藥物的鑒別、檢查和含量測定-藥物分析

第二章藥物的鑒別、檢查和含量測定藥物的鑒別第一節(jié)鑒別試驗概述第二節(jié)鑒別試驗的項目第三節(jié)鑒別試驗的方法藥物的鑒別一、定義和對象依據(jù)藥物的分子結(jié)構(gòu)和理化性質(zhì)采用規(guī)定的試驗方法(化學(xué)、物理化學(xué)或生物學(xué)方法)判斷藥物真?zhèn)蔚倪^程化學(xué)結(jié)構(gòu)已知的藥物,并非新化合物藥物的鑒別二、目的 ——證實貯藏在有標(biāo)簽容器中的藥物是否為其所標(biāo)示的藥物，并非結(jié)構(gòu)鑒定。即回答是不是？而非回答是什么？藥物的鑒別三、意義鑒別檢查含量測定檢驗報告取樣藥品質(zhì)量檢驗工作中的首項任務(wù)只有在藥物鑒別無誤的前提下，才能進(jìn)行雜質(zhì)檢查和含量測定。藥物的鑒別第一節(jié)鑒別試驗概述第二節(jié)鑒別試驗的項目第三節(jié)鑒別試驗的方法藥物的鑒別性狀一般鑒別試驗專屬鑒別試驗藥物的鑒別性狀一般鑒別：區(qū)分藥物的類別專屬鑒別：區(qū)分個別的藥物(同類或相同母核)原料藥鑒別制劑鑒別鑒別項下規(guī)定的試驗藥物的鑒別1.外觀2.溶解度3.物理常數(shù)（1）熔點；（2）比旋度；（3）吸收系數(shù)一、性狀藥物的鑒別1.外觀

—— 藥品本身固有的聚集狀態(tài)、晶形、色、臭、味 聚集形態(tài)、顏色——感覺(指)，視覺(眼)

臭——嗅覺(鼻)

味——味覺(口)一、性狀Ch.P.(2015年版)維生素B1（原料藥）的描述為“本品為白色結(jié)晶或結(jié)晶性粉末；有微弱的特臭，味苦；干燥品在空氣中迅即吸收約4%的水分”。鏈霉素片（制劑）的描述為“本品為糖衣片或薄膜衣片，除去包衣后，顯白色至微帶黃綠色”。藥物的鑒別一、性狀2.溶解度極易溶解系指溶質(zhì)1g(ml)能在溶劑不到1ml中溶解;易溶系指溶質(zhì)1g(ml)能在溶劑1~不到10ml中溶解;溶解系指溶質(zhì)1g(ml)能在溶劑10~不到30ml中溶解;

略溶系指溶質(zhì)1g(ml)能在溶劑30~不到100ml中溶解;微溶系指溶質(zhì)1g(ml)能在溶劑100~不到1000ml中溶解;極微溶解系指溶質(zhì)1g(ml)能在劑1000~不到10000ml中溶解;幾乎不溶或不溶系指溶質(zhì)1g(ml)能在溶劑10000ml中不能完全溶解。藥品的一種物理性質(zhì)，是指藥品在溶劑中的溶解能力，一定程度上反映了藥品的純度。藥物的鑒別一、性狀3.物理常數(shù)熔點、吸收系數(shù)、比旋度等10余項熔點固體熔化成液體的溫度熔融同時分解的溫度

自初熔至全熔的一段溫度熔點藥物的鑒別比旋度：在一定波長與溫度下，偏振光透過長1dm且每1ml中含有旋光性物質(zhì)1g的溶液時測得的旋光度。用表示。應(yīng)用：鑒別藥物檢查純度含量測定(制劑)e.g.Vc+20.5

～21.5

一、性狀3.物理常數(shù)藥物的鑒別吸收系數(shù)：在給定的波長、溶劑和溫度等條件下，吸光物質(zhì)在單位濃度、單位液層厚度時的吸收度稱為吸收系數(shù)。 摩爾(

)與百分吸收系數(shù)()。 中國藥典用：應(yīng)用：鑒別藥物檢查純度含量測定(制劑)e.g.鹽酸氨溴索：233-247第三章藥物的鑒別試驗-項目一、性狀3.物理常數(shù)二、一般鑒別試驗

依據(jù)某一類藥物的化學(xué)結(jié)構(gòu)或理化性質(zhì)的特征，通過鑒別試驗來鑒別藥物的真?zhèn)巍?/p>

區(qū)別不同類別的藥物，而不能證實是哪一種藥物。藥物的鑒別常見一般鑒別試驗二、一般鑒別試驗丙二酰脲類托烷生物堿類芳香第一胺類有機氟化物類有機酸鹽無機金屬鹽類無機酸鹽藥物的鑒別藥物的鑒別水楊酸鹽鑒別方法一：取供試品的稀溶液，加三氯化鐵試液1滴，即顯紫色。反應(yīng)原理：本品在中性或弱酸性條件下，與三氯化鐵試液生成配位化合物，在中性時呈紅色，弱酸性時呈紫色。鑒別方法二：取供試品溶液，加稀鹽酸，即析出白色水楊酸沉淀；分離，沉淀在醋酸銨試液中溶解。二、一般鑒別試驗藥物的鑒別三、專屬鑒別試驗是證實某一種藥物的依據(jù)，根據(jù)每一種藥物化學(xué)結(jié)構(gòu)的差異及其所引起的物理化學(xué)特性不同，選擇某些特有的靈敏的定性反應(yīng)來鑒別藥物。在一般鑒別試驗的基礎(chǔ)上，區(qū)別同類藥物的各個單體。藥物的鑒別三、專屬鑒別試驗苯巴比妥巴比妥司可巴比妥苯佐卡因藥物的鑒別顯微粉末鑒別技術(shù)圖3人參（Ginseng

根）粉末12435圖2樹脂道圖1

人參(Panaxginseng

根)橫切面三、專屬鑒別試驗藥物的鑒別薄層色譜鑒別技術(shù)應(yīng)用味連雅連云連CoptisChinesesisFrach.(味連）CoptisdeltoideaC.Y.Hsiao(雅連）CoptisteetaWall.(云連）三、專屬鑒別試驗1234藥物的鑒別北五味子與南五味子的薄層色譜鑒別北五味子SchisandriaechinesesFructus南五味子SchisandriaechinesesFructusReferenceg-schisandrin（五味子乙素）Schizandrin（五味子甲素）Schisantherin(GomisinC)(五味子酯甲）Schisandrin(五味子醇甲）三、專屬鑒別試驗藥物的鑒別烏梢蛇PCR分子鑒定10個不同批次的烏梢蛇藥材PCR鑒別結(jié)果1.陽性對照2-11.烏梢蛇12.陰性對照13.空白烏梢蛇藥材及其混淆品PCR鑒別結(jié)果陽性對照2.烏梢蛇3.虎斑頸槽蛇4.三索錦蛇5.雙全白花蛇6.灰鼠蛇7.滑鼠蛇8.紅點錦蛇9.王錦蛇10.赤鏈華游蛇11.中國水蛇12.短吻蝮蛇13.百花錦蛇14.眼鏡蛇15.赤練蛇16.鉛色水蛇17.金環(huán)蛇18.山烙鐵頭蛇19.黑眉錦蛇20.環(huán)紋華游蛇21.蘄蛇22.金錢白花蛇23.陰性對照24.空白烏梢蛇三、專屬鑒別試驗藥物的鑒別第一節(jié)鑒別試驗概述第二節(jié)鑒別試驗的項目第三節(jié)鑒別試驗的方法藥物的鑒別一、要求專屬性強，耐用性好，靈敏度高，操作簡便、快速。常用方法：化學(xué)法、光譜法、色譜法和生物學(xué)法。中藥材鑒別方法：顯微鑒別法和特征圖譜或指紋圖譜鑒別法。制劑的鑒別：盡可能與原料藥相同；必須：排除輔料干擾；多組分或微量成分，須用更靈敏、專屬的方法。特殊性質(zhì)：采用特定方法。如手性、晶型等。藥物的鑒別(一)化學(xué)鑒別法(二)光譜鑒別法(三)色譜鑒別法二、方法藥物的鑒別二、方法將供試品直接加熱或加適當(dāng)試劑在規(guī)定的溫度下進(jìn)行實驗，觀測此時所發(fā)生的特異現(xiàn)象。1.干法（一）化學(xué)鑒別法藥物的鑒別二、方法（一）化學(xué)鑒別法-干法鉑絲用鹽酸濕潤后，蘸取供試品，在無色火焰中燃燒，使火焰顯出特殊的顏色。例1鈉的焰色實驗例2含碘有機藥物

直火加熱可生成紫色碘蒸氣。藥物的鑒別二、方法（一）化學(xué)鑒別法-干法

例3適當(dāng)溫度下加熱供試品，生成特殊氣味的氣體。舒林酸藥物的鑒別二、方法（一）化學(xué)鑒別法將供試品和試劑在適當(dāng)?shù)娜軇┲?，于一定條件下進(jìn)行反應(yīng)，發(fā)生易于觀測的化學(xué)變化。2.濕法藥物的鑒別二、方法（一）化學(xué)鑒別法-濕法(1)呈色反應(yīng)鑒別法(2)沉淀生成反應(yīng)鑒別法(3)熒光反應(yīng)鑒別法(5)使試劑褪色鑒別法(6)測定生成物的熔點(4)氣體生成鑒別法藥物的鑒別二、方法（一）化學(xué)鑒別法-濕法

三氯化鐵呈色反應(yīng)

對乙酰氨基酚(1)呈色反應(yīng)鑒別法藥物的鑒別二、方法（一）化學(xué)鑒別法-濕法(2)沉淀生成反應(yīng)鑒別法①與金屬離子的沉淀反應(yīng)②與碘化鉍鉀的沉淀反應(yīng)③其它沉淀反應(yīng)如:

巴比妥的銀鹽反應(yīng)異煙肼的銀鏡反應(yīng)生物堿的碘化鉍鉀反應(yīng)藥物的鑒別二、方法（一）化學(xué)鑒別法-濕法(3)氣體生成反應(yīng)鑒別法大多數(shù)伯胺（銨）類藥物、酰脲類以及某些酰胺類藥物,可經(jīng)強堿處理后加熱產(chǎn)生氨氣.巴比妥類藥物藥物的鑒別二、方法（一）化學(xué)鑒別法-濕法(3)氣體生成反應(yīng)鑒別法大多數(shù)伯胺（銨）類藥物、酰脲類以及某些酰胺類藥物,可經(jīng)強堿處理后加熱產(chǎn)生氨氣.巴比妥類藥物藥物的鑒別二、方法（一）化學(xué)鑒別法-濕法①藥物本身在可見光下發(fā)射熒光②藥物溶液+硫酸③藥物溶液+溴④藥物溶液+間苯二酚⑤藥物經(jīng)其它反應(yīng)后發(fā)射熒光(4)熒光反應(yīng)鑒別法藥物的鑒別二、方法（一）化學(xué)鑒別法-濕法(5)使試劑褪色鑒別法如: 維生素C與二氯靛酚反應(yīng)使褪色藥物的鑒別二、方法（一）化學(xué)鑒別法-濕法(6)測定生成物的熔點-較少應(yīng)用如:

阿司匹林水解、酸化后析出水楊酸 熔點:156~161℃

異煙肼與香草醛乙醇溶液生成腙 熔點：228~231℃藥物的鑒別二、方法(二)光譜鑒別法1.紫外光譜鑒別法2.紅外光譜鑒別法3.x-射線衍射4.近紅外光譜法5.原子吸收法6.核磁共振法藥物的鑒別二、方法(二)光譜鑒別法1.圖譜2.λmaxA2.λminA3.峰、谷的個數(shù)4.A1/A21.紫外光譜鑒別法藥物的鑒別

本品8μg/ml的鹽酸溶液(9→100≈0.1mol/L)， 最大吸收波長286nm，吸光度約為0.57， 最小吸收波長244nm。

二、方法(二)光譜鑒別法-UV氟胞嘧啶紫外光譜鑒別藥物的鑒別溶液:0.4%氫氧化鈉溶液,0.25mg/ml;要求:1.265與273nm處有最大吸收

2.245與271nm處有最小吸收

3.259nm處有一肩峰示例1:

布洛芬的鑒別二、方法(二)光譜鑒別法-UV藥物的鑒別溶液:無水乙醇溶液 (1)0.10mg/ml (2)10μg/ml要求:溶液(1)在280與288nm處有最大吸收 溶液(2)在226nm處有最大吸收示例2:氯貝丁酯的鑒別二、方法(二)光譜鑒別法-UV藥物的鑒別溶液(1)——高濃度λmax=226nmλmax=280與288nm溶液(2)——低濃度二、方法(二)光譜鑒別法-UV藥物的鑒別溶液:0.01mol/L鹽酸溶液,0.4mg/ml;要求:1.263與271nm處有最大吸收

2.吸光度分別為0.53~0.58與0.43~0.48示例3:

鹽酸布比卡因的鑒別二、方法(二)光譜鑒別法-UV藥物的鑒別溶液:甲醇溶液,5μg/ml;要求:1.262,381與405nm處有最大吸收

2.362與381nm處的吸光度比值0.6 3.381與405nm處的吸光度比值0.9 示例4:

兩性霉素B的鑒別二、方法(二)光譜鑒別法-UV藥物的鑒別二、方法(二)光譜鑒別法2.紅外光譜鑒別法Ch.P.采用標(biāo)準(zhǔn)圖譜對照法BP采用標(biāo)準(zhǔn)圖譜對照法USP采用對照品法JP規(guī)定條件下測定一定波長處特征吸收峰藥物的鑒別氯羥去甲安定紅外光譜鑒別氯羥去甲安定的測定：“取本品，經(jīng)干燥后用溴化鉀壓片法測定其紅外光吸收圖譜中3440cm-1，3220cm-1，1695cm-1，1614cm-1，1324cm-1，1132cm-1以及828cm-1波數(shù)附近處有吸收”。藥物的鑒別二、方法(三)色譜鑒別法

利用不同物質(zhì)在不同色譜條件下,產(chǎn)生各自的特征色譜行為(比移值或保留時間)進(jìn)行的鑒別試驗。藥物的鑒別適用于復(fù)雜環(huán)境下藥物有效成分及雜質(zhì)鑒別，具有分離、分析同時進(jìn)行的特點 常用方法:TLC ——應(yīng)用較廣HPLC GC MS ——目前應(yīng)用較少——多與含量測定同時應(yīng)用二、方法(三)色譜鑒別法藥物的鑒別二、方法(三)色譜鑒別法-TLC法（1）對照品比較法

供試品斑點與對照品的Rf值及斑點的顏色應(yīng)一致。s

r藥物的鑒別二、方法(三)色譜鑒別法-TLC法(2)供試品與對照品混合法

應(yīng)顯示單一、緊密的斑點?；?/p>

藥物的鑒別二、方法(三)色譜鑒別法-TLC法(3)供試品與結(jié)構(gòu)相似的藥物對照品混合

二者Rf不同。應(yīng)顯示兩個清晰分離的斑點。

sR藥物的鑒別二、方法(三)色譜鑒別法-TLC法(4)(3)項下兩種溶液等體積混合

應(yīng)顯示兩個清晰分離的斑點s

R藥物的鑒別二、方法(三)色譜鑒別法-TLC法1234藥物的鑒別二、方法(三)色譜鑒別法-HPLC/GC法對照品比較法

——供試品色譜峰與對照品色譜峰的tR，

tR’值一致藥物的鑒別HPLC法鑒別藥物的鑒別中藥的指紋圖譜/特征圖譜鑒別法特定條件下的全部相關(guān)成分圖譜/特定條件下主要已知成分的圖譜1：NotoginsenosideR1;2～11：GinsenosideRg1,Re,Rf,Rb1,Rg2,Rc,Rb2,Rb3,RdandRg3藥物的鑒別顯微鑒別法靈芝孢子的電鏡掃描照片靈芝破壁孢子的電鏡掃描照片Electronscanningmicroscope中藥(原藥)——利用顯微鏡觀察組織構(gòu)造及細(xì)胞內(nèi)含物進(jìn)行鑒別方法藥物的鑒別

澤瀉內(nèi)皮層細(xì)胞牡丹皮草酸鈣簇晶茯苓菌絲

山藥淀粉粒山茱萸果皮表皮細(xì)胞地黃薄壁組織六味地黃丸中藥材的顯微特征圖藥物的鑒別鑒別法選用的基本原則①方法要有一定的專屬性、靈敏性、且便于推廣。②化學(xué)法和儀器法相結(jié)合，每種藥品一般選用2~4種方法進(jìn)行鑒別試驗，相互取長補短。③盡可能采用藥典中收載的方法。藥物的鑒別例1-1.維生素C的鑒別：（2）在維生素C的分子中具有烯二醇的結(jié)構(gòu)，這個結(jié)構(gòu)具有很強的還原性,可以和一些氧化劑作用.（1）分子中具有2個手性C原子,具有旋光性.藥典中規(guī)定：維生素C的比旋度應(yīng)為+20.5

+21.5

（3）紅外光譜與對照圖譜一致.例1.維生素C片的鑒別：（1）取本品細(xì)粉適量（約相當(dāng)于維生素C0.2g)加水10ml，振搖使維生素C溶解，濾過，濾液分成二等份，在一份中加硝酸銀試液0.5ml，即生成銀的黑色沉淀；在另一份中，加二氯靛酚鈉試液1~2滴，試液的顏色即消失。（2）取本品細(xì)粉適量（約相當(dāng)于維生素C10mg），加水10ml，振搖使維生素C溶解，濾過，取濾液作為供試品溶液；另取維生素C對照品，加水溶解并稀釋制成lml中約含lmg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液2μl，分別點于同一硅膠GF254薄層板上，以乙酸乙酯-乙醇-水（5:4:1）為展開劑，展開，晾干，立即（1小時內(nèi)）置紫外光燈（254nm）下檢視。供試品溶液所顯主斑點的位置和顏色應(yīng)與對照品溶液的主斑點相同。（1）采用化學(xué)鑒別法對復(fù)方制劑中左炔諾酮進(jìn)行鑒別，三硝基苯酚在堿性條件下與左炔諾酮結(jié)構(gòu)中的α,β-不飽和酮發(fā)生反應(yīng)。（2）由于本品中炔諾酮是左旋體，因此采用旋光度測定法，對左炔諾酮進(jìn)行鑒別。（3）采用TLC法，以左炔諾孕酮和炔雌醇為對照，根據(jù)甾體激素能與硫酸反應(yīng)的性質(zhì)，采用硫酸作為顯色劑，對復(fù)方制劑中2個藥效成分分別進(jìn)行鑒別。（4）采用HPLC法，以左炔諾孕酮和炔雌醇為對照，以保留時間為指標(biāo)，對復(fù)方制劑中2個藥效成分分別進(jìn)行鑒別。鑒別原理例2：復(fù)方左炔諾孕酮片的全檢驗（3）、（4）兩項可選做一項（1）取本品5片，研細(xì)，加三氯甲烷10ml充分?jǐn)嚢韬螅瑸V過，取濾液2ml，加堿性三硝基苯酚溶液（取0.6%三硝基苯酚乙醇溶液、7%氫氧化鈉溶液與稀乙醇，臨用前等量混合）2ml，放置30min后，溶液呈棕黃色。鑒別方法例2：復(fù)方左炔諾孕酮片的全檢驗（2）取本品細(xì)粉適量（約相當(dāng)于左炔諾孕酮15mg)，分次加三氯甲烷約200ml，充分?jǐn)嚢韬?，用G4垂熔漏斗減壓濾過，用三氯甲烷洗滌濾渣與濾器，合并濾液，置水浴上蒸干，放冷,精密加三氯甲烷2ml，用1dm的微量旋光管依法測定，應(yīng)為左旋，并不得低于0.18°。鑒別方法例2：復(fù)方左炔諾孕酮片的全檢驗（3）取本品5片，研細(xì)，加三氯甲烷10ml，充分?jǐn)嚢韬?，濾過，濾液蒸干，精密加三氯甲烷1ml使左炔諾孕酮與炔雌醇溶解，作為供試品溶液；另取左炔諾孕酮與炔雌醇對照品，加三氯甲烷溶解并稀釋制成每1ml中約含左炔諾孕酮0.75mg與炔雌醇0.15mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各30W，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇（9:1）為展開劑，展開，晾干，噴以硫酸-無水乙醇（1:1）混合液，在105℃加熱使顯色。供試品溶液所顯兩個成分的主斑點的位置和顏色應(yīng)與對照品溶液相應(yīng)的主斑點相同。鑒別方法例2：復(fù)方左炔諾孕酮片的全檢驗（4）在含量測定項下記錄的色譜圖中，供試品溶液兩主峰的保留時間應(yīng)與對照品溶液相應(yīng)兩主峰的保留時間一致。以上（3）、（4）兩項可選做一項。鑒別方法例2：復(fù)方左炔諾孕酮片的全檢驗習(xí)題1.藥物的鑒別試驗是鑒別（）的真?zhèn)?。A.未知藥物B.儲藏在標(biāo)簽容器中的藥物C.結(jié)構(gòu)不明確的藥物D.純度不明確的藥物2.水楊酸鹽反應(yīng)是基于藥物分子結(jié)構(gòu)中的（）。A.酚羥基B.丙二酰脲環(huán)C.甲基D.含氮雜環(huán)3.丙二酰脲反應(yīng)在（）條件下進(jìn)行。A.中性B.酸性C.堿性D.弱酸性4.經(jīng)強酸處理后加熱產(chǎn)生硫化氫氣體的是（）類藥物的特征。A.胺類藥物B.芳酸類C.維生素類D.含硫藥物5.在其他成分存在的情況下，該鑒別方法能否正確鑒別出目標(biāo)藥物特性是指方法的（）。A.靈敏度B.定量限C.專屬性D.耐用性6.紫外光譜的橫坐標(biāo)是（）。A.吸光度B.吸收系數(shù)C.波長D.吸光度比值7.中國/美國藥典采用紅外光譜法鑒別藥物時采用（）/（）。A.最大吸收波長對照法B.對照品對照法C.吸收度比值法D.標(biāo)準(zhǔn)圖譜對照法8.薄層色譜法的主要定性參數(shù)是（）。A.校正因子B.比移值C.保留時間D.半峰寬第二章藥物的鑒別、檢查和含量測定藥物的雜質(zhì)檢查主要內(nèi)容3藥物的雜質(zhì)檢查123藥物純度的概念與要求雜質(zhì)的來源與種類雜質(zhì)的限量檢查78第一節(jié)藥物的純度及要求1.藥物的純度（Purity）

——藥物純凈的程度

反映藥品質(zhì)量的一項重要指標(biāo)79藥物純度與試劑純度共同點：規(guī)定雜質(zhì)及其限量不同點：制訂純度要求的出發(fā)點不同80藥物純度(藥用規(guī)格)

——從用藥安全、有效和對藥物穩(wěn)定性等方面考慮,只有合格品和不合格品81化學(xué)試劑純度(試劑規(guī)格)——雜質(zhì)可能引起的化學(xué)變化對使用的影響，依據(jù)試劑的使用范圍和目的規(guī)定，不考慮雜質(zhì)的生理作用及毒副作用。

一般分為4個等級：基準(zhǔn)試劑、優(yōu)級純或特種試劑(光譜純、色譜純、農(nóng)藥殘留檢測級)、分析純和化學(xué)純。82化學(xué)試劑不能代替藥品使用83例如:硫酸鋇(BaSO4)

試劑規(guī)格對可溶性鋇鹽不做檢查檢查:氯化物、鐵、灼燒失重等藥用規(guī)格可溶性鋇鹽導(dǎo)致醫(yī)療事故檢查:可溶性鋇鹽、重金屬、砷鹽等藥物的純度評價DrugPurityEvaluation藥物的性狀理化性質(zhì)雜質(zhì)檢查

(純度檢查)

含量測定852.藥物的雜質(zhì)（Impurity）

——影響藥品純度的物質(zhì)稱為雜質(zhì)藥物中存在的：無治療作用

或影響藥物的穩(wěn)定性和療效

甚至對人體健康有害的物質(zhì)861)對人體有害的:如砷鹽和重金屬2)影響藥物穩(wěn)定性:如水分(青霉素鉀鹽)3)對人體無害也不影響藥物穩(wěn)定性:如,

指示性雜質(zhì)(信號雜質(zhì))Cl-、SO42-考核生產(chǎn)工藝和生產(chǎn)控制是否正常87(一)雜質(zhì)的來源生產(chǎn)過程中引入貯藏過程中產(chǎn)生第二節(jié)雜質(zhì)的來源與種類88原料藥——原料不純、反應(yīng)不完全，中間體或副產(chǎn)物等生產(chǎn)過程中引入配料反應(yīng)純化精制89(CH3CO)2OH++水楊酸苯酯乙酰水楊酸苯酯乙酰水楊酰水楊酸乙酰水楊酸酐醋酸苯酯生產(chǎn)過程中引入90制劑——在劑型制備過程中藥物降解產(chǎn)生新的雜質(zhì)生產(chǎn)過程中引入如,

腎上腺素注射液中檢查腎上腺素磺酸(抗氧劑——焦亞硫酸鈉)

鹽酸普魯卡因注射劑中檢查對氨基苯甲酸(水解)91藥物生產(chǎn)過程中常需要用到的試劑、溶劑藥物生產(chǎn)過程所用的金屬器皿、及其他不耐酸堿的金屬工具無效或低效異構(gòu)體或晶型天然植物提取中常含有結(jié)構(gòu)、性質(zhì)相近的物質(zhì),很難完全分離除去生產(chǎn)過程中引入92貯藏過程中產(chǎn)生

溫度、濕度、日光、空氣、微生物的作用下，藥物發(fā)生水解、氧化、分解、異構(gòu)化、晶型轉(zhuǎn)變、聚合、潮解和發(fā)霉等變化而產(chǎn)生雜質(zhì)。93如：利血平在日光和氧氣的作用下,氧化變質(zhì),光氧化產(chǎn)物無降壓作用再如：四環(huán)素在酸性條件下可發(fā)生差向異構(gòu)化反應(yīng),生成差向四環(huán)素(毒性高、活性低)貯藏過程中產(chǎn)生94(二)雜質(zhì)的種類按雜質(zhì)來源分類按雜質(zhì)結(jié)構(gòu)分類按雜質(zhì)性質(zhì)分類95(1)一般雜質(zhì)

——在自然界中分布廣泛,在多種藥物的生產(chǎn)或貯藏過程中容易引入的雜質(zhì)如:

氯化物、硫酸鹽、重金屬、砷鹽、硫化物、鐵鹽、易炭化物、水分、有機溶劑殘留量等按雜質(zhì)來源分為2類96(2)特殊雜質(zhì)

——特定的藥物在生產(chǎn)或貯藏過程中,根據(jù)藥物的性質(zhì)、生產(chǎn)工藝及條件,可能引入的雜質(zhì)特殊雜質(zhì)是多種多樣的如：阿司匹林——水楊酸對乙酰氨基酚——對氨基酚按雜質(zhì)來源分為2類97(1)無機雜質(zhì)——Cl-、SO42-

、S2-、CN-、砷鹽、重金屬等按雜質(zhì)理化性質(zhì)分為3類(2)有機雜質(zhì)——有機藥物中引入的原料、中間體、副產(chǎn)物、分解物、異構(gòu)體等(3)殘留溶劑——苯、氯仿等1~3類溶劑98(1)信號雜質(zhì)——一般無害，但其含量多少可反映藥物純度水平，指示生產(chǎn)工藝是否合理

如：氯化物、硫酸鹽等(2)有害雜質(zhì)——對人體有毒害的雜質(zhì)，在質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中嚴(yán)加控制，以保證用藥安全

如：重金屬、砷鹽、氰化物、氟化物等按雜質(zhì)性質(zhì)分為3類99(3)無效或低效雜質(zhì)

a.具有立體異構(gòu)體的藥物，其生物活性有很大差異如：腎上腺素為左旋體,其升壓作用是右旋體的12倍

b.

異構(gòu)體中，其順式體與反式體的生物活性也不相同如：VA以全反式的生物活性為最高按雜質(zhì)性質(zhì)分為3類100(3)無效或低效雜質(zhì)

c.多晶型藥物的晶型不同，其理化性質(zhì)及體內(nèi)的吸收和療效也有差異如：驅(qū)蟲藥甲苯咪唑，有A、B、C三種晶型,其中C晶型的驅(qū)蟲率90%,B晶型的驅(qū)蟲率40%~60%,A晶型的驅(qū)蟲率小于20%.按雜質(zhì)性質(zhì)分為3類101第三節(jié)雜質(zhì)的限量檢查絕對純凈藥物不存在藥物中所含雜質(zhì)的最大允許量為雜質(zhì)限量雜質(zhì)限量的控制方法：

限量檢查法（limittest）雜質(zhì)定量測定1021.限量檢查三種方法(LimitTest)比較法靈敏度法標(biāo)準(zhǔn)對照法103操作:平行試驗

比較兩支比色管的顏色或濁度,判斷雜質(zhì)限量是否符合規(guī)定管1（樣品管）管2（對照管）1)標(biāo)準(zhǔn)對照法104操作:在供試品溶液中加入試劑，在試驗條件下，不得出現(xiàn)正反應(yīng)如:

蒸餾水中氯化物的檢查2)靈敏度法——反應(yīng)靈敏度控制雜質(zhì)限量105如:

胰島素的吸收度檢查3)比較法——取一定量供試品,在規(guī)定條件下測定待檢雜質(zhì)的參數(shù)(如,吸光度),與規(guī)定限度比較,判斷供試品中雜質(zhì)限量Aλ276nm0.5mg/ml供試品液0.01mol/HCl樣品規(guī)定：測得的A應(yīng)該為0.48～0.551062.限量的表示方法

——雜質(zhì)限量(L)是指藥物中所含雜質(zhì)的最大允許量,是雜質(zhì)在藥物中所占的份數(shù)表示方法:

%(百分之幾) ppm(百萬分之幾)1073.限量的計算公式限量=？1083.限量的計算公式雜質(zhì)量(樣品管)(對照管)雜質(zhì)量＜限量＜1093.限量的計算公式(樣品管)(對照管)雜質(zhì)量雜質(zhì)量＝限量＝1103.限量的計算公式雜質(zhì)量(樣品管)(對照管)雜質(zhì)量＞限量＞1113.限量的計算公式(樣品管)(對照管)V×C＝1123.限量的計算公式計算公式可寫成113用ppm表示雜質(zhì)限量注意:①單位是否統(tǒng)一②供試品是否有稀釋114

標(biāo)準(zhǔn)NaCl溶液(10

gCl/ml)對照管:取標(biāo)準(zhǔn)溶液1.5ml

同法操作比較,濁度不得更大求氯化物限量是多少？例1:

茶苯海明中氯化物的檢查115例1:

茶苯海明中氯化物的檢查116規(guī)定：含重金屬不超過百萬分之十求：應(yīng)取標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液(10

gPb/ml)多少ml？例2:谷氨酸鈉中重金屬的檢查117例2:谷氨酸鈉中重金屬的檢查118例3:

溴化鈉中砷鹽檢查方法：中國藥典規(guī)定：取標(biāo)準(zhǔn)砷溶液2.0mL(每1mL相當(dāng)于1μg砷)制備砷斑規(guī)定：含砷量不得超過4ppm計算：應(yīng)取供試品量(g)？119例4:

腎上腺素中酮體的檢查規(guī)定:A310nm≯0.05,已知酮體的求:酮體限量?120例4:

腎上腺素中酮體的檢查A=E·C·LC:g/100ml121例5:

硫酸阿托品中莨菪堿的檢查方法：取本品,加水溶解并制成每1ml中含50mg

的溶液,依法測定,旋光度不得超過-0.4°已知：莨菪堿的比旋度為-32.5°計算：莨菪堿的限量(%)122例6:卡比馬唑片中甲巰咪唑的檢查對照品：甲巰咪唑100μg/ml的氯仿溶液薄層板：硅膠G；點樣：10μl展開劑：CHCl3-丙酮(4:1)；顯色:碘化鉍鉀

判斷：供試品溶液如顯與對照品溶液相應(yīng)的雜質(zhì)斑點，其顏色不得深于對照品溶液的斑點123例6:卡比馬唑片中甲巰咪唑的檢查100μg/ml5mg/片,20片10ml第二章藥物的鑒別、檢查和含量測定藥物的含量測定一、容量分析法二、光譜分析法三、色譜分析法定量分析方法的分類UV,FluHPLC,GC藥物的含量測定含量測定要求：操作簡便結(jié)果準(zhǔn)確、重現(xiàn)藥物的含量測定化學(xué)原料藥：純度高、雜質(zhì)少，強調(diào)測定結(jié)果的準(zhǔn)確性和重現(xiàn)性，首選容量分析法；制劑的含量：組成復(fù)雜，干擾組分多，且含量限度一般較寬，強調(diào)方法的靈敏度和專屬性，多采用色譜分析法；藥物制劑的定量檢查：如溶出度、含量均一度。由于分析樣本量大，且限度較寬，在輔料不干擾的前提下，常采用光譜分析法。藥物的含量測定藥物的含量測定(一)特點與適用范圍(1)方法簡便易行(2)方法耐用性高(3)測定結(jié)果準(zhǔn)確(4)方法專屬性差適用于原料藥含量測定(二)有關(guān)計算:1.滴定度與滴定度計算2.含量計算

(1)直接滴定法

(2)間接滴定法生成物滴定法剩余量滴定法

也稱滴定法:將已知濃度滴定液滴加至被測藥物溶液中，至滴定終點，根據(jù)滴定液的濃度、體積和滴定度，計算含量。容量分析法一、容量分析法藥物的含量測定二、光譜分析法定義分類

UV-Vis利用物質(zhì)的光譜進(jìn)行定性、定量和結(jié)構(gòu)分析的方法——光譜分析法

IR

AA

Fluor藥物的含量測定1.特點與適用范圍(1)方法簡便易行(2)方法靈敏度高(3)結(jié)果準(zhǔn)確度較高(4)方法專屬性較差制劑含量測定與定量檢查2.儀器校正和檢定(1)波長

(2)吸光度的準(zhǔn)確度

(3)雜散光

3.測定法對照品比較,吸收系數(shù)計算光譜,標(biāo)準(zhǔn)曲線法基于對紫外光區(qū)(200~400nm)和可見光區(qū)(400~760nm)單色光吸收特性的分析方法原理:

UV-Vis（一）紫外-可見分光光度法藥物的含量測定(1)對照品比較法原料藥溶液濃度

（一）紫外-可見分光光度法藥物的含量測定（一）紫外-可見分光光度法說明:稀釋體積D藥物的含量測定（一）紫外-可見分光光度法呋喃唑酮的含量測定:取本品約20mg,精密稱定,置250ml量瓶中,加二甲基甲酰胺使溶解后用水稀釋至刻度,精密量取10ml,置100ml量瓶中,用水稀釋至刻度,作為供試品溶液,在367nm處測定A;另取呋喃唑酮對照品,同法測定,計算,即得藥物的含量測定(2)吸收系數(shù)法原料藥

溶液濃度

（一）紫外-可見分光光度法藥物的含量測定(3)標(biāo)準(zhǔn)曲線法原料藥

溶液濃度

（一）紫外-可見分光光度法根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算藥物的含量測定(4)多組分測定方法

（一）紫外-可見分光光度法計算分光光度法藥物的含量測定1.特點(1)高靈敏度(2)熒光自熄滅(3)易受干擾

(4)線性范圍窄

(RX–RXb)/(Rr–Rrb)=0.5~2

2.消除干擾

(1)溶劑:空白對照

(2)溶液:稀,凈,充氮,pH

(3)器皿:潔凈,無機清潔液3.測定法:對照品比較物質(zhì)受UV或Vis照射激發(fā)后能發(fā)射出比激發(fā)光波長長的熒光;激發(fā)光停止照射,熒光隨之消失;激發(fā)和發(fā)射光譜用于定性，熒光強度用于定量。Fluor(二)熒光分析法藥物的含量測定

含量測定：

a.標(biāo)準(zhǔn)曲線法

b.比例法（對照法）Cx:供試品溶液濃度Cr:對照品溶液濃度Rx：供試品溶液熒光強度Rr：對照品溶液熒光強度Rxb：供試品溶液試劑空白熒光強度Rrb：對照品溶液試劑空白熒光強度

應(yīng)在0.50~2.0之間注意：

(二)熒光分析法藥物的含量測定三、色譜分析法特點與應(yīng)用分類

依據(jù)分離原理：(1)高靈敏度:ng-μg/ml(2)高專屬性:選擇性檢測(3)高效能與高速度吸附;分配;離子交換;分子排阻色譜法

復(fù)方制劑含量測定的首選方法依據(jù)分離方式：紙色譜;薄層色譜;柱色譜;氣相色譜;高效液相色譜法

1.氣相色譜法(GC)2.高效液相色譜法(HPLC)藥物的含量測定(一)高效液相色譜法1.儀器(RP-HPLC)(1)色譜柱:

ODS最常用;粒徑一般在3-10

m;溫度≯40℃

(2)檢測器:

UV(DAD,PDA);Fluor,ELSD,RID,ECD,MS

(3)流動相:

首選甲醇-水(末端波長檢測:乙腈-水),有機相≮5%;pH2-82.系統(tǒng)適用性試驗

(1)色譜柱的理論板數(shù)(n)

(2)色譜峰的分離度(R)

(3)色譜系