高考生物高分計劃一輪講義第35講細(xì)胞工程

第35講細(xì)胞工程[考綱明細(xì)]1.植物的組織培養(yǎng)(Ⅱ)2.動物細(xì)胞培養(yǎng)與體細(xì)胞克隆(Ⅱ)3.細(xì)胞融合與單克隆抗體(Ⅱ)考點(diǎn)1植物組織培養(yǎng)與植物體細(xì)胞雜交1．細(xì)胞工程的概念與理論基礎(chǔ)(1)細(xì)胞工程①操作水平：細(xì)胞水平或細(xì)胞器水平。②目的：按照人的意愿來改變細(xì)胞內(nèi)的遺傳物質(zhì)或獲得細(xì)胞產(chǎn)品。(2)植物細(xì)胞的全能性①概念：具有某種生物全部遺傳信息的任何一個細(xì)胞，都具有發(fā)育成完整生物體的潛能。②原理：細(xì)胞內(nèi)含有本物種的全套遺傳信息。③全能性表達(dá)條件：具有完整的細(xì)胞結(jié)構(gòu)，處于離體狀態(tài)，提供一定的營養(yǎng)、激素和其他適宜外界條件。④細(xì)胞全能性大小與細(xì)胞分化程度成反比。⑤全能性大小：植物細(xì)胞：受精卵＞生殖細(xì)胞＞體細(xì)胞動物細(xì)胞：受精卵＞生殖細(xì)胞＞體細(xì)胞核(動物細(xì)胞全能性受限制，但細(xì)胞核具有全能性)2．植物組織培養(yǎng)(1)理論基礎(chǔ)：植物細(xì)胞的全能性。(2)操作流程eq\x(離體的器官、組織或細(xì)胞\o(→,\s\up17(a))A\o(→,\s\up17(b))B\o(→,\s\up17(發(fā)育))完整植株)①離體的器官、組織或細(xì)胞常稱為外植體。②a過程為脫分化，b過程為再分化，A表示愈傷組織，B表示叢芽或胚狀體。3．植物體細(xì)胞雜交(1)概念：將不同種的植物體細(xì)胞，在一定條件下融合成雜種細(xì)胞，并把雜種細(xì)胞培育成新的植物體的技術(shù)。(2)原理：體細(xì)胞雜交利用了細(xì)胞膜的流動性，雜種細(xì)胞培育成雜種植株利用了植物細(xì)胞的全能性。(3)過程4．植物細(xì)胞工程的實(shí)際應(yīng)用(1)植物繁殖的新途徑①微型繁殖：用于快速繁殖優(yōu)良品種的植物組織培養(yǎng)技術(shù)。特點(diǎn)eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(a.保持優(yōu)良品種的遺傳特性,b.高效快速地實(shí)現(xiàn)種苗的大量繁殖))②作物脫毒技術(shù)：是選取作物無毒組織(如莖尖)進(jìn)行組織培養(yǎng)，獲得脫毒苗的技術(shù)。③人工種子：以植物組織培養(yǎng)得到的胚狀體、不定芽、頂芽和腋芽等為材料，經(jīng)過人工薄膜包裝得到的種子。(2)作物新品種的培育①單倍體育種②突變體的利用：在植物組織培養(yǎng)過程中，由于培養(yǎng)細(xì)胞一直處于不斷的分生狀態(tài)，因此容易受到培養(yǎng)條件和外界壓力(如射線、化學(xué)物質(zhì)等)的影響而發(fā)生突變。從這些產(chǎn)生突變的個體中可以篩選出對人們有用的突變性狀，進(jìn)而培育成新品種。(3)細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)①細(xì)胞產(chǎn)物：蛋白質(zhì)、脂肪、糖類、藥物、香料、生物堿等。②培養(yǎng)階段：愈傷組織階段。③技術(shù)基礎(chǔ)：植物組織培養(yǎng)技術(shù)。eq\a\vs4\al([思維診斷])1．深挖教材人工種皮是保證包裹在其中的胚狀體順利生長成小植株的關(guān)鍵部分，請?zhí)接懀喝斯しN皮中應(yīng)該具有的有效成分是什么？為了促進(jìn)胚狀體的生長發(fā)育，我們還可以向人工種皮中加入哪些物質(zhì)？提示針對植物種類和土壤等條件，在人工種子的包裹劑中還可以加入適量的養(yǎng)分、無機(jī)鹽、有機(jī)碳源以及農(nóng)藥、抗生素、有益菌等。為了促進(jìn)胚狀體的生長發(fā)育，還可以向人工種皮中加入一些植物生長調(diào)節(jié)劑。2．判斷正誤(1)同一株綠色開花植物不同部位的細(xì)胞經(jīng)組織培養(yǎng)獲得的植株基因都是相同的(×)(2)棉花根尖細(xì)胞經(jīng)誘導(dǎo)形成幼苗能體現(xiàn)細(xì)胞的全能性(√)(3)植物的每個細(xì)胞在植物體內(nèi)和體外都能表現(xiàn)出細(xì)胞的全能性(×)(4)愈傷組織是外植體通過脫分化和再分化后形成的(×)(5)利用物理法或化學(xué)法可以直接將兩個植物細(xì)胞進(jìn)行誘導(dǎo)融合(×)(6)再生出細(xì)胞壁是原生質(zhì)體融合成功的標(biāo)志(√)題組一植物組織培養(yǎng)過程的分析1.(2017·江蘇南通全真模擬)金絲楸是珍貴的古老樹種，在多個方面具有重要的應(yīng)用價值。金絲楸在自然狀態(tài)下很難通過種子繁殖。為盡快推廣種植，可以通過相關(guān)技術(shù)獲得優(yōu)質(zhì)苗種，下列技術(shù)應(yīng)用不合理的是()A．采用根段誘導(dǎo)其生根發(fā)芽快速育苗B．采集幼芽嫁接到其他適宜的植物體上C．采用幼葉或莖尖部位的組織生產(chǎn)人工種子D．采用花朵中的花粉粒經(jīng)組織培養(yǎng)獲得試管苗答案D解析對于自然狀態(tài)下難以通過種子進(jìn)行有性繁殖的生物，可通過無性繁殖來保持母本的優(yōu)良性狀，如扦插、嫁接、選擇適宜的外植體進(jìn)行植物組織培養(yǎng)等，但一般不選擇花費(fèi)力氣進(jìn)行花藥離體培養(yǎng)，那樣獲得的單倍體不一定能很好的保持親本的優(yōu)良性狀，A、B、C正確，D錯誤。2．如圖示植物組織培養(yǎng)過程。據(jù)圖分析下列敘述正確的是()A．⑤植株根尖細(xì)胞的全能性比①植株根尖細(xì)胞的強(qiáng)B．②試管的培養(yǎng)基中含有植物生長調(diào)節(jié)劑，不含有有機(jī)物C．③試管中的細(xì)胞能進(jìn)行減數(shù)分裂D．調(diào)節(jié)④培養(yǎng)基中植物生長調(diào)節(jié)劑的比例可誘導(dǎo)產(chǎn)生不同的植物器官答案D解析⑤植株根尖細(xì)胞的全能性與①植株根尖細(xì)胞相同，A錯誤；②試管的培養(yǎng)基中含有植物生長調(diào)節(jié)劑和有機(jī)物等，B錯誤；③試管中的細(xì)胞進(jìn)行的分裂方式為有絲分裂，C錯誤；調(diào)節(jié)④培養(yǎng)基中植物生長調(diào)節(jié)劑的比例，可誘導(dǎo)產(chǎn)生根或芽，D正確。技法提升1．植物組織培養(yǎng)的關(guān)鍵(1)條件：離體，一定營養(yǎng)物質(zhì)，激素(生長素、細(xì)胞分裂素)等。(2)培養(yǎng)基狀態(tài)：固體培養(yǎng)基(需再分化生根培養(yǎng)基及生芽培養(yǎng)基)(3)體內(nèi)細(xì)胞未表現(xiàn)全能性的原因：基因的表達(dá)具有選擇性。(4)光照的應(yīng)用脫分化階段不需要給予光照，再分化階段需要給予光照，以利于葉綠素的形成。2．植物激素在植物組織培養(yǎng)中的作用題組二植物體細(xì)胞雜交過程考查3.如圖所示為白菜—甘藍(lán)的培育流程，下列敘述錯誤的是()A．過程①用到的酶是纖維素酶和果膠酶B．過程②常用的化學(xué)試劑是聚乙二醇C．過程④細(xì)胞的全能性提高D．過程⑤細(xì)胞的全能性降低，最終失去全能性答案D解析植物細(xì)胞壁的主要成分是纖維素和果膠，所以去除細(xì)胞壁應(yīng)用纖維素酶和果膠酶，A正確；雜種細(xì)胞是已經(jīng)分化的細(xì)胞，而愈傷組織是未分化的細(xì)胞，所以愈傷組織的全能性要高于雜種細(xì)胞，C正確；無論是分化的還是未分化的植物細(xì)胞都具有全能性，D錯誤。4．如圖為植物細(xì)胞融合后再生出新植株的部分過程示意圖，請據(jù)圖分析，以下敘述中不正確的是()A．使植物細(xì)胞形成原生質(zhì)體階段的關(guān)鍵技術(shù)是使用纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁B．植物細(xì)胞融合一般要用聚乙二醇(PEG)等誘導(dǎo)劑進(jìn)行誘導(dǎo)C．原生質(zhì)體融合成為一個新的雜種細(xì)胞的標(biāo)志是出現(xiàn)新的細(xì)胞核D．親本植物A的細(xì)胞與親本植物B的細(xì)胞兩兩融合后的細(xì)胞類型有3種答案C解析植物體細(xì)胞雜交前首先要用纖維素酶和果膠酶去除植物細(xì)胞的細(xì)胞壁以得到原生質(zhì)體，A正確；誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合時，常用聚乙二醇作誘導(dǎo)劑，B正確；原生質(zhì)體融合成一個新的雜種細(xì)胞的標(biāo)志是出現(xiàn)新的細(xì)胞壁，C錯誤；A細(xì)胞和B細(xì)胞融合后形成AA、BB和AB三種類型的融合細(xì)胞，D正確。技法提升雜種植物遺傳物質(zhì)的變化(1)遺傳特性：雜種植株中含有兩種植物的遺傳物質(zhì)，故雜種植株具備兩種植物的遺傳特性。(2)染色體組數(shù)①染色體組數(shù)＝兩種植物體細(xì)胞內(nèi)染色體組數(shù)之和。②植物體細(xì)胞雜交形成的雜種植株，有幾個染色體組就稱為幾倍體。③若一植物細(xì)胞含有2x條染色體，2個染色體組，基因型為Aabb，另一植物細(xì)胞含有2y條染色體，2個染色體組，基因型為ccDd，則新植株應(yīng)為異源四倍體，其體細(xì)胞中染色體為(2x＋2y)條，4個染色體組，基因型為AabbccDd。

考點(diǎn)2動物細(xì)胞培養(yǎng)與動物體細(xì)胞核移植1．動物細(xì)胞培養(yǎng)(1)動物細(xì)胞工程常用的技術(shù)手段：動物細(xì)胞培養(yǎng)、動物細(xì)胞核移植、動物細(xì)胞融合、生產(chǎn)單克隆抗體等，其中動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是其他工程技術(shù)的基礎(chǔ)。(2)動物細(xì)胞培養(yǎng)①原理：細(xì)胞增殖。②過程③條件a．無菌、無毒的環(huán)境：對培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進(jìn)行無菌處理。通常在細(xì)胞培養(yǎng)液中還要添加一定量的抗生素，其目的是防止培養(yǎng)過程中的污染。此外，應(yīng)定期更換培養(yǎng)液，目的是防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對細(xì)胞自身造成傷害。b．營養(yǎng)：合成培養(yǎng)基中有糖、氨基酸、促生長因子、無機(jī)鹽、微量元素等，需加血清、血漿等一些天然成分。c．溫度和pH：哺乳動物適宜溫度為36.5±0.5_℃，pH為7.2～7.4。d．氣體環(huán)境：95%的空氣加5%的CO2的混合氣體。CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。④應(yīng)用a．生產(chǎn)生物制品，如病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體等。b．應(yīng)用于基因工程。c．檢測有毒物質(zhì)，判斷某種物質(zhì)的毒性；用于生理、病理、藥理等方面的研究。2．動物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動物(1)原理：動物體細(xì)胞核具有全能性。(2)過程(3)結(jié)果：產(chǎn)生新個體。(4)應(yīng)用①加速家畜遺傳改良進(jìn)程，促進(jìn)優(yōu)良畜群繁育；②保護(hù)瀕危物種；③生產(chǎn)醫(yī)用蛋白；④作為異種移植的供體；⑤用于組織器官的移植。eq\a\vs4\al([思維診斷])1．深挖教材(1)進(jìn)行核移植時，為什么要選用去核的MⅡ期的卵母細(xì)胞？提示核移植時選MⅡ期卵母細(xì)胞的原因有：①此類細(xì)胞體積大，易于操作；②卵黃多，可為胚胎發(fā)育提供充足的營養(yǎng)；③卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中存在激發(fā)細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì)。(2)用于核移植的供體細(xì)胞一般都選用傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞，想一想，這是為什么？提示培養(yǎng)的動物細(xì)胞一般當(dāng)傳代至10～50代左右時，部分細(xì)胞核型可能會發(fā)生變化，其細(xì)胞遺傳物質(zhì)可能會發(fā)生突變，而10代以內(nèi)的細(xì)胞一般能保持正常的二倍體核型。因此，在體細(xì)胞核移植中，為了保證供體細(xì)胞正常的遺傳基礎(chǔ)，通常采用傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞。2．判斷正誤(1)動物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)依據(jù)的原理都是細(xì)胞的全能性(×)(2)在動物細(xì)胞培養(yǎng)及植物組織培養(yǎng)中，都需要對培養(yǎng)基滅菌，還都要用到CO2培養(yǎng)箱(×)(3)可以用滅活的病毒促進(jìn)動物細(xì)胞融合，而不能促進(jìn)植物細(xì)胞融合(√)(4)與“多利”羊等克隆哺乳動物相關(guān)的技術(shù)有胚胎移植、細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)(√)(5)植物原生質(zhì)體融合和動物細(xì)胞融合原理是相同的(√)(6)動物細(xì)胞培養(yǎng)中兩次使用胰蛋白酶的作用相同(×)題組一動物細(xì)胞培養(yǎng)過程考查1.某研究小組為測定某種藥物對體外培養(yǎng)細(xì)胞的毒性，準(zhǔn)備對某種動物的肝腫瘤細(xì)胞(甲)和正常肝細(xì)胞(乙)進(jìn)行動物細(xì)胞培養(yǎng)。下列敘述正確的是()A．制備肝細(xì)胞懸液時，可用胃蛋白酶處理肝組織塊B．恒溫培養(yǎng)箱中的CO2濃度維持在5%左右，以促進(jìn)細(xì)胞呼吸C．為了保證細(xì)胞培養(yǎng)所需的無毒環(huán)境，需大量添加各種抗生素D．本實(shí)驗(yàn)應(yīng)設(shè)置對照實(shí)驗(yàn)，以檢測藥物對甲、乙細(xì)胞的毒性大小答案D解析在利用肝組織塊制備肝細(xì)胞懸液時，常用胰蛋白酶，不能使用胃蛋白酶，因?yàn)槲傅鞍酌感枰趶?qiáng)酸環(huán)境下才能起作用，但這樣的環(huán)境不適于細(xì)胞生存，A錯誤；細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在含5%CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行，CO2的作用是維持培養(yǎng)液的pH，B錯誤；抗生素是用來殺菌的，大量添加對細(xì)胞有害，C錯誤；本實(shí)驗(yàn)應(yīng)設(shè)置對照實(shí)驗(yàn)，用添加藥物的培養(yǎng)液分別培養(yǎng)甲、乙細(xì)胞，根據(jù)死亡細(xì)胞占培養(yǎng)細(xì)胞的比例，以檢測藥物對甲、乙的毒性大小，D正確。2．下列有關(guān)動物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述，錯誤的是()A．惡性腫瘤細(xì)胞系具有不死性和失去接觸抑制等特性B．利用液體培養(yǎng)基和CO2培養(yǎng)箱，模擬動物體的內(nèi)環(huán)境C．因細(xì)胞具有相互依存關(guān)系，細(xì)胞克隆需滋養(yǎng)細(xì)胞支持生長D．細(xì)胞株沒有差異性，在連續(xù)傳代過程中遺傳性狀始終保持穩(wěn)定答案D解析惡性腫瘤細(xì)胞系能無限繁殖，細(xì)胞表面糖蛋白減少，細(xì)胞之間的黏著性降低，即具有不死性和失去接觸抑制等特性，A正確；動物細(xì)胞培養(yǎng)時模擬動物體的內(nèi)環(huán)境，需要液體培養(yǎng)基(糖、氨基酸、促生長因子、無機(jī)鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質(zhì))和CO2培養(yǎng)箱(95%空氣和5%的CO2)，B正確；滋養(yǎng)細(xì)胞為動物細(xì)胞培養(yǎng)提供分化抑制因子，維持分裂狀態(tài)，C正確；細(xì)胞株傳到50左右不能再繼續(xù)傳代，部分細(xì)胞遺傳物質(zhì)改變，具有癌變細(xì)胞的特點(diǎn)，可以在培養(yǎng)條件下無限制的傳代下去，D錯誤。題組二動物體細(xì)胞核移植的考查3.下列關(guān)于動物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動物的敘述，正確的是()A．目前在實(shí)驗(yàn)中，科學(xué)家可以用類似植物組織培養(yǎng)的方法獲得完整的動物個體B．體細(xì)胞的細(xì)胞核移植到受體細(xì)胞之前，要先去掉受體卵母細(xì)胞的核C．用于核移植的供體細(xì)胞一般都選用傳代50代以內(nèi)的細(xì)胞D．用體細(xì)胞核移植方法生產(chǎn)的克隆動物是對體細(xì)胞供體動物進(jìn)行100%的復(fù)制答案B解析目前在實(shí)驗(yàn)中，科學(xué)家還不可以直接把動物細(xì)胞培養(yǎng)成完整的動物個體，A錯誤；用于核移植的供體細(xì)胞一般都選用傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞，因?yàn)?0代內(nèi)的細(xì)胞能保持正常的二倍體核型，C錯誤；用體細(xì)胞核移植方法生產(chǎn)的克隆動物，并沒有對體細(xì)胞供體動物進(jìn)行100%的復(fù)制，因?yàn)檫€有部分遺傳物質(zhì)來自受體卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)，D錯誤。4．(2018·福建漳州月考)下圖是利用現(xiàn)代生物工程技術(shù)治療遺傳性糖尿病(基因缺陷導(dǎo)致胰島B細(xì)胞不能正常合成胰島素)的過程設(shè)計圖解。請據(jù)圖回答：(1)圖中①、②所示的結(jié)構(gòu)分別是________、__________。(2)圖中③、④所示的生物工程技術(shù)分別是__________________、____________________。(3)過程③通常用去核卵母細(xì)胞作受體細(xì)胞的原因除了它體積大、易操作，含有營養(yǎng)物質(zhì)豐富外，還因?yàn)樗黖_____________。(4)過程④通常采用的方法是____________。(5)過程④的完成需要用到的非酶基因操作工具為________。(6)圖示方法與一般的異體移植相比最大的優(yōu)點(diǎn)是________________________。答案(1)細(xì)胞核內(nèi)細(xì)胞團(tuán)(2)(體細(xì)胞)核移植技術(shù)基因工程(轉(zhuǎn)基因技術(shù)或重組DNA技術(shù))(3)含有促進(jìn)(或激活)細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì)(4)顯微注射技術(shù)(5)載體(6)不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)解析(1)體細(xì)胞核移植利用體細(xì)胞的細(xì)胞核和去核卵母細(xì)胞。內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞具有發(fā)育的全能性，其中導(dǎo)入健康胰島B細(xì)胞基因，可以形成能正常分泌胰島素的胰島B細(xì)胞群。(2)圖中③是將體細(xì)胞的細(xì)胞核和去核卵母細(xì)胞重組為一個細(xì)胞，為體細(xì)胞核移植技術(shù)。圖中④是將健康胰島B細(xì)胞基因?qū)胧荏w細(xì)胞，為基因工程技術(shù)。(3)過程③通常用去核卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞，除了因?yàn)樗w積大，易操作，含有營養(yǎng)物質(zhì)豐富外，還因?yàn)槠浜心軌蚣せ罴?xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì)。(4)將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞通常用顯微注射法。(5)基因工程的基本工具為限制酶、DNA連接酶、載體，載體為非酶基因操作工具，通常為質(zhì)粒。(6)圖示方法與一般的異體移植相比可避免免疫排斥。技法提升細(xì)胞核移植中的遺傳物質(zhì)及工程技術(shù)(1)克隆動物是由重組細(xì)胞經(jīng)培養(yǎng)而來的，該重組細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)基因來源于受體細(xì)胞，細(xì)胞核基因來源于供體細(xì)胞的細(xì)胞核，所以克隆動物絕大部分性狀與供體動物相同，少數(shù)性狀與提供卵母細(xì)胞的動物相同，與代孕動物的性狀無遺傳關(guān)系。(2)動物體細(xì)胞核移植技術(shù)(克隆)從生殖方式的角度看屬于無性生殖，需要動物細(xì)胞培養(yǎng)和胚胎工程技術(shù)的支持。

考點(diǎn)3動物細(xì)胞融合與單克隆抗體的制備1．動物細(xì)胞融合(1)原理：細(xì)胞膜具有一定的流動性。(2)方法：物理法(離心、振動、電激)、化學(xué)法和生物法(滅活病毒處理)。(3)結(jié)果：形成雜交細(xì)胞。(4)意義：克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙。(5)應(yīng)用：制備單克隆抗體。2．單克隆抗體制備(1)血清抗體與單克隆抗體(2)過程(3)單克隆抗體的應(yīng)用①作為診斷試劑：能準(zhǔn)確識別各種抗原物質(zhì)的細(xì)微差異，并與一定抗原發(fā)生特異性結(jié)合，具有準(zhǔn)確、高效、簡易、快速的優(yōu)點(diǎn)。②用于治療疾病和運(yùn)載藥物：主要用于癌癥治療，可制成“生物導(dǎo)彈”，也有少量用于治療其他疾病。eq\a\vs4\al([思維診斷])1．深挖教材動物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交有哪些不同之處？提示①融合前的處理不同：植物體細(xì)胞雜交用纖維素酶和果膠酶去掉細(xì)胞壁，制備原生質(zhì)體才能融合，而動物細(xì)胞可以直接融合。②誘導(dǎo)方式不同：相比植物體細(xì)胞雜交，動物細(xì)胞融合特有的誘導(dǎo)方式是用滅活的病毒處理。③目的不同：植物體細(xì)胞雜交的目的是為了培育雜種植株；動物細(xì)胞融合只是為了獲得雜種細(xì)胞。2．判斷正誤(1)將B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行誘導(dǎo)融合，培養(yǎng)液中融合后的細(xì)胞即為雜交瘤細(xì)胞(×)(2)單克隆抗體的制備過程中，第一次篩選的目的是篩選出雜交瘤細(xì)胞，第二次篩選的目的是獲得能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞(√)(3)小鼠骨髓瘤細(xì)胞的染色體數(shù)為40，B淋巴細(xì)胞的染色體數(shù)為46，融合后形成的雜交瘤細(xì)胞DNA分子數(shù)為86(×)(4)雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行體內(nèi)培養(yǎng)，是為了獲得能產(chǎn)生單克隆抗體的胚胎(×)(5)體細(xì)胞雜交技術(shù)可用于克隆動物和制備單克隆抗體(×)(6)B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞經(jīng)細(xì)胞融合后有三種細(xì)胞類型(若僅考慮兩兩融合的情況)(√)題組一動物細(xì)胞融合過程分析1.關(guān)于動物細(xì)胞融合的說法，不正確的是()A．動物細(xì)胞融合也稱細(xì)胞雜交，是指兩個或多個動物細(xì)胞結(jié)合形成一個細(xì)胞的過程B．動物細(xì)胞融合后形成的具有原來兩個或多個動物細(xì)胞遺傳信息的單核細(xì)胞稱為雜交細(xì)胞C．常用的誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合的因素有聚乙二醇、滅活的病毒、電激、紫外線照射等D．細(xì)胞融合技術(shù)突破了有性雜交方法的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能答案C解析A項(xiàng)為動物細(xì)胞融合的含義；B項(xiàng)是融合后細(xì)胞的特點(diǎn)；C項(xiàng)中紫外線照射常用于人工誘變，可誘發(fā)基因突變，而不是誘導(dǎo)細(xì)胞融合的因素，常用的誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合的物理因素是離心、振動和電激；D項(xiàng)為動物細(xì)胞融合的意義。題組二單克隆抗體制備過程的考查2.對于下面制備單克隆抗體過程示意圖，不正確的敘述是()A．①表示B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞，均是從小鼠的脾臟中提取的B．④中的篩選是通過抗原—抗體反應(yīng)進(jìn)行的C．②促進(jìn)細(xì)胞融合的方法可以利用聚乙二醇作介導(dǎo)D．⑤可以無限增殖答案A解析單克隆抗體是利用B淋巴細(xì)胞(漿細(xì)胞)和小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合得到，融合方法可以是化學(xué)方法如聚乙二醇，也可以是生物方法如滅活病毒，C正確；如果要篩選產(chǎn)特異性抗體的雜交細(xì)胞可以通過抗原—抗體反應(yīng)，如果有反應(yīng)說明表達(dá)了抗體，B正確；融合細(xì)胞具有雙親特點(diǎn)，既能無限增殖又能產(chǎn)生特異性抗體，D正確；骨髓瘤細(xì)胞從骨髓中提取，A錯誤。3．某小鼠生活過程中被多種病原體感染過，科學(xué)家以該小鼠為實(shí)驗(yàn)材料，利用單克隆抗體技術(shù)，獲得了抗某種病原體的高純度單克隆抗體。下列敘述不正確的是()A．被多種病原體感染過的小鼠體內(nèi)會產(chǎn)生多種效應(yīng)B細(xì)胞B．經(jīng)細(xì)胞融合后形成的單個雜交瘤細(xì)胞可分泌多種特異性抗體C．用“抗原—抗體檢測法”可篩選出產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞D．單克隆抗體的制備過程中使用了細(xì)胞培養(yǎng)和細(xì)胞融合技術(shù)答案B解析經(jīng)細(xì)胞融合后形成的單個雜交瘤細(xì)胞既能迅速大量繁殖，又能產(chǎn)生專一的抗體，B錯誤。技法提升制備單克隆抗體過程中兩次篩選的方法及目的高考熱點(diǎn)突破1．(2016·江蘇高考)下列有關(guān)細(xì)胞工程的敘述，正確的是()A．PEG是促細(xì)胞融合劑，可直接誘導(dǎo)植物細(xì)胞融合B．用原生質(zhì)體制備人工種子，要防止細(xì)胞破裂C．骨髓瘤細(xì)胞經(jīng)免疫處理，可直接獲得單克隆抗體D．核移植克隆的動物，其線粒體DNA來自供卵母體答案D解析PEG(聚乙二醇)可誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合，不能直接誘導(dǎo)植物細(xì)胞融合，A錯誤；制備人工種子是用人工薄膜包裹組織培養(yǎng)形成的胚狀體、腋芽等，B錯誤；單克隆抗體是雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的，不是由骨髓瘤細(xì)胞經(jīng)免疫處理后產(chǎn)生，C錯誤；細(xì)胞核移植技術(shù)培育的克隆動物中，細(xì)胞核DNA來自提供體細(xì)胞核的個體，細(xì)胞質(zhì)中線粒體DNA來自提供卵母細(xì)胞的個體，D正確。2．(2016·天津高考)將攜帶抗M基因、不帶抗N基因的鼠細(xì)胞去除細(xì)胞核后，與攜帶抗N基因、不帶抗M基因的鼠細(xì)胞融合，獲得的胞質(zhì)雜種細(xì)胞具有M、N兩種抗性。該實(shí)驗(yàn)證明了()A．該胞質(zhì)雜種細(xì)胞具有全能性B．該胞質(zhì)雜種細(xì)胞具有無限增殖能力C．抗M基因位于細(xì)胞質(zhì)中D．抗N基因位于細(xì)胞核中答案C解析只有將該胞質(zhì)雜種細(xì)胞培育成小鼠，才可證明該胞質(zhì)雜種細(xì)胞具有全能性，A錯誤；該實(shí)驗(yàn)沒有證據(jù)表明該胞質(zhì)雜種細(xì)胞能無限增殖，B錯誤；攜帶抗M基因、不帶抗N基因的鼠細(xì)胞去除細(xì)胞核后，與不帶抗M基因、攜帶抗N基因的細(xì)胞融合，雜種細(xì)胞具有M、N兩種抗性，說明細(xì)胞質(zhì)中含有抗M基因，但不能確定抗N基因的位置，C正確，D錯誤。3．(2015·江蘇高考)如圖為制備人工種子部分流程示意圖，下列敘述正確的是()A．胚狀體是外植體在培養(yǎng)基上脫分化形成的一團(tuán)愈傷組織B．該過程以海藻酸鈉作為營養(yǎng)成分，以CaCl2溶液作為凝固劑C．可在海藻酸鈉溶液中添加蔗糖，為胚狀體提供碳源D．包埋胚狀體的凝膠珠能夠隔絕空氣，有利于人工種子的儲藏答案C解析胚狀體可由愈傷組織經(jīng)再分化形成，具有生根發(fā)芽的能力，A錯誤；海藻酸鈉是包埋的載體，不提供營養(yǎng)成分，CaCl2能使海藻酸鈉形成凝膠珠，B錯誤；植物組織培養(yǎng)中常用蔗糖作為碳源，C正確；人工種子儲藏過程中胚狀體細(xì)胞需要進(jìn)行有氧呼吸，不能完全隔絕空氣，D錯誤。4．(2016·全國卷Ⅱ)下圖表示通過核移植等技術(shù)獲得某種克隆哺乳動物(二倍體)的流程?；卮鹣铝袉栴}：(1)圖中A表示正常細(xì)胞核，染色體數(shù)為2n，則其性染色體的組成可為________。過程①表示去除細(xì)胞核，該過程一般要在卵母細(xì)胞培養(yǎng)至適當(dāng)時期再進(jìn)行，去核時常采用________的方法。②代表的過程是________。(2)經(jīng)過多次傳代后，供體細(xì)胞中________的穩(wěn)定性會降低。因此，選材時必須關(guān)注傳代次數(shù)。(3)若獲得的克隆動物與供體動物性狀不完全相同，從遺傳物質(zhì)的角度分析其原因是_____________________________________。(4)與克隆羊“多莉(利)”培育成功一樣，其他克隆動物的成功獲得也證明了______________________________________。答案(1)XX或XY顯微操作胚胎移植(2)遺傳物質(zhì)(3)卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)會對克隆動物的性狀產(chǎn)生影響(4)動物已分化體細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性解析(1)因供體的性別不確定，故其細(xì)胞核內(nèi)的性染色體組成為XX或XY；一般將卵母細(xì)胞培養(yǎng)到MⅡ中期，用顯微操作法將其細(xì)胞核去除；②代表的過程是胚胎移植。(2)傳代培養(yǎng)10代以內(nèi)的細(xì)胞可以保持正常的二倍體核型，超過10代以后，供體細(xì)胞中遺傳物質(zhì)的穩(wěn)定性會降低。(3)克隆動物細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)來自卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)，細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)對克隆動物的性狀會產(chǎn)生影響。(4)克隆動物的成功可以證明動物已分化的體細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性。5．(2015·安徽高考)科研人員采用轉(zhuǎn)基因體細(xì)胞克隆技術(shù)獲得轉(zhuǎn)基因綿羊，以便通過乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)人凝血因子IX醫(yī)用蛋白，其技術(shù)路線如圖。(1)由過程①獲得的A為______________________。(2)在核移植之前，必須先去掉受體卵母細(xì)胞的核，目的是_____________________________________________________。受體應(yīng)選用________期卵母細(xì)胞。(3)進(jìn)行胚胎移植時，代孕母羊?qū)σ迫胱訉m的重組胚胎基本上不發(fā)生________________，這為重組胚胎在代孕母羊體內(nèi)的存活提供了可能。(4)采用胎兒成纖維細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)基因體細(xì)胞克隆，理論上可獲得無限個轉(zhuǎn)基因綿羊，這是因?yàn)開__________________________。答案(1)含目的基因的表達(dá)載體(2)保證核遺傳物質(zhì)來自含目的基因的成纖維細(xì)胞MⅡ中(3)免疫排斥反應(yīng)(4)整合有目的基因的成纖維細(xì)胞可進(jìn)行傳代培養(yǎng)解析(1)在基因工程中，構(gòu)建基因表達(dá)載體后才能將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞。(2)核移植技術(shù)選用的成熟卵母細(xì)胞處于減數(shù)第二次分裂中期(MⅡ中期)，需去掉細(xì)胞核以保證得到的克隆動物的核遺傳物質(zhì)來自含目的基因的成纖維細(xì)胞。(3)胚胎移植時受體動物對移入的胚胎基本不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，這為胚胎的存活提供了可能。(4)由于整合有目的基因的胎兒成纖維細(xì)胞具有增殖能力，可進(jìn)行傳代培養(yǎng)，所以理論上可利用動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)和核移植技術(shù)，獲得無限個轉(zhuǎn)基因綿羊。6．(2015·福建高考)GDNF是一種神經(jīng)營養(yǎng)因子，對損傷的神經(jīng)細(xì)胞具有營養(yǎng)和保護(hù)作用。研究人員構(gòu)建了含GDNF基因的表達(dá)載體(如圖1所示)，并導(dǎo)入到大鼠神經(jīng)干細(xì)胞中，用于干細(xì)胞基因治療的研究。請回答：(1)在分離和培養(yǎng)大鼠神經(jīng)干細(xì)胞的過程中，使用胰蛋白酶的目的是________。(2)構(gòu)建含GDNF基因的表達(dá)載體時，需選擇圖1中的________限制酶進(jìn)行酶切。(3)經(jīng)酶切后的載體和GDNF基因進(jìn)行連接，連接產(chǎn)物經(jīng)篩選得到的載體主要有3種：單個載體自連、GDNF基因與載體正向連接、GDNF基因與載體反向連接(如圖1所示)。為鑒定這3種連接方式，選擇HpaⅠ酶和BamHⅠ酶對篩選得到的載體進(jìn)行雙酶切，并對酶切后的DNA片段進(jìn)行電泳分析，結(jié)果如圖2所示。圖中第________泳道顯示所鑒定的載體是正向連接的。(4)將正向連接的表達(dá)載體導(dǎo)入神經(jīng)干細(xì)胞后，為了檢測GDNF基因是否成功表達(dá)，可用相應(yīng)的________與提取的蛋白質(zhì)雜交。當(dāng)培養(yǎng)的神經(jīng)干細(xì)胞達(dá)到一定密度時，需進(jìn)行________培養(yǎng)以得到更多數(shù)量的細(xì)胞，用于神經(jīng)干細(xì)胞移植治療實(shí)驗(yàn)。答案(1)使細(xì)胞分散開(2)XhoⅠ(3)②(4)抗體傳代解析(1)在動物(大鼠)細(xì)胞培養(yǎng)過程中，使用胰蛋白酶的目的是使組織分散成單個細(xì)胞。(2)據(jù)圖可知，GDNF基因的兩端都是XhoⅠ限制酶的酶切位點(diǎn)，而其中間是BamHⅠ限制酶的酶切位點(diǎn)，因此不能用BamHⅠ限制酶，只能用XhoⅠ限制酶對該基因進(jìn)行酶切。(3)據(jù)圖可知，載體和GDNF基因的長度分別是6000bp和700bp，當(dāng)載體自連時有XhoⅠ限制酶和HpaⅠ限制酶酶切位點(diǎn)，當(dāng)選擇HpaⅠ限制酶和BamHⅠ限制酶進(jìn)行雙酶切時，只能得到一段長度為6000bp的條帶，對應(yīng)第①泳道；當(dāng)正向連接時限制酶的酶切位點(diǎn)依次為HpaⅠ－XhoⅠ－BamHⅠ－XhoⅠ，它們之間的距離分別為100bp、600bp、100bp，當(dāng)選擇HpaⅠ限制酶和BamHⅠ限制酶進(jìn)行雙酶切時，會產(chǎn)生一段長度為100bp＋600bp(即700bp)的條帶，對應(yīng)②泳道；當(dāng)反向連接時限制酶的酶切位點(diǎn)依次為HpaⅠ－XhoⅠ－BamHⅠ－XhoⅠ，它們之間的距離分別為100bp、100bp、600bp，當(dāng)選擇HpaⅠ限制酶和BamHⅠ限制酶進(jìn)行雙酶切時，會產(chǎn)生一段長度為100bp＋100bp(即200bp)的條帶，對應(yīng)第③泳道。(4)為了檢測目的基因(GDNF基因)是否成功表達(dá)，可采取抗原—抗體雜交技術(shù)。動物細(xì)胞具有貼壁生長和接觸抑制的特點(diǎn)，所以當(dāng)培養(yǎng)的細(xì)胞達(dá)到一定密度時，應(yīng)采取傳代培養(yǎng)以獲得更多數(shù)量的細(xì)胞。限時規(guī)范特訓(xùn)1．(2018·廣東深圳高中模擬)利用相關(guān)工程技術(shù)可以獲得抗黑腐病雜種黑芥—花椰菜植株，已知野生黑芥具有黑腐病的抗性基因，而花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病，技術(shù)人員用一定劑量的紫外線處理黑芥原生質(zhì)體可使其染色體片段化，并喪失再生能力，再利用此原生質(zhì)體作為部分遺傳物質(zhì)的供體與完整的花椰菜原生質(zhì)體融合，流程如下圖。據(jù)圖回答下列問題：(1)該過程用到的工程技術(shù)有________________和________________。(2)過程①所需的酶是________________，過程②PEG的作用是________________，經(jīng)過②操作后，需篩選出融合的雜種細(xì)胞，顯微鏡下觀察融合的活細(xì)胞中有供體的葉綠體存在可作為初步篩選雜種細(xì)胞的標(biāo)志。(3)原生質(zhì)體培養(yǎng)液中需要加入適宜濃度的甘露醇以保持一定的滲透壓，其作用是________________。原生質(zhì)體經(jīng)過細(xì)胞壁再生，進(jìn)而分裂和脫分化形成________。(4)若分析再生植株的染色體變異類型，應(yīng)剪取再生植株和雙親植株的根尖，制成裝片，然后在顯微鏡下觀察比較染色體的________；將雜種植株栽培在含有________的環(huán)境中，可篩選出具有高抗性的雜種植株。答案(1)植物體細(xì)胞雜交植物組織培養(yǎng)(2)纖維素酶和果膠酶促進(jìn)原生質(zhì)體的融合(3)保持原生質(zhì)體完整性愈傷組織(4)形態(tài)和數(shù)目黑腐病菌解析(1)圖中先去掉兩種植物細(xì)胞的細(xì)胞壁，然后誘導(dǎo)融合獲得雜種細(xì)胞，再通過植物組織培養(yǎng)獲得雜種植株，該過程是植物體細(xì)胞雜交。(2)植物細(xì)胞壁的主要成分是纖維素和果膠，根據(jù)酶的專一性原理，可采用纖維素酶和果膠酶去掉植物細(xì)胞的細(xì)胞壁；聚乙二醇(PEG)的作用是促進(jìn)原生質(zhì)體融合。(3)去掉細(xì)胞壁后獲得的原生質(zhì)體需要放在適宜濃度的甘露醇溶液中，保持原生質(zhì)體完整性，避免失水或吸水造成細(xì)胞損傷；在植物組織培養(yǎng)中，經(jīng)過脫分化后形成愈傷組織。(4)由于染色體在顯微鏡下能看見，因此可以制作臨時裝片，觀察染色體的形態(tài)和數(shù)目，以確定是否發(fā)生染色體變異；對雜種植物進(jìn)行鑒定最簡單的方法是從個體水平上進(jìn)行檢測，即接種黑腐病菌，觀察植物的性狀。2．(2017·江西上高二中周練)藍(lán)莓中富含的花青素能有效地改善視力，下面為科學(xué)家利用植物組織培養(yǎng)的方法，大量培養(yǎng)藍(lán)莓具體流程的文字圖解。請回答下列問題：藍(lán)莓組織eq\o(→,\s\up17(①))愈傷組織eq\o(→,\s\up17(②))長出叢芽eq\o(→,\s\up17(③))生根eq\o(→,\s\up17(④))移栽成活(1)用于離體培養(yǎng)的藍(lán)莓組織叫做________，該技術(shù)的原理是________。(2)配制MS培養(yǎng)基時，應(yīng)加入一定量的瓊脂、蔗糖、無機(jī)鹽、維生素、有機(jī)物等營養(yǎng)物質(zhì)，蔗糖除作為碳源外，還具有__________________的功能。常用的培養(yǎng)基有脫分化培養(yǎng)基、生根培養(yǎng)基和生芽培養(yǎng)基，這三種培養(yǎng)基的主要差異是_________________________________________________。(3)圖中藍(lán)莓組織要經(jīng)過消毒處理后才能進(jìn)行培養(yǎng)。其①過程中，細(xì)胞的分化程度為________(選填“升高”“降低”或“不變”)。(4)愈傷組織經(jīng)過②③過程重新分化成根或叢芽的過程叫________。(5)藍(lán)莓花青素在60℃以下的熱穩(wěn)定性較好，將含花青素的粗品經(jīng)真空干燥(可使水的沸點(diǎn)降低40℃原因是_________________________________________。答案(1)外植體植物細(xì)胞具有全能性(2)提供能量和維持滲透壓生長素和細(xì)胞分裂素的用量及比例不同(3)降低(4)再分化(5)避免(干燥時溫度過高導(dǎo)致)花青素分解解析(1)植物組織培養(yǎng)的原理是植物細(xì)胞具有全能性，用于離體培養(yǎng)的組織叫做外植體。(2)配制MS培養(yǎng)基時，應(yīng)加入一定量的瓊脂、蔗糖、無機(jī)鹽、維生素、有機(jī)物等營養(yǎng)物質(zhì)，蔗糖除作為碳源外，還具有提供能量和維持滲透壓的功能。常用的培養(yǎng)基有脫分化培養(yǎng)基、生根培養(yǎng)基和生芽培養(yǎng)基，這三種培養(yǎng)基的主要差異是生長素和細(xì)胞分裂素的用量及比例不同。(3)圖中①過程是脫分化形成愈傷組織的過程，高度分化的細(xì)胞恢復(fù)分裂能力，則分化程度降低。(4)圖中②③過程是愈傷組織經(jīng)過再分化形成叢芽或根的過程。(5)含花青素的粗品經(jīng)真空干燥(可使水的沸點(diǎn)降至40℃)制成成品，采用該方法的主要原因是避免(干燥時溫度過高導(dǎo)致)3．(2017·黑龍江大慶一中高三段考)如圖表示高等動、植物細(xì)胞融合的部分過程，請據(jù)圖回答：(1)若圖表示植物體細(xì)胞雜交的部分過程，欲將丁細(xì)胞培育成植株，可選用________技術(shù)，這一技術(shù)的兩個關(guān)鍵步驟是________和________。(2)若圖表示制備單克隆抗體的部分過程，甲細(xì)胞為小鼠的骨髓瘤細(xì)胞，則乙細(xì)胞為________________。在分離乙細(xì)胞之前，應(yīng)對小鼠進(jìn)行的處理是____________________。過程①區(qū)別于植物細(xì)胞常用的誘導(dǎo)劑是______________，篩選得到的丁細(xì)胞還需進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，經(jīng)多次篩選，就可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細(xì)胞。該制備過程涉及到的生物技術(shù)有_______________。答案(1)植物組織培養(yǎng)脫分化再分化(2)B淋巴細(xì)胞(漿細(xì)胞)將抗原注射入小鼠體內(nèi)滅活的病毒動物細(xì)胞融合技術(shù)、動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)解析(1)要將雜種細(xì)胞培育成雜種植株，需采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，該技術(shù)包括脫分化和再分化兩個關(guān)鍵步驟。(2)若圖表示制備單克隆抗體的部分過程，甲細(xì)胞為小鼠的骨髓瘤細(xì)胞，則乙細(xì)胞為相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞。在分離B淋巴細(xì)胞之前，需將抗原注射入小鼠體內(nèi)。過程①為誘導(dǎo)細(xì)胞融合的過程，對于植物細(xì)胞可采用物理法(離心、振動、電激)和化學(xué)法(聚乙二醇)，對于動物細(xì)胞還可以采用生物法(滅活的病毒)。篩選得到的雜交瘤細(xì)胞還需進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，經(jīng)多次篩選，就可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細(xì)胞。該制備過程涉及到動物細(xì)胞融合技術(shù)、動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。4．(2017·江西上饒玉山一中高三月考)回答下列問題：如圖所示為動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，動物細(xì)胞增殖情況的變化曲線(圖中B、D兩點(diǎn)表示經(jīng)篩選后繼續(xù)培養(yǎng))，請據(jù)圖回答下面的問題：(1)OA段的培養(yǎng)稱為________培養(yǎng)，AB段可能發(fā)生了________現(xiàn)象，需要用________酶處理，以使組織細(xì)胞分散開來。(2)為制備單克隆抗體，需將________注射到小鼠體內(nèi)，以此獲取________細(xì)胞，同時可選取圖中________點(diǎn)的細(xì)胞與該細(xì)胞融合形成雜交細(xì)胞，所選取細(xì)胞的細(xì)胞膜上的________比正常細(xì)胞顯著減少。(3)為篩選出能夠產(chǎn)生單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞，可用________培養(yǎng)基達(dá)到目的。雜交瘤細(xì)胞具有__________________________的特點(diǎn)。答案(1)原代接觸抑制胰蛋白(2)抗原相應(yīng)的B淋巴D糖蛋白(3)選擇既能無限增殖，又能分泌特異性抗體解析(1)人們通常將動物組織消化后的初次培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)，分瓶后的培養(yǎng)稱為傳代培養(yǎng)；當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到表面相互接觸時，細(xì)胞就會停止分裂增殖，即會發(fā)生接觸抑制現(xiàn)象，用胰蛋白酶可使組織細(xì)胞分散開來。(2)為制備單克隆抗體，需將特定抗原注射到小鼠體內(nèi)，以此獲取分泌特定抗體的B淋巴細(xì)胞，同時可選取圖中D點(diǎn)的細(xì)胞與該細(xì)胞融合形成雜交細(xì)胞，因?yàn)樵擖c(diǎn)部分細(xì)胞已癌變，形成的雜交瘤細(xì)胞既能無限增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體，其細(xì)胞膜上的糖蛋白比正常細(xì)胞顯著減少。(3)為篩選出能夠產(chǎn)生單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞，可用選擇培養(yǎng)基達(dá)到目的。雜交瘤細(xì)胞具有既能無限增殖，又能分泌特異性抗體的特點(diǎn)。5．(2018·江西贛州崇義中學(xué)月考)早早孕試紙是人們設(shè)計出來的一種方便女性檢測自己是否懷孕的產(chǎn)品。人絨毛膜促性腺激素(HCG)是由受孕婦女體內(nèi)胎盤產(chǎn)生的一種糖蛋白類激素，在孕婦的尿液中大量存在，而非妊娠孕婦尿液中幾乎不含有該激素。膠體金法早早孕檢測試紙采用雙抗體夾心法原理，以膠體金為指示標(biāo)記制作而成。其測定和判斷方法如圖：注：MAX線處含有鼠源性HCG單抗和膠體金，T線處含羊抗HCG的抗體，C線處含有羊抗鼠多克隆抗體。(1)HCG在胎盤細(xì)胞的________合成，然后在________上進(jìn)一步合成加工，最后經(jīng)________進(jìn)一步的修飾加工然后分泌到細(xì)胞外。(2)MAX線處包埋的鼠源性HCG單克隆抗體是由________細(xì)胞產(chǎn)生的，由于單克隆抗體具有________、________的特點(diǎn)，所以能準(zhǔn)確地識別各種抗原物質(zhì)的細(xì)微差異，并跟一定抗原發(fā)生特異性結(jié)合。(3)制備鼠源性HCG單克隆抗體的過程中，可能運(yùn)用到了________和動物細(xì)胞培養(yǎng)等技術(shù)，其中后者需要置于95%空氣加5%的CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)，CO2的作用是________。答案(1)核糖體內(nèi)質(zhì)網(wǎng)高爾基體(2)雜交瘤純度高特異性強(qiáng)(靈敏度高)(3)動物細(xì)胞融合技術(shù)維持培養(yǎng)液的pH值解析(1)人絨毛膜促性腺激素(HCG)是由受孕婦女體內(nèi)胎盤產(chǎn)生的一種糖蛋白類激素，是在胎盤細(xì)胞的核糖體合成，然后在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上進(jìn)一步合成加工，最后經(jīng)高爾基體進(jìn)一步的修飾加工然后分泌到細(xì)胞外。(2)MAX線處包埋的鼠源性HCG單克隆抗體是由雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的，由于單克隆抗體具有純度高、特異性強(qiáng)(靈敏度高)的特點(diǎn)，所以能準(zhǔn)確地識別各種抗原物質(zhì)的細(xì)微差異，并跟一定抗原發(fā)生特異性結(jié)合。(3)制備鼠源性HCG單克隆抗體的過程中，可能運(yùn)用到了動物細(xì)胞融合技術(shù)和動物細(xì)胞培養(yǎng)等技術(shù)，其中后者需要置于95%空氣加5%的CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)，CO2的作用是維持培養(yǎng)液的pH值。6．(2017·山東泰安一模)克隆良種豬成功率較低，該現(xiàn)象與早期胚胎細(xì)胞的異常凋亡有關(guān)。Bcl-2基因是細(xì)胞凋亡抑制基因，用PCR技術(shù)可檢測出該基因的轉(zhuǎn)錄水平，進(jìn)而了解該基因與不同胚胎時期細(xì)胞凋亡的關(guān)系?？寺∝i的培育及該基因轉(zhuǎn)錄水平檢測流程如圖，圖中a、b、c、d分別代表流程中某過程，請回答：(1)圖中重組細(xì)胞的細(xì)胞核來自________細(xì)胞。a過程采用的技術(shù)手段稱做________技術(shù)。(2)b過程所用的培養(yǎng)液與植物組織的培養(yǎng)基從成分上主要區(qū)別是前者必須含有________；c過程表示________。(3)d過程需要________酶的催化，從基因組數(shù)據(jù)庫中查詢Bcl-2mRNA的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列設(shè)計合成2種________用于PCR擴(kuò)增，除此以外在PCR反應(yīng)體系中還應(yīng)包含的主要成分有擴(kuò)增緩沖液、水、4種脫氧核苷酸、模板DNA以及__________________，PCR擴(kuò)增過程第一輪循環(huán)的模板是________________。(4)若cDNA經(jīng)PCR技術(shù)n次擴(kuò)增后檢測出其中Bcl-2cDNA的分子數(shù)為m，則總mRNA中的Bcl-2mRNA的分子數(shù)比例為________，從而說明不同胚胎時期Bcl-2基因的轉(zhuǎn)錄水平及其與細(xì)胞凋亡的關(guān)系。答案(1)良種豬的體體細(xì)胞核移植(2)動物(豬)血清胚胎移植(3)逆轉(zhuǎn)錄引物Taq酶(熱穩(wěn)定DNA聚合酶)Bcl-2cDNA(4)eq\f(m,2n)解析(1)圖中a過程采用的技術(shù)手段是體細(xì)胞核移植技術(shù)，即把良種豬的體細(xì)胞的細(xì)胞核移入去核的卵母細(xì)胞中，構(gòu)建一個新的重組細(xì)胞。(2)動物細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)液不同于植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基，主要區(qū)別是動物細(xì)胞培養(yǎng)液中需要加入動物血清等天然成分，c表示胚胎移植過程。(3)由以上分析可知d表示逆轉(zhuǎn)錄過程。PCR技術(shù)需要2種引物，此時PCR擴(kuò)增技術(shù)是在高溫條件下進(jìn)行的，還需要熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq酶)。擴(kuò)增第一輪循環(huán)的模板是Bcl-2cDNA。(4)cDNA是由mRNA逆轉(zhuǎn)錄形成的，1個cDNA經(jīng)PCR技術(shù)n次擴(kuò)增后可形成2n個子代DNA分子，轉(zhuǎn)錄是以DNA分子的一條鏈為模板合成RNA的過程，因此總的mRNA的數(shù)目也為2n，若檢測出其中Bcl-2cDNA的分子數(shù)為m，則Bcl-2mRNA的分子數(shù)也為m，總mRNA中的Bcl-2mRNA的分子數(shù)比例為eq