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PAGEPAGE17專題24微生物的利用探考情悟真題【考情探究】考點(diǎn)考向要求5年考情預(yù)料熱度考題示例素養(yǎng)要素難度1微生物的培育培育基與純化培育試驗(yàn)與探究2024課標(biāo)全國Ⅱ,37,15分科學(xué)探究、社會責(zé)任中★★★2微生物的分別與計(jì)數(shù)微生物的分別與計(jì)數(shù)2024課標(biāo)全國Ⅰ,37,15分中★★★分析解讀本專題包括微生物的培育,特定微生物的純化、計(jì)數(shù)等內(nèi)容。試題情境貼近生活、生產(chǎn),考查利用所學(xué)生物學(xué)問解決實(shí)際問題的實(shí)力,如利用選擇培育基篩選目標(biāo)微生物,以制備特定產(chǎn)品、治理污染等。也有與傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)內(nèi)容融合考查,試題難度適中。復(fù)習(xí)時(shí)應(yīng)留意:熟記微生物培育、純化基礎(chǔ)學(xué)問,通過剖析典型例題,構(gòu)建微生物培育、篩選、計(jì)數(shù)題型的解題模板。
【真題探秘】破考點(diǎn)練考向考點(diǎn)一微生物的培育【考點(diǎn)集訓(xùn)】考向培育基與純化培育1.(2025屆甘肅天水一中月考,37,15分)炭疽病是由炭疽桿菌引起的一種人畜共患傳染病。炭疽桿菌兩端截平、呈竹節(jié)狀排列,菌落呈卷發(fā)狀。對炭疽病疑似患者,可依據(jù)噬菌體的宿主專一性,通過試驗(yàn)確診。(1)細(xì)菌培育:采集疑似患者的樣本,分別培育,獲得可疑菌落。(2)細(xì)菌鑒定:試驗(yàn)流程如圖所示。①對配制的液體培育基等需實(shí)行法進(jìn)行滅菌;試驗(yàn)所用液體培育基的碳源為(選填“無機(jī)碳”或“有機(jī)碳”)。
②選擇可疑菌落制片后,用視察,可看到呈竹節(jié)狀排列的桿菌。
③接種可疑菌后,35℃培育24小時(shí),液體培育基變渾濁,緣由是。比照組試管中應(yīng)加入,與試驗(yàn)組同時(shí)培育6小時(shí)后,若試驗(yàn)組液體培育基的渾濁度比比照組(選填“高”或“低”),則可明確疑似患者被炭疽桿菌感染;反之則解除。
④對解除的疑似患者及易感人群,可接種炭疽桿菌疫苗,刺激機(jī)體產(chǎn)生相應(yīng)抗體。與產(chǎn)生抗體相關(guān)的細(xì)胞除T細(xì)胞、B細(xì)胞外,還有。
答案(2)①高壓蒸汽滅菌有機(jī)碳②顯微鏡③細(xì)菌大量繁殖等量生理鹽水低④吞噬細(xì)胞、效應(yīng)B細(xì)胞(或漿細(xì)胞)2.(2024新疆烏魯木齊質(zhì)檢,37,7分)有機(jī)物M是一種難降解的有害污染物??蒲腥藛T利用有機(jī)物M、磷酸鹽、鎂鹽以及一些微量元素配制的培育基,勝利篩選出了能有效降解有機(jī)物M的細(xì)菌。試驗(yàn)的流程如圖所示。請分析回答問題:(1)培育基中加入有機(jī)物M的目的是篩選,這種培育基屬于培育基。
(2)目的菌生長所須要的碳源來自培育基中的,試驗(yàn)中須要振蕩培育,由此推想該菌的細(xì)胞呼吸類型是。
(3)培育一段時(shí)間后,應(yīng)選擇培育液中有機(jī)物M含量的培育瓶,將其中的細(xì)菌轉(zhuǎn)為固體培育,圖中采納了法接種,培育后可獲得單個(gè)菌落。
(4)試驗(yàn)結(jié)束后,運(yùn)用過的培育基應(yīng)當(dāng)進(jìn)行處理后才能倒掉。
答案(1)能降解有機(jī)物M的細(xì)菌選擇(2)有機(jī)物M好氧型(或需氧型)(3)最少平板劃線(4)滅菌(或無害化)考點(diǎn)二微生物的分別與計(jì)數(shù)【考點(diǎn)集訓(xùn)】考向微生物的分別與計(jì)數(shù)1.(2025屆河北、安徽名校聯(lián)盟聯(lián)考,36,15分)黃曲霉素是由黃曲霉和寄生曲霉等產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物,具有極強(qiáng)的毒性和致癌性,主要污染糧油及其制品,科研人員用黃曲霉素B1(AFB1)的結(jié)構(gòu)類似物——香豆素(C9H6O2)篩選出能高效降解AFB1的菌株。請回答下列問題:(1)為了篩選到AFB1降解菌,常從霉?fàn)€的花生、玉米和棉花中采樣,緣由可能是
。
(2)篩選AFB1降解菌時(shí),培育基中唯一的碳源是,加入瓊脂的目的是。接種后,培育基中AFB1降解菌的數(shù)量會漸漸。
(3)菌體對有機(jī)物的降解途徑有胞外分泌物降解和菌體吸附降解兩種,試驗(yàn)小組對降解菌的發(fā)酵液進(jìn)行離心,分別用上清液和沉淀物制成的菌懸液降解AFB1,發(fā)覺上清液中AFB1的殘留率明顯低于菌懸液。①分析以上信息可知,菌體降解AFB1的途徑主要是。
②經(jīng)檢測發(fā)覺上清液中存在多種蛋白質(zhì),請?jiān)O(shè)計(jì)試驗(yàn)驗(yàn)證蛋白質(zhì)K是降解AFB1的有效成分,要求簡要寫出試驗(yàn)思路和預(yù)期結(jié)果(試驗(yàn)材料:培育過降解菌的上清液、蛋白質(zhì)K水解酶、含AFB1的培育液)。答案(1)霉?fàn)€的花生、玉米和棉花中富含AFB1,可能含有較多的AFB1降解菌(2)香豆素作為凝固劑,制備固體培育基增多(3)①胞外分泌物降解②試驗(yàn)思路:取兩試管編號甲、乙,分別加入等量的培育過降解菌的上清液,甲組加入適量的蛋白質(zhì)K水解酶,乙組不作處理,一段時(shí)間后將甲、乙組培育液分別加入含AFB1的培育液中,一段時(shí)間后檢測AFB1含量(說明:寫出試驗(yàn)組和比照組)預(yù)期結(jié)果:甲組的AFB1未被降解,乙組的AFB1被降解(或甲組AFB1的降解率小于乙組)2.(2025屆四省八校聯(lián)考,37,15分)某探討小組對自來水和污染河水水樣中的大腸桿菌含量進(jìn)行了測定?;卮鹣铝袉栴}。(1)檢測自來水中大腸桿菌的數(shù)量,可選用伊紅美藍(lán)培育基。該培育基除了為大腸桿菌的生長、繁殖供應(yīng)水和氮源外,還要供應(yīng)兩類基本養(yǎng)分成分;制備該培育基時(shí)應(yīng)在滅菌之(填“前”或“后”)調(diào)整pH至7.6,以滿意大腸桿菌生長的要求;該培育基中加入伊紅美藍(lán)的作用是。
(2)探討小組運(yùn)用“濾膜法”對污染嚴(yán)峻的河流水體進(jìn)行大腸桿菌活菌數(shù)的測定,需將水樣進(jìn)行適當(dāng)稀釋,如取水樣1mL加入mL無菌水制備稀釋倍數(shù)為10倍的稀釋液,并照此依次制備更高倍數(shù)的稀釋液。取每個(gè)稀釋倍數(shù)的菌液5mL進(jìn)行過濾,然后將濾膜放置在伊紅美藍(lán)培育基上培育。假如經(jīng)過培育后,稀釋倍數(shù)為103倍對應(yīng)的4個(gè)平板上菌落數(shù)分別為43、47、42、48個(gè),那么每升河水約含大腸桿菌個(gè)。
(3)用上述方法統(tǒng)計(jì)樣本中菌落數(shù)時(shí)須要設(shè)置比照組。若在調(diào)查中,某一試驗(yàn)組平板上菌落數(shù)平均數(shù)為46個(gè)/平板,而空白比照組的一個(gè)平板上出現(xiàn)了6個(gè)菌落,請分析說明空白比照組出現(xiàn)菌落的可能緣由:(答出三點(diǎn)即可)。若將40(即46-6)個(gè)/平板作為試驗(yàn)組菌落數(shù)的平均值進(jìn)行計(jì)算,則該做法(填“正確”或“不正確”)。
答案(1)碳源和無機(jī)鹽(答不全不得分)前使大腸桿菌的菌落呈現(xiàn)黑色,便于對大腸桿菌計(jì)數(shù)(2)99×106(3)培育基滅菌不合格、倒平板過程被污染、培育皿滅菌不合格等不正確【五年高考】A組統(tǒng)一命題·課標(biāo)卷題組1.(2024課標(biāo)全國Ⅰ,37,15分)已知一種有機(jī)物X(僅含有C、H兩種元素)不易降解,會造成環(huán)境污染。某小組用三種培育基篩選土壤中能高效降解X的細(xì)菌(目標(biāo)菌)。Ⅰ號培育基:在牛肉膏蛋白胨培育基中加入X(5g/L)。Ⅱ號培育基:氯化鈉(5g/L),硝酸銨(3g/L),其他無機(jī)鹽(適量),X(15g/L)。Ⅲ號培育基:氯化鈉(5g/L),硝酸銨(3g/L),其他無機(jī)鹽(適量),X(45g/L)?;卮鹣铝袉栴}。(1)在Ⅰ號培育基中,為微生物供應(yīng)氮源的是。Ⅱ、Ⅲ號培育基中為微生物供應(yīng)碳源的有機(jī)物是。
(2)若將土壤懸浮液接種在Ⅱ號液體培育基中,培育一段時(shí)間后,不能降解X的細(xì)菌比例會,其緣由是。
(3)Ⅱ號培育基加入瓊脂后可以制成固體培育基,若要以該固體培育基培育目標(biāo)菌并對菌落進(jìn)行計(jì)數(shù),接種時(shí),應(yīng)采納的方法是。
(4)假設(shè)從Ⅲ號培育基中得到了能高效降解X的細(xì)菌,且該菌能將X代謝為丙酮酸,則在有氧條件下,丙酮酸可為該菌的生長供應(yīng)和。
答案(1)牛肉膏、蛋白胨X(2)下降不能降解X的細(xì)菌因缺乏碳源不能增殖,而能降解X的細(xì)菌能夠增殖(3)稀釋涂布平板法(4)能量合成其他物質(zhì)的原料2.(2024課標(biāo)全國Ⅱ,37,15分)物質(zhì)W是一種含氮有機(jī)物,會污染土壤。W在培育基中達(dá)到肯定量時(shí)培育基表現(xiàn)為不透亮。某探討小組欲從土壤中篩選出能降解W的細(xì)菌(目標(biāo)菌)?;卮鹣铝袉栴}。(1)要從土壤中分別目標(biāo)菌,所用選擇培育基中的氮源應(yīng)當(dāng)是。
(2)在從土壤中分別目標(biāo)菌的過程中,發(fā)覺培育基上甲、乙兩種細(xì)菌都能生長并形成菌落(如圖所示)。假如要得到目標(biāo)菌,應(yīng)當(dāng)選擇菌落進(jìn)一步純化,選擇的依據(jù)是。
(3)土壤中的某些微生物可以利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈?。若要設(shè)計(jì)試驗(yàn)進(jìn)一步確定甲、乙菌能否利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈?請簡要寫出試驗(yàn)思路、預(yù)期結(jié)果和結(jié)論,即。
(4)該小組將人工合成的一段DNA轉(zhuǎn)入大腸桿菌,使大腸桿菌產(chǎn)生能降解W的酶(酶E)。為了比較酶E與自然酶降解W實(shí)力的差異,該小組擬進(jìn)行如下試驗(yàn),請完善相關(guān)內(nèi)容。①在含有肯定濃度W的固體培育基上,A處滴加含有酶E的緩沖液,B處滴加含有相同濃度自然酶的緩沖液,C處滴加,三處滴加量相同。
②一段時(shí)間后,測量透亮圈的直徑。若C處沒有出現(xiàn)透亮圈,說明;若A、B處形成的透亮圈直徑大小相近,說明。
答案(1)W(2)乙乙菌落四周出現(xiàn)透亮圈,說明乙菌能降解W(3)將甲、乙菌分別接種在無氮源培育基上,若細(xì)菌能生長,則說明該細(xì)菌能利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈?4)①緩沖液②緩沖液不能降解W酶E與自然酶降解W的實(shí)力相近3.(2024課標(biāo)全國Ⅲ,37,15分)回答下列與細(xì)菌培育相關(guān)的問題。(1)在細(xì)菌培育時(shí),培育基中能同時(shí)供應(yīng)碳源、氮源的成分是(填“蛋白胨”“葡萄糖”或“NaNO3”)。通常,制備培育基時(shí)要依據(jù)所培育細(xì)菌的不同來調(diào)整培育基的pH,其緣由是。硝化細(xì)菌在沒有碳源的培育基上(填“能夠”或“不能”)生長,緣由是。
(2)用平板培育細(xì)菌時(shí)一般須要將平板(填“倒置”或“正置”)。
(3)單個(gè)細(xì)菌在平板上會形成菌落,探討人員通??梢罁?jù)菌落的形態(tài)、大小、顏色等特征來初步區(qū)分不同種的微生物,緣由是。
(4)有些運(yùn)用后的培育基在丟棄前須要經(jīng)過處理,這種處理可以殺死丟棄物中全部的微生物。
答案(1)蛋白胨不同細(xì)菌生長繁殖所需的最適pH不同能夠硝化細(xì)菌可以利用空氣中的CO2作為碳源(2)倒置(3)在肯定的培育條件下,不同種微生物表現(xiàn)出各自穩(wěn)定的菌落特征(4)滅菌4.(2024課標(biāo)全國Ⅰ,37,15分)將馬鈴薯去皮切塊,加水煮沸肯定時(shí)間,過濾得到馬鈴薯浸出液。在馬鈴薯浸出液中加入肯定量蔗糖和瓊脂,用水定容后滅菌,得到M培育基?;卮鹣铝袉栴}:(1)M培育基若用于真菌的篩選,則培育基中應(yīng)加入鏈霉素以抑制的生長,加入了鏈霉素的培育基屬于培育基。
(2)M培育基中的馬鈴薯浸出液為微生物生長供應(yīng)了多種養(yǎng)分物質(zhì),養(yǎng)分物質(zhì)類型除氮源外還有(答出兩點(diǎn)即可)。氮源進(jìn)入細(xì)胞后,可參加合成的生物大分子有(答出兩點(diǎn)即可)。
(3)若在M培育基中用淀粉取代蔗糖,接種土壤濾液并培育,平板上長出菌落后可通過加入顯色劑篩選出能產(chǎn)淀粉酶的微生物。加入的顯色劑是,該方法能篩選出產(chǎn)淀粉酶微生物的原理是
。
(4)甲、乙兩位同學(xué)用稀釋涂布平板法測定某一土壤樣品中微生物的數(shù)量,在同一稀釋倍數(shù)下得到以下結(jié)果:甲同學(xué)涂布了3個(gè)平板,統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是110、140和149,取平均值133;乙同學(xué)涂布了3個(gè)平板,統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是27、169和176,取平均值124。有人認(rèn)為這兩位同學(xué)的結(jié)果中,乙同學(xué)的結(jié)果可信度低,其緣由是
。
答案(1)細(xì)菌選擇(2)碳源、無機(jī)鹽蛋白質(zhì)、核酸(3)碘液淀粉遇碘液顯藍(lán)色,產(chǎn)淀粉酶的菌落四周淀粉被水解,形成透亮圈(4)乙同學(xué)的結(jié)果中,1個(gè)平板的計(jì)數(shù)結(jié)果與另2個(gè)相差懸殊,結(jié)果的重復(fù)性差5.(2024課標(biāo)全國Ⅱ,37,15分)在生產(chǎn)、生活和科研實(shí)踐中,常常通過消毒和滅菌來避開雜菌的污染?;卮鹣铝袉栴}:(1)在試驗(yàn)室中,玻璃和金屬材質(zhì)的試驗(yàn)器具(填“可以”或“不行以”)放入干熱滅菌箱中進(jìn)行干熱滅菌。
(2)牛奶的消毒常采納巴氏消毒法或高溫瞬時(shí)消毒法,與煮沸消毒法相比,這兩種方法的優(yōu)點(diǎn)是。
(3)密閉空間內(nèi)的空氣可采納紫外線照耀消毒,其緣由是紫外線能。在照耀前,適量噴灑,可強(qiáng)化消毒效果。
(4)水廠供應(yīng)的自來水通常是經(jīng)過(填“氯氣”“乙醇”或“高錳酸鉀”)消毒的。
(5)某同學(xué)在運(yùn)用高壓蒸汽滅菌鍋時(shí),若壓力達(dá)到設(shè)定要求,而鍋內(nèi)并沒有達(dá)到相應(yīng)溫度,最可能的緣由是。
答案(1)可以(2)在達(dá)到消毒目的的同時(shí),養(yǎng)分物質(zhì)損失較少(3)破壞DNA結(jié)構(gòu)消毒液(4)氯氣(5)未將鍋內(nèi)冷空氣排盡6.(2024課標(biāo)全國Ⅲ,37,15分)回答下列與酵母菌有關(guān)的問題:(1)分別培育酵母菌通常運(yùn)用(填“牛肉膏蛋白胨”“MS”或“麥芽汁瓊脂”)培育基,該培育基應(yīng)采納滅菌法滅菌。若將酵母菌劃線接種在平板上,培育一段時(shí)間后可視察到菌落,菌落的含義是。
(2)酵母菌液體培育時(shí),若通入氧氣,可促進(jìn)(填“菌體快速增殖”“乙醇產(chǎn)生”或“乳酸產(chǎn)生”);若進(jìn)行厭氧培育,可促進(jìn)(填“菌體快速增殖”“乙醇產(chǎn)生”或“乳酸產(chǎn)生”)。
(3)制作面包時(shí),為使面包松軟通常要在面粉中添加肯定量的酵母菌,酵母菌引起面包松軟的緣由是。
答案(1)麥芽汁瓊脂高壓蒸汽由一個(gè)細(xì)胞繁殖而來的肉眼可見的子細(xì)胞群體(2)菌體快速增殖乙醇產(chǎn)生(3)酵母菌分解葡萄糖會產(chǎn)生CO2,CO2使面包松軟7.(2024課標(biāo)全國Ⅰ,37,15分)某些土壤細(xì)菌可將尿素分解成CO2和NH3,供植物汲取和利用?;卮鹣铝袉栴}:(1)有些細(xì)菌能分解尿素,有些細(xì)菌則不能,緣由是前者能產(chǎn)生。能分解尿素的細(xì)菌不能以尿素的分解產(chǎn)物CO2作為碳源,緣由是。但可用葡萄糖作為碳源,進(jìn)入細(xì)菌體內(nèi)的葡萄糖的主要作用是(答出兩點(diǎn)即可)。
(2)為了篩選可分解尿素的細(xì)菌,在配制培育基時(shí),應(yīng)選擇(填“尿素”“NH4NO3”或“尿素+NH4NO3”)作為氮源,不選擇其他兩組的緣由是。
(3)用來篩選分解尿素細(xì)菌的培育基含有KH2PO4和Na2HPO4,其作用有(答出兩點(diǎn)即可)。
答案(1)脲酶分解尿素的細(xì)菌是異養(yǎng)生物,不能利用CO2來合成有機(jī)物為細(xì)胞生命活動供應(yīng)能量,為其他有機(jī)物的合成供應(yīng)原料(2)尿素其他兩組都含有NH4NO3,能分解尿素的細(xì)菌和不能分解尿素的細(xì)菌都能利用NH4NO3,不能起到篩選作用(3)為細(xì)菌生長供應(yīng)無機(jī)養(yǎng)分,作為緩沖劑保持細(xì)胞生長過程中pH穩(wěn)定8.(2024課標(biāo)全國Ⅲ,39,15分,0.24)某同學(xué)用簇新的泡菜濾液為試驗(yàn)材料分別純化乳酸菌。分別純化所用固體培育基中因含有碳酸鈣而不透亮,乳酸菌產(chǎn)生的乳酸能溶解培育基中的碳酸鈣?;卮鹣铝袉栴}:(1)分別純化乳酸菌時(shí),首先須要用對泡菜濾液進(jìn)行梯度稀釋,進(jìn)行梯度稀釋的理由是。(2)推想在分別純化所用的培育基中加入碳酸鈣的作用有和。分別純化時(shí)應(yīng)選擇出的菌落作為候選菌。
(3)乳酸菌在-20℃長期保存時(shí),菌液中常須要加入肯定量的(填“蒸餾水”“甘油”或“碳酸鈣”)。
答案(1)無菌水(2分)泡菜濾液中菌的濃度高,干脆培育很難分別得到單菌落(3分)(2)鑒別乳酸菌中和產(chǎn)生的乳酸(或酸)(每空3分,共6分)具有透亮圈(2分)(3)甘油(2分)9.(2024課標(biāo)全國Ⅰ,39,15分,0.6127)已知微生物A可以產(chǎn)生油脂,微生物B可以產(chǎn)生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生產(chǎn)。回答有關(guān)問題:(1)顯微視察時(shí),微生物A菌體中的油脂通??捎萌旧?。微生物A產(chǎn)生的油脂不易揮發(fā),可選用(填“萃取法”或“水蒸氣蒸餾法”)從菌體中提取。
(2)為了從自然界中獲得能產(chǎn)生脂肪酶的微生物B的單菌落,可從含有油料作物種子腐爛物的土壤中取樣,并應(yīng)選用以為碳源的固體培育基進(jìn)行培育。
(3)若要測定培育液中微生物B的菌體數(shù),可在顯微鏡下用干脆計(jì)數(shù);若要測定其活菌數(shù)量,可選用法進(jìn)行計(jì)數(shù)。
(4)為了確定微生物B產(chǎn)生的脂肪酶的最適溫度,某同學(xué)測得相同時(shí)間內(nèi),在35℃、40℃、45℃溫度下降解10g油脂所需酶量依次為4mg、1mg、6mg,則上述三個(gè)溫度中,℃條件下該酶活力最小。為了進(jìn)一步確定該酶的最適溫度,應(yīng)圍繞℃設(shè)計(jì)后續(xù)試驗(yàn)。
答案(1)蘇丹Ⅲ(或蘇丹Ⅳ)萃取法(每空2分,共4分)(2)油脂(3分)(3)血細(xì)胞計(jì)數(shù)板稀釋涂布平板(每空2分,共4分)(4)4540(每空2分,共4分)老師用書專用10.(2024課標(biāo)全國Ⅰ,39,15分)植物秸稈中的纖維素可被某些微生物分解?;卮鹣铝袉栴}:(1)分解秸稈中纖維素的微生物能分泌纖維素酶,該酶是由3種組分組成的復(fù)合酶,其中的葡萄糖苷酶可將分解成。
(2)在含纖維素的培育基中加入剛果紅(CR)時(shí),CR可與纖維素形成色復(fù)合物。用含有CR的該種培育基培育纖維素分解菌時(shí),培育基上會出現(xiàn)以該菌的菌落為中心的。
(3)為從富含纖維素的土壤中分別獲得纖維素分解菌的單菌落,某同學(xué)設(shè)計(jì)了甲、乙兩種培育基(成分見下表):酵母膏無機(jī)鹽淀粉纖維素粉瓊脂CR溶液水培育基甲++++-++培育基乙+++-+++注:“+”表示有,“-”表示無。據(jù)表推斷,培育基甲(填“能”或“不能”)用于分別和鑒別纖維素分解菌,緣由是;培育基乙(填“能”或“不能”)用于分別和鑒別纖維素分解菌,緣由是。
答案(1)纖維二糖葡萄糖(2)紅透亮圈(3)不能液體培育基不能用于分別單菌落不能培育基中沒有纖維素,不會形成CR—纖維素紅色復(fù)合物,即使出現(xiàn)單菌落也不能確定其為纖維素分解菌11.(2024課標(biāo)全國Ⅱ,39,15分,0.5527)為了調(diào)查某河流的水質(zhì)狀況,某探討小組測定了該河流水樣中的細(xì)菌含量,并進(jìn)行了細(xì)菌分別等工作。回答下列問題:(1)該小組采納稀釋涂布平板法檢測水樣中的細(xì)菌含量。在涂布接種前,隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板先行培育了一段時(shí)間,這樣做的目的是;
然后,將1mL水樣稀釋100倍,在3個(gè)平板上用涂布法分別接入0.1mL稀釋液;經(jīng)適當(dāng)培育后,3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為39、38和37。據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為。
(2)該小組采納平板劃線法分別水樣中的細(xì)菌。操作時(shí),接種環(huán)通過滅菌,在其次次及以后的劃線時(shí),總是從上一次劃線的末端起先劃線。這樣做的目的是。
(3)示意圖A和B中,表示的是用稀釋涂布平板法接種培育后得到的結(jié)果。
(4)該小組將得到的菌株接種到液體培育基中并混勻,一部分進(jìn)行靜置培育,另一部分進(jìn)行振蕩培育。結(jié)果發(fā)覺:振蕩培育的細(xì)菌比靜置培育的細(xì)菌生長速度快。分析其緣由是:振蕩培育能提高培育液中的含量,同時(shí)可使菌體與培育液充分接觸,提高的利用率。
答案(15分)(1)檢測培育基平板滅菌是否合格3.8×107(每空2分,共4分)(2)灼燒(2分)將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個(gè)菌落(3分)(3)B(2分)(4)溶解氧養(yǎng)分物質(zhì)(每空2分,共4分)12.(2013課標(biāo)全國Ⅱ,39,15分,0.5633)臨床運(yùn)用抗生素前,有時(shí)須要做細(xì)菌耐藥試驗(yàn)。試驗(yàn)時(shí),首先要從病人身上獲得少量樣本,然后依據(jù)肯定的試驗(yàn)步驟操作,以確定某致病菌對不同抗生素的敏感性。回答下列問題:(1)為了從樣本中獲得致病菌單菌落,可用法或法將樣本接種于固體培育基表面,經(jīng)過選擇培育、鑒別等步驟獲得。
(2)取該單菌落適當(dāng)稀釋,用法接種于固體培育基表面,在37℃培育箱中培育24h,使其勻稱生長,布滿平板。
(3)為了檢測該致病菌對于抗生素的敏感性,將分別含有A、B、C、D四種抗生素的濾紙片勻稱置于該平板上的不同位置,培育一段時(shí)間后,含A的濾紙片四周出現(xiàn)透亮圈,說明該致病菌對抗生素A;含B的濾紙片四周沒有出現(xiàn)透亮圈,說明該致病菌對抗生素B;含C的濾紙片四周的透亮圈比含A的小,說明;
含D的濾紙片四周的透亮圈也比含A的小,且透亮圈中出現(xiàn)了一個(gè)菌落,在解除雜菌污染的狀況下,此菌落很可能是抗生素D的。
(4)依據(jù)上述試驗(yàn)結(jié)果,為達(dá)到抗菌目的,最好應(yīng)選用抗生素。
答案(15分)(1)劃線稀釋涂布(或涂布)(每空2分,共4分)(2)涂布(1分)(3)敏感不敏感該致病菌對C的敏感性比對A的弱耐藥菌(每空2分,共8分)(4)A(2分)13.(2011課標(biāo),39,15分)有些細(xì)菌可分解原油,從而消退由原油泄漏造成的土壤污染。某同學(xué)欲從受原油污染的土壤中篩選出能高效降解原油的菌株?;卮饐栴}:(1)在篩選過程中,應(yīng)將土壤樣品稀釋液接種于以為唯一碳源的固體培育基上。從功能上講,該培育基屬于培育基。
(2)純化菌種時(shí),為了得到單菌落,常采納的接種方法有兩種,即和。
(3)為了篩選出高效菌株,可比較單菌落四周分解圈的大小,分解圈大說明該菌株的降解實(shí)力。
(4)通常狀況下,在微生物培育過程中,試驗(yàn)室常用的滅菌方法有灼燒滅菌、和。無菌技術(shù)要求試驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈旁邊進(jìn)行,以避開四周環(huán)境中微生物的污染。
答案(1)原油選擇(2)平板劃線法稀釋涂布平板法(3)強(qiáng)(4)干熱滅菌高壓蒸汽滅菌火焰14.(2009全國Ⅱ,33,10分)利用微生物分解玉米淀粉生產(chǎn)糖漿,具有廣袤的應(yīng)用前景。但現(xiàn)有野生菌株對淀粉的轉(zhuǎn)化效率低,某同學(xué)嘗試對其進(jìn)行改造,以獲得高效菌株。(1)試驗(yàn)步驟:①配制(固體、半固體、液體)培育基,該培育基的碳源應(yīng)為。
②將接入已滅菌的培育基平板上。
③馬上用適當(dāng)劑量的紫外照耀,其目的是。
④菌落形成后,加入碘液,視察菌落四周培育基的顏色改變和改變范圍的大小,四周出現(xiàn)現(xiàn)象的菌落即為初選菌落。經(jīng)分別、純化后即可達(dá)到試驗(yàn)?zāi)康摹?/p>
(2)若已得到二株變異菌株Ⅰ和Ⅱ,其淀粉轉(zhuǎn)化率較高。經(jīng)測定菌株Ⅰ淀粉酶的催化活性高,菌株Ⅱ的淀粉酶蛋白含量高。經(jīng)進(jìn)一步探討發(fā)覺,突變發(fā)生在淀粉酶基因的編碼區(qū)或非編碼區(qū),可推想出菌株Ⅰ的突變發(fā)生在區(qū),菌株Ⅱ的突變發(fā)生在區(qū)。
答案(1)①固體玉米淀粉②野生菌株③對野生菌株進(jìn)行誘變④淺色范圍大(2)編碼非編碼B組自主命題·省(區(qū)、市)卷題組1.(2024江蘇單科,31,8分)酵母的蛋白質(zhì)含量可達(dá)自身干重的一半,可作為飼料蛋白的來源。有些酵母可以利用工業(yè)廢甲醇作為碳源進(jìn)行培育,這樣既可削減污染又可降低生產(chǎn)成本。探討人員擬從土壤樣品中分別該類酵母,并進(jìn)行大量培育。下圖所示為操作流程,請回答下列問題:(1)配制培育基時(shí),依據(jù)培育基配方精確稱量各組分,將其溶解、定容后,調(diào)整培育基的,剛好對培育基進(jìn)行分裝,并進(jìn)行滅菌。
(2)取步驟②中不同梯度的稀釋液加入標(biāo)記好的無菌培育皿中,在步驟③中將溫度約(在25℃、50℃或80℃中選擇)的培育基倒入培育皿混勻,冷凝后倒置培育。
(3)挑取分別平板中長出的單菌落,按步驟④所示進(jìn)行劃線。下列敘述合理的有。
a.為保證無菌操作,接種針、接種環(huán)運(yùn)用前都必需滅菌b.劃線時(shí)應(yīng)避開劃破培育基表面,以免不能形成正常菌落c.挑取菌落時(shí),應(yīng)挑取多個(gè)菌落,分別測定酵母細(xì)胞中甲醇的含量d.可以通過逐步提高培育基中甲醇的濃度,獲得甲醇高耐受株(4)步驟⑤中,為使酵母數(shù)量快速增加,培育過程中需保證足夠的養(yǎng)分和供應(yīng)。為監(jiān)測酵母的活細(xì)胞密度,將發(fā)酵液稀釋1000倍后,經(jīng)等體積臺盼藍(lán)染液染色,用25×16型血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)5個(gè)中格中的細(xì)胞數(shù),理論上色細(xì)胞的個(gè)數(shù)應(yīng)不少于,才能達(dá)到每毫升3×109個(gè)活細(xì)胞的預(yù)期密度。
答案(8分)(1)pH高壓蒸汽(濕熱)(2)50℃(3)a、b、d(4)氧氣無302.(2024江蘇單科,31,7分)苯酚及其衍生物廣泛存在于工業(yè)廢水中,對環(huán)境有嚴(yán)峻危害。小明同學(xué)打算依據(jù)下圖操作步驟,從處理廢水的活性污泥中分別篩選酚降解高效菌株。請回答下列問題:(1)酚降解菌富集培育基含有蛋白胨、K2HPO4、MgSO4、苯酚和水,其中可作為碳源的有。
(2)將采集到的樣品接種培育,苯酚用量應(yīng)隨轉(zhuǎn)接次數(shù)增加而漸漸,以達(dá)到富集酚降解菌的目的。若如圖平板中菌落過于密集,應(yīng)進(jìn)一步,以便于菌落計(jì)數(shù)與分別。制備平板培育基時(shí)除了須要水、養(yǎng)分物質(zhì)外,還必需添加。
(3)如圖為連續(xù)劃線法示意圖,在圖中(填圖中序號)區(qū)域更易獲得單菌落。
(4)采納比色測定法(運(yùn)用苯酚顯色劑)檢測降解后的廢水中苯酚殘留量。先制作系列濃度梯度并進(jìn)行顯色反應(yīng),下表中1~5號比色管的苯酚濃度應(yīng)分別為。
管號123456苯酚濃度(mg/L)1假如廢水為50mg/L苯酚溶液,降解后約有21%的苯酚殘留,則需將殘留液稀釋(填序號:①5②10③20)倍后,再進(jìn)行比色。
答案(7分)(1)蛋白胨、苯酚(2)增加稀釋涂布凝固劑(3)③(4)0、0.2、0.4、0.6、0.8③【三年模擬】時(shí)間:30分鐘分值:70分非選擇題(共70分)1.(2025屆河南中原名校二聯(lián),1)(10分)纖維素酶是一種重要的酶產(chǎn)品,目前關(guān)于常溫柔高溫纖維素酶菌株探討較多,但有些地方氣溫低,須要產(chǎn)低溫纖維素酶菌株。某試驗(yàn)小組通過試驗(yàn)室微生物篩選方法,篩選到了低溫纖維素分解菌,請回答下列問題:(1)纖維素分解菌是能產(chǎn)生纖維素酶的微生物,纖維素酶是復(fù)合酶,至少包括和葡萄糖苷酶。纖維素分解菌也能以葡萄糖為碳源,但是試驗(yàn)室中培育纖維素分解菌的培育基一般選用纖維素而不選用葡萄糖為碳源,培育基不選用葡萄糖作為碳源的緣由是。
(2)自然界中很多真菌能產(chǎn)生胞外纖維素分解酶,其分解纖維素的實(shí)力遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于細(xì)菌,真菌與細(xì)菌相比結(jié)構(gòu)上的顯著特點(diǎn)是。若要分別出低溫條件下能分解纖維素的真菌,為了防止其他微生物的繁殖,可實(shí)行的措施是(至少答出兩點(diǎn))。
(3)為便利鑒定、篩選和計(jì)數(shù),將菌液接種到培育基上的一般方法為。
答案(10分,除注明外,每空2分)(1)C1酶、CX酶(1分)微生物普遍可利用葡萄糖作為碳源,用葡萄糖作為碳源,其他微生物也可大量繁殖,易造成雜菌污染(2)具有以核膜為界限的細(xì)胞核在低溫環(huán)境下培育,培育基以纖維素為唯一碳源,培育基中加入肯定量的抗生素(4分,回答出兩項(xiàng)即可)(3)稀釋涂布平板法(1分)2.(2025屆西南名校聯(lián)盟聯(lián)考,37)(15分)微生物連續(xù)培育時(shí),一部分舊的培育基以肯定的速度流出,同時(shí)不斷有等量的簇新培育基流入以保證微生物對養(yǎng)分物質(zhì)的須要。探討人員將JA122大腸桿菌接種到葡萄糖含量受到限制的培育基中,連續(xù)培育多代,然后取樣分析培育基中存在的新菌株。請回答下列問題:(1)用于連續(xù)培育JA122大腸桿菌的培育基從物理性質(zhì)看屬于培育基,大腸桿菌與酵母菌在結(jié)構(gòu)上的主要區(qū)分是大腸桿菌。
(2)樣品中共發(fā)覺CV101、CV103、CV116三種新菌株,產(chǎn)生新菌株的緣由是JA122大腸桿菌發(fā)生了。
(3)對三種菌株的代謝差異進(jìn)行分析發(fā)覺,CV103對葡萄糖汲取率最高,代謝終產(chǎn)物是醋酸鹽。進(jìn)一步探討表明,CV101可以在培育過CV103的培育基過濾液中生長,據(jù)此作出推想:CV101菌株能以CV103菌株產(chǎn)生的醋酸鹽為碳源。請?jiān)O(shè)計(jì)并完成下列試驗(yàn)步驟,來驗(yàn)證以上觀點(diǎn)。①配制的固體培育基(A組)和不含碳源的固體培育基(B組);
②將等量的適量稀釋的CV101菌液分別接種到A、B培育基中培育一段時(shí)間,并視察記錄菌株的生長狀況。試驗(yàn)過程應(yīng)在條件下進(jìn)行。
③預(yù)期試驗(yàn)結(jié)果:。
答案(15分)(1)液體(2分)無以核膜為界限的細(xì)胞核(2分)(2)基因突變(2分)(3)①以醋酸鹽為唯一碳源(3分)②無菌(3分)③A組菌株生長(形成菌落),B組菌株不能生長(無菌落)(3分)3.(2024陜西榆林二模,37)(15分)請回答有關(guān)微生物培育、應(yīng)用和保存以及物質(zhì)提取的問題:(1)微生
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