檢驗項目操作規(guī)程

血液常規(guī)測定一儀器法

一.儀器：深圳邁瑞B(yǎng)C-2600型三分群血液分析儀；

二.抗凝劑：

1.使用全血時常用EDTA-L或EDTA-Na20一般1.5~2.2mg可阻止1ml血液凝

固。2.本實驗室采用全血方式。

三.標本采集及測定：

1.真空采集法：

準備一次性采血針、消毒棉簽、75%乙醇、EDTA-K2抗凝管、壓脈帶。

采血步驟：WHO推薦采血部位：患者取坐位，前臂水平伸直，暴露穿刺部位,

選擇容易固定、明顯可見的肘部靜脈。，用75%乙醇棉簽自靜脈穿刺部位從內(nèi)

向外、順時針方向消毒皮膚，待干。在采血部位上端6cm扎壓脈帶，使靜脈

充盈暴露。穿刺時，針頭與皮膚成30度角快速刺入皮膚，然后以5度角向

前穿破靜脈壁進入靜脈腔。充分混勻抗凝管內(nèi)的血液。采血完畢，用干棉簽

壓住傷口，止血片刻。

注意事項：

(1)若患者正在進行靜脈輸液、輸血，不宜在同側(cè)手臂采血。

(2)在采血過程中，應當避免導致溶血的因素。

(3)嚴格按照無菌技術(shù)操作，防止患者采血部位感染，保證一人一針一管

一墊一消毒，杜絕交叉感染。

(4)取血清標本時避免震蕩，防止紅細胞破裂造成溶血。

2.測定：采血完成后待5-10分鐘即可上機測定。

四.血液分析儀測定原理

1、白細胞分析：在進行白細胞體積分析時，儀器計算機部分可以將白細胞

體積從35?450fl分為256個通道，每個通道為1.64fL細胞根據(jù)其大小被

分別放在不同的通道中，從而得到白細胞體積分布的直方圖。經(jīng)過溶血劑處

理后的白細胞可以根據(jù)體積大小初步確認其相應的細胞群：第一群

（35~160fl）是小細胞區(qū)，主要是淋巴細胞。第二群（90~160fl）是單個細

胞區(qū)，也被稱為中間細胞，包括單核細胞、嗜酸性粒細胞、嗜堿性粒細胞、

核向左移或白血病可有的各階段幼稚細胞及白血病細胞。第三群160fl以

上）是大細胞區(qū)，主要是中性粒細胞。儀器根據(jù)各亞群占總體的比例計算出

各亞群的百分率，如果與該標本的白細胞總數(shù)相乘，即得到各類細胞的絕對

值。

2、紅細胞分析：紅細胞數(shù)和紅細胞壓積：紅細胞通過小孔時，形成相應大

小的脈沖，脈沖的多少即紅細胞的數(shù)目，脈沖的高度代表單個脈沖細胞的體

積。脈沖高度疊加經(jīng)換算即可得紅細胞得壓積。稀釋的血液進入紅細胞檢測

通道時，其中含有白細胞，因此，紅細胞檢測的各項參數(shù)均含有白細胞因素,

但正常血液有形成分中白細胞比例很少，故其影響可忽略不計。在某些病理

情況下，如白血病，白細胞數(shù)明顯增加而又伴嚴重貧血時，即可使所得各項

參數(shù)產(chǎn)生明顯差異。根據(jù)所測單個紅細胞體積及相同體積細胞占總體得比

例，可打印出紅細胞體積分布直方圖。

3、血紅蛋白含量測定：被稀釋的血液加入溶血劑后，紅細胞溶解，釋放血

紅蛋白，后者與溶血劑結(jié)合形成血紅蛋白衍生物，進入血紅蛋白檢測系統(tǒng)，

在特定波長（一般530~550nm）下比色，吸光度的變化與液體中Hb含量成比

例，儀器便可顯示Hb濃度。

4、各項紅細胞指數(shù)檢測：MCV、MCH.MCHC及RDW均是根據(jù)儀器檢測的紅細

胞數(shù)、紅細胞壓積和血紅蛋白含量的實驗數(shù)據(jù)，經(jīng)內(nèi)存電腦換算出來的。

5、血小板分析：血小板計數(shù)直方圖范圍為2?20fl,不同儀器血小板直方圖

的范圍不一，MPV就是此平整曲線所含的群體算術(shù)平均體積，所以，MPV也

就是PLT大小分布直方圖的產(chǎn)物。

五、各項參數(shù)代號、參考范圍及臨床意義

名稱正常參考值臨床意義

RBC男：增加：RBC增多癥、先天性心臟病、脫水、缺氧

4.0-5.5*107L減少：各種原因的貧血、白血病、大手術(shù)后、失

女：

3.5-5.0*10l2/L血、缺血

MCV80-100fl增加與降低應與MCH、MCHC結(jié)合判斷貧血類型

RDW11.0-14.5%增加用于缺鐵性貧血與地中海貧血的鑒別

MPV6.0-11.5fl鑒別血小板減少病因和血小板分布直方圖一起有

利于骨髓增生性疾病，與反應性血小板增多的鑒

另人出血性疾病的診斷。

PCT0.06—0.4%與血小板增加或減少性疾病有關(guān)

PDW9—1312/L與血小板破壞增多的疾病有關(guān)

WBC3.2—9.7*109/L增加：化膿性炎癥、高熱、組織損傷、術(shù)后、白

血病

減少：傷寒、再障、病毒性感染、放療化療后

HCT35.0—50.0%減低：各類貧血及紅細胞數(shù)量減少時有不同程度

降低

MCH28.0—32.Opg與MCV一起作為貧血類型的診斷

MCHC320—360g/L同上

LY0.8-4.0GR增力口：化膿性感染、術(shù)后、急性出血、尿毒癥、

20-40*109/L粒細

GR2.0-7.5胞性白血病降低、傳染病、LY減少急

50-70*109/L性期、

MID0.1-1.0放射病、細胞免疫缺陷等

3-10*109/LGR減少：傷寒、流感、放療化療、再障、粒細胞

缺乏癥、

LY增加：結(jié)核、傳染性肝炎、慢性淋巴細胞白血

病、傳單等

六、血細胞體積分布直方圖的應用:

1、紅細胞體積分布直方圖：將MCV和RDW配合直方圖分析，可直接觀察紅

細胞體積的分布情況。

只現(xiàn)一個峰：見于正常人、缺鐵性貧血（峰左移）、巨幼細胞性貧血（峰右

移）。

可現(xiàn)兩個峰：缺鐵性貧血給予鐵劑治療有效時，可出現(xiàn)一個小紅細胞峰和另

一個正紅細胞（或網(wǎng)織紅細胞）峰。巨幼細胞性貧血給予葉酸、維生素Bl2

治療有效時也可見兩個峰。

2、白細胞體積分布直方圖：正常人白細胞體積分布直方圖，可見兩個明顯

分離的峰，左峰為小細胞群（淋巴細胞），右峰為大細胞群（粒細胞），兩峰

之間為中間細胞分布。急性白血病時，由于異常的原始、幼稚細胞增多，可

見中間細胞明顯增高，這時直方圖上見一個峰，峰值常在90~160fl之間。

這時必須推片染色鏡檢。

3、血小板體積分布直方圖：正常人血小板體積主要分布在2?20fl之間，

2「30fl之間有少量血小板，一般儀器以30fl為最大的分析界標。血小板體

積增大時，直方圖會出現(xiàn)明顯拖尾現(xiàn)象。有小紅細胞或紅細胞碎片干擾時，

直方圖尾部會抬高。

七.質(zhì)量保證：

（一）人員

1、操作人員上崗前的培訓：

2、上崗前要接受良好的培訓。要對儀器的原理、操作規(guī)程、使用注意事項、

異常報警的含義、引起實驗誤差的因素及如何維護要有充分的了解，掌握用

ICSH推薦的標準方法校正儀器的每一個測試參數(shù)的程序。

3、注意在分析前、中、后每一步的質(zhì)量控制，注意病人生理或病理因素給

實驗造成的誤差或服用藥物的干擾作用。根據(jù)質(zhì)控圖的變化及時進行儀器的

調(diào)試。測試后要根據(jù)臨床診斷、直方圖變化、各項參數(shù)的關(guān)系，確認無誤后

方能發(fā)出報告。

（二）儀器應注意的問題

1、機器應避免直接與水接觸，避免過度的大氣壓力，避免過高的溫度及濕

度。

2、機器應放置水平，在搬運過程中應避免搖動和機械碰撞。

3、當出現(xiàn)警告信號時，得到的數(shù)據(jù)是不正確的，特別是當“！”出現(xiàn)時，不

要使用帶有警告信號的數(shù)據(jù)。

4、定期校正儀器，以保證發(fā)出報告的質(zhì)量。

（三）操作人員在分析中應注意的幾個問題：

1、血液放置時間應在5~10分鐘方可進行檢驗，以免影響血小板（抽取時盡

量避免擠壓，破壞）。

2、測試時試劑的溫度對結(jié)果的影響：血液分析儀細胞計數(shù)最適溫度為

18?22℃,低于15°C、高于30°C,均對結(jié)果有影響。

3、儀器使用人員每天早晨應做空白計數(shù)，有條件時做室內(nèi)質(zhì)控，看儀器是

否在正常狀態(tài)下，每天下班前，沖洗2—3次，每周或每1000個標本更換過

濾網(wǎng)。

4、儀器的半堵孔現(xiàn)象：根據(jù)檢測器上微孔堵塞的程度，通常分為完全堵孔

和不完全堵孔兩種。如發(fā)生完全堵孔，血細胞不能通過微孔計數(shù)，也不顯示

結(jié)果，有的儀器還同時在屏幕上顯示“clog”，所以完全堵孔較容易判斷。

不完全堵孔主要通過下述方法判斷：觀察計數(shù)時間；觀察示波器波形；看計

數(shù)指示燈閃動，如該燈閃動無規(guī)律常是不完全堵孔的表現(xiàn)。

5、由于多發(fā)性骨髓瘤、巨球蛋白血癥、淋巴系統(tǒng)增殖性疾病、轉(zhuǎn)移瘤、自

身免疫性疾病、感染及某些原因不明疾病血中含有冷球蛋白；骨髓瘤、癌癥、

白血病、妊娠、血栓疾病、糖尿病患者血中存有冷纖維蛋白，可使血液中非

晶體物質(zhì)聚集，因而導致血細胞計數(shù)值增高。此時，將稀釋標本放37度水

浴，10分鐘后立即計數(shù)可消除此影響。

6、血液中白細胞增高影響紅細胞計數(shù)，或有核紅細胞出現(xiàn)影響白細胞計數(shù)。

7、低色素貧血或紅細胞內(nèi)含有大量HbS或HbCO,某些新生兒或某些肝病患

者，紅細胞膜質(zhì)類異常，都具有抵抗溶血劑作用，導致紅細胞溶血不完全。

8、M蛋白增多時，在PH低的情況下M蛋白可與溶血劑發(fā)生反應，使結(jié)果偏

高。

9、各種病因引起的血栓前狀態(tài)使血小板易于聚集。

10、高血脂癥可使Hb假性升高，進而導致MCH和MCHC的測定偏差。

11、大量巨大血小板或小紅細胞的存在，影響血小板和紅細胞的檢查。

血型鑒定

I.AB0血型鑒定

一.原理：根據(jù)紅細胞上有無A抗原或B抗原，將血型分為A型、

B型、AB型及0型四種，可利用紅細胞凝集實驗，通過正反定型準確鑒定A、

B、0血型。所謂正定型，是用已知抗-A和抗-B分型血清來測定紅細胞上有

無相應的A抗原/和B抗原；所謂反定型，是用已知A細胞和B細胞來測定

血清中有無相應的抗-A/和抗-B。

二.試劑和材料：

1、抗-A（B型）、抗-B（A型）及抗A+B（0型）分型血清。

2、受檢者5%紅細胞鹽水懸液。

三.方法：

1、玻片法（常用）：

（1）正定型：取潔凈玻片一張（或白凈板一塊），用蠟筆劃成圓圈，標明

抗A、抗B；分別滴加抗A、抗B分型血清1滴于標明的圓圈內(nèi)，再各

加受檢者2%紅細胞懸液1滴（或全血10ul）,混合均勻，5min內(nèi)觀察

結(jié)果。

（2）結(jié)果觀察：將玻片不斷輕輕搖動，使血清與細胞充分混勻，連續(xù)15

分鐘，以肉眼觀察有無凝集（溶血）反應，如以玻片做實驗時，也可用

低倍鏡觀察結(jié)果。

結(jié)果判定：A、B、0血型正反定型結(jié)果

分型血清+受檢者紅細胞受檢者血型受檢者血清+試劑紅細胞

抗-A抗-B抗-A+BA細胞B細胞0細胞

+一+A-+-

—++B+——

———0++-

+++AB———

四.注意事項：

1、分型血清質(zhì)量性能符合要求，用完后應放冰箱保存，以免細菌污染。

2、試劑紅細胞以3個健康者同型新鮮紅細胞混合，用生理鹽水洗滌一次,

以除去存在血清中的抗體，及可溶性抗原。

3、試管、滴管和玻片必須清潔干燥，防止溶血。

4、操作方法應按規(guī)定，一般應先加血清，然后再加紅細胞懸液，以便容

易核實是否滴加血清。

5、按理IgM抗-A和抗-B與相應紅細胞的反應溫度以4℃為最強，但為

了防止冷凝集現(xiàn)象的干擾，一般仍在室溫(20°C?24°C)內(nèi)進行試驗，37°C

可使反應減弱。

6、觀察時應注意紅細胞呈特異性凝集，繼發(fā)性凝固以及緡錢狀排列的區(qū)

別。

7、判斷結(jié)果后應仔細核對、記錄、避免筆誤。

尿液常規(guī)測定

一、標本收集與保存：

1、門診病人尿常規(guī)檢驗，可留取任意時間的一次性尿于清潔、干燥的一次

性尿杯內(nèi)，立即送檢；

2、臨床疑似腎臟病的患者，取清晨第一次尿為佳；

3、特殊檢驗應按實驗要求留取標本：尿糖檢驗，留空腹尿；細胞、管型計

數(shù)留3h尿或24h尿；

4、標本的保存：收到標本應在30min內(nèi)檢查完，否則應妥善保存：如冷藏、

加防腐劑等。

二、尿液常規(guī)檢查

方法：目前多采用干化學試帶法；

儀器：迪瑞N-600型尿自動分析儀判讀結(jié)果。

檢測原理、臨床意義：

（一）尿PH值檢查：

原理：采用酸堿指示劑法，其膜塊區(qū)含有甲基紅及澳麝香草酚蘭，兩種酸堿

指示劑適量配合可反映尿PH值4.5-9.0的變化范圍。

參考值：正常人普通膳食呈弱酸性：5.4?8.4（平均6.0）

臨床意義：

1、尿PH值測定可了解體內(nèi)酸堿平衡情況。

強酸尿：代酸中毒、中風、糖尿病、腎結(jié)石、IV型腎小管酸中毒、白血病、

壞血病。

（2）強堿尿：堿中毒、腎小管酸中毒（I、II、HI型）、泌尿系變形桿菌感

染。

2、尿PH值檢測監(jiān)測腎結(jié)石和泌尿系病人的尿液酸堿變化情況，指導臨床用

藥。

如：某些患者通過給藥使PH值大于6.5,就不會形成尿酸和胱氨酸結(jié)石。而

某些患者須保持PH值酸性，因堿性尿會促進某些微生物的生長發(fā)育和磷酸

鈣結(jié)石的形成。因此有學者認為：尿PH值變化與尿結(jié)石的形成密切相關(guān)。

3、監(jiān)控尿PH值變化對其他膜塊區(qū)反應的干擾作用：如尿蛋白、比重受PH

值影響大。

4、影響因素：

尿標本必須新鮮，放置過久細菌分解尿液成分（多數(shù)細菌產(chǎn)氨），使尿

液呈堿性。

（2）嚴格按規(guī)定時間浸泡試帶，浸尿時間過長，尿PH值呈減低趨勢。

（3）實驗溫度：最適20度，PH值隨溫度升高而減低。

（二）尿比重（SG）

尿比重是指尿液與純水的重量之比，，主要測定尿內(nèi)固體物質(zhì)（主要是

尿素、氯化鈉）濃度。隨著尿液分析儀的問世，干化學法測尿比重得到廣泛

應用，具有簡單快速、用尿量少不受人為因素影響等優(yōu)點。（參考方法；折

射儀法）

原理：其膜塊區(qū)主要含有多聚電解質(zhì)（甲乙烯醛馬來酎）、酸堿指示劑（澳

麝香草酚蘭）、緩沖液。其原理是采用經(jīng)過處理的多聚電解質(zhì)的PKa改變與

尿液離子濃度相關(guān)，試紙條中的多聚電解質(zhì)含有隨尿標本中離子濃度而解離

的酸性基因，離子濃度越多，酸性基因（H+）解離越多，使膜塊區(qū)域中的PH

改變，這種改變可由膜塊中的酸堿指示劑（澳麝香草酚蘭）的顏色變化顯示

出來。進而換算成尿液的比重值。

參考值：1.015?1.025；晨尿通常＞1.020；新生兒1.002?1.004

臨床意義：

(1)尿比重的高低主要取決于腎臟的濃縮功能，它與尿中所含溶質(zhì)的多少

成正比，而與尿量成反比，并與尿液的顏色深淺基本相平行。

尿比重升高：表示尿液濃縮，見于急性腎炎、蛋白尿、糖尿、高熱、大量出

汗、腹水、心功能不全。

(2)尿比重降低：表示濃縮功能下降，見于尿崩癥、慢性腎炎、精神性多

飲多尿癥。

(3)恒定在1.010左右，呈等張尿，表示腎實質(zhì)有嚴重的損害。

用尿比重和尿量的動態(tài)變化來監(jiān)測腎結(jié)石病人的尿物理變化，用于指導病人

飲食習慣，預防病人結(jié)石的再次形成。

4、影響因素：

(1)新鮮尿標本，不能含有強堿、強酸等物質(zhì)；強堿性尿PH>7.0時應在

干化學基礎上增加0.005作為補償；

(2)試紙法只與離子濃度有關(guān)不受非離子化學物質(zhì)影響；

(3)尿中蛋白升高時，尿比重增強明顯；

(4)不宜用于新生兒尿比重檢查，可能由于新生兒尿比重在L002T.004

之間的緣故。

(5)過高過低的尿比重測試不夠敏感，因此只能用于篩選。

(三)尿蛋白檢查：

各種指示劑都有一定的PH值變色范圍，在一定的PH值緩沖液中顏色比

較恒定，當溶液中有蛋白質(zhì)時一，由于蛋白質(zhì)離子對指示劑離子相反電荷的吸

引而生成復合物，引起指示劑的進一步電離，超越了緩沖作用，指示劑發(fā)生

顏色改變，溶液中蛋白質(zhì)濃度越大，變色程度也越大，這是指示劑的蛋白質(zhì)

誤差。蛋白質(zhì)能與澳酚藍起顏色反應，蛋白質(zhì)含量的多少與顏色深淺成正比。

指示劑蛋白誤差原理：

其膜塊中主要含有酸堿指示劑（澳酚藍PH域值3.2）、枸椽酸緩沖系統(tǒng)、

表面活性劑。在PH3.2時-，澳酚藍產(chǎn)生陰離子，與帶陽離子的蛋白質(zhì)（主要

是白蛋白）結(jié)合后發(fā)生顏色變化（Neels建議：磺基水楊酸法為干化學法檢

測尿蛋白參比方法）。

參考值：陰性；30?130mg/日；

當尿蛋白＞100mg/L或＞150mg/24h時尿蛋白定性陽性。

臨床意義：

1、生理性蛋白尿：指泌尿系并無器質(zhì)性病變，尿內(nèi)暫時出現(xiàn)蛋白而言，又

稱功能性蛋白尿。由劇烈運動、長時間直立、高溫、受寒等

因素形成腎血管痙攣或充血，形成腎小球滲透性增強。

2、病理性蛋白尿：指泌尿系因器質(zhì)性病變、尿內(nèi)持續(xù)出現(xiàn)蛋白而言。見于:

各類腎病、腎毒性物質(zhì)引起的腎損害、妊高癥、SLE的腎損害、免疫性蛋白

尿。

3、影響因素：

（1）尿標本必須新鮮。變質(zhì)尿液產(chǎn)生的PH值變化影響實驗結(jié)果（假陽性）。

（2）試紙條溫度：4°C取出即用，蛋白質(zhì)偏低。

（3）尿液存放時間過久而致細菌生長繁殖；試帶甩動（浸濕后甩動）：因反

應時間延長，試帶色素相互滲透而致蛋白質(zhì)升高。

（4）起假陽性藥物：奎寧、口密咤等藥物引起強堿尿（PH值大于9.0時）干化

學法假陽性；磺基水楊酸法假陰性。

(5)引起假陰性藥物：青霉素族有明顯的干擾作用，干化學法假陰性，磺基

水楊酸法假陽性。

(6)標本內(nèi)含其他分泌物(如：生殖系統(tǒng))或較多細胞成分，或消毒殺菌劑

可引起假陽性，這并非泌尿病變所致。

(7)不同測定方法對尿內(nèi)不同蛋白質(zhì)檢測的敏感性不同。雙縮腺定量可以對

白蛋白、球蛋白顯示近似的敏感性。而干化學法對球蛋白較敏感，對球蛋白

的敏感性僅是蛋白質(zhì)的因此對于腎病患者特別是在疾病發(fā)展過程中

需要觀察尿蛋白含量的病例、最好使用磺基水楊酸法和雙縮胭法進行定性和

定量實驗。

(四)尿糖測定

原理：酶法：膜塊中主要成分含有GOD、POD酶和色原(一類用碘化鉀作色

原，另一類用鄰甲聯(lián)苯胺作色原)葡萄糖氧化酶把葡萄糖氧化成葡萄糖醛酸

和過氧化氫。過氧化氫再由過氧化物酶催化釋放[0],使色原呈現(xiàn)不同的顏

色變化。

參考值：正常人0.56?5.0mmol/24h,定性陰性。

臨床意義：尿糖陽性：見于糖尿病、腎性糖尿病、甲亢、口服及注射大量葡

萄糖及應激反應時。

影響因素：

1、新鮮尿標本放置時間過長導致葡萄糖降低；

2、試帶浸尿時間過長導致葡萄糖升高，

3、試帶溫度：4度取出即用，導致葡萄糖偏低；

4、試帶浸尿后甩動導致葡萄糖升高；

5、干化學與班氏法比較。

（五）尿酮體檢測：

原理：其膜塊中主要含有亞硝基鐵氧化鈉，可與尿中乙酰乙酸、丙酮產(chǎn)生紫

色反應，其對乙酰乙酸的敏感性50T00mg/L,對丙酮僅為400-700mg/L,不

與B-羥丁酸起反應。

臨床意義：

陽性：葡萄糖酮癥酸中毒、妊娠劇吐、長期饑餓、營養(yǎng)不良及劇烈運動后。

影響因素：

1、新鮮尿標本及時送檢，避免出現(xiàn)假陰性或結(jié)果偏低。

（1）易揮發(fā)：乙酰乙酸、丙酮都是揮發(fā)性物質(zhì)；

（2）易分解：乙酰乙酸受熱易分解成丙酮；

（3）尿液被細菌污染，酮體消失；

2、試帶浸尿時間：隨時間延長而下降；

3、注意干化學法與酮體粉法的靈敏度差異：同一病理標本兩種方法可能出

現(xiàn)截然不同的結(jié)果，分析時應特別注意。

4、注意不同病程，酮體成分的變化會給檢測結(jié)果帶來差異；不同病因引起

的酮癥，酮體的成分可不同，即使同一病人不同病程也可有差異。

在糖尿病酮癥酸中毒早期病例中：主要是羥丁酸、乙酰乙酸很少或

缺乏；此時測量可導致對總酮體量估計不足。

在糖尿病酮癥酸中毒癥狀緩解之后：乙酰乙酸含量反而比初始急性期

高。

因此，應根據(jù)病程發(fā)展，協(xié)助臨床醫(yī)生共同分析實驗結(jié)果。

(六)尿膽紅素、尿膽原檢測

膽紅素原理：直接膽紅素在強酸介質(zhì)中與2,4-二氯苯胺重氮鹽起偶聯(lián)反應

呈紫紅色偶氮化合物。

尿膽原原理：與改良Ehrlich法相同，尿膽原在酸性溶液中與對-二甲氨基

甲醛作用生成櫻紅色。

參考值：尿膽紅素：陰性

尿膽原：定性正常人為弱陽性反應，排出量0.5?4.0mg/d

臨床意義：

1、尿膽紅素陽性：常見于阻塞性或肝細胞性黃疸，病毒性和中毒性肝炎。

2、尿膽原-陽性：常見于溶血型疾患及肝實質(zhì)病變，如肝炎時，

-陰性：常見于完全阻塞性黃疸檢查。

影響因素：

1、新鮮尿標本放置時間長：膽紅素在陽光照射下成為膽綠素，膽紅素降低;

尿膽原氧化成尿膽素使尿膽原降低。

2、試帶浸尿時間延長時膽紅素升高。

3、試帶浸濕后甩動尿膽原升高。

4、假陽性干擾：

(1)膽紅素：某些藥物如牛黃、熊膽粉造成膽紅素假陽性。

(2)尿膽原：尿內(nèi)源物質(zhì)如膽色素原、口引噪、膽紅素、吩睡嗪類藥物造成

尿膽原假陽性。

5、假陰性干擾：

(1)膽紅素陰性：尿內(nèi)高濃度的VitC、亞硝酸鹽造成抑制偶氮反應，造成

假陰性。氯丙嗪治療或尿內(nèi)含鹽酸苯偶氮毗咤的代謝產(chǎn)物，造成假陰性。

（2）抗菌素抑制腸道菌群導致尿膽原降低。

6、正常人尿膽原排出量每天波動很大，夜間和上午量少，午后升高，在午

后2-4h達到高峰。同時，尿膽原的清除率與尿PH相關(guān)，PH5.0時清除率

2ml/min；PH8.0時增至25ml/min。故學者提倡：預先給患者提前服用碳酸

氫鈉堿化尿液，收集午后2-4h尿進行測定，以提高檢出率。

（七）尿亞硝酸鹽檢查

原理：尿亞硝酸鹽檢查：膜塊中主要含有對氨基苯碑酸、1,2,3,4-四氫

并喳咻-3酚物質(zhì)。大多數(shù)尿路感染是由大腸埃希菌引起的，正常人尿液中含

有來自食物或蛋白質(zhì)正常代謝產(chǎn)物的硝酸鹽，當尿液中有大腸埃希菌增殖

時，可將硝酸鹽還原為亞硝酸鹽，其可將膜塊中對氨基苯碑酸重氮化而成重

氮鹽，后者與1,2,3,4-四氫并唯琳-3酚偶聯(lián)，使膜塊產(chǎn)生紅色，借此診

斷患者是否被大腸埃希菌感染。其檢出敏感度為0.03-0.06mg/dlo

尿液中亞硝酸鹽檢出率：受以下三方面的影響：

a.感染細菌是否含有硝酸鹽還原酶；

b食物中是否含有適量的硝酸鹽；

c尿液標本是否在膀胱停留間隔4h以上。

符合上述三個條件，此實驗的檢出率為80%,反之成陰性結(jié)果。因此本實驗

陰性并不能排除菌尿的可能，陽性也不能完全肯定泌尿系感染。

參考值：一般為陰性。

臨床意義：常用于大腸埃希菌引起的泌尿系感染。可作為尿路感染的過篩試

驗。

影響因素：

1、標本放置時間過長或污染亞硝酸鹽轉(zhuǎn)為陽性。

2、尿液應在膀胱停留間隔4h以上，使細菌有充分的作用時間，故以清晨第

一次尿液為宜。間隔時間過短易造成假陰性。

3、泌尿道止痛藥（苯偶氮毗胺）及空氣中的亞硝酸氣體造成假陽性。

4、假陰性：使用大量抗壞血酸時；使用抗生素細菌被抑制時一；使用利尿劑

時。

（八）尿白細胞檢查

原理：基于粒細胞胞質(zhì)內(nèi)含有特異性酯酶，可作用于膜塊中的口引口朵酚酯形成

吧噪酚釋放。并與重氮鹽反應形成紫色縮合物，其顏色的深淺與細胞的多少

呈比例關(guān)系。

參考值：一般為陰性。

臨床意義：

1、泌尿系統(tǒng)及鄰近器官有感染性病變。

2、腎結(jié)核、腫瘤亦增多

3、腎移植后有排斥反應者，尿中大量出現(xiàn)淋巴細胞及單核細胞。

4、成年婦女生殖系統(tǒng)有炎癥時，可見成團的膿細胞并伴有大量扁平細胞。

影響因素：

1、新鮮尿液標本立即測定，以免白細胞受破壞，導致干化學法與鏡檢法人

為的實驗誤差。

2、此法只能測中性粒細胞，不與淋巴細胞反應，在腎移植術(shù)后排斥反應時,

尿中以淋巴細胞為主；或其他病因引起的淋巴細胞尿時一，會產(chǎn)生假陰性結(jié)果。

3、假陽性:

(1)尿液中污染甲醛；

(2)含有高濃度的膽紅素；

(3)某些物質(zhì)：吠喃坦咤。

(4)尿液再膀胱儲存時間過長或標本放置時間延長，導致白細胞破壞，酯

酶釋放到尿中，造成干化學法陽性、鏡檢陰性的所謂“假陽性”現(xiàn)象。

4、假陰性：

(1)尿蛋白大于5g/L。

(2)尿中含大劑量頭抱氨卞或慶大霉素等負干擾。

(九)尿血紅蛋白(潛血)尿紅細胞檢查

原理：干化學法膜塊中主要含有氧化氫菌香素或過氧化氫烯枯及色素(鄰甲

聯(lián)苯胺)兩種物質(zhì)。其原理是尿中紅細胞內(nèi)的Hb或其被破壞釋放的Hb均含

有亞鐵血紅素，它具有過氧化物酶活性，在過氧化氫菌香素或過氧化氫烯枯

存在條件下，催化鄰甲聯(lián)苯胺脫氫而呈色。

參考值：一般為陰性。

臨床意義：Hb、肌紅蛋白敏感度0.3-0.6/L,對完整紅細胞敏感度5-10

個/ul。

影響因素：

1、新鮮尿標本，放置時間越長，潛血減低。

2、試帶浸尿時間延長，潛血升高。

3、試帶浸濕后甩動：潛血升高。

假陽性：

1、某些氧化性藥物：漂白粉及磺胺類、非那酊、喳咻、碑中毒。

2、尿含有易熱酶、肌紅蛋白或菌尿（細菌產(chǎn)生過氧化物酶）。

3、腎病患者的紅細胞在腎臟或泌尿道破壞、或尿比重過低、尿PH偏高，均

易造成紅細胞破壞，血紅蛋白釋出，出現(xiàn)所謂紅細胞干化學檢查的“假陽性”

現(xiàn)象。

假陰性：大量VitC競爭性的奪取試帶中過氧化物的氧，導致假陰性。

尿HCG檢查（膠體金法）

一.原理：免疫膠體金法是將羊抗人HCG抗血清（多抗）、羊抗鼠IgG分

別固定在特制的纖維素試帶上并呈兩條線上下排列，羊抗鼠IgG線在試

帶上方為陰性對照，羊抗人HCG多抗在下方為測定。試帶條中含均勻分

布的膠體金標記的鼠抗人BTCG單克隆抗體和無關(guān)的金標記鼠IgG0檢

測時將試帶浸入被檢尿液中（液面低于固定的兩條抗體線）后迅速取出，

尿液沿試帶上行，尿中的B-HCG在上行過程中與膠體金標記單克隆抗體

結(jié)合，待行至羊抗人HCG抗體線時，形成金標記的B-HCG單抗-尿HCG-

羊抗人HCG復合物而在試帶上顯紫紅色區(qū)帶，為HCG陽性反應，試帶上

無關(guān)的金標記鼠IgG隨尿繼續(xù)上行至羊抗鼠IgG處時與之形成紫紅色的

金標記抗原抗體復合物是為陰性對照。判斷結(jié)果時，含HCG的尿液試帶

上可顯示上、下兩條紫紅色線條，而陰性標本則只顯示出上邊一條紫紅

色線。

二.操作：

1.收集尿液：取任何時間尿標本留于潔凈、干燥的尿杯中及時送檢，取

晨尿標本更佳；

2.取出試紙將標有MAX線的一端向下浸入尿液，液面不得超過MAX線,

待顯示尿液向上爬行時將試紙條取出平放，5min內(nèi)讀取結(jié)果。

三.參考范圍：正常非妊娠女性：陰性；正常妊娠女性：陽性

四.臨床意義：

1、早期妊娠診斷：一般孕后7~10天尿HCG即可陽性，35?40天

為2500IU/L以上，60?70天出現(xiàn)高峰，可達8萬?32萬IU/LO常用的HCG

檢驗法均能呈陽性反應，早早孕檢測在受精卵著床后5?7天既能測出HCGo

2、先兆流產(chǎn)：HCG含量如逐漸上升可能保住胎兒，不斷下降應盡

及早處理，以免造成過期流產(chǎn)。

3、人工流產(chǎn)后無胎盤組織殘留者，即轉(zhuǎn)為陰性反應；如仍有活動

的胎盤組織殘留者仍為陽性，應考慮為不完全流產(chǎn)。

4、宮外孕的診斷，60%宮外孕患者HCG呈陽性反應。50%宮外孕在

陰道開始流血3周后，反應轉(zhuǎn)為陰性。

5、滋養(yǎng)層細胞腫瘤：惡性葡萄胎、絨毛膜癌(80%左右可引起陽

性反應)以及男性睪丸畸胎瘤等腫瘤時，尿中HCG升高。

6、尿液HCG檢測是早期診斷妊娠及相關(guān)疾病最簡便而重要的方

法。妊娠試驗陽性，首先應想到正常妊娠，除了少數(shù)出現(xiàn)假陽性反應外，大

約95%~100%孕婦均可被檢出來。如有可疑，可配合血清HCG檢測，兩者有

很好的相關(guān)性。

7.其它：更年期、排卵期、雙側(cè)卵巢切除術(shù)均可致黃體生成素(LH)升高;

內(nèi)分泌疾病如腦垂體疾病、甲亢，婦科疾病如卵巢囊腫、子宮癌等HCG也可

增高。近年發(fā)現(xiàn)惡性腫瘤如畸胎瘤、胰腺癌、胃癌、肝癌、乳腺癌、肺癌等,

血HCG也可升高

五、注意事項：

1.宜用清晨第一次新鮮尿液，必要時離心取上清液測定。

2.標本應及時送檢，否則應貯于2?8度，不超過48h。

3.浸入尿液時液面不得超過MAX線；5min后讀取結(jié)果無效。

4.若無控制線出現(xiàn)或控制線與測定線均不呈現(xiàn)紫紅色，表示試劑失效。

5.注意假陽性因素的影響。

糞便檢查

一、標本采集方法及注意事項：

標本采集的方法，因檢驗目的不同而有差別。

1、一般檢驗應留取新鮮糞便約5g左右（指頭大?。┗蛳”?ml,以防止糞

質(zhì)迅速干燥。若孵化血吸蟲毛坳，應留取全部新鮮糞便，不得少于30go

2、糞便標本應選擇膿血黏液等病理成分，若無病理成分，則可多部分取材。

糞便標本應收集于清潔、干燥、內(nèi)層涂臘的有蓋硬紙盒內(nèi)送檢，便于檢驗后

焚燒消毒。細菌學檢驗的糞便標本應收集于滅菌封口的容器內(nèi)，勿混入消毒

劑及化學藥品。

3、糞便標本中不得混入尿液、消毒劑及污水，因此不應采取尿壺或便盆中

的糞便。糞便標本應在采取后1小時內(nèi)進行檢查，否則可因PH及消化酶等

的影響，導致其有形成分分解破壞。

4、檢驗阿米巴滋養(yǎng)體應于排便后立即檢查，冬季尚需要采取保溫（25度）

措施。

5、做化學法潛血試驗時，應于試驗前3天禁食肉類及動物血食物，同時禁

服鐵劑及Vco

6、糞便檢驗的標本通常采取自然排出的糞便，但在無糞便排出而又必須檢

查時，可經(jīng)肛門指診或采便管拭取標本；而灌腸后的糞便常因過度稀釋及混

有油滴而影響檢驗結(jié)果。

二、檢驗后的處理：

1、如盛器為紙類物質(zhì)，檢驗完畢后應用火燒毀。

2、所用載玻片需用1%8.4液浸泡后洗刷并烤干。

三、一般性狀檢查：包括顏色、性狀、寄生蟲、結(jié)石等。

1、顏色：可根據(jù)觀察所見報告，如：黃色、褐色、土色、灰白、綠色、紅色、

柏油樣等。正常糞便因糞膽素而顯棕黃色，但可因食物、藥物或病理原因影

響而改變糞便顏色：灰白色見于領餐后、服矽酸鋁、阻塞性黃疸、膽汁減少

或缺乏；綠色見于食用含葉綠素的蔬菜后及含膽綠素時；紅色見于下消化道

出血、食用西紅柿、西瓜等；柏油樣便見于上消化道出血等或服用鐵劑、活

性炭等藥物或食用動物血及肝臟；醬色常見于阿米巴痢疾、食用大量咖啡、

巧克力等；米淚水樣見于霍亂；淡黃色見于乳兒便或服用大黃或山道年后，

在病理情況下，則因膽紅素未氧化所致。

2、性狀：正常時為成形軟便。

(1)粘液便：小腸有炎癥，見于各種腸炎、痢疾。

(2)澹便：便呈粥狀且內(nèi)容粗糙，見于消化不良、慢性胃炎、胃竇潴留。

⑶陳狀便：腸易激質(zhì)綜合癥。

⑷血性及膿血便：見于腸道下段有病變：痢疾、潰瘍性結(jié)腸炎、結(jié)腸或直

腸癌。

阿米巴痢疾：以血為主，血中帶膿，呈暗紅色稀果醬樣；

菌?。阂哉骋杭澳摓橹?，膿中帶血。

⑸鮮血便：直腸息肉、結(jié)腸癌、痔瘡、肛裂等。

(6)柏油樣便：腸道上段病變：上消化道出血。

(7)稀糊(汁)狀便：腸蠕動亢進或分泌增多所致。常見于急性胃腸炎。

(8)米淚水樣便：霍亂及副霍亂。

(9)白陶土樣便：阻塞性黃疸。

(10)干結(jié)便：習慣性便秘。

(11)細條狀便：提示直腸狹窄、直腸癌。

(12)乳凝塊：嬰兒糞便中見有黃白色乳凝塊，也可見蛋花樣便，提示脂肪

或蛋白消化不完全消化不良、嬰幼兒腹瀉。

3、寄生蟲：

蛔蟲、蛻蟲、絳蟲節(jié)片等較大蟲體，肉眼即可分辨；鉤蟲蟲體常需將糞

便沖洗過篩后方可看到。服驅(qū)蟲劑后排便時應檢查有無蟲體；驅(qū)帶絳蟲后應

仔細尋找頭節(jié)。

4、結(jié)石：糞便中可見到膽石、胰石、糞石。應用排石藥或碎石術(shù)后多見膽

石。

四.顯微鏡檢查：主要檢出：細胞、寄生蟲卵、真菌、細菌、原蟲等。

1.涂片鏡檢：一般采用生理鹽水涂片法。

潔凈玻片上加等滲鹽水1—2滴，選擇糞便的不正常部位，或挑取不同

部位的糞便，做直接涂片檢查。最好取載玻片，制成涂片后，應覆于蓋片，

涂片的厚度以能透過印刷物字跡為準。先用低倍鏡觀察全片有無蟲卵、原蟲、

包囊、寄生蟲幼蟲、血細胞，再用高倍鏡詳細檢查病理成分的形態(tài)結(jié)構(gòu)。

應注意將植物纖維及其細胞與寄生蟲、人體細胞相鑒別，并應該注意有

無肌纖維、結(jié)締組織、彈力纖維、淀粉顆粒、脂肪小滴球等。若大量出現(xiàn)則

提示消化不良，或胰腺外分泌功能不全。

細胞中應注意紅細胞、白細胞、嗜酸性粒細胞、腸黏膜上皮細胞、巨噬

細胞、腫瘤細胞等。

夏科一雷登結(jié)晶：為無色或淺黃色兩端尖而透明具有折光性的菱形晶

體，大小不一，常見于腸道潰瘍，尤以阿米巴感染糞便中最易檢出，過敏性

腹瀉及鉤蟲病患者糞便亦常可見到。

細菌：占糞便凈重的1/3,正常菌群主要是大腸桿菌和腸球菌占80%,

而過路菌不超過10%,芽抱菌和酵母菌為常住菌，但總量不超過10%,正常

菌群消失或比例失調(diào)可因大量應用抗生素所致。

2.鏡檢規(guī)則及報告方式：

先用低倍鏡（10*10,視野寬度1.8mm）檢視全片。

寄生蟲卵分別計數(shù)10個低倍鏡視野中的蟲卵數(shù)，求均值報告X義/低倍

鏡視野。

原蟲檢查的標本必須在低倍鏡檢查的基礎上，再換高倍鏡檢查，詳細觀

察原蟲的結(jié)構(gòu)特征，確定后再報告。

細胞以高倍鏡（10*4,視野寬度0.45mm）檢查10個視野，求均值報告:

XX/高倍視野。

表1：糞便涂片鏡檢時細胞成分的報告方式

細胞數(shù)/10個高倍視野（HPF）報告方式（細胞數(shù)/HPF）

10個高倍視野中：只見到一個偶見

有時不見，最多見到2?3/每HPF0~3

最少5個，多則10個/每HPF5-10

均在10個以上/每HPF多數(shù)

均勻分布滿視野，難以計數(shù)滿視野

五.化學檢查一糞便潛血試驗

上消化道有少量出血時，紅細胞被消化而分解破壞，由于顯微鏡下不能

發(fā)現(xiàn)，故稱潛血。糞便潛血試驗常用的一類化學方法是利用血液中的主要成

分血紅蛋白中的亞鐵血紅素，具有類似過氧化物酶的作用催化過氧化氫，分

解釋放新生態(tài)氧，氧化色原物質(zhì)而呈色，呈色的深淺反映HB的多少，亦即

出血量的大小。

（一）金標法：特異性強、靈敏度度高、檢測限寬。

1.原理：采用單克隆和多克隆抗體，特異性地針對糞便樣品中的人Hb,在

不到5分鐘的時間里，可以檢測出最低量為0.2ug/ml的Hb,高濃度的Hb

可在1分鐘內(nèi)檢出。

2.試劑：便潛血一步法試紙（條型或板型），室溫保存。

3.操作方法：

采便：用采便棒采集糞便標本的多個部位后放回采便容器內(nèi)，將蓋擰緊，搖

動采便器使形成均勻混懸狀便樣；折斷采便器尖端待用；

條型試紙：將適量混懸液滴到小試管內(nèi)，將試紙條箭頭端插入小試管內(nèi)，液

面不得超過MAX線；5分鐘內(nèi)判讀結(jié)果。

4.結(jié)果判讀：

陽性：控制線與反應線同時出現(xiàn)色帶，表明樣品中有隱性出血；

陰性：只有控制線出現(xiàn)色帶，反應線未出現(xiàn)色帶，

表明樣品中無隱性出血；

無效：控制線無色帶出現(xiàn)，表明試驗無效，應重新測試。

5、注意事項：

(1)肉眼血便時，最好在顯微鏡下辨認RBC,因本試紙抗體僅特異性針對人

HB,當大量出血時，RBC來不及被破壞，便隱血可能出現(xiàn)陰性結(jié)果。

(2)出現(xiàn)柏油便時，HB濃度超出檢測范圍會出現(xiàn)假陰性結(jié)果，解決辦法是;

充分稀釋便樣然后測試。

(3)出現(xiàn)柏油便時，如充分稀釋后仍為陰性，可能是由于HB在消化道內(nèi)

存留時間太長，其免疫原性被破壞二失去與抗體結(jié)合的能力，而呈陰性反應。

此時可在排除飲食等其他因素后用化學法加以確認。

(4)分析結(jié)果時注意：※家族性腸道息肉或直腸癌部分可能不出血或間斷

出血，少量血在糞便中分布不均，都可造成假陰性結(jié)

果。

(5)正常人便隱血陽性，可能是由于某些藥物(如阿司匹林)刺激胃腸道

造成隱血。

(6)一般需連查三次以獲得準確結(jié)果。

(7)本實驗只能作為篩選或輔助診斷用，不能代替其他檢查。

6、臨床意義：

糞便潛血試驗對慢性消化道出血的診斷及消化道惡性腫瘤的篩

選均有重要價值，屬非損傷性檢查。

(1)消化道出血時，如潰瘍病、惡性腫瘤、腸結(jié)核、傷寒、鉤蟲病等均可

呈陽性反應。

(2)消化道惡性腫瘤時、糞便潛血可持續(xù)陽性；潰瘍病時顯間斷陽性。

(3)流行性出血熱患者便隱血試驗也有84%的陽性率，可作為該病的重要佐

證。

靜脈采血法

1.采血部位：通常采用肘部靜脈，當肘部靜脈不明顯時，可采用手背部、

手腕部等部位靜脈；幼兒可采用頸外靜脈采血。

2.采血器材：一次性注射器（或真空定量采血管）、止血帶、墊枕、75%乙

醇、30g/L碘液、無菌棉簽。

3.采血步驟：

（1）采血前按檢驗項目要求，準備好相應的采血器材，如注射器、抗凝管

或不同種類的真空管。

（2）患者取臥位或坐位，手臂伸直平放在床邊或臺面墊枕上，暴露穿刺部

位。

（3）找好采血靜脈后，先用30g/L碘棉簽從內(nèi)向外部順時針方向消毒穿刺

處皮膚，稍等片刻再用75%乙醇棉簽以同樣方式消毒并擦去碘跡，在采血部

位上方扎上止血帶，囑患者握緊拳頭，使靜脈顯露。如靜脈不太明顯時，可

囑患者反復伸握拳數(shù)次，促使靜脈怒漲。肥胖型患者，上述伸握拳數(shù)次后還

不明顯者，這時必須憑操作者的經(jīng)驗，以左手食指在采血部位觸摸，發(fā)現(xiàn)靜

脈走向后，試采穿刺往往成功。

（4）操作者以左手拇指固定靜脈穿刺部位的下端，右手持注射器或其它穿

刺用具，使針頭斜面與針筒刻度向上，先以約與皮膚30度角的位置迅速刺

破皮膚，然后適當降低角度穿破靜脈壁進入靜脈腔中，見回血后，將針頭順

勢進入少許，以免采血時針頭滑出，但不可用力穿刺，以免穿破靜脈造成血

腫。

(5)用右手食指將針頭固定，左手緩緩抽動注射器內(nèi)芯，至所需血量后解

開止血帶，囑患者松拳，用無菌干棉簽壓住傷口，拔出針頭。

(6)取下針頭，將血液沿管壁緩緩注入容器中，防止產(chǎn)生泡沫。

(7)采血完畢，應再次核對病人姓名和號碼，并立即清洗器材，如屬一次

性注射器或真空采血管裝置，應將用過的器材放在固定的回收箱內(nèi)，決不能

隨意丟棄，污染環(huán)境。

4.注意事項：

(1)采血前應向病人耐心解釋以消除不必要的疑慮和恐懼心理。如遇個別

病人進針時或采血后發(fā)生眩暈，應立即拔出針頭，讓其平臥休息片刻即可恢

復。

(2)應防止血標本溶血。造成溶血的原因有注射器和容器不干燥、不潔凈、

止血帶固扎時間太長，淤血過久；穿刺不順損傷組織過多；抽血速度太快；

(3)血液注入容器時未取下針頭或用力按出產(chǎn)生大量氣泡；抗凝血用力震

蕩；

(4)離心機速度過快等。

(5)為了避免淤血或濃縮，止血帶壓迫時間不可過長，最好不超過半分鐘。

(6)抽血時，只能向外抽，不能向靜脈內(nèi)推，以免空氣進入形成氣栓，造

成嚴重后果。

葡萄糖(GLU)

—GOD-PAP法

—.原理：

葡萄糖氧化酶(GOD)能催化葡萄糖氧化成葡萄糖酸，并產(chǎn)生一分子過

氧化氫。在過氧化物酶(POD)和色原性氧受體的存在下，過氧化氫分解,

釋放初生態(tài)氧、氧化色素原，生成紅色化合物(Trinder反應)。其反應式

如下:

葡萄糖+。2+2乩0」竺+葡萄糖酸+2H202

2H2O2+4-氨基安替比林+酚-酶亞胺+4H20

二.標本收集：

1.標本應為血清或血漿，正常量的抗凝劑檸檬酸鹽、EDTA、肝素、草酸

鹽等不影響測定。

2.盡快分離血清。在全血中每小時葡萄糖大約降低7%,血清中葡萄糖儲

存在2?8°C可穩(wěn)定24小時。

三.試劑、校準品及質(zhì)控品

1.試劑：液體試劑，原裝試劑2?8℃避光保存，如出現(xiàn)混濁或沉淀，則

失效。

2.校準品：試劑盒配套校準品：濃度5.55mol/L（100mg/dl）,可分裝、標

記、密閉冷藏保存，分次使用。

3.質(zhì)控品：質(zhì)控血清（3ml*10規(guī)格）小心開啟瓶塞（請勿丟失），用奧氏

吸管準確吸取3ml蒸儲水溶解粉劑，顛倒混勻，避免產(chǎn)生氣泡和丟失，靜

置30min。待完全溶解后，輕輕倒置5?10次即可使用。可以分裝、標記、

冷凍保存?zhèn)溆谩?/p>

四.儀器設備：

1.卓越310型半自動生化儀；

2.基本設備：離心機等。

五.操作：

標準質(zhì)控測定空白

標準液10ul———

質(zhì)控液一10ul一一

血清樣品一一10ul—

試劑應用液1.5ml1.5ml1.5ml1.5ml

充分混勻，3711c保溫15min后，冷卻空白調(diào)零，505nm比色讀取吸光

度。

六.計算：

血糖濃度=（A標本/A標準）*標準濃度（5.5mmoL/L）

單位換算：mg/L=mmoL/LX18

七.操作性能：

試劑空白吸光度W0.1

重復性：變異系數(shù)CV%W2%

線性范圍：可達22.24mmoL/L；

八.參考值：成人：3.89?6.1mmoL/L

九.醫(yī)學決定水平：

1.2.8mmoL/L0禁食后12小時血糖測定值低于此值，則為低血糖癥，可

出現(xiàn)焦慮、出汗、顫抖和虛弱等癥狀；若反應發(fā)生較慢，且以易怒、嗜睡、

頭痛為主要癥狀、則應該做其他實驗，以查找原因。

2.7.OmmoL/Lo空腹血糖達到或超過此值，可考慮糖尿病的診斷，但應

加做糖耐量試驗。

3.10.OmmoL/Lo飯后lh血糖測得此值或高于此值，則可高度懷疑為糖尿

病。

十.臨床意義：

1.血糖增高：

1.1生理性增高：見于餐后1-2小時-、攝入高糖食品、劇烈運動或情緒緊

張等交感神經(jīng)興奮和應激情況（包括全麻引起的全身應激反應）。

1.2病理性增高：

1.2.1胰島功能低下，胰島分泌不足的糖尿病；

1.2.2升血糖激素分泌增多：如嗜銘細胞瘤、腎上腺皮質(zhì)功能亢進（庫欣綜

合癥)腦垂體功能亢進(肢端肥大癥)、甲亢等。

1.2.3中樞性疾?。猴B內(nèi)壓增高、顱內(nèi)出血、重癥腦炎、顱腦外傷等。

1.2.4其它：高熱、嘔吐、腹瀉所致脫水、肺炎等急性傳染病、腎臟炎癥。

2.血糖降低：

2.1生理性降低：見于饑餓和劇烈運動；妊娠期、哺乳期；

2.2病理性降低：

2.2.1空腹血糖降低：

(1)內(nèi)分泌疾病所致胰島素絕對或相對過剩：胰島B細胞瘤、甲狀腺功能不

全、腎上腺功能不全、腦垂體惡性病質(zhì)；

(2)嚴重肝細胞受損所致肝糖原儲存耗竭：急性進行性肝臟疾病；

(3)其它：營養(yǎng)物質(zhì)缺乏、急性酒精中毒抑制糖原異生、先天性糖原代謝酶

缺乏；

2.2.2餐后或反應性血糖降低：

(1)功能性飲食性低血糖；

(2)胃切除術(shù)后飲食性反應性低血糖；

(3)2型糖尿病或OGTT受損出現(xiàn)晚期低血糖；

2.2.3藥物引起的血糖降低：胰島素注射過量、優(yōu)降糖使用不當；

H■?一.質(zhì)量保證：

1.標本一般使用無溶血的血清或血漿。全血血糖濃度比血清或血漿低

8%-15%,參考值為3.3-5.6mmol/L。所以，干化學測定多用于治療監(jiān)測，而

不能用于診斷。

2.樣品采集后盡快離心分離血清或血漿。全血樣品在室溫條件下放置每小

時可下降5%?7%(約0.56mmol/L),如立即分離血清或血漿，則可穩(wěn)定24h。

3.血糖測定受飲食、取血部位影響?？崭寡潜仨氂谇宄砍槿】崭?2h后

的靜脈血；由于靜脈GLU〈毛細血管GLU〈動脈GLU(動脈血較靜脈血高

0.56mmol/L,毛細血管血較靜脈高0.22mmol/L),臨床分析時應注意。

4.血糖測定也受測定方法影響。GOD-POD法谷胱甘肽、VitC可干擾測定。

VitC濃度0.Ig/L時可使血糖結(jié)果偏低1.3%~7.6%；1.0g/L時可使反應不顯

色。

5.樣品嚴重溶血、脂血、黃疸也產(chǎn)生干擾。溶血可使結(jié)果增加。

6.結(jié)果如超過線性范圍，請用生理鹽水將標本按1：1稀釋，測定結(jié)果乘2。

7.認真做好室內(nèi)質(zhì)控，適時保養(yǎng)儀器，適時校準儀器，保證儀器正常運轉(zhuǎn)。

十二.危急值報告指標：

血糖V2.8mmol/L或＞25mmol/L須立即向臨床報告結(jié)果，以利于病人的

搶救，并做好記錄。

血清甘油三酯測定

一.原理：采用中華醫(yī)學會檢驗學會推薦的方法(GPO-PAP)酶法

用高效的微生物脂蛋白脂肪酶(LPL)使血清中TG水解成甘油與脂肪酸，將

生成的甘油用甘油激酶(GK)及腺昔三磷酸(ATP)磷酸化，以磷酸甘油氧化

酶(GPO)氧化3-磷酸甘油(G-3-P),然后以PAP試劑顯色測定所生成的過氧

化氫，反應式如下：

TG+3H20LPL,甘油+3RC00H

甘油+ATP.mm；G-3-P+ADP

G-3-P+02=，磷酸二羥丙酮+H202

H。+4-AAP+4-氯酚」二苯醍亞胺非那腺+2H20+HCL

—.標本的采集方法及對病人準備的要求：

1.受試者準備：

取血前兩周保持平時飲食習慣；近期無急性病、外傷、手術(shù)等異常情況;

取血前數(shù)天至數(shù)周停止影響血脂的藥物（如血脂調(diào)節(jié)藥物、避孕藥、某些降

壓藥、激素等），否則記錄用藥情況；取血前禁食12小時、不飲酒、不做劇

烈運動；除臥床患者外，取血前至少靜坐5分鐘。

2.取血方法：取前臂靜脈血，止血帶的使用不超過1分鐘，避免溶血。

3.取血次數(shù)：應以1周以上2月以內(nèi)的時間間隔對同一受試者取血2-3次。

4.血清的處理和儲藏：

血液樣品采取在室溫靜置30-40min令其自行凝固，3小時內(nèi)分離血清。

樣品如不能當日完成測定，在4°C保存不超過3天，-20°C以下可保存數(shù)周，

-70匕保存數(shù)年。血清不能反復凍融，否則LDH-L值最不穩(wěn)定。

三.試劑、校準品及質(zhì)控品：

1.試劑：中生試劑，原裝試劑2-8℃保存至試劑標簽所示失效日期。

工作液：取lOmlRl緩沖液加入一瓶R2中，溶解后即為工作液。2~8°C保存

可穩(wěn)定2周，15~25°C保存穩(wěn)定2天。

2.校準品：試劑盒配套校準品：濃度2.26mol/L（200mg/dl）,可分裝、標

記、密閉冷藏保存，分次使用。

3.質(zhì)控品：中生21項質(zhì)控血清（3ml*10規(guī)格）小心開啟瓶塞（請勿丟失）,

用奧氏吸管準確吸取3nli蒸儲水溶解粉劑，顛倒混勻，避免產(chǎn)生氣泡和丟失,

靜置30min。待完全溶解后，輕輕倒置5~10次即可使用。可以分裝、標記、

冷凍保存?zhèn)溆谩?/p>

四.儀器設備：

1.卓越310型半自動生化儀；

2.基本設備：離心機。

五.操作：

標準質(zhì)控測定空白

標準液10ul

質(zhì)控液?一10ul――

血清樣品一一10ul一

試劑應用液LOml1.0ml1.0ml1.0ml

充分混勻，37°C保溫lOmin后，試劑空白調(diào)零，500nm比色讀取吸光

度。

六.計算：

甘油三酯濃度=（A標本/A標準）*標準濃度（mmoL/L）

單位換算：mg/L=mmoL/LX87.7

七.操作性能：

試劑空白吸光度W0.1

可報告范圍（線性范圍）：＜11.29mmol/L

精密度：變異系數(shù)CV%W4%；批間CV〈6%

八.正常參考值：TG：0.56-1.71mmoL/L

建議控制水平：男:0.45-1.81mmoL/L,女：0.4-1.53mmoL/L

九.臨床意義：

多數(shù)學者認為高甘油三酯血癥為心血管疾病的危險因素。血清甘油三酯水

平受性別、年齡和飲食的影響。

1.TG增高：可見家族性高甘油三酯血癥、飲食大量甘油三酯和繼發(fā)於某些

疾病如：糖尿病、甲狀腺功能減退、腎病綜合征和胰腺炎等。

2.TG降低：見于甲狀腺功能亢進、腎上腺皮質(zhì)功能降低、肝功能嚴重障礙

等。

十.質(zhì)量保證：

1.嚴格病人準備及標本采集。

2.盡快分離標本測定，避免溶血，溶血可使結(jié)果偏高。

3.高濃度膽紅素和VitC可使測定結(jié)果偏低。

4.結(jié)果如超過線性范圍，請用生理鹽水將標本按1：1稀釋，測定結(jié)果乘2。

5.認真做好室內(nèi)質(zhì)控。每次測定都應落在允許范圍內(nèi)，真實地反映儀器和

試劑的性能。

6.適時保養(yǎng)儀器，適時校準儀器，保證儀器正常運轉(zhuǎn)。

血膽固醇測定

一.原理：

血清中的膽固醇酯（CE）被膽固醇酯水解酶（CEH）水解成游離膽固醇

（Fc）,后者被膽固醇氧化酶（CHOD）氧化成△4-膽留烯酮并產(chǎn)生過氧化氫,

再經(jīng)過氧化物酶（POD）催化4-氨基安替比林與酚（三者合稱PAP）,生成紅

色醍亞胺色素（Trinder反應）。醍亞胺的最大吸收在500nm左右，吸光度與

標本中TC含量成正比。反應式如下：

膽固醇酯+H20，，膽固醇+游離脂肪酸

膽固醇+Ch二人」-膽雷烯酮+H202

2H202+4-氨基安替比林+酚POD＞醍亞胺+4H20O

H202+4-AAP+4-氯酚/二苯醍亞胺非那胺+2H20+HCL

二.標本的采集方法及對病人準備的要求：

1.受試者準備：

取血前兩周保持平時飲食習慣；近期無急性病、外傷、手術(shù)等異常情況;

取血前數(shù)天至數(shù)周停止影響血脂的藥物（如血脂調(diào)節(jié)藥物、避孕藥、某些降

壓藥、激素等），否則記錄用藥情況；取血前禁食12小時、不飲酒、不做劇

烈運動；除臥床患者外，取血前至少靜坐5分鐘。

2.取血方法：取前臂靜脈血，止血帶的使用不超過1分鐘，避免溶血。

3.取血次數(shù)：應以1周以上2月以內(nèi)的時間間隔對同一受試者取血2-3次。

4.血清的處理和儲藏：

血液樣品采取在室溫靜置30-40min令其自行凝固，3小時內(nèi)分離血清。

樣品如不能當日完成測定，在4℃保存不超過3天，-20℃以下可保存數(shù)周，

-70℃保存數(shù)年。血清不能反復凍融，否則LDH-L值最不穩(wěn)定。

三.試劑、校準品及質(zhì)控品：

1.試劑：中生試劑，原裝試劑2-8℃保存至試劑標簽所示失效日期。

工作液：取10mlR2緩沖液加入一瓶R1中，溶解后即為工作液。2?8°C保存

可穩(wěn)定1個月，15?25°C保存穩(wěn)定3天。

2.校準品：試劑盒配套校準品（定值見標簽），可分裝、標記、密閉冷藏保

存，分次使用。

3.質(zhì)控品：中生21項質(zhì)控血清（3ml*10規(guī)格）小心開啟瓶塞（請勿丟失）,

用奧氏吸管準確吸取3ml蒸儲水溶解粉劑，顛倒混勻，避免產(chǎn)生氣泡和丟失,

靜置30m