將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞 教學(xué)課件

將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞1.目的基因的篩選與獲取2.基因表達(dá)載體的構(gòu)建3.將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞4.目的基因的檢測(cè)與鑒定基因工程的基本操作程序?qū)⒛康幕驅(qū)胧荏w細(xì)胞將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞

將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過(guò)程——轉(zhuǎn)化將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法基因槍法受體細(xì)胞：體細(xì)胞花粉管通道法導(dǎo)入植物細(xì)胞我國(guó)科學(xué)家獨(dú)創(chuàng)①花粉管通道法

在植物授粉后一定時(shí)間內(nèi)，剪去柱頭，將DNA溶液滴在花柱切面，使目的基因通過(guò)花粉管通道進(jìn)入胚囊?；ǚ勐鸭?xì)胞精子花粉管如用微量注射器將含目的基因的DNA溶液直接注入子房中；多種操作方法

易感染雙子葉植物和裸子植物內(nèi)含Ti質(zhì)粒，其上的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞的染色體DNA上。農(nóng)桿菌特點(diǎn)Ti質(zhì)粒T-DNA②農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法導(dǎo)入植物細(xì)胞Ti質(zhì)粒目的基因構(gòu)建表達(dá)載體導(dǎo)入植物細(xì)胞插入植物細(xì)胞染色DNA表達(dá)新性狀轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌

將從葉片取下的圓形小片與農(nóng)桿菌共培養(yǎng)，篩選轉(zhuǎn)化細(xì)胞，再生成植株；隨轉(zhuǎn)化方法的突破，用農(nóng)桿菌侵染水稻、玉米等單子葉植物也取得成功。如根據(jù)受體植物不同，具體轉(zhuǎn)化方法有所區(qū)別將花序浸沒(méi)在含農(nóng)桿菌的溶液中，培養(yǎng)植株并獲得種子，再進(jìn)行篩選、鑒定。

基因槍法（particlegun）又稱微彈轟擊法，是利用壓縮氣體產(chǎn)生的動(dòng)力，將包裹在金屬顆粒表面的表達(dá)載體DNA打入受體細(xì)胞中，使目的基因與其整合并表達(dá)的方法。常用的金屬顆粒有鎢粉粒子和金粉粒子，粒子的直徑一般在0.6∽4um。這是單子葉植物中常用的一種基因轉(zhuǎn)化方法，但是成本較高?？諝饧铀俟芪棽牧息刍驑尫▽?dǎo)入植物細(xì)胞導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞顯微注射技術(shù)受精卵方法注入顯微注射儀顯微操作臺(tái)顯微注射法轉(zhuǎn)化方法將含有目的基因的表達(dá)載體提純?nèi)÷眩ㄊ芫眩╋@微注射受精卵發(fā)育獲得具有新性狀的生物基因工程中，常用原核生物作為受體細(xì)胞。1.繁殖周期短2.體積小易于培養(yǎng)操作3.多為單細(xì)胞，遺傳物質(zhì)相對(duì)較少導(dǎo)入微生物細(xì)胞優(yōu)點(diǎn)感受態(tài)細(xì)胞法大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞吸收DNA分子Ca2+處理細(xì)胞感受態(tài)細(xì)胞重組表達(dá)載體與感受態(tài)細(xì)胞混合常用菌轉(zhuǎn)化方法將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞概念圖將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞植物細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞導(dǎo)入微生物細(xì)胞受體細(xì)胞體細(xì)胞轉(zhuǎn)化方法農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法基因槍法花粉管通道法將目的基因插入Ti質(zhì)粒的T-DNA上要點(diǎn)受體細(xì)胞受精卵轉(zhuǎn)化方法顯微注射法受體細(xì)胞原核生物轉(zhuǎn)化方法感受態(tài)細(xì)胞法（Ca2+處理法）【例1】下列有關(guān)目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的說(shuō)法中，正確的是()A.大腸桿菌作為受體細(xì)胞時(shí)通常需要使用鈉離子處理B.通過(guò)顯微注射法可將目的基因直接導(dǎo)入受體細(xì)胞中C.將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞，并在受體細(xì)胞中維持穩(wěn)定和表達(dá)的過(guò)程，稱為轉(zhuǎn)化D.可用基因槍法將目的基因?qū)雱?dòng)物受精卵中C典例分析典例分析C【例2】下圖為利用生物技術(shù)獲得生物新品種的過(guò)程，有關(guān)說(shuō)法錯(cuò)誤的是(

)A.A→B一般用4種脫氧核苷酸為原料，并加入2種引物

B.A→B利用了DNA復(fù)制原理，需要使用耐高溫的DNA聚