------------iffl靦------------------------------------------1學(xué)生用書
P338
命題點(diǎn)1動(dòng)物體細(xì)胞核移植的原理和過程分析
1.[2023天津]根據(jù)圖分析,下列說法正確的是(D)
,付功W
A.子代動(dòng)物遺傳性狀和受體動(dòng)物完全一致
B.過程1需要MII期去核卵母細(xì)胞
C.過程2可以大幅改良動(dòng)物性狀
D.過程2為過程3提供了量產(chǎn)方式,過程3為過程1、2提供了改良性狀的方式
解析子代動(dòng)物的遺傳性狀與受體動(dòng)物(只提供子宮)基本無關(guān),A錯(cuò)誤。過程1是培育試管動(dòng)物,該過
程需要將獲能的精子與培養(yǎng)至MII期的卵母細(xì)胞(不去核)進(jìn)行體外受精,B錯(cuò)誤。通過過程2得到克隆
動(dòng)物的過程屬于無性生殖,無性生殖不能大幅改良動(dòng)物性狀,C錯(cuò)誤。通過過程2可得到大量同種個(gè)體,
為過程3提供了量產(chǎn)方式;過程3運(yùn)用了轉(zhuǎn)基因技術(shù),利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)可以改變動(dòng)物性狀,培育新品種,
故過程3為過程1、2提供了改良性狀的方式,D正確。
2.[2021遼寧]如圖是利用體細(xì)胞核移植技術(shù)克隆優(yōu)質(zhì)奶牛的簡(jiǎn)易流程圖。有關(guān)敘述正確的是(B)
甲牛一比卷J注射
①供體細(xì)胞培養(yǎng)w
O-
去核
乙,重組細(xì)胞
②
③激活并培養(yǎng)
移植
生出后代丁牛一代孕丙牛一重構(gòu)胚
A.后代丁的遺傳性狀由甲和丙的遺傳物質(zhì)共同決定
B.過程①需要提供95%空氣和5%CO2的混合氣體
C.過程②常使用顯微操作去核法對(duì)受精卵進(jìn)行處理
D.過程③將激活后的重組細(xì)胞培養(yǎng)至原腸胚后移植
解析據(jù)圖可知,后代丁的遺傳物質(zhì)來自甲牛和乙牛,丙牛只提供了胚胎發(fā)育的場(chǎng)所,并未提供遺傳物
質(zhì),故后代丁的遺傳性狀由甲和乙的遺傳物質(zhì)共同決定,A錯(cuò)誤;進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),通常采用培養(yǎng)皿
或培養(yǎng)瓶,將其置于含有95%空氣和5%CC>2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng),B正確;過程②常使用顯
微操作去核法對(duì)處于MII期的卵母細(xì)胞進(jìn)行處理,C錯(cuò)誤;通常情況下,過程③將激活后的重組細(xì)胞培養(yǎng)
至桑甚胚或囊胚階段后移植,D錯(cuò)誤。
命題變式
[設(shè)問拓展型](1)必須先對(duì)卵母細(xì)胞進(jìn)行去核操作,其目的是使核移植后得到的胚胎或動(dòng)物的遺傳物
質(zhì)絕大部分來自有重要利用價(jià)值的動(dòng)物提供的細(xì)胞核。
(2)哺乳動(dòng)物的核移植可以分為胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植,通過胚胎細(xì)胞核移植獲得克隆動(dòng)物的
難度小于(填“大于”或“小于”)體細(xì)胞核移植,其原因是胚胎細(xì)胞分化程度相對(duì)較低,恢復(fù)全
能性相對(duì)容易。
(3)核移植過程中用物理或化學(xué)方法(如電刺激、乙醇和蛋白酶合成抑制劑等)激活重構(gòu)胚,其目的是_
使其完成細(xì)胞分裂和發(fā)育進(jìn)程。
命題點(diǎn)2克隆動(dòng)物的培育和應(yīng)用分析
3.[2024南京調(diào)研]世界上首個(gè)體細(xì)胞克隆猴“中中”在中國(guó)誕生。如圖是克隆“中中”的相關(guān)示意圖。下
列敘述錯(cuò)誤的是(C)
去核卵子重組細(xì)胞
代孕族
成纖維細(xì)胞核
乙胎兒成纖維細(xì)胞
A.動(dòng)物細(xì)胞核的全能性是通過體細(xì)胞核移植獲得克隆動(dòng)物成功的基礎(chǔ)
B.去核卵子可以為重組細(xì)胞全能性的表達(dá)提供所需的物質(zhì)條件
C.代孕猴對(duì)早期胚胎不發(fā)生免疫排斥,為胚胎收集提供了可能
D.克隆猴比鼠更適合作為人類疾病研究和藥物實(shí)驗(yàn)的模型動(dòng)物
解析通過體細(xì)胞核移植技術(shù)得到克隆動(dòng)物的原理是動(dòng)物細(xì)胞核具有全能性,A正確;去核卵子含有豐富
的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),可以為重組細(xì)胞全能性的表達(dá)提供所需的物質(zhì)條件,B正確;受體對(duì)外來胚胎不發(fā)生免疫排
斥反應(yīng),這為胚胎在受體內(nèi)的存活提供了可能,C錯(cuò)誤;猴與人在進(jìn)化上親緣關(guān)系比鼠與人近,因此,與
鼠相比,克隆猴比鼠更適合作為人類疾病研究和藥物實(shí)驗(yàn)的模型動(dòng)物,D正確。
4.根據(jù)體細(xì)胞核移植技術(shù)的特點(diǎn)進(jìn)行推斷,體細(xì)胞核移植技術(shù)可以用來(D)
①擴(kuò)大瀕危動(dòng)物種群數(shù)量,有效提高生物多樣性
②提高某些良種家畜自然繁殖率③解決人體器官移植供體來源短缺的問題④為科學(xué)研究提供實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
⑤構(gòu)建轉(zhuǎn)基因克隆動(dòng)物,作為生物反應(yīng)器,大規(guī)模生產(chǎn)珍貴的醫(yī)用蛋白
A.①②④⑤B.①②③
C.②③④⑤D.③④⑤
解析利用體細(xì)胞核移植技術(shù),只能增加動(dòng)物的個(gè)體數(shù)量,不能提高生物多樣性,①錯(cuò)誤;核移植技術(shù)不
能提高良種家畜自然繁殖率,自然繁殖率主要是由生物的基因決定的,②錯(cuò)誤。故選D。
1.[2022江蘇]航天員葉光富和王亞平在天宮課堂上展示了培養(yǎng)的心肌細(xì)胞跳動(dòng)的視頻。下列相關(guān)敘述正確
的是(B)
A.培養(yǎng)心肌細(xì)胞的器具和試劑都要先進(jìn)行高壓蒸汽滅菌
B.培養(yǎng)心肌細(xì)胞的時(shí)候既需要氧氣也需要二氧化碳
C.心肌細(xì)胞在培養(yǎng)容器中通過有絲分裂不斷增殖
D.心肌細(xì)胞在神經(jīng)細(xì)胞發(fā)出的神經(jīng)沖動(dòng)的支配下跳動(dòng)
解析培養(yǎng)心肌細(xì)胞的器具需要用高壓蒸汽滅菌法滅菌,但是部分培養(yǎng)心肌細(xì)胞所用試劑(如動(dòng)物血清)
不能用高壓蒸汽滅菌法滅菌,A錯(cuò)誤;培養(yǎng)心肌細(xì)胞的時(shí)候既需要氧氣(有助于心肌細(xì)胞進(jìn)行有氧呼吸)
也需要二氧化碳(有助于維持培養(yǎng)液的pH),B正確;在體外培養(yǎng)條件下,心肌細(xì)胞通過有絲分裂進(jìn)行增
殖,但細(xì)胞增殖一段時(shí)間后會(huì)出現(xiàn)接觸抑制等現(xiàn)象,因此不會(huì)不斷增殖,C錯(cuò)誤;心肌細(xì)胞在神經(jīng)細(xì)胞釋
放的神經(jīng)遞質(zhì)的支配下跳動(dòng),D錯(cuò)誤。
2.[2021山東]一個(gè)抗原往往有多個(gè)不同的抗原決定簇,一個(gè)抗原決定簇只能刺激機(jī)體產(chǎn)生一種抗體,由同
一抗原刺激產(chǎn)生的不同抗體統(tǒng)稱為多抗。將非洲豬瘟病毒衣殼蛋白p72注入小鼠體內(nèi),可利用該小鼠的免
疫細(xì)胞制備抗p72的單抗,也可以從該小鼠的血清中直接分離出多抗。下列說法正確的是(D)
A.注入小鼠體內(nèi)的抗原純度對(duì)單抗純度的影響比對(duì)多抗純度的影響大
B.單抗制備過程中通常將分離出的漿細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合
C.利用該小鼠只能制備出一種抗p72的單抗
D.p72部分結(jié)構(gòu)改變后會(huì)出現(xiàn)原單抗失效而多抗仍有效的情況
解析由題中信息“一個(gè)抗原往往有多個(gè)不同的抗原決定簇,一個(gè)抗原決定簇只能刺激機(jī)體產(chǎn)生一種抗
體”可知,由同一抗原刺激機(jī)體可以產(chǎn)生多抗,說明多抗與一個(gè)抗原的多個(gè)不同的抗原決定簇有關(guān),抗原
純度對(duì)多抗純度的影響大,單抗理論上與抗原純度無關(guān),A錯(cuò)誤;單抗制備過程中,通常將分離出的B淋
巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合,B錯(cuò)誤;一個(gè)抗原往往有多個(gè)不同的抗原決定簇,一個(gè)抗原決定簇只能刺激機(jī)
體產(chǎn)生一種抗體,由同一抗原刺激可產(chǎn)生多種不同的抗體,因此利用該小鼠能制備出多種抗p72的單抗,
C錯(cuò)誤;p72部分結(jié)構(gòu)改變會(huì)導(dǎo)致部分抗原決定簇改變,原單抗會(huì)失效,而多抗仍有效,D正確。
3.[2022海南,13分]以我國(guó)科學(xué)家為主的科研團(tuán)隊(duì)將。SNL(即4個(gè)基因Ob4/Sox2Wawog〃加28A的縮寫)
導(dǎo)入黑羽雞胚成纖維細(xì)胞(CEFs),誘導(dǎo)其重編程為誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPS),再誘導(dǎo)iPS分化為誘導(dǎo)原始
生殖細(xì)胞(iPGCs),然后將iPGCs注射到孵化2.5天的白羽雞胚血管中,最終獲得具有黑羽雞遺傳特性的
后代,實(shí)驗(yàn)流程如圖?;卮鹣铝袉栴}。
物翳V廣那
AOSNL號(hào)△第雞胚我贊細(xì)胞
午1細(xì)胞重編程|3FS)
\2金誘導(dǎo)多能干細(xì)胞
匕4J#zaf注射到受體|(iPS)
vFyl—⑥歲胚血管中福誘導(dǎo).鵠細(xì)胞
(1)CEFs是從孵化9天的黑羽雞胚中分離獲得的,為了獲得單細(xì)胞懸液,雞胚組織剪碎后需用』
酶、膠原蛋白酶等處理。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)通常需要在合成培養(yǎng)基中添加血清等天然成分,以滿足細(xì)胞
對(duì)某些細(xì)胞因子的需求。
(2)體外獲取OSNL的方法有基因文庫法、PCR、人工合成法(答出1種即可)。若要在CEFs中表
達(dá)外源基因的蛋白,需構(gòu)建基因表達(dá)載體,載體中除含有目的基因和標(biāo)記基因外,還須有啟動(dòng)子和終止
子等。啟動(dòng)子是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位,有了它才能驅(qū)動(dòng)目的基因轉(zhuǎn)錄出mRNA,最終
表達(dá)出所需要的蛋白質(zhì)。
(3)iPS細(xì)胞和iPGCs細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能不同的根本原因是基因的選擇性表達(dá)。
(4)誘
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