臨床檢驗操作規(guī)程

臨床檢驗操作規(guī)程

第一節(jié)臨床血液學(xué)檢驗

血常規(guī)檢查

【標(biāo)本】

抗凝靜脈血(有些儀器也可用末梢血)。

【方法】

血液細(xì)胞自動分析儀測定法。

【試劑】

血液細(xì)胞自動分析儀配套試劑。

【操作】

詳見自己實驗室血液細(xì)胞自動分析儀使用手冊。

【附注】

1.血常規(guī)包括白細(xì)胞計數(shù)及分類、紅細(xì)胞計數(shù)、血紅蛋白濃度、

紅細(xì)胞比積、血小板計數(shù)等項目。這些項目亦有相應(yīng)的手工方法，詳

見有關(guān)資料。

2.半自動及全自動血液細(xì)胞分析儀從設(shè)計上均要求用抗凝靜脈

血。其優(yōu)點為：

(1)靜脈血能正確地反映病人實際情況，重復(fù)性好；

(2)利于延長儀器的使用壽命；

(3)解決了采血盤的交叉感染問題等。

3.血細(xì)胞計數(shù)應(yīng)用EDTA-K2：為抗凝劑(EDTA-K2?2H201.5~

2.2mg可抗凝1ml血)。

4.貯血容器應(yīng)選用有蓋塑料管?？鼓杉笤谑覝刂匈A存應(yīng)

不超過6h;如需制作血涂片應(yīng)在2h內(nèi)完成。

5.測定前必須將EDTA?匕抗凝血充分混勻。

6.血細(xì)胞分析儀測定最適溫度為18?22C,低于15C或高于

30℃,均可使細(xì)胞體積發(fā)生改變，影響各參數(shù)的結(jié)果。

7.血細(xì)胞分析儀用于白細(xì)胞分類只能當(dāng)作一種過篩手段，當(dāng)白細(xì)

胞、紅細(xì)胞、血紅蛋白和血小板的任何一項有明顯

升高或降低；白細(xì)胞分類出現(xiàn)異常結(jié)果（中間細(xì)胞群百分率＞8.0%）;

紅細(xì)胞、白細(xì)胞和血小板的任何一個直方圖出現(xiàn)異常圖形等情況，須

用顯微鏡檢查及分類。

嗜酸性粒細(xì)胞直接計數(shù)

【標(biāo)本】

末梢血或抗凝靜脈血。

【方法】

直接計數(shù)法。

【試劑】

1.Hinkelmann液；

2.乙醇-伊紅稀釋液；

3.伊紅-丙酮稀釋液。

【操作】

1.小試管中加稀釋液0.38ml。

2.常法取末梢血20ul,加入管內(nèi)混勻，待紅細(xì)胞溶解后兩側(cè)充

池。

3.靜置3~5min,用低倍鏡（必要時用高倍鏡）鏡下計數(shù)10

個大方格內(nèi)嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)?？倲?shù)X20X10。=嗜酸性粒細(xì)胞/L

【附注】

1.血液稀釋后應(yīng)于1h內(nèi)計數(shù)完畢。

2.充池前要充分混勻，但又不宜用力過猛。

3.住院病人采集標(biāo)本時間力求統(tǒng)一，以免受日間生理變化的影

響。

紅細(xì)胞沉降率測定

【標(biāo)本】

抗凝靜脈血。

【方法】

魏氏法。

【試劑】

109mmol/L枸椽酸鈉溶液。

【操作】

1.3nlmx100mm試管1支，在2ml容量處刻上記號，加抗凝劑

0.4ml0

2.靜脈采血后，取下針頭，加血至刻度，旋轉(zhuǎn)混合。

3.用血沉管(300mmx2.5mm)吸取上述混勻血液至"0"刻度

處，拭去管外附著的血液，將管垂直立在血沉架上。

4.記時，室溫中靜置lh,觀察血漿高度，以紅細(xì)胞下沉的毫米

數(shù)報告之。

【附注】

1.紅細(xì)胞在單位時間內(nèi)下沉的速度與血漿蛋白的量與質(zhì)，血漿

中脂類的量和質(zhì)，紅細(xì)胞的大小與數(shù)量，是否成串錢相聚以及血沉管

的內(nèi)徑、清潔度、放置位置是否垂直，室溫高低等因素都有關(guān)系。

2.標(biāo)本采集時應(yīng)空腹。

3.血液和抗凝劑的比例要準(zhǔn)確。

4.血沉管內(nèi)徑要標(biāo)準(zhǔn)（2.5mm）,放置要垂直。

5.做血沉的標(biāo)本要在采集后3h內(nèi)測定，并充分混勻。

6.室溫過低、過高和貧血時，對結(jié)果有影響。為此，血沉應(yīng)盡

量放在18~25C室溫下測定。室溫過高時血沉加快，可以按溫度系

數(shù)校正。室溫過低時血沉減慢，無法校正。

網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)

【標(biāo)本】

末梢血或抗凝靜脈血。

【方法】

百分計數(shù)法。

【試劑】

10g/L煌焦油藍(lán)生理鹽水溶液或10g/L煌焦油藍(lán)ACD溶液。

【操作】

1.于小試管中滴加1滴煌焦油藍(lán)生理鹽水溶液或煌焦油藍(lán)ACD

溶液。

2.加入末梢血或靜脈血2滴于上述試管中，混勻。

3.靜置15?20min后，取用1滴制成薄片。

4.油鏡下檢查1000個紅細(xì)胞中網(wǎng)織紅細(xì)胞數(shù)，以百分率或絕對

值報告。

【附注】

1.活體染色時間不能過短，室溫低時，放37C溫箱。

2.網(wǎng)織紅細(xì)胞也可用Miller窺盤計數(shù)法、熒光染色或流式細(xì)胞

儀計數(shù)。

嗜堿性點彩紅細(xì)胞計數(shù)

【標(biāo)本】

末梢血。

【方法】

百分計數(shù)法。

【試劑】

1.甲醇；

2.堿性亞甲基藍(lán)染液（保存2?3周）。

【操作】

1.按常法制成薄血片，自然干燥后，用甲醇固定3min。

2.用堿性亞甲基藍(lán)染液染色1?2niin,水洗待干。

3.用油鏡計數(shù)1000個紅細(xì)胞中嗜堿性點彩紅細(xì)胞數(shù)，以百分率

報告。

【附注】

1.用堿性亞甲基藍(lán)染液染色后，紅細(xì)胞呈淺藍(lán)綠色，嗜堿性點

彩呈深藍(lán)色。

2.也可用瑞氏染色，嗜堿性點彩呈藍(lán)黑色。

3.由于點彩紅細(xì)胞分布不勻，必要時擴(kuò)大計數(shù)紅細(xì)胞數(shù)。

第二節(jié)體液及排泄物檢查

尿液檢驗

尿常規(guī)檢查

【標(biāo)本】

新鮮尿液。

【方法】

化學(xué)試帶法。

【試劑】

各型號尿液化學(xué)分析儀配套試帶。

【操作】

詳見自己實驗室的尿液化學(xué)分析儀使用手冊。

【附注】

1.尿常規(guī)檢查使用尿液化學(xué)分析儀，目前能進(jìn)行8~10項檢測

（PH、蛋白、葡萄糖、酮體、隱血、尿膽紅素、尿膽素原、亞硝酸鹽、

比重、白細(xì)胞）。這些項目亦有相應(yīng)的手工方法，詳見有關(guān)資料。

2.必須了解所用試帶各膜塊注意事項、藥物干擾。

3.要注意尿液化學(xué)分析儀測定結(jié)果與手工法的差異，必要時用

手工法復(fù)查。

4.尿液化學(xué)分析儀檢測僅是一個過篩手段，當(dāng)?shù)鞍?、隱血、白

細(xì)胞等出現(xiàn)異常結(jié)果（如尿蛋白"+”或以上）時，應(yīng)進(jìn)行鏡檢。

5.尿液顏色、透明度等一般性狀異常時也應(yīng)報告。

本-周氏（Bence-Jones）蛋白定性檢查

【標(biāo)本】

新鮮尿液。

【方法】

熱沉淀反應(yīng)法。

【試劑】

1.200g/L磺基水楊酸溶液；

2.2moi/L醋酸鹽緩沖溶液（pH4.9土0.1）。

【操作】

1.先將尿液用磺基水楊酸法作蛋白定性檢查，如呈陰性反應(yīng)，

則可認(rèn)為尿液標(biāo)本中本-周氏蛋白陰性。

2.取透明尿液4ml于試管中，再加入醋酸鹽緩沖液1ml,混勻

后，放置56C水浴中15分鐘。如有渾濁或出現(xiàn)沉淀，再將試管放入

沸水中，煮沸3分鐘，觀察試管中渾濁或沉淀的變化，如渾濁變清、

渾濁減弱或沉淀減少，均提示本-周氏蛋白陽性。若煮沸后，渾濁增

加或沉淀增多，表明此尿液中還有其它蛋白質(zhì)，此時應(yīng)將試管從沸水

中取出，立即過濾。如濾液開始透明，溫度下降后渾濁，再煮沸時又

透明，提示本-周氏蛋白為陽性。

【附注】

1.過多的本-周氏蛋白，在90C以上不易完全溶解，故需與對

照管比較，也可將尿液稀釋后再測。

2.煮沸過濾除去尿中白、球蛋白時，動作要迅速，并需保持高

溫，否則本-周氏蛋白也會濾去。

尿乳糜定性檢查

【標(biāo)本】

新鮮尿液。

【試劑】

1.乙醛(AR);

2.蘇丹川醋酸乙醇染色液或猩紅染色液。

【操作】

1.取尿5?10ml,加乙醛2~3ml,混合振搖后，使脂肪溶于乙

醒。靜置數(shù)分鐘后，2000r/min離心5min。

2.吸取乙醛與尿液的界面層涂片，加蘇丹川醋酸乙醇染色液或

猩紅染色液1滴。

3.鏡檢觀察是否有紅色脂肪小滴。

【附注】

1.尿液中加少量飽和氫氧化鈉，再加乙醛，有助于澄清。

2.將分離的乙醛層隔水蒸干，若留有油狀沉淀，也可加蘇丹in,

鏡檢證實有無脂肪小滴。

尿膽色素原定性試驗

【標(biāo)本】

新鮮尿液。

【試劑】

1.對二甲氨基苯甲醛試劑；

2.飽和醋酸鈉溶液；

3.氯仿；

4.正丁醇。

【操作】

1.在試管中，加入尿標(biāo)本2ml及對二甲氨基苯甲醛試劑2ml,

混合。

2.立即加飽和醋酸鈉溶液4ml,混合，加氯仿3ml,振搖混合后,

上層水溶液呈紅色者為陽性反應(yīng)。

3.陽性結(jié)果應(yīng)用下法證實：如尿膽原含量多，用一次氯仿不能

完全抽提尿膽原，應(yīng)多次用氯仿抽提，直至氯仿層呈淡粉紅色或無色

為止，再觀察上層水溶液色澤。如上層水溶液為紅色時，再加正丁醇

4ml抽提，如水溶液仍呈紅色則證實尿中膽色素元為陽性。

【附注】

1.醋酸鈉溶液必須為飽和液。

2.當(dāng)尿膽色素原濃度太高時，應(yīng)將尿標(biāo)本稀釋25~100倍。

3.尿液必須新鮮，不能久置。

尿苯丙酮酸定性試驗

【標(biāo)本】

新鮮尿液。

【方法】

三氯化鐵法。

【試劑】

1.100g/L三氯化鐵液；

2.磷酸鹽沉淀劑。

【操作】

1.尿液4ml加磷酸鹽沉淀劑1ml,混勻，靜置3min,如出現(xiàn)沉

淀，可用濾紙過濾或離心除去。

2.濾液中加入濃鹽酸2~3滴和100g/L三氯化鐵溶液2?3滴，

每加1滴立即觀察顏色變化。以尿液顯藍(lán)綠色并持續(xù)2-4min,為陽

性。

【附注】

1.尿中若含酚類藥物（如水楊酸制劑）及氯丙嗪，也可與氯化

鐵結(jié)合顯色，試驗前應(yīng)停用此類藥物。膽紅素也可造成假陽性。

2.小兒出生后6周內(nèi)不易查出。故于出生6周后檢查為宜。

3.大多數(shù)苯丙酮尿癥患者的尿液可出現(xiàn)陽性。但約1/4?1/2病

例可能會漏檢

4.亦可采用2,4-二硝基苯肺法。

尿沉渣檢查

【標(biāo)本】

新鮮尿液（最好采集清晨中段尿）。

【方法】

顯微鏡檢查法。

【操作】

1.取刻度離心管,倒入混合后的新鮮尿液10ml,1500r/min離

心5mino

2.棄去上層清液，留下0.2ml沉渣，輕搖離心管，使尿沉渣有

形成分充分混勻。

3.取尿沉渣0.02ml,滴在載玻片上，用18mmx18mm的蓋玻片

覆蓋。

4.鏡檢觀察，用10x10鏡頭，觀察其中有形成分的全貌及管

型。用10x40鏡頭觀察鑒定細(xì)胞成分及計算數(shù)量，應(yīng)觀察10個視

野所見最低和最高值，記錄結(jié)果。管型用高倍鏡鑒定，但計數(shù)數(shù)量按

低倍鏡觀察20個視野，算出一個視野的平均值，記錄結(jié)果。尿結(jié)晶

和鹽類數(shù)量以每一高倍視野+、2+、3+、4+報告。

【附注】

1.清晨空腹第一次尿（一般情況應(yīng)采集中段尿），應(yīng)在lh內(nèi)送

檢。

2.見到各種上皮細(xì)胞也應(yīng)報告，報告方式參照白細(xì)胞。

3.亦可采用染色尿沉渣鏡檢。

尿沉渣定量檢查

【標(biāo)本】

新鮮晨尿。

【方法】

一小時尿沉渣計數(shù)法。

【操作】

1.標(biāo)本收集：患者先排尿棄去，準(zhǔn)確收集3h尿液于干燥容器

內(nèi)送檢（標(biāo)本留取時間5:30~8:30）?

2.準(zhǔn)確測量3h尿量，充分混合。取混勻尿液10ml,置刻度離

心管中，1500r/min離心5min,用吸管吸棄上層尿液9ml,留下1ml,

充分混勻。吸取混勻尿液1滴，注于血細(xì)胞計數(shù)板內(nèi)。細(xì)胞共數(shù)10

個大方格，管型共數(shù)20個大方格。最終計算出紅細(xì)胞/h、白細(xì)胞/h、

管型/h。

【附注】

1.尿液應(yīng)新鮮，PH應(yīng)在6以下。

2.尿液比重最好在1.026以上。

3.如尿液中含多量磷酸鹽時，應(yīng)加少量稀醋酸液（切勿加多），

使其溶解；含大量尿酸鹽時，應(yīng)加溫使其溶解。

4.亦可采用尿沉渣定量分析板或尿沉渣自動分析儀進(jìn)行尿沉渣

定量檢查，詳見有關(guān)資料。

絨毛膜促性腺激素檢測

【標(biāo)本】

新鮮尿液。

【方法】

金標(biāo)抗體檢測法。

【操作】

見試劑盒說明書。

【附注】

若質(zhì)控點和測定點均不呈現(xiàn)紅色，表示試劑失效。

糞便檢驗

糞便的顯微鏡檢查

【標(biāo)本】

新鮮糞便。

【方法】

直接涂片鏡檢法。

【操作】

1.潔凈玻片上加等滲鹽水1~2滴，選擇糞便的不正常部分，或

挑取不同部位的糞便做直接涂片（最好取大玻片，制成涂片后，應(yīng)覆

以蓋片。涂片的厚度以能透過印刷物字跡為準(zhǔn)）檢查。

2.在涂片中如發(fā)現(xiàn)疑似包囊，則在該涂片上滴加1滴碘液，在高

倍鏡下仔細(xì)鑒別，如仍不能決定時，可取全量糞便濃縮法檢查。

隱血試驗

【標(biāo)本】

新鮮糞便。

【方法】

免疫學(xué)檢測法。

【操作】

取一片潔凈干燥的載玻片，滴加2~3滴蒸像水，取糞便少許，

調(diào)成均勻混懸液。取糞便隱血試紙條，按說明書操作，將試紙條的反

應(yīng)端浸濕。在5min內(nèi)觀察結(jié)果。以反應(yīng)線及質(zhì)控線均呈藍(lán)色帶為陽

性。

【附注】

1.若兩條線均不顯色，說明試紙條失效。

2.本法由于間斷性出血或出血在糞便中分布不均等因素，可造

成假陰性結(jié)果。

3.本法由于藥物等原因，對正常人檢查有時會得到陽性結(jié)果。

4.亦可采用化學(xué)試帶法、鄰甲聯(lián)苯胺法、愈創(chuàng)木酯法等。收集

標(biāo)本前3日應(yīng)禁食動物性食物及富含葉綠素食物、鐵劑、中藥。但本

法不受動物血紅蛋白的干擾，試驗前不須禁食肉類。

糞膽素檢查

【標(biāo)本】

新鮮糞便。

【方法】

氯化高汞煮沸法。

【試劑】

飽和氯化高汞溶液。

【操作】

1.于小試管內(nèi)置糞便一小塊，加飽和氯化高汞溶液數(shù)毫升。

2.將糞塊調(diào)勻，加熱煮沸3min,立即觀察顏色反應(yīng)。

【附注】

1.結(jié)果不易判定時，應(yīng)注意糞便顏色，必要時以鹽水代替試劑

做空白對照。

2.當(dāng)糞便顆粒經(jīng)煮沸后如有紅色又有綠色出現(xiàn)，說明標(biāo)本內(nèi)既

含糞膽素又含膽紅素，常見于腸炎、腹瀉等。

腦脊液檢驗

潘氏（Pandy）球蛋白定性試驗

【標(biāo)本】

新鮮腦脊液。

【試劑】

5%苯酚溶液（棕色瓶內(nèi)保存）。

【操作】

取試劑2~3ml,置于小試管內(nèi)，用毛細(xì)滴管滴入腦脊液1?2滴,

襯以黑色背景，立即觀察結(jié)果，報告陰性或陽性及陽性的程度。

細(xì)胞計數(shù)

【標(biāo)本】

新鮮腦脊液。

【試劑】

1.細(xì)胞計數(shù)板；

2.紅細(xì)胞稀釋液；

3.冰乙酸；

4.1%冰乙酸。

【操作】

1.細(xì)胞總數(shù)：

(1)澄清腦脊液：混勻后用滴管直接滴入計數(shù)池，計數(shù)10個大

方格內(nèi)紅、白細(xì)胞數(shù)，其總和即為每u1的細(xì)胞數(shù)。(如細(xì)胞較多，

可計數(shù)一大格內(nèi)的細(xì)胞數(shù)X10)。

(2)渾濁或帶血腦脊液：用血紅蛋白吸管吸取混勻的腦脊液

20ul,加入含紅細(xì)胞稀釋液0.38ml的小試管內(nèi)，混勻后滴入計數(shù)池

內(nèi)，用低倍鏡計數(shù)4個大方格中的細(xì)胞總數(shù)，再乘以50即為每ul腦

脊液的細(xì)胞總數(shù)。

2.白細(xì)胞數(shù)：

(1)非血性標(biāo)本：小試管內(nèi)放入冰乙酸1?2滴，轉(zhuǎn)動試管，使

內(nèi)壁沾有冰乙酸后傾去之，然后滴加混勻的腦脊液3~4滴，數(shù)分鐘

后，混勻充入計數(shù)池，按細(xì)胞總數(shù)操作中的紅、白細(xì)胞計數(shù)法計數(shù)。

(2)血性標(biāo)本：將混勻的腦脊液用1%冰乙酸溶液稀釋后，按細(xì)

胞總數(shù)操作中的紅、白細(xì)胞計數(shù)法計數(shù)，結(jié)果x稀釋倍數(shù)。

3.細(xì)胞分類：

(1)直接分類法：白細(xì)胞計數(shù)后，將低倍鏡換成高倍鏡，直接

在高倍鏡下根據(jù)細(xì)胞核的形態(tài)分別計數(shù)單個核細(xì)胞(包括淋巴細(xì)胞及

單核細(xì)胞)和多核細(xì)胞，應(yīng)數(shù)100個白細(xì)胞，并以百分率表示。若白

細(xì)胞少于100個，應(yīng)直接寫出單核、多核細(xì)胞的具體數(shù)字。

(2)染色分類法：如直接分類不易區(qū)分細(xì)胞時，可將腦脊液離

心沉淀，取沉淀物2滴，加正常血清1滴，推片制成均勻薄膜，置室

溫或37C溫箱內(nèi)待干，進(jìn)行瑞氏染色后用油鏡分類。

如見有不能分類的細(xì)胞，應(yīng)另行描述報告。

【附注】

1.腦脊液常規(guī)包括一般性狀檢查、潘氏(Pandy)球蛋白定性試

驗及細(xì)胞計數(shù)。

2.計數(shù)應(yīng)及時進(jìn)行。

3.細(xì)胞計數(shù)時，應(yīng)注意新型隱球菌與白細(xì)胞的區(qū)別。

4.計數(shù)池用后，應(yīng)用75%乙醇消毒60min。

漿膜腔積液檢查

漿膜粘蛋白定性試驗(Rivalta反應(yīng))

【標(biāo)本】

新鮮漿膜腔積液。

【試劑】

冰醋酸。

【操作】

取100ml量筒，加蒸鐳水100ml,滴入冰醋酸0.1ml(PH3~5),

充分混勻，靜止數(shù)分鐘，將穿刺液靠近量筒液面逐滴輕輕滴下，在黑

色背景下，觀察白色霧狀沉淀的發(fā)生及其下降速度等，報告陰性或陽

性及陽性的程度。

細(xì)胞學(xué)檢查

【標(biāo)本】

新鮮漿膜腔積液。

【操作】

1.細(xì)胞總數(shù)及有核細(xì)胞計數(shù)

方法基本與腦脊液同，漏出液中有核細(xì)胞數(shù)量常在100x1()6/1

以下；滲出液中有核細(xì)胞數(shù)量較多，常在500X1(T/L以上。

2.細(xì)胞分類：

穿刺液應(yīng)在抽出后立即離心，用沉淀物涂片后以瑞氏染色法進(jìn)行

分類。必要時制備稍厚涂片，在干燥前放置乙醛乙醇等量混合液中固

定30min,用蘇木素-伊紅(HE)或巴氏法染色查找癌細(xì)胞。

精液檢查

精子活動率

【標(biāo)本】

新鮮精液。

【操作】

取新鮮標(biāo)本混勻后，在溫?zé)岵Ｆ嫌酶弑剁R觀察100個精子，計

數(shù)活動精子與不活動精子的比例，計算精子活動的百分率。

【附注】

如室溫低于10℃時，應(yīng)將標(biāo)本先放入37C溫育5~10min后鏡檢。

精子活力

【標(biāo)本】

新鮮精液。

【操作】

取上述新鮮濕片標(biāo)本，觀察精子的活動力，以。級至IV級報告。

精子計數(shù)

【標(biāo)本】

新鮮精液。

【試劑】

精子稀釋液。

【操作】

1.于小試管內(nèi)加精子稀釋液o.38ml,吸液化精液20ul,加入稀

釋液內(nèi)搖勻。

2.充分搖勻后，滴入血細(xì)胞計數(shù)池內(nèi)，靜置1?2min,待精子

下沉后，以精子頭部作為基準(zhǔn)進(jìn)行計數(shù)。

3.如精子數(shù)少，可計數(shù)2個大方格內(nèi)精子數(shù)，數(shù)得總數(shù)乘10萬

即為每毫升精液內(nèi)精子數(shù)，再換算成X107L報告。

4.如精子數(shù)多，可計數(shù)5個中方格內(nèi)精子數(shù)，加6個零，即為

每ml精液內(nèi)精子數(shù)再換算成xlO'/L報告。

【附注】

1.收集精液前應(yīng)避免性生活3—7天，精液宜用清潔干燥之小瓶

收集，避孕套內(nèi)的精液不宜采集。收集精液標(biāo)本后應(yīng)在一小時內(nèi)檢查,

冬季應(yīng)注意保溫。

2.出現(xiàn)一次異常結(jié)果，應(yīng)隔一周后復(fù)查，反復(fù)查2~3次方能得

出比較正確的結(jié)果。

3.如低倍鏡、高倍鏡檢查均無精子，應(yīng)將精液離心沉淀后再涂

片檢查，如兩次均無精子，報告“無精子”。

精子形態(tài)觀察

【標(biāo)本】

新鮮精液。

【試劑】

革蘭或瑞氏染液。

【操作】

革蘭或瑞氏染色后用油鏡觀察，報告異常精子的百分比。

前列腺液檢查

【標(biāo)本】

新鮮前列腺液（臨床醫(yī)師作前列腺按摩術(shù)后，采集標(biāo)本于清潔玻

片上，立即送檢）。

【操作】

1.肉眼觀：記錄液體顏色、是否混有血液、粘稠度（有無膿塊）。

2.濕片鏡檢：高倍鏡下觀察白細(xì)胞、紅細(xì)胞、卵磷脂小體，其

次為上皮細(xì)胞、精子、淀粉樣體等，必要時革蘭染色查細(xì)菌。

陰道分泌物檢查

【標(biāo)本】

陰道分泌物。

【操作】

1.清潔度：取陰道分泌物，用生理鹽水涂片，高倍鏡檢查，根

據(jù)所含白細(xì)胞（或膿細(xì)胞）、上皮細(xì)胞、桿菌、球菌的多少，分成I~

IV度。

2.滴蟲檢查：在濕片鏡下如見梨形，比白細(xì)胞大2倍，頂端有

鞭毛4根，在25?42C溫度下可活動的滴蟲（在寒冷天氣，標(biāo)本要

采取保溫措施），報告之。

3.霉菌檢查：在濕片高倍鏡下如見卵圓形霉菌袍子，報告之。

痰液檢查

顯微鏡檢查

【標(biāo)本】

痰液。

【操作】

選擇膿樣、干酪樣或帶膿樣血液部分，取1小塊置玻片上，直接

與生理鹽水混合，涂成薄片，加蓋片后輕壓之，用低倍鏡及高倍鏡檢

查。注意有無紅細(xì)胞、白細(xì)胞、上皮細(xì)胞、彈力纖維、枯什曼螺旋體、

夏科-雷登結(jié)晶、膽紅素結(jié)晶、硫磺樣顆粒（放線菌塊）、寄生蟲卵

（可見蛔蟲卵、肺吸蟲卵）、痢疾阿米巴、真菌袍子、心力衰竭細(xì)胞、

載碳細(xì)胞、癌細(xì)胞等。

嗜酸性粒細(xì)胞檢查

【標(biāo)本】

痰液。

【試劑】

瑞氏或伊紅-美藍(lán)染色液。

（操作

取痰液做直接涂片，干燥后用瑞氏或伊紅-美藍(lán)染色液染色，油

鏡下計數(shù)100個白細(xì)胞，報告嗜酸性粒細(xì)胞百分?jǐn)?shù)。

第三節(jié)血栓與止血的檢驗

血管壁與內(nèi)皮細(xì)胞檢驗

出血時間（BT）

出血時間檢測是指皮膚受特定條件的外傷后，出血自行停止所需

的時間。此過程反映皮膚毛細(xì)血管與血小板相互作用，包括血小板粘

附，血小板活化和釋放以及血小板聚集等反應(yīng)。

1.出血時間“測定器法”自肘前窩凹下二橫指處，經(jīng)常規(guī)消毒

后，使刀片由“測定器”內(nèi)刺入皮膚，啟動秒表，每隔半分鐘用干凈

濾紙吸干流出的血液，直至出血自然停止，按停秒表，記錄出血時間。

2.Duke法，自耳垂或指尖取血。

（方法與操作】

見《全國臨床檢驗操作規(guī)程》（第二版）

（注意事項】

測定器法：

1.采取部位應(yīng)保暖，血液應(yīng)自動流出。

2.由于刺入皮膚的刀片長度和深度均固定，故“測定器法”的

結(jié)果較為準(zhǔn)確。

3.濾紙吸干流出血液時，應(yīng)避免與傷口接觸。

4.試驗前1周內(nèi)不能服用抗血小板藥物，如阿司匹林等，以免

影響結(jié)果。

血小板數(shù)量和功能檢驗

血小板計數(shù)和平均血小板體積測定

血小板計數(shù):

目視計數(shù)法。

【標(biāo)本】

末梢血或抗凝靜脈血。

（方法與操作】

見《全國臨床檢驗操作規(guī)程》（第二版）。

【試劑】

1.草酸鐵法稀釋液。

2.許汝和稀釋液。

【附注】

1.血小板稀釋液要清潔。防微粒和細(xì)菌污染。試管和吸管也應(yīng)

清潔、干凈。

2.針刺應(yīng)稍深，使血流通暢。拭去第一滴血后，首先采血作血

小板檢測，動作要快，防止血小板聚集和破壞。采取標(biāo)本后盡快計數(shù)。

3.血液稀釋液充分混勻后，滴入計數(shù)池內(nèi)后，要靜置l（F15niin。

室溫高時注意保持計數(shù)池周圍的濕度，以免水分蒸發(fā)。

4.計數(shù)時光線要適中，注意有折光性的血小板與雜質(zhì)灰塵相區(qū)

別，附在血細(xì)胞旁邊的血小板也要注意，不要漏掉。

血小板計數(shù)儀計數(shù)

【標(biāo)本】

末梢血。

（方法與操作】

使用血小板計數(shù)儀及與其相匹配的稀釋液。操作詳見儀器使用說

明書。

平均血小板體積（MPV）測定

【標(biāo)本】

根據(jù)儀器的要求用末稍血或靜脈取血注入抗凝管（EDTA.Na2或肝

素）

（方法與操作】

自動化血細(xì)胞計數(shù)儀均可檢測

血小板功能檢驗

血小板粘附試驗

【標(biāo)本】

自靜脈取血1.0-l.5mL

【方法】

1.玻珠柱法：

（1）操作：見《全國臨床檢驗操作規(guī)程》（第二版）。

（2）注意事項：

1）取血過程必須順利，掌握血液通過玻珠柱的速度，流速

太快，粘附率降低，流速太慢會使粘附率增高。

2）玻珠柱為一次性用具，用后即棄去。

3）待用玻珠柱應(yīng)置于干燥器中貯存，受潮后粘附率下降。

2.玻璃濾器法：

【標(biāo)本】

自靜脈取血1.5mlo

（方法與操作】

見《全國臨床檢驗操作規(guī)程》（第二版）。

血小板聚集試驗（PAgT）

【標(biāo)本】

自肘靜脈取血4.5ml注入于含0.5ml109mmol/L枸椽酸鈉的硅化

離心管內(nèi)，充分混勻。

【試劑】

1.富含血小板血漿（PRP）及貧含血小板血漿（PPP）。

2.血小板聚集誘導(dǎo)劑ADP、腎上腺素、膠原、瑞斯托霉素

（Ristocetin）等。

［方法與操作】

PAgT比濁法，按《全國臨床檢驗操作規(guī)程》（第二版）步驟操作。

（注意事項】

1.血標(biāo)本中pH6.8飛.5之間時，可測得最佳結(jié)果。pH<6.4或

>10.0時，可使聚集抑制或消失。

2.阿司匹林、潘生丁、肝素、雙香豆素等可抑制聚集，尤其阿

司匹林抑制聚集作用時間可持續(xù)1周。

3.采血后標(biāo)本應(yīng)放在15~25C下，切忌冰箱內(nèi)保存，并在3h內(nèi)

作完實驗。

凝血因子檢驗

全血凝固時間檢驗（CT）

【標(biāo)本】

靜脈取血3mlo

（方法與操作】

試管法、硅管法操作參見《全國臨床檢驗操作規(guī)程》（第二版）。

【附注】

1.靜脈取血要一針見血，盡量減少組織液和空氣混入。

2.水浴箱溫度要恒定，過高或過低，可影響結(jié)果。

活化部分凝血活酶時間測定（APTT）

【標(biāo)本】

自靜脈取血，用109mmo1/L枸椽酸鈉作1:9抗凝。

【試劑】

市售成套試劑。

［方法與操作】

按試劑及有關(guān)儀器說明書要求進(jìn)行。

【附注】

1.標(biāo)本應(yīng)及時檢測，最遲不超過2h。

2.分離血漿應(yīng)在3000r/min,離心lOmin。

3.本試驗較試管法全血凝血時間敏感，能檢出因子削：C<25%

輕型血友病。

血漿凝血酶原時間測定（PT,一期法）

【標(biāo)本】

靜脈血1.8ml,用109mmol/L枸椽酸鈉0.2ml抗凝。

【試劑】

1.組織凝血活酶浸出液；

2.0.025mol/LCaCh液;

（方法與操作】

見《全國臨床檢驗操作規(guī)程》（第二版）。

【附注】

1.采血后宜在lh內(nèi)完成，置冰箱4C保存，不應(yīng)超過4h,-20C

下可放置2周，-70C可放置6個月。

2.水溫箱控制在37C±1C,過高過低均影響結(jié)果。

簡易凝血活酶生成試驗（STGT）

【標(biāo)本】

取全血0.04ml加5nli蒸偏水，混勻，即成溶血液，備用。

（方法與操作】

見《全國臨床檢驗操作規(guī)程》（第二版）

循環(huán)抗凝物質(zhì)檢驗

凝血酶時間測定（TT）

【標(biāo)本】

自靜脈取血「1.5ml,注入枸椽酸鈉抗凝管內(nèi)，混勻。

（方法與操作】

見《全國臨床檢驗操作規(guī)程》（第二版）

【試劑】

1.109mmol/L枸椽酸鈉液

2.凝血酶溶液

【附注】

1.采血后宜在lh內(nèi)完成，置冰箱內(nèi)保存不應(yīng)超過4h。

2.肝素或EDTA.Na2抗凝血漿不宜作本試驗。

第四節(jié)溶血性貧血的檢驗

紅細(xì)胞滲透脆性試驗

標(biāo)本】

1.簡易法，靜脈血為宜。

2.比色法，用肝素抗凝管，抽取靜脈血1.0一1.5011,混勻。

(方法及操作與試劑】

1.簡易法：用配有6號針頭的干燥無菌注射器取靜脈血

1.01.5ml,立即滴入試管架上含有不同量的NaCL及蒸偏水的各管

中，每管1滴，貧血患者可加2滴，搖勻，靜置，室溫2h,觀察結(jié)

果。詳見《臨床實驗診斷學(xué)上冊》。

2.比色法：見《臨床實驗診斷學(xué)上冊》。

【附注】

1.簡易法：

(1)試劑配制要準(zhǔn)確，每次配制量不宜過大，廠2個月內(nèi)需更

換1次試劑。

(2)如取耳垂血要使血液流出暢通，如靜脈血要求注射器干燥。

(3)如用抗凝血，以去纖維蛋白或肝素抗凝血為合適。

(4)如開始及完全溶血的結(jié)果不易判斷時，可離心后觀察。

(5)地中海貧血的滲透脆性降低，需作低濃度NaCL液檢測。

2.比色法：

(1)如在室溫下實驗，需在2小時內(nèi)比色結(jié)束。

(2)血與NaCL緩沖液的PH值及溫度對檢查結(jié)果均有一定影響。

紅細(xì)胞自體溶血試驗

本試驗是測定患者的紅細(xì)胞在自體血清中經(jīng)孵育后，自發(fā)發(fā)生的

溶血程度。

【試劑】

1.100g/L葡萄糖(無菌);

2.等滲鹽水（無菌）；

3.HiCN稀釋液;

4.0.4.1101/LATP生理鹽水無菌液。

（方法與操作】

見《全國臨床檢驗操作規(guī)程》第二版。

【附注】

應(yīng)嚴(yán)守?zé)o菌操作規(guī)程。

臨床微生物及寄生蟲檢驗

細(xì)菌涂片檢查

涂片不染色顯微鏡檢查

1.標(biāo)本要求：各種標(biāo)本或細(xì)菌培養(yǎng)物。

2.試驗方法：直接涂片法、壓滴法或懸滴法。

3.操作步驟：見《全國臨床檢驗操作規(guī)程》（第二版）。

4.結(jié)果觀察：觀察標(biāo)本中有無細(xì)菌或真菌，如有再觀察細(xì)菌的形

態(tài)及運(yùn)動情況，報告所見。

5.注意事項：注意微生物操作安全；標(biāo)本量不宜太多，以免影響

觀察；涂片制作后立即觀察，涂片干涸后應(yīng)重新制作涂片。

涂片革蘭染色顯微鏡檢查

1.標(biāo)本要求：各種標(biāo)本或細(xì)菌培養(yǎng)物。

2.試驗方法：常規(guī)法、快速法。

3.操作步驟：見《全國臨床檢驗操作規(guī)程》（第二版）。

4.結(jié)果觀察：觀察染色涂片有無細(xì)菌或真菌，如有則進(jìn)一步觀察

細(xì)菌的染色性、形態(tài)、特殊結(jié)構(gòu)及排列方式。涂片中如有細(xì)胞，則觀

察細(xì)菌菌體在細(xì)胞內(nèi)或細(xì)胞外。報告所見。

5.注意事項：涂片厚薄適宜均勻；固定及染色不能超時，否則染

色變性；只能報告所見細(xì)菌的染色性、形態(tài)、特殊結(jié)構(gòu)及排列方式，

不能直接報告細(xì)菌菌種如報告涂片見淋病奈瑟菌、白喉棒狀桿菌。

涂片抗酸染色顯微鏡檢查

1.標(biāo)本要求：各種標(biāo)本或細(xì)菌培養(yǎng)物。

2.試驗方法：萋尼染色法、快速染色法或熒光（金胺-羅丹）染

色法。

3.操作方法：見《全國臨床檢驗操作規(guī)程》（第二版）。

4.結(jié)果觀察：抗酸菌在萋尼染色法中呈紅色，在金胺-羅丹染色

法中呈熒光金黃色。

5.觀察染色涂片有無抗酸桿菌，如有則進(jìn)一步觀察細(xì)菌數(shù)量大致

情況。涂片中如有細(xì)胞，則觀察菌體在細(xì)胞內(nèi)或細(xì)胞外。報告所見。

6.注意事項：涂片厚薄適宜均勻；固定及染色不能超時，否則染

色變性；只能報告有無抗酸桿菌，如有，可報告其數(shù)量大致情況及是

否在細(xì)胞內(nèi)，不能直接報告見分枝桿菌或結(jié)核分枝桿菌，因奴卡菌屬、

放線菌屬細(xì)菌也可為抗酸陽性菌。

涂片墨汁染色顯微鏡檢查

1.標(biāo)本要求：各種標(biāo)本或細(xì)菌培養(yǎng)物。

2.試驗方法：直接染色法。

3.操作步驟：見《全國臨床檢驗操作規(guī)程》（第二版）。

4.結(jié)果觀察：涂片背景為黑色，新型隱球菌或細(xì)菌莢膜在染色中

呈折光環(huán)形菌體結(jié)構(gòu)。

5.觀察染色涂片有新型隱球菌或細(xì)菌莢膜時為檢查陽性。報告所

見。

6.注意事項：染液與標(biāo)本液的比例為1:1,比例不當(dāng)影響觀察效

果；只能報告所見即有無折光性環(huán)狀樣菌體，不能直接報告見新型隱

球菌等。

寄生蟲檢驗操作

瘧原蟲檢查

1.標(biāo)本要求：間日瘧及三日瘧患者應(yīng)在發(fā)作后數(shù)小時至10小時采

血，惡性瘧患者在發(fā)作后20小時左右采血。

2.試驗方法：薄血片或厚血片染色鏡檢。

3.試驗材料：瑞氏-姬姆薩染色液、顯微鏡等。

4.操作步驟：見《全國臨床檢驗操作規(guī)程》（第二版）。

5.結(jié)果判斷：薄片須找100或100以上個視野，厚片須找20個視

野或以上才能報告“未找到瘧原蟲”。

6.注意事項：見瘧原蟲時必須進(jìn)行分類。

微絲坳檢查

1.標(biāo)本要求：采血時間以晚上9?12時前后為宜。

2.試驗方法：鮮血片法、厚血片法、試管濃集法。

3.試驗材料：枸椽酸鈉等。

4.操作步驟：見《全國臨床檢驗操作規(guī)程》（第二版）。

蟲卵及包囊濃縮檢查

1.標(biāo)本要求：新鮮糞便取蠶豆大小，放于大小與大號青霉素相似

的瓶內(nèi)。

2.試驗方法：漂浮法、清水沉淀法。

3.試驗材料：一般檢驗常規(guī)材料。

4.操作步驟：見《全國臨床檢驗操作規(guī)程》（第二版）。

肛門擦拭子蟲卵檢查

1.標(biāo)本要求：隨機(jī)取樣送檢。

2.試驗方法：軟透明紙肛門拭子檢查法、棉拭子肛門擦拭法等。

3.試驗材料：一般常規(guī)實驗用品。

4.操作步驟：見《全國臨床檢驗操作規(guī)程》（第二版）。

臨床免疫學(xué)檢查

傳染病免疫學(xué)檢查

乙型肝炎血清標(biāo)志物（HBV-M）檢測

【方法】

ELISA法。

【試劑】

國內(nèi)有商品化試劑盒供應(yīng)。但必須按規(guī)定使用經(jīng)中國藥品生物制

品檢定所檢定并貼有“中國藥品生物制品檢定所檢定合格”字樣的防

偽標(biāo)簽的試劑。

【操作】

按試劑盒內(nèi)說明書書進(jìn)行。

【附注】

1.試劑盒應(yīng)置冰箱中保存，取出后平衡至室溫方可使用，未用

完的微孔條須密封保存；

2.每次應(yīng)設(shè)空白1孔（不加標(biāo)本及標(biāo)酶試劑，其余各步相同）,

陰性對照3孔，陽性對照2孔;

3.洗滌液須用蒸鐳水或去離子水配制，洗滌時各孔均應(yīng)加滿洗

液，以防孔口內(nèi)邊緣有游離酶殘存不能洗凈；

4.用洗板機(jī)洗板，每次洗板反復(fù)5遍，最后一次要求微孔內(nèi)不

殘留洗滌液，如達(dá)不到要求，需扣干；

5.洗板機(jī)洗板時應(yīng)設(shè)定30―60秒的浸泡時間；

6.滴加試劑前應(yīng)將滴瓶翻轉(zhuǎn)數(shù)次，使液體均勻并棄去一滴。滴

加時瓶身應(yīng)保持垂直，以使滴量準(zhǔn)確，注意勿將試劑滴在孔壁上；

7.37C溫育須采用水浴箱，不可使用37C干式恒溫箱，且微孔

條必須接觸37℃水浴水面，不可懸空；

8.不同批號試劑不可混合使用。

【結(jié)果判斷】

酶標(biāo)儀雙波長450/630nm比色測定；

1.HBsAg、抗一HBs、HBeAg;

臨界值(C.0)=陰性對照孔A值的均值Nx2.1(陰性對照A值

<0.05時按0.05W；

標(biāo)本A值S/C.O>1為HBsAg,抗一HBs、HBeAg陽性(S/N>2.1);

標(biāo)本A值S/C.0<1為HBsAg、抗一HBs、HBeAg陰性(S/N<2.1)。

2.抗一HBe、抗一啊；

臨界值(C.O)=陰性對照孔A值的均值Nx0.5;

標(biāo)本A值S/C.0<1者為抗一HBe、抗一HB,陽性(S/NC0.50);

標(biāo)本A值S/C.O>1者為抗一HBe、抗一HBc陰性(S/N>0.50)。

抗甲型肝炎病毒免疫球蛋白M(Anti-HAV-IgM)測定

【方法】

ELISA法。

【試劑】

市售合格試劑、要求同HBV兩對半；

【操作】

按試劑說明書要求進(jìn)行，要求可參考HBV兩對半；

【結(jié)果判斷】

要求同HBV兩對半中HBsAg。

抗丙型肝炎病毒免疫球蛋白G(Anti-HCV-IgG)測定

【方法】

ELISA法。

【試劑】

市售合格試劑、要求同HBV兩對半。

【操作】

按試劑盒說明書進(jìn)行、要求可參考HBV兩對半。

【結(jié)果判斷】

1.陰性對照：正常情況下，A值40.08;

2.陽性對照：正常情況下，A值》0.50;

3.臨界值(C.O)=陰性對照均值x2.8。

陰性對照孔A值＞0.08應(yīng)舍棄、如所有陰性對照孔A值均＞0.08,

試驗應(yīng)重做。陰性對照孔A值＜0.05時以0.05計算。

標(biāo)本A值S/C.O)1者為陽性。

標(biāo)本A值S/C.OC1為陰性。

抗HIV(1+2)測定

在選用測定方法時、需根據(jù)自身條件和需要加以綜合考慮、盡管

所述方法靈敏度特異性都很高、但在實際工作中，假陽性仍然可見,

為達(dá)到最佳的檢測目的，一般需采用下列程序。

ELISA,金標(biāo)等過篩試驗陰性排除后；陽性者應(yīng)以同類另一方法

或另類某種方法重新過篩試驗，以排除假陽性，若仍為陽性，可用免

疫印跡法證實，再次排除假陽性，經(jīng)重復(fù)檢測均為陽性者，方可慎重

發(fā)出陽性結(jié)果報告。

【方法】

1.篩選：ELISA法、金標(biāo)法、明膠凝集試驗、免疫熒光法和乳

膠凝集試驗等。

試劑：必須使用經(jīng)中國藥品生物制品檢定所檢定并貼有“中國藥

品生物制品檢定所檢定合格”防偽標(biāo)簽的商品試劑盒。

2.確認(rèn)：免疫印跡法和放射免疫沉淀試驗。

試劑：使用經(jīng)國家衛(wèi)生部正式批準(zhǔn)的快速免疫轉(zhuǎn)印試劑盒和相應(yīng)

的放射免疫沉淀試劑盒。

【操作】

按試劑說明書要求進(jìn)行。

【結(jié)果判斷】

按試劑說明書要求判定。

【附注】

1.判斷是否感染HIV應(yīng)十分慎重，對可能是陽性的樣品還應(yīng)結(jié)

合其它測定項目的結(jié)果和臨床情況作出判斷。

2.金標(biāo)法必須使用當(dāng)天新鮮血清才能保證最佳結(jié)果，否則易產(chǎn)

生非特異性顯色反應(yīng)。血漿必須去掉纖維蛋白，否則易造成膜過濾阻

塞。

肥達(dá)氏反應(yīng)

【方法】

大孔反應(yīng)凝集試驗。

【試劑】

試劑市售。

【操作】

按試劑盒內(nèi)使用說明書執(zhí)行，在大孔反應(yīng)板內(nèi)進(jìn)行試驗，較傳統(tǒng)

的肥達(dá)氏反應(yīng)結(jié)果更清晰，每次試驗均須做陰、陽性對照管（孔）。

【結(jié)果判斷】

為便于觀察，每10ml稀釋菌液中（70億菌/ml）,加入20.Og/L

美蘭溶液5ul（微升），結(jié)果更清晰。

凝集價0>1:80、H>1:160才有診斷價值。但近斯接種過傷寒,

付傷寒菌苗者其凝集價亦可升高。

抗“0”抗體屬IgM,出現(xiàn)早、維持時間僅數(shù)日，抗H抗體屬IgG,

出現(xiàn)較晚、但維持時間可達(dá)數(shù)年。

抗鏈球菌溶血素0（ASO）檢查

【方法】

膠乳凝集法。

【試劑】

市售成套商品試劑。

【操作】

按試劑說明書進(jìn)行。

1.A、S、0膠乳加入后，輕輕搖動到指定的時間應(yīng)立刻紀(jì)錄結(jié)

果。再放置一段時間后出現(xiàn)的清晰凝集不列為陽性。室溫降低10℃,

在膠乳試劑加入后應(yīng)延長反應(yīng)時間2min,室溫升高10℃應(yīng)縮短反應(yīng)

時間2min。陽性質(zhì)控血清應(yīng)在本說明書指定的時間內(nèi)出現(xiàn)清晰凝集,

但不能將陽性質(zhì)控血清出現(xiàn)凝集的時間視為判斷結(jié)果的時間界限。

2.溶血、脂血、高膽紅素血癥、高膽固醇血癥、類風(fēng)濕因子陽

性以及標(biāo)本被細(xì)菌污染都不會影響本試驗。

3.膠乳試劑不可冰凍，放置在4C冰箱保存，有效期可達(dá)1年,

但用前必須搖勻。

4.本試驗用的滴管口徑以及裝膠乳試劑的塑料瓶的口徑應(yīng)同樣

大小，保證液滴大小一致。

梅毒血清學(xué)檢查

快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片法（RPR）

【試劑】

本試驗有商品試劑盒。RPR抗原懸液呈均勻，灰黑色無雜質(zhì)。6~

10℃暗處可保存1年。

【操作】

按試劑盒說明書進(jìn)行。

【結(jié)果判斷】

陰性標(biāo)本不凝集，陽性標(biāo)本反應(yīng)液中可見明顯黑色凝集顆粒，根

據(jù)顆粒大小報告+-++++。如有需要，陽性標(biāo)本也可在RPR卡片上將血

清用生理鹽水作1:2一1:32稀釋后，按定性試驗方法做半定量試驗。

【附注】

1.此試驗的最佳溫度為23~29C,溫度過高，反應(yīng)性可能增強(qiáng)。

溫度過低，靈敏度可能下降；

2.觀察結(jié)果要及時；

3.被檢血清中若反應(yīng)素過多，有可能抑制“反應(yīng)性”，而出現(xiàn)前

帶現(xiàn)象。半定量試驗有助于澄清此問題。因此呈粗糙非反應(yīng)性結(jié)果的

血清宜再做半定量試驗。

甲苯胺紅不加熱血清法（TRUST）

【試劑】

本試驗有商品試劑盒。

【操作】

按說明書進(jìn)行。

【結(jié)果判斷】

按說明書進(jìn)行，根據(jù)粉紅色凝塊有無及大小報告-、土、+―++++。

【附注】

1.待測血清及TRUST抗原于測定前放室溫平衡（23?29。；

2.陽性反應(yīng)需做半定量試驗，操作方法同RPR半定量試驗。

螺旋體血球凝集法（TPHA）

【試劑】

市售成套試劑。

【操作】

按試劑說明書進(jìn)行。

【結(jié)果判斷】

定性試驗：將標(biāo)本最終稀釋成1:40與未致敏的紅細(xì)胞反應(yīng)，作

為陰性對照；同樣將該標(biāo)本最終稀釋成1:80與致敏的紅細(xì)胞反應(yīng)，

如出現(xiàn)明顯之凝集現(xiàn)象為陽性。對出現(xiàn)陽性的標(biāo)本，可進(jìn)一步作1:5、

1:10……的倍比系列稀釋進(jìn)行半定量試驗，以呈現(xiàn)明顯凝集反應(yīng)的最

高稀釋倍數(shù)作為該血清樣本的凝集效價。

【附注】

1.以致病的梅毒螺旋體致敏明膠粒子代替紅細(xì)胞的TPPA試驗與

TPHA試驗一樣，在試驗的原理，操作及結(jié)果的判斷方面基本一致。

TPPA已有商品化試劑盒供應(yīng)；

2.梅毒血清學(xué)檢查，傳統(tǒng)的康一華氏反應(yīng)已被陶汰，目前常用

的方法除上述不加熱血清反應(yīng)素試驗（USR）、RPR、TRUST、TPHA、TPPA

外，還有性病研究試驗VDRL及熒光螺旋體抗體吸收試驗FTA-ABS等；

其中的FTATBS、TPHA、TPPA,屬特異性的密螺旋體抗原試驗，而VDRL、

USR、RPR、TRUST則屬非特異性的脂類抗原試驗，實際應(yīng)用時常以其

一種作為篩選檢查，而用FTA-ABS或TPHA或TPPA作證實試驗。

腫瘤免疫學(xué)檢查

甲胎蛋白（AFP）測定

【方法】

ELISA法。

【試劑】

本試驗有商品試劑盒。

【操作】

按試劑說明書進(jìn)行。

【結(jié)果判斷】

1.定性：顯色為陽性，無色為陰性；

2.定量：酶標(biāo)儀測定，測49211nl波長吸光度，查標(biāo)準(zhǔn)曲線（吸

光度為縱坐標(biāo)，AFP含量為橫坐標(biāo)），得出標(biāo)本中AFP含量，乘以稀

釋倍數(shù)后發(fā)出定量報告。

【附注】

操作中有關(guān)要求可參考乙肝兩對半試驗。定量的試劑目前以進(jìn)口

的ELISA法AFP測定試劑盒為佳。此外，也可用放射免疫（雙抗體）

法對AFP進(jìn)行定量測定，操作按市售放免試劑盒說明書進(jìn)行。

自身抗體一類風(fēng)濕因子(RF)測定

類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和紅斑狼瘡患者的血清中常存在高滴度的RF,

國內(nèi)普通使用膠乳凝集試驗進(jìn)行測定。此外，也可用雙抗原夾心ELISA

法測定，其測定的操作程序按市售試劑盒進(jìn)行。

【方法】

膠乳凝集試驗。

【試劑】

市售試劑盒。

【操作】

按說明書進(jìn)行。

［結(jié)果判斷］

按說明書要求。

【附注】

1.每次試驗必須設(shè)陰、陽對照；

2.RF膠乳試劑