高考生物一輪復(fù)習(xí) 第十單元 生物技術(shù)實踐 第36講 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用-人教版高三生物試題

第36講微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用(限時:40分鐘)測控導(dǎo)航表知識點題號及難易度1.微生物的實驗室培養(yǎng)1,3(中)2.實驗室微生物的分離與計數(shù)2,6(中)3.綜合考查4(中),5(中),7(中)1.(2015寧夏銀川二模)下圖是生物興趣小組為研究“金河牌酸奶中乳酸菌種類及其耐藥情況”而制定的流程圖。請分析回答:配制細菌培養(yǎng)基并滅菌乳酸菌分離純化乳酸菌耐藥性檢測(1)乳酸菌在結(jié)構(gòu)上與酵母菌的主要區(qū)別是(填“有”或“無”)染色體。

(2)本研究使用的細菌培養(yǎng)基中特別加入了一定量的碳酸鈣,乳酸菌在(生理過程)中產(chǎn)生的乳酸能與不溶性的碳酸鈣生成可溶性的乳酸鈣,從而在菌落周圍形成溶鈣圈。從物理形態(tài)分析,本研究使用的培養(yǎng)基屬于(類型)。

(3)在利用高壓蒸汽滅菌鍋對培養(yǎng)基滅菌時,把鍋內(nèi)水加熱煮沸,必須后,將鍋密閉,繼續(xù)加熱以保證鍋內(nèi)氣壓上升,達到121℃。滅菌后的培養(yǎng)基應(yīng)適當(dāng)冷卻后,在附近倒平板。(4)請完善“檢測乳酸菌對青霉素、四環(huán)素耐藥性”實驗操作步驟步驟1:分別取加入三組無菌培養(yǎng)皿中,再加入滅菌并冷卻到50℃左右的培養(yǎng)基,立即混勻,靜置凝固成平板。步驟2:向三組培養(yǎng)基中分別接種待檢測的乳酸菌菌種。步驟3:將接種后的三組培養(yǎng)基和一個都置于適宜溫度等條件下培養(yǎng)若干天,觀察比較培養(yǎng)基中菌落生長情況。

解析:(1)酵母菌屬于真核生物,乳酸菌屬于原核生物,他們的主要區(qū)別在于乳酸菌細胞內(nèi)沒有核膜包被的細胞核,無染色體。(2)培養(yǎng)基中特別加入了一定量的碳酸鈣,乳酸菌在無氧呼吸中產(chǎn)生的乳酸能與不溶性的碳酸鈣生成可溶性的乳酸鈣,從而在菌落周圍形成溶鈣圈。從物理形態(tài)分析,本研究使用的培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基。(4)步驟1:分別取等量的青霉素、四環(huán)素和無菌水加入三組無菌培養(yǎng)皿中,再加入滅菌并冷卻到50℃答案:(1)無(2)無氧呼吸固體培養(yǎng)基(3)將鍋內(nèi)冷空氣徹底排除酒精燈火焰(4)步驟1:等量的青霉素、四環(huán)素和無菌水步驟3:未接種的培養(yǎng)基2.下面是分離分解尿素的細菌所用的培養(yǎng)基配方:KH2PO4Na2HPO4MgSO4·7H2O葡萄糖尿素瓊脂蒸餾水1.4g2.1g0.2g10.0g1.0g15.0g定容至1000mL請根據(jù)以上配方,回答下列問題:(1)該培養(yǎng)基含有微生物所需要的類營養(yǎng)物質(zhì)。其中最主要的碳源是,氮源是。

(2)該培養(yǎng)基按物理性質(zhì)劃分是培養(yǎng)基;按培養(yǎng)基的作用劃分是培養(yǎng)基。

(3)該培養(yǎng)基具有選擇作用的原因是

。

(4)在該培養(yǎng)基中,可通過檢測pH的變化來判斷尿素是否被分解,依據(jù)的原理是

。

所用方法是在培養(yǎng)基中加入指示劑,如果尿素被分解,則培養(yǎng)基變成色。

解析:(1)該培養(yǎng)基中含有碳源、氮源、水和無機鹽四類營養(yǎng)物質(zhì),葡萄糖是最主要的碳源,尿素是氮源。(2)由于有凝固劑瓊脂的存在,該培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基。(3)由于尿素是該培養(yǎng)基的唯一氮源,只有能分解尿素的微生物才能生長,因此該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。(4)尿素被分解可產(chǎn)生氨,氨能使酚紅指示劑變成紅色,據(jù)此可推測培養(yǎng)基中的尿素是否被分解。答案:(1)四葡萄糖尿素(2)固體選擇(3)該培養(yǎng)基中唯一的氮源是尿素,只有能分解尿素的微生物才能在該培養(yǎng)基上生長和繁殖(4)在細菌分解尿素的化學(xué)反應(yīng)中,細菌合成的脲酶將尿素分解成氨,氨會使培養(yǎng)基的堿性增強,pH升高酚紅紅3.(2013全國Ⅱ卷)臨床使用抗生素前,有時需要做細菌耐藥實驗。實驗時,首先要從病人身上獲取少量樣本,然后按照一定的實驗步驟操作,以確定某致病菌對不同抗生素的敏感性?；卮鹣铝袉栴}:(1)為了從樣本中獲取致病菌單菌落,可用法或法將樣本接種于固體培養(yǎng)基表面,經(jīng)過選擇培養(yǎng)、鑒別等步驟獲得。

(2)取該單菌落適當(dāng)稀釋,用法接種于固體培養(yǎng)基表面,在37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h,使其均勻生長,布滿平板。(3)為了檢測該致病菌對于抗生素的敏感性,將分別含有A、B、C、D四種抗生素的濾紙片均勻置于該平板上的不同位置,培養(yǎng)一段時間后,含A的濾紙片周圍出現(xiàn)透明圈,說明該致病菌對抗生素A;含B的濾紙片周圍沒有出現(xiàn)透明圈,說明該致病菌對抗生素B;含C的濾紙片周圍的透明圈比含A的小,說明

;

含D的濾紙片周圍的透明圈也比含A的小,且透明圈中出現(xiàn)了一個菌落,在排除雜菌污染的情況下,此菌落很可能是抗生素D的。

(4)根據(jù)上述實驗結(jié)果,為達到抗菌目的,最好應(yīng)選用抗生素。

解析:(1)對微生物純化培養(yǎng)時,常用的接種方法為劃線法和稀釋涂布法。(2)若讓已經(jīng)獲得的單個菌落在固體培養(yǎng)基上大量且均勻繁殖,接種方法為涂布法。(3)對某種抗生素越敏感的致病菌,在該抗生素存在的范圍內(nèi),越不易生存,所形成的透明圈就越大。但是,如果在透明圈中還有菌落生存,則說明該菌落的耐藥性強。(4)根據(jù)(3)的結(jié)論,為了達到抗菌目的,應(yīng)選擇能使該致病菌大量死亡,即產(chǎn)生的透明圈大的那種抗生素。答案:(1)劃線稀釋涂布(或涂布)(2)涂布(3)敏感不敏感該致病菌對C的敏感性比對A的弱耐藥菌(4)A4.(2015云南統(tǒng)一檢測)大腸桿菌是人和許多動物腸道中的主要細菌,若水中大腸桿菌超標,說明水源可能被糞便污染。伊紅美藍培養(yǎng)基可用于檢測水中大腸桿菌的數(shù)量?；卮鹣铝袉栴}:(1)伊紅美藍培養(yǎng)基含有大腸桿菌生長繁殖必須的四類營養(yǎng)物質(zhì),大腸桿菌的代謝產(chǎn)物會和伊紅、美藍發(fā)生反應(yīng),使菌落呈現(xiàn)黑色。伊紅美藍培養(yǎng)基屬于(填“選擇”或“鑒別”)培養(yǎng)基。

(2)某水樣的大腸桿菌嚴重超標,需采用稀釋涂布平板法統(tǒng)計樣品中活菌數(shù)。當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時,培養(yǎng)基表面生長的一個菌落,來源于樣品稀釋液中的。一般選擇菌落數(shù)在的平板進行計數(shù),這樣統(tǒng)計的菌落數(shù)(填“大于”“等于”或“小于”)活菌的實際數(shù)目。

(3)用大劑量紫外線照射大腸桿菌,獲得了變異菌株,這種變異來源于。利用平板劃線法對該變異菌株進行純化,在第二次以及其后的劃線操作時,菌體來自。

解析:(1)培養(yǎng)基的基本成分應(yīng)包括碳源、氮源、水、無機鹽等,大腸桿菌的代謝產(chǎn)物和伊紅、美藍發(fā)生反應(yīng),使菌落呈現(xiàn)黑色,從功能上說,此培養(yǎng)基屬于鑒別培養(yǎng)基。(2)當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時,培養(yǎng)基表面生長的一個菌落,來源于樣品稀釋液中的一個活菌,一般選擇菌落數(shù)在30～300的平板進行計數(shù),由于當(dāng)兩個或多個細菌連在一起時,平板上觀察到的往往只是一個菌落,所以觀察值比實際值要低。(3)大腸桿菌屬于原核生物,其變異只有基因突變。利用平板劃線法對該變異菌株進行純化,在第二次以及其后的劃線操作時,菌體來自上一次劃線末端。答案:(1)碳源、氮源、水和無機鹽鑒別(2)一個活菌30～300小于(3)基因突變上一次劃線的末端5.(2015吉林長春二模)醋酸菌和纖維素分解菌是工業(yè)中常用的微生物。請分析回答下列問題:(1)在和糖源都充足時,醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸;當(dāng)缺少糖源時,醋酸菌可將乙醇氧化為,進而生成醋酸。

(2)為了從某細菌樣品中篩選出纖維素分解菌,可采用染色法進行篩選。如果樣品中細菌濃度較低,可以通過培養(yǎng)來增加纖維素分解菌的濃度,該過程所用的培養(yǎng)基為(填“固體”“液體”)培養(yǎng)基。為了純化纖維素分解菌,某同學(xué)采用平板劃線法進行接種,在做第二次以及其后的劃線操作時,應(yīng)該從上一次劃線的開始劃線。為了避免環(huán)境中微生物的污染,實驗操作應(yīng)在附近進行。

(3)將菌種進行臨時保存時,可在低溫下使用試管斜面保存,但該方法除保存時間短外,菌種還易;若需較長時間保存菌種,可用的方法是。

解析:試管斜面保存菌種,菌種易被污染或產(chǎn)生變異,適于臨時保存菌種,若需較長時間保存菌種,可采用甘油管藏的方法。答案:(1)氧氣乙醛(2)剛果紅選擇液體末端酒精燈火焰(3)被污染或產(chǎn)生變異甘油管藏6.(2014陜西五校一模)下面的甲圖表示酵母菌、硝化細菌和乳酸菌在半固體培養(yǎng)基中的生長情況,乙圖表示這三種菌的增殖速度與氧氣濃度之間的關(guān)系,請據(jù)圖回答:(1)乙圖中a、b、c三條曲線依次表示甲圖號試管中微生物在不同氧氣濃度中的增殖速度。

(2)研究發(fā)現(xiàn),青霉素能破壞細菌的細胞壁并在細菌細胞的繁殖期起殺菌作用。如果培養(yǎng)基中混雜了這三類微生物,請設(shè)計實驗,利用改變培養(yǎng)基成分等培養(yǎng)條件,將酵母菌和硝化細菌分離出來。①主要步驟:a.分別配制不含的培養(yǎng)基(A)和加入的培養(yǎng)基(B),分別滅菌。

b.分別接種混合液放在適宜條件下培養(yǎng)。c.觀察結(jié)果:②結(jié)果:在A培養(yǎng)基上生存的是,在B培養(yǎng)基上生存的是。

(3)微生物培養(yǎng)過程中,獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是。

(4)若想對初步篩選得到的目的菌進行純化并計數(shù),可采用的接種方法是。

解析:從甲圖試管中微生物的分布和數(shù)量分析,乳酸菌分布在缺氧的下層,酵母菌在缺氧的底部和氧含量高的上層均勻分布,而硝化細菌主要分布在上層,因此可以判斷出a、b、c曲線表示3、2、1號試管中的微生物增殖速度。青霉素破壞細菌的細胞壁,而酵母菌屬于真菌,青霉素不能起到殺滅的作用,硝化細菌屬于自養(yǎng)生物,不需要添加葡萄糖作為能源物質(zhì)和碳源。答案:(1)3、2、1(2)①有機碳源青霉素②硝化細菌酵母菌(3)防止雜菌污染(無菌技術(shù))(4)稀釋涂布平板法7.(2014四川理綜)有機農(nóng)藥苯磺隆是一種除草劑,長期使用會污染環(huán)境。研究發(fā)現(xiàn),苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分離降解苯磺隆的菌株和探索其降解機制的實驗過程如圖甲、乙所示。(1)微生物生長繁殖所需的主要營養(yǎng)物質(zhì)有碳源、水、四類,該實驗所用的選擇培養(yǎng)基只能以苯磺隆作為唯一碳源,其原因是。

(2)與微生物培養(yǎng)基相比,植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基常需添加生長素和,這些植物激素一般需要事先單獨配制成保存?zhèn)溆谩?/p>

(3)純化菌株時,通常使用的劃線工具是。劃線的某個平板培養(yǎng)后,第一劃線區(qū)域的劃線上都不間斷地長滿了菌,第二劃線區(qū)域所劃的第一條線上無菌落,其他劃線上有菌落。造成劃線無菌落可能的操作失誤有

。

(4)為探究苯磺隆的降解機制,將該菌種的培養(yǎng)液過濾離心,取上清液做圖乙所示實驗。該實驗的假設(shè)是

,

該實驗設(shè)計是否合理?為什么?。

解析:(1)微生物生長所需要的主要營養(yǎng)物質(zhì)包括碳源、氮源、水和無機鹽。使用以苯磺隆作為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基,只有能利用苯磺隆的微生物才能正常生長繁殖。(2)植物組織培養(yǎng)常需要添加的植物激素有生長素和細胞分裂素,這些植物激素一般需事先單獨配制成母液備用。(3)平板劃線法接種時常使用接種環(huán)劃線。第二劃線區(qū)域只有第一條線無菌落,很可能是因為接種環(huán)在灼燒后未冷卻就直接劃線,高溫導(dǎo)致菌種死亡,也可能