將目的基因?qū)胧荏w細胞 教學課件

將目的基因?qū)胧荏w細胞1.目的基因的篩選與獲取2.基因表達載體的構(gòu)建3.將目的基因?qū)胧荏w細胞4.目的基因的檢測與鑒定基因工程的基本操作程序?qū)⒛康幕驅(qū)胧荏w細胞將目的基因?qū)胫参锛毎?/p>

將目的基因?qū)雱游锛毎麑⒛康幕驅(qū)胛⑸锛毎康幕蜻M入受體細胞內(nèi)，并且在受體細胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達的過程——轉(zhuǎn)化將目的基因?qū)胧荏w細胞將目的基因?qū)胫参锛毎r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法基因槍法受體細胞：體細胞花粉管通道法導入植物細胞我國科學家獨創(chuàng)①花粉管通道法

在植物授粉后一定時間內(nèi)，剪去柱頭，將DNA溶液滴在花柱切面，使目的基因通過花粉管通道進入胚囊?；ǚ勐鸭毎踊ǚ酃苋缬梦⒘孔⑸淦鲗⒑康幕虻腄NA溶液直接注入子房中；多種操作方法

易感染雙子葉植物和裸子植物內(nèi)含Ti質(zhì)粒，其上的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細胞的染色體DNA上。農(nóng)桿菌特點Ti質(zhì)粒T-DNA②農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法導入植物細胞Ti質(zhì)粒目的基因構(gòu)建表達載體導入植物細胞插入植物細胞染色DNA表達新性狀轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌

將從葉片取下的圓形小片與農(nóng)桿菌共培養(yǎng)，篩選轉(zhuǎn)化細胞，再生成植株；隨轉(zhuǎn)化方法的突破，用農(nóng)桿菌侵染水稻、玉米等單子葉植物也取得成功。如根據(jù)受體植物不同，具體轉(zhuǎn)化方法有所區(qū)別將花序浸沒在含農(nóng)桿菌的溶液中，培養(yǎng)植株并獲得種子，再進行篩選、鑒定。

基因槍法（particlegun）又稱微彈轟擊法，是利用壓縮氣體產(chǎn)生的動力，將包裹在金屬顆粒表面的表達載體DNA打入受體細胞中，使目的基因與其整合并表達的方法。常用的金屬顆粒有鎢粉粒子和金粉粒子，粒子的直徑一般在0.6∽4um。這是單子葉植物中常用的一種基因轉(zhuǎn)化方法，但是成本較高?？諝饧铀俟芪棽牧息刍驑尫▽胫参锛毎麑雱游锛毎@微注射技術(shù)受精卵方法注入顯微注射儀顯微操作臺顯微注射法轉(zhuǎn)化方法將含有目的基因的表達載體提純?nèi)÷眩ㄊ芫眩╋@微注射受精卵發(fā)育獲得具有新性狀的生物基因工程中，常用原核生物作為受體細胞。1.繁殖周期短2.體積小易于培養(yǎng)操作3.多為單細胞，遺傳物質(zhì)相對較少導入微生物細胞優(yōu)點感受態(tài)細胞法大腸桿菌感受態(tài)細胞吸收DNA分子Ca2+處理細胞感受態(tài)細胞重組表達載體與感受態(tài)細胞混合常用菌轉(zhuǎn)化方法將目的基因?qū)胧荏w細胞概念圖將目的基因?qū)胧荏w細胞植物細胞動物細胞導入微生物細胞受體細胞體細胞轉(zhuǎn)化方法農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法基因槍法花粉管通道法將目的基因插入Ti質(zhì)粒的T-DNA上要點受體細胞受精卵轉(zhuǎn)化方法顯微注射法受體細胞原核生物轉(zhuǎn)化方法感受態(tài)細胞法（Ca2+處理法）【例1】下列有關(guān)目的基因?qū)胧荏w細胞的說法中，正確的是()A.大腸桿菌作為受體細胞時通常需要使用鈉離子處理B.通過顯微注射法可將目的基因直接導入受體細胞中C.將目的基因?qū)胧荏w細胞，并在受體細胞中維持穩(wěn)定和表達的過程，稱為轉(zhuǎn)化D.可用基因槍法將目的基因?qū)雱游锸芫阎蠧典例分析典例分析C【例2】下圖為利用生物技術(shù)獲得生物新品種的過程，有關(guān)說法錯誤的是(

)A.A→B一般用4種脫氧核苷酸為原料，并加入2種引物

B.A→B利用了DNA復制原理，需要使用耐高溫的DNA聚