無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件

無菌工藝和驗(yàn)證

無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第1頁指導(dǎo)思想：產(chǎn)品質(zhì)量是檢驗(yàn)出來標(biāo)志：抽樣檢驗(yàn)理論關(guān)注點(diǎn)：樣品檢驗(yàn)質(zhì)量管理基本方法一：無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第2頁抽樣檢驗(yàn)應(yīng)用

抽樣檢驗(yàn)：經(jīng)過樣本，推斷整體。抽樣檢驗(yàn)是數(shù)理統(tǒng)計分支，它用盡量少樣本盡可能反應(yīng)全部產(chǎn)品質(zhì)量。無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第3頁抽樣檢驗(yàn)應(yīng)用

抽樣檢驗(yàn)：經(jīng)過樣本，推斷整體。抽樣檢驗(yàn)是數(shù)理統(tǒng)計分支，它用盡量少樣本盡可能反應(yīng)全部產(chǎn)品質(zhì)量。無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第4頁樣品抽樣檢驗(yàn)結(jié)果是判別藥品質(zhì)量唯一法定依據(jù)。樣品按USP(美國藥典)和USP-NF（國家處方集）要求檢驗(yàn)合格，即判合格；反之，則判為不合格。無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第5頁FDA觀點(diǎn)：一個科學(xué)、龐大抽樣計劃，經(jīng)過擴(kuò)大抽樣檢驗(yàn)方法能夠?qū)崿F(xiàn)確保藥品質(zhì)量目標(biāo)。無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第6頁FDA面臨新挑戰(zhàn)-樣品是否有代表性-抽樣檢驗(yàn)不可能發(fā)覺藥品生產(chǎn)中污染/

混同-低劑量高活性藥品混合是否均勻-無菌藥品滅菌是否有效……無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第7頁抽樣檢驗(yàn)困境：抽查批號產(chǎn)品、其對應(yīng)原料、半成品及成品均經(jīng)過抽樣檢驗(yàn)且檢驗(yàn)結(jié)果符合標(biāo)準(zhǔn)，抽樣和檢驗(yàn)方法方面毫無問題。但FDA查不到所采取工藝能一直如一地生產(chǎn)出符合要求質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)產(chǎn)品證據(jù)。無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第8頁FDA官員感嘆：“我們這些藥政管理官員，經(jīng)歷了許多年經(jīng)驗(yàn)和教訓(xùn)之后終于明白，我們在制訂法規(guī)過程中并沒真正研究過工藝過程本身，……我們以往立足點(diǎn)是在質(zhì)量檢驗(yàn)上，而不是在質(zhì)量確保上”。無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第9頁FDA結(jié)論：“工藝驗(yàn)證應(yīng)該是我們立足點(diǎn)?！碑a(chǎn)品質(zhì)量是生產(chǎn)出來，不是靠檢驗(yàn)來。無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第10頁無菌無菌工藝無菌檢驗(yàn)無菌工藝和無菌檢驗(yàn)無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第11頁沒有活體微生物（細(xì)胞繁殖體）存在。無菌：無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第12頁

無菌藥品是指法定藥品標(biāo)準(zhǔn)中列有沒有菌檢驗(yàn)項目標(biāo)制劑和無

菌原料藥，包含注射劑、眼用制劑、無菌軟膏劑、

無菌混懸液等。比如：大容量注射劑、小容量注射劑、無菌粉針、無菌凍干粉針、無菌眼藥水、無菌混懸劑、無菌原料藥等。無菌藥品：無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第13頁1、濕熱滅菌法2、干熱滅菌法3、輻射滅菌法4、氣體滅菌法5、過濾滅菌法6、無菌生產(chǎn)工藝怎樣到達(dá)無菌？

《中國藥典》年版附錄ⅩⅤⅡ

滅菌法無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第14頁1.殘余概率法（Bioburdenbasedprocess）

2.過分殺滅法（Overkillprocess）3.生物指示劑/殘余概率相結(jié)合滅菌工藝（Biologicalindicator/bioburdencombinedprocess）USP滅菌方式:

32版1222章無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第15頁

以生物負(fù)荷（產(chǎn)品滅菌前微生物污染水平）為基礎(chǔ)方法，用于生產(chǎn)過程中極少檢出芽孢，產(chǎn)品穩(wěn)定性較差，只能適度滅菌產(chǎn)品。殘余概率法

Bioburdenbasedprocess無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第16頁

適合用于穩(wěn)定性很好，能經(jīng)受苛刻滅菌條件產(chǎn)品。

過分殺滅法

Overkillprocess無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第17頁過分殺滅法VS殘余概率法無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第18頁滅菌抉擇樹：能否121℃、15分鐘濕熱滅菌能否采取F0≥8濕熱滅菌，SAL≤10-6否121℃、15分鐘濕熱滅菌是采取F0≥8濕熱滅菌，SAL≤10-6能否對藥液除菌過濾否是無菌原料、無菌配制、無菌灌封藥液除菌過濾及無菌灌封否是無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第19頁滅菌工藝選擇：無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第20頁滅菌工藝與生物負(fù)荷關(guān)系：無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第21頁1、終端滅菌工藝

2、無菌生產(chǎn)工藝無菌藥品生產(chǎn)工藝無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第22頁能夠最終用熱力學(xué)方法除去微生物生產(chǎn)工藝。

如：大容量注射劑、水針等產(chǎn)品生產(chǎn)。終端滅菌生產(chǎn)工藝無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第23頁嚴(yán)格原料微生物標(biāo)準(zhǔn)嚴(yán)格控制微生物污染、制訂滅菌前生物負(fù)荷程度標(biāo)準(zhǔn)控制藥液存放溫度和時間藥液取樣、污染菌判別目標(biāo)：控制生物負(fù)荷終端滅菌生產(chǎn)工藝質(zhì)量確保：無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第24頁空載熱分布滿載熱分布熱穿透試驗(yàn)微生物挑戰(zhàn)試驗(yàn)……終端滅菌生產(chǎn)工藝驗(yàn)證關(guān)鍵點(diǎn)：無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第25頁過濾除菌工藝無菌分裝工藝如：凍干粉針、粉針、無菌原料藥、生物疫苗、血液制品等產(chǎn)品生產(chǎn)。無菌生產(chǎn)工藝：無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第26頁對進(jìn)入無菌區(qū)物料充分滅菌，消除污染源。全部接觸經(jīng)除菌過濾藥液設(shè)備都經(jīng)過清潔和滅菌驗(yàn)證防止人員直接接觸除菌后藥液、容器預(yù)防人員活動干擾層流目標(biāo)：以預(yù)防污染為目標(biāo)，消除生產(chǎn)工藝中潛在污染各種可能性。無菌生產(chǎn)工藝質(zhì)量確保：無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第27頁終端滅菌工藝VS無菌生產(chǎn)工藝無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第28頁無菌工藝模擬或培養(yǎng)基灌裝驗(yàn)證無菌生產(chǎn)工藝工藝驗(yàn)證關(guān)鍵點(diǎn)：無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第29頁P(yáng)rocessSimulationTestingforAsepticallyFilledProducts

無菌灌裝產(chǎn)品工藝模擬試驗(yàn)解讀：PDATechnicalReportN0.22

無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第30頁評價無菌工藝操作能力最有效方法。完全模擬工藝配制和灌裝工藝，用一個能夠促進(jìn)微生物生長培養(yǎng)基替換無菌產(chǎn)品。確認(rèn)無菌生產(chǎn)工藝無菌確保水平（SAL）方法。工藝模擬試驗(yàn)（培養(yǎng)基灌裝）無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第31頁證實(shí)采取無菌工藝生產(chǎn)無菌產(chǎn)品能力無菌工藝人員資質(zhì)和確保符合現(xiàn)行GMP要求無菌工藝模擬目標(biāo)：無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第32頁安裝干擾容器尺寸容器密封灌裝速度灌裝體積灌裝連續(xù)時間生產(chǎn)批量、工藝模擬批量工藝模擬試驗(yàn)原理1無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第33頁手動灌裝培養(yǎng)條件培養(yǎng)基選擇容器檢驗(yàn)惰性氣體設(shè)施考慮人員考慮工藝模擬試驗(yàn)原理2無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第34頁工藝人員設(shè)備環(huán)境

培養(yǎng)基灌裝驗(yàn)證包含：無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第35頁模擬工藝定義:使用促微生物生長培養(yǎng)基，及與無菌物料生產(chǎn)相同方法評定無菌工藝方法。包含工藝全部步驟，從藥品成份、賦形劑（假如有）、容器、密封滅菌到產(chǎn)品密封。在無菌灌裝之前無菌藥品容器和密封后放置最長時間必須包含在模擬范圍內(nèi)。工藝無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第36頁非無菌物料進(jìn)入無菌區(qū)域“切入點(diǎn)”。未經(jīng)滅菌或消毒物料，滅菌后進(jìn)入灌裝間保護(hù)手工操作進(jìn)入灌裝間前防護(hù)。設(shè)備：無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第37頁生產(chǎn)環(huán)境一直符合無菌產(chǎn)品生產(chǎn)要求確保系統(tǒng)和設(shè)備按照設(shè)定目標(biāo)正常運(yùn)轉(zhuǎn)無菌確保—環(huán)境監(jiān)測無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第38頁取樣點(diǎn)選擇取樣頻率行動限和警戒線方法學(xué)和數(shù)據(jù)解釋GMP附錄1：無菌藥品第十條（二）：

A級區(qū)監(jiān)測頻率及取樣量，應(yīng)能及時發(fā)覺全部些人為干預(yù)、偶發(fā)事件及任何系統(tǒng)損壞。環(huán)境監(jiān)測：無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第39頁最長無菌生產(chǎn)、操作時間無菌生產(chǎn)中每次發(fā)生干預(yù)事件冷凍干燥設(shè)備無菌組裝人員數(shù)目和活動無菌條件轉(zhuǎn)移交接班改變、中止和衣物更換模擬無菌工藝應(yīng)該包含（1）：

（FDA提議）無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第40頁無菌設(shè)備連接和斷開無菌樣品搜集生產(chǎn)線速度和配置重量檢驗(yàn)設(shè)備、容器密閉檢驗(yàn)SOP特殊要求模擬無菌工藝應(yīng)該包含（2）：

（FDA提議）無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第41頁滅菌系統(tǒng)潔凈環(huán)境系統(tǒng)公用輔助系統(tǒng)生產(chǎn)控制系統(tǒng)設(shè)備清洗模擬工藝還包括：無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第42頁（一）選擇標(biāo)準(zhǔn)：

促生長能力、低選擇性、澄明度、中等濃度和過濾性。

培養(yǎng)基：無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第43頁促生長能力

支持少許微生物復(fù)壯和生長，10-100CFU或更少。低選擇性

1、適應(yīng)廣譜微生物生長，細(xì)菌、霉菌和酵母菌都能夠生長。

2、企業(yè)自己菌種庫（環(huán)境中分離微生物）培養(yǎng)基：無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第44頁澄明

清澈，假如發(fā)生渾濁，能夠觀察到

中等濃度

遵照供給商提議。其它濃度或經(jīng)過驗(yàn)證過濾性

培養(yǎng)基應(yīng)該能夠穿過生產(chǎn)過程所使用一樣級別過濾器培養(yǎng)基無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第45頁（二）培養(yǎng)基靈敏度檢驗(yàn)：1、將無菌培養(yǎng)基分裝到一定數(shù)量無菌試管。2、制備好菌懸液（枯草桿菌、白色念珠菌）

10-100cfu/mL。3、加入上述菌懸液1mL進(jìn)準(zhǔn)備好培養(yǎng)基內(nèi)，每份培養(yǎng)基最少加2管。4、培養(yǎng)7天。5、每種培養(yǎng)基50%發(fā)生渾濁，長菌。培養(yǎng)基：無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第46頁1、培養(yǎng)基儲罐滅菌，移入無菌區(qū)域。2、滅菌后連接件、閥門、過濾器等和培養(yǎng)

基儲罐無菌連接。3、滅菌后培養(yǎng)基經(jīng)過濾器和儲罐無菌連接。4、儲罐另一端和灌裝機(jī)相連，連接時無菌。〈USP〉培養(yǎng)基制備：無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第47頁1、培養(yǎng)基無菌檢驗(yàn)

滅菌后，灌裝前培養(yǎng)基取樣，進(jìn)行無菌檢驗(yàn)。確認(rèn)培養(yǎng)基是無菌

微生物檢驗(yàn)：無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第48頁2、瓶子、瓶蓋和膠塞無菌檢驗(yàn)

灌裝前瓶子、瓶蓋和膠塞取樣，進(jìn)行無菌檢驗(yàn)。確認(rèn)進(jìn)入灌裝線瓶子、瓶蓋和膠塞是無菌。

微生物檢驗(yàn)：無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第49頁3、灌裝后培養(yǎng)基靈敏度檢驗(yàn)

同培養(yǎng)基靈敏度檢驗(yàn)。確認(rèn)滅菌后培養(yǎng)基靈敏度符合要求。

微生物檢驗(yàn)：無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第50頁4、瓶子培養(yǎng)和破損檢驗(yàn)

灌裝培養(yǎng)基瓶子編號后，按照預(yù)定培養(yǎng)溫度培養(yǎng)至14天。統(tǒng)計培養(yǎng)結(jié)果。

微生物檢驗(yàn)：無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第51頁1、FDA：

20-35℃，目標(biāo)值±2.5℃，不少于14天；如選擇兩個溫度，則每一溫度下最少培養(yǎng)7

天，從低溫開始。2、PIC：

20-35℃下最少14天?；蛳?0-25℃下7天，然后30-35℃下7天。培養(yǎng)時間：無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第52頁

發(fā)覺微生物生長瓶子污染百分比=100%

灌裝瓶數(shù)–破損瓶數(shù)評定結(jié)果：無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第53頁生產(chǎn)部人員

灌裝人員（灌裝、膠塞、清洗瓶等）、清潔人員質(zhì)量部人員

QA（IPC、監(jiān)測人員）、QC(取樣、檢驗(yàn))工程部人員運(yùn)行人員、維護(hù)人員人員：無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第54頁上崗前：最少參加一次無菌工藝模擬考核，為其上崗資質(zhì)主要內(nèi)容。年度資質(zhì)確認(rèn)：無菌崗位操作員工每年至少參加一次無菌工藝模擬。

人員資質(zhì)無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第55頁禁止“非無菌”儀器或器材接觸無菌材料。遲緩、有目標(biāo)移動。操作中身體一直處于A級層流之外無菌操作確保無菌工作服不受污染……無菌操作人員行為：無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第56頁接收培訓(xùn)人員

生產(chǎn)部人員、質(zhì)量部人員、工程部人員人員培訓(xùn)：無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第57頁首次驗(yàn)證

最少連續(xù)成功灌裝3個批次。年度驗(yàn)證

每條生產(chǎn)線每年不得少于2次。

6個月生產(chǎn)期間沒有有目標(biāo)停頓生產(chǎn)無菌生產(chǎn)區(qū)域生產(chǎn)線退伍驗(yàn)證

生產(chǎn)線退伍前必須進(jìn)行一次無菌工藝模擬。驗(yàn)證頻率：無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第58頁環(huán)境監(jiān)測數(shù)據(jù)水系統(tǒng)檢驗(yàn)數(shù)據(jù)無菌檢驗(yàn)數(shù)據(jù)關(guān)鍵工藝變更、空調(diào)系統(tǒng)變更以上趨勢評定，決定了周期性培養(yǎng)基灌裝驗(yàn)證次數(shù)。培養(yǎng)基灌裝驗(yàn)證次數(shù)：無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第59頁

方案、匯報和調(diào)查無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第60頁定義被模擬工藝定義使用房間定義使用灌裝線和設(shè)備使用容器和密封類型線速度灌裝單位數(shù)量干擾和中止數(shù)目和類型一起參加人數(shù)使用培養(yǎng)基模擬方案內(nèi)容1：無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第61頁灌裝到容器內(nèi)培養(yǎng)基體積培養(yǎng)條件同時環(huán)境監(jiān)測批統(tǒng)計復(fù)印件全部測試可接收標(biāo)準(zhǔn)最終匯報描述選擇“最差條件”原理陽性數(shù)量和編號促生長試驗(yàn)要求和結(jié)果模擬方案內(nèi)容2：無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第62頁測試方法應(yīng)該盡可能模擬工藝選擇方法和程度必須理由充分而且文件化試驗(yàn)方法必須足夠靈敏，程度時能夠到達(dá)全部陽性都應(yīng)該判別全自動生產(chǎn)線發(fā)生污染率靠近于零在舊設(shè)施中生產(chǎn)或是較長生優(yōu)點(diǎn)理步驟或是手工操作情況下，污染率不應(yīng)該超出1個（3000灌裝單位內(nèi)）。在少于3000瓶批量中，工藝模擬數(shù)量最少要等于批量，因?yàn)樾∨康挽`敏度，不允許有陽性出現(xiàn)。大于3000瓶批量，能夠接收陽性數(shù)量計算是應(yīng)該慎重。建立可接收程度標(biāo)準(zhǔn)：無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第63頁是一組到達(dá)工藝極限值上限或下限情況，和那些在SOP范圍內(nèi)，但與理想情況相比時有最大可能造成工藝或產(chǎn)品失敗情況。最差條件不一定會造成產(chǎn)品或工藝失敗。最差條件：無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第64頁使用原料、組件和密封在無菌工藝區(qū)域保留時間超出范圍無菌操作人員數(shù)量，超出正常生產(chǎn)所需人員數(shù)量在特殊線上，以最快速度灌裝最少數(shù)量（操作困難），以最慢速度灌裝最大數(shù)量（最大暴露）促生長培養(yǎng)基有抑制性或保護(hù)性處方……“最差條件”類型無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第65頁污染容器應(yīng)仔細(xì)調(diào)查其完整性。陽性應(yīng)該判定到種、屬。全方面取樣，查找污染源。確定潛在污染源，污染源是怎樣進(jìn)入工藝。回顧生產(chǎn)統(tǒng)計。回顧關(guān)鍵系統(tǒng)：HVAC等對全部程序和工藝變更進(jìn)行回顧。失敗調(diào)查無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第66頁失敗原因：能夠指定。污染為一個清楚、單一起源。

糾正辦法：立刻糾正，而且文件化。調(diào)查結(jié)果1：無菌工藝和無菌檢驗(yàn)培訓(xùn)課件第67頁失敗原因：不能夠指定。含糊指定，各種系統(tǒng)和工藝共同作