細(xì)胞膜的通透性專家講座

試驗六、細(xì)胞膜通透性講解人：趙鵬飛細(xì)胞膜的通透性專家講座第1頁一、試驗?zāi)繕?biāo)了解相對分子質(zhì)量、脂溶性大小、電解質(zhì)和電解質(zhì)溶液對細(xì)胞膜透性影響。細(xì)胞膜的通透性專家講座第2頁二、試驗原理細(xì)胞膜含有選擇通透性。溶血現(xiàn)象：。水分子能夠自由經(jīng)過細(xì)胞膜，當(dāng)細(xì)胞處于低滲液環(huán)境時，水分子大量滲帶細(xì)胞內(nèi)，使細(xì)胞膨脹，進而細(xì)胞破裂，血紅蛋白釋放到介質(zhì)中由不透明紅細(xì)胞懸液變?yōu)榧t色透明血紅蛋白溶液。溶血現(xiàn)象可作為測量物質(zhì)進入紅血細(xì)胞速度一個指標(biāo)。細(xì)胞膜的通透性專家講座第3頁溶血現(xiàn)象發(fā)生快慢與進入細(xì)胞物質(zhì)分子量大小相關(guān)。相對分子質(zhì)量大進入細(xì)胞慢，發(fā)生溶血所需時間也長。非極性化合物易溶于脂溶劑，但在水中溶解度很小。碳鏈越長，脂溶性越大。一個化合物在脂溶劑中溶解度與其在水中溶解度之比，稱為分配系數(shù)。各種非電解質(zhì)溶液，只要單位面積中所含分子數(shù)相同，就含有相同滲透壓。電解質(zhì)溶液，如NaCl與葡萄糖分子數(shù)相等時，NaCl產(chǎn)生滲透壓要大得多。含有相同滲透壓某非電解溶液與某電解質(zhì)溶液濃度之比，成為等滲系數(shù)。用i來表示：i=葡萄糖等滲物質(zhì)量濃度/NaCl等滲物質(zhì)量濃度（發(fā)生溶血者為低滲液，所以把發(fā)生溶血前一管溶液濃度近似視為紅細(xì)胞等滲）。細(xì)胞膜的通透性專家講座第4頁三、試驗用具用具：小燒杯、試管、試管架、刻度吸管、注射器、秒表等。材料：小鼠血。試劑：1mol/L乙二醇水溶液、1mol/L丙三醇水溶液、1mol/L葡萄糖水溶液、3mol/L甲醇、3mol/L乙醇、3mol/L丙醇、1/8mol/L、1/9mol/L、1/10mol/L、1/12mol/L、1/14mol/L葡萄糖溶液、1/12mol/L、1/14mol/L、1/16mol/L、1/18mol/LNaCl溶液。細(xì)胞膜的通透性專家講座第5頁四、試驗步驟準(zhǔn)備工作：小鼠采血剪尾采血、摘除眼球采血

、心臟采血

、斷頭采血、眼眶靜脈叢采血（一）相對分子質(zhì)量大小對膜通透性影響1.在編號3支試管中，分別用吸管吸入2ml1mol/L乙二醇、1mol/L丙三醇、1mol/L葡萄糖高滲液。2.先后分別用注射器滴加兩滴血液，用手指按住管口，倒置一次。3.觀察血溶時間，最長延至10min，填表。細(xì)胞膜的通透性專家講座第6頁（二）脂溶性大小對細(xì)胞膜透性影響1.編號3支試管分別加入2ml3mol/L甲醇、乙醇、丙醇。2.分別先后加入兩滴血液，按住管口倒置一次。3.觀察溶血時間。做試驗統(tǒng)計。（三）電解質(zhì)和非電解質(zhì)溶液對細(xì)胞膜透性影響1.將試管編號，注明溶質(zhì)名稱及物質(zhì)量濃度。2.按編號分別加入不一樣濃度葡萄糖及氯化鈉溶液2ml。3.每管各加入兩滴血液，按住管口，倒置一次。4.室溫放置15min，觀察發(fā)生溶血濃度，確定等滲濃度。5.按下表統(tǒng)計試驗結(jié)果。6.計算等滲摩爾濃度。細(xì)胞膜的通透性專家講座第7頁TANKYOU!細(xì)胞膜的通透性專家講座第8頁

1剪尾采血

小鼠每次采血量0.1ml

左手拇指和食指從背部抓住鼠頸部皮膚，將鼠頭朝下，鼠保定后將其尾巴置于50℃熱水中浸泡數(shù)分鐘，使尾部血管充盈。擦干尾部，再用剪刀或刀片剪去尾尖1-2mm，用試管接流出血液，同時自尾根部向尾尖按摩。取血后用棉球壓迫止血并用6%液體火棉膠涂在傷口處止血。

2摘除眼球采血

小鼠采血量0.6-1ml

左手抓住小鼠頸部皮膚，輕壓在試驗臺上，取側(cè)臥位，左手食指盡可能將小鼠眼周皮膚往頸后壓，使眼球突出。用眼科彎鑷快速夾去眼球，將鼠倒立，用器皿接住流出血液。采血完成馬上用紗布壓迫止血。大鼠少用。

3心臟采血

小鼠采血量0.5-0.6ml

鼠仰臥位固定，剪去胸前區(qū)被毛，皮膚消毒后，用左手食指在左側(cè)第3-4肋間觸摸到心搏處，右手持帶有4-5號針頭注射器，選擇心搏最強處穿刺，當(dāng)刺中心臟時，血液會自動進入注射器。細(xì)胞膜的通透性專家講座第9頁4斷頭采血

小鼠采血0.8-1.2ml

左手拇指和食指從背部抓住鼠頸部皮膚，將鼠頭朝下，右手用剪刀剪斷鼠頸部約1/2-4/5，讓血液流入試管。

5眼眶靜脈叢采血

小鼠采血量為0.2-0.3ml

取內(nèi)徑為1.0-1.5mm玻璃毛細(xì)管，臨用前折斷成1～1.5cm長毛細(xì)管段，浸入1％肝素溶液中，干燥后用。取血時左手抓住鼠兩耳之間頸背部皮膚以固定頭部，輕輕向下壓迫頸部兩側(cè)，引發(fā)頭部靜脈血液回流困難使眼眶靜脈叢充血，右手持毛細(xì)管由內(nèi)眥部插入結(jié)膜，再輕輕向眼底部方向推進，輕輕旋轉(zhuǎn)毛細(xì)管以劃破靜脈叢，讓血液順毛細(xì)管流出，接收入事先準(zhǔn)備容器中