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第九章血液電解質(zhì)、酸堿和血?dú)獗O(jiān)測(cè)體液以細(xì)胞膜為界分為兩大部分:細(xì)胞內(nèi)液和細(xì)胞外液。細(xì)胞外液又可分為血漿和組織間液。體液中的無(wú)機(jī)物與部分以離子形式存在的有機(jī)物統(tǒng)稱為電解質(zhì),而葡萄糖、尿素等不能解離的有機(jī)物稱為非電解質(zhì)。細(xì)胞內(nèi)液細(xì)胞外液組織間液血漿各部位體液之間處于動(dòng)態(tài)平衡,都具有相對(duì)穩(wěn)定的電解質(zhì)含量和酸堿度,構(gòu)成了人體正常新陳代謝所必需的內(nèi)環(huán)境。在病理狀態(tài)下機(jī)體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定和平衡常常遭到破壞,是威脅患者生命安全的重大因素。第2頁(yè),共29頁(yè),2024年2月25日,星期天第一節(jié)電解質(zhì)分析儀測(cè)定電解質(zhì)的方法,有化學(xué)法、火焰光度法、原子吸收法、離子選擇性電極法等。火焰光度法因其靈敏度較高、設(shè)備簡(jiǎn)單、成本低等優(yōu)點(diǎn),曾經(jīng)被普遍采用。原理:每一元素都有其特定的發(fā)射光譜,即其譜波長(zhǎng)有特異性的,用火焰為激發(fā)源,對(duì)某些金屬元素的發(fā)射光譜進(jìn)行光度分析。第3頁(yè),共29頁(yè),2024年2月25日,星期天第一節(jié)電解質(zhì)分析儀目前的電解質(zhì)分析儀多采用離子選擇性電極法測(cè)量溶液中的離子濃度。優(yōu)點(diǎn):快速精確地同時(shí)測(cè)定生物樣品中的鉀、鈉、氯、鈣、鎂、pH等多項(xiàng)指標(biāo),同時(shí)具有操作方便、靈敏度和選擇性好、快速、準(zhǔn)確、微量、不破壞被測(cè)試樣、不用進(jìn)行復(fù)雜的預(yù)處理等。缺點(diǎn):電極的壽命短,一般約一年左右需要更換電極;需要定標(biāo)液、活化液等試劑,測(cè)試成本比火焰光度法高。第4頁(yè),共29頁(yè),2024年2月25日,星期天第一節(jié)電解質(zhì)分析儀電解質(zhì)分析儀有六種電極:鈉、鉀、氯、鈣、鎂和參比電極。每個(gè)電極都有一個(gè)特定的離子選擇膜,能夠?qū)Ρ粶y(cè)樣本中相應(yīng)離子特異性親和或滲透,相當(dāng)于特異性離子交換器,膜兩側(cè)的電勢(shì)差與離子濃度差成比。第5頁(yè),共29頁(yè),2024年2月25日,星期天第一節(jié)電解質(zhì)分析儀在電解液中插入離子選擇電極(指示電極)作為電池的正極,參比電極作為電池的負(fù)極,組成原電池。在相關(guān)的離子選擇性電極和參比電極之間形成一電極電位差,即電池電動(dòng)勢(shì)。通過測(cè)量電池電動(dòng)勢(shì),便可對(duì)被測(cè)離子進(jìn)行定量測(cè)定。第6頁(yè),共29頁(yè),2024年2月25日,星期天第一節(jié)電解質(zhì)分析儀鈉電極是一種含鋁硅酸鈉的玻璃電極。由于使用了對(duì)鈉離子敏感的玻璃膜,所以對(duì)鈉離子的選擇性很高。它產(chǎn)生的電位和鈉離子的濃度成比例。當(dāng)pH值低于5時(shí),它會(huì)受到氫離子的干擾。第7頁(yè),共29頁(yè),2024年2月25日,星期天第一節(jié)電解質(zhì)分析儀鉀電極是以鉀-纈(xié)氨霉素為活性材料的聚氯乙烯的膜電極,它是利用鉀離子與纈氨霉素的強(qiáng)配位能力而達(dá)到高的選擇性。一般由三部分構(gòu)成,在塑料套中嵌裝了內(nèi)參比電極的電極桿、纈氨霉素套、內(nèi)參比溶液。第8頁(yè),共29頁(yè),2024年2月25日,星期天第一節(jié)電解質(zhì)分析儀濕式電解質(zhì)分析儀是目前最常用的一類分析儀器,它將被測(cè)樣品作為電池的一部分,然后將離子選擇性電極和參比電極插入其中組成電池,通過測(cè)量原電池電動(dòng)勢(shì)來進(jìn)行測(cè)試分析。干式電解質(zhì)分析儀也是采用基于離子選擇的差示電位法來進(jìn)行分析測(cè)試。濕式電解質(zhì)分析儀一般由離子選擇性電極、參比電極、分析箱、測(cè)量電路、控制電路、驅(qū)動(dòng)電機(jī)及顯示器等組成。第9頁(yè),共29頁(yè),2024年2月25日,星期天第一節(jié)電解質(zhì)分析儀分析箱的設(shè)計(jì),實(shí)現(xiàn)恒溫測(cè)量自動(dòng)化、樣品微量化。測(cè)量電路與所有離子選擇性電極測(cè)量?jī)x器相同??刂齐娐贰Ⅱ?qū)動(dòng)器等能使儀器實(shí)現(xiàn)半自動(dòng)化和自動(dòng)化。顯示器為儀器的輸出設(shè)備,用于顯示或打印結(jié)果。第10頁(yè),共29頁(yè),2024年2月25日,星期天第一節(jié)電解質(zhì)分析儀干式電解質(zhì)分析儀由包括兩個(gè)完全相同的離子選擇性電極的多層膜片組成,兩者均由離子選擇性敏感膜、參比層、氯化銀層和銀層組成,并用一紙鹽橋相連。第11頁(yè),共29頁(yè),2024年2月25日,星期天第一節(jié)電解質(zhì)分析儀測(cè)定時(shí),用雙孔移液管取10μl血清和10μl參比液滴入兩個(gè)加樣孔內(nèi),即可測(cè)定二者間的電位。通常每測(cè)一個(gè)項(xiàng)目需要用一個(gè)干片,每個(gè)干片上帶有條形識(shí)別碼,儀器會(huì)自動(dòng)識(shí)別所進(jìn)行的測(cè)定項(xiàng)目。干式電解質(zhì)分析儀具有使用簡(jiǎn)單、方便、快速等許多無(wú)可比擬的優(yōu)點(diǎn),是大有發(fā)展前途的一種分析儀。第12頁(yè),共29頁(yè),2024年2月25日,星期天第二節(jié)酸堿分析儀pH敏感玻璃膜的一側(cè)為已知的固定pH,另一側(cè)是未知pH溶液,在玻璃膜兩側(cè)產(chǎn)生的電位差取決于敏感玻璃兩邊的pH差值。由于玻璃膜一側(cè)溶液的pH是一固定常數(shù),因此,電位差主要取決于玻璃膜另一邊溶液的pH值。第13頁(yè),共29頁(yè),2024年2月25日,星期天第二節(jié)酸堿分析儀為了準(zhǔn)確測(cè)定這個(gè)電位差,采用化學(xué)半電池。用一個(gè)半電池接到恒定的內(nèi)溶液,另一個(gè)半電池接到未知的外溶液。參比電極通常是由汞-氯化亞汞(甘汞)組成半電池。參比電極與測(cè)量電極用一個(gè)膜隔開,電極通過電解質(zhì)液來保持與pH系統(tǒng)其他部分通電,電解質(zhì)液為飽和氯化鉀溶液。第14頁(yè),共29頁(yè),2024年2月25日,星期天第二節(jié)酸堿分析儀參比電極的電勢(shì)必須與被測(cè)樣品溶液的性質(zhì)無(wú)關(guān)。其外殼是玻璃管,里面套一根小玻璃管,其頂部伸出電極引線,引線的下端浸沒在汞中,汞的下端有糊狀甘汞,汞和甘汞用棉花堵住,只有離子才能通過,而汞和甘汞不會(huì)漏失,小管和大管之間充滿KCl溶液,末端用多孔陶瓷滲入到溶液中,實(shí)現(xiàn)電極引線與溶液間的電導(dǎo)通。第15頁(yè),共29頁(yè),2024年2月25日,星期天第二節(jié)酸堿分析儀第16頁(yè),共29頁(yè),2024年2月25日,星期天第二節(jié)酸堿分析儀pH玻璃膜電極:
SiO2基質(zhì)中加入Na2O、Li2O和CaO燒結(jié)而成的特殊玻璃膜。內(nèi)充0.1mol/L的HCl溶液,敏感膜厚度約為0.10mm。再插入一根AgCl-Ag電極作內(nèi)參比電極(涂有氯化銀的銀絲)。水浸泡后,表面的Na+與水中的H+交換,表面形成水合硅膠層。第17頁(yè),共29頁(yè),2024年2月25日,星期天第二節(jié)酸堿分析儀玻璃電極H+OH-++++++------酸性堿性玻璃膜玻璃敏感膜(0.2-0.5mm)膠層約0.1mm正電荷負(fù)電荷內(nèi)參比液第18頁(yè),共29頁(yè),2024年2月25日,星期天第二節(jié)酸堿分析儀復(fù)合電極又叫做聯(lián)合電極。其結(jié)構(gòu)有球泡形的,也有平頭形的。
它由兩個(gè)電極組合而成,分別裝在兩個(gè)同心的玻璃管之中,內(nèi)管是一個(gè)玻璃電極,外管是一個(gè)銀一氯化銀參比電極。參比電極也是由飽和氯化鉀溶液通過滲漏孔形成一個(gè)鹽橋和待測(cè)液相連接的。第19頁(yè),共29頁(yè),2024年2月25日,星期天第三節(jié)血?dú)夥治鰞x濕式血?dú)夥治鰞x第20頁(yè),共29頁(yè),2024年2月25日,星期天第三節(jié)血?dú)夥治鰞x血?dú)夥治龇椒ㄊ且环N相對(duì)測(cè)量方法。在進(jìn)行測(cè)量之前,先要用標(biāo)準(zhǔn)液體來確定pH、PO2和PCO2三套電極的工作曲線,通常把確定電極系統(tǒng)工作曲線的過程稱為定標(biāo)或校準(zhǔn)。每種電極都要有兩種標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)來進(jìn)行定標(biāo)。pH系統(tǒng)使用7.383和6.840左右的兩種標(biāo)準(zhǔn)緩沖液來進(jìn)行定標(biāo)。氧和二氧化碳分壓標(biāo)準(zhǔn)氣體有兩種,第一種中含20%的O2和5%的CO2;第二種含10%的CO2,不含02??刂葡到y(tǒng)要將上述兩種標(biāo)準(zhǔn)氣體分別混合到兩種pH定標(biāo)液內(nèi),對(duì)三種電極一起進(jìn)行定標(biāo)。進(jìn)入血樣以后,三種電極分別直接測(cè)量出血樣pH、PO2和PCO2值,隨后通過相關(guān)公式計(jì)算得出HCO3-(碳酸氫離子)、BE(血剩余堿)、TCO2(總二氧化碳)等報(bào)告值。在工作過程中,儀器還自動(dòng)對(duì)電極進(jìn)行一點(diǎn)定標(biāo),隨時(shí)檢查電極偏離工作曲線的情況。一旦發(fā)現(xiàn)問題,儀器會(huì)停止測(cè)量工作,強(qiáng)制重新定標(biāo),以保證所測(cè)數(shù)據(jù)的正確性。第21頁(yè),共29頁(yè),2024年2月25日,星期天第三節(jié)血?dú)夥治鰞xPCO2電極屬于氣敏電極。是由測(cè)量半電池和參比半電池組裝在一起的復(fù)合電極。PCO2電極頭部為pH敏感玻璃,測(cè)量半電池密封在玻璃電極內(nèi),電極內(nèi)部裝有恒定pH緩沖液和Ag/AgCl電極,參比半電池(Ag/AgCl)裝在電極的外部。PCO2電極裝入有機(jī)玻璃圓筒中,塑料套上有氣體滲透膜,其后裝有PCO2電解液,PCO2電解液能使參比電極產(chǎn)生電泳,通過開口與測(cè)量電極接通。第22頁(yè),共29頁(yè),2024年2月25日,星期天第三節(jié)血?dú)夥治鰞x為保持PCO2測(cè)量pH系統(tǒng)的穩(wěn)定,PCO2電極安裝了氣體滲透膜,即PCO2電極膜,它是一種特殊的薄膜,起選擇隔層的作用,可透過二氧化碳,而其他離子則不能通過。測(cè)量時(shí),二氧化碳會(huì)通過膜擴(kuò)散,斜率隨反應(yīng)時(shí)間而慢慢增加,pH玻璃電極系統(tǒng)須盡可能靠近氣體滲透膜,在玻璃電極頂端和PCO2電極膜之間放一尼龍網(wǎng)狀墊圈蓋在電極頭上,以保持有一薄層電解質(zhì)液。第23頁(yè),共29頁(yè),2024年2月25日,星期天第三節(jié)血?dú)夥治鰞x如果電極膜兩側(cè)存在二氧化碳分壓差,二氧化碳則在分壓差作用下通過膜進(jìn)行擴(kuò)散,使電極內(nèi)外氣體分壓平衡。二氧化碳進(jìn)入電解質(zhì)液內(nèi)會(huì)產(chǎn)生H+和HCO3-。反應(yīng)所產(chǎn)生的H+濃度與PCO2的高低成比例,當(dāng)用水性HCO3-液槽作為測(cè)量半電池時(shí),即可通過pH變化值測(cè)知血液的PCO2。第24頁(yè),共29頁(yè),2024年2月25日,星期天第三節(jié)血?dú)夥治鰞x血氧分壓的測(cè)量基于電解氧的原理。氧電極是一種極譜氣敏電極。PO2電極有一個(gè)陰極和一個(gè)陽(yáng)極,陰極由鉑絲構(gòu)成,陽(yáng)極由銀/氯化銀構(gòu)成。第25頁(yè),共29頁(yè),2024年2月25日,星期天第三節(jié)血?dú)夥治鰞x將兩個(gè)電極置于電解質(zhì)溶液中接通直流電后,在陰極會(huì)得電子,發(fā)生還原反應(yīng),陽(yáng)極會(huì)失電子,發(fā)生氧化反應(yīng)。兩個(gè)電極之問會(huì)有電流流過,此時(shí)溶液中如有氧存在,則能促進(jìn)電解質(zhì)電解,使電流增強(qiáng),從而可根據(jù)電流變化獲知溶液中的氧量。研究證實(shí),電壓在300~700mV時(shí)電流與PO2成正比,電極電壓變化對(duì)兩者的關(guān)系并無(wú)明顯影響,且以600mV最為理想。電壓超過800mV,即使無(wú)氧分子參與,水本身也會(huì)被電解而產(chǎn)生電流。第26頁(yè),共29頁(yè),2024年2月25日,星期天第三節(jié)血?dú)夥治鰞x干式血?dú)夥治鰞x血中氧分子可以與特定熒光染料結(jié)合,使之喪失熒光特性。熒光強(qiáng)度與血中PO2成反比。通過空白熒光與血樣平衡后的熒光光度差即可計(jì)算出血液PO2。第27頁(yè),共29頁(yè),2024年2月25日,星期天第三節(jié)血?dú)夥治鰞x人們通常廣義地把各種微弱的光亮都稱為熒光。物理上所說的熒光,是一種光致發(fā)光的冷發(fā)光現(xiàn)象。當(dāng)某種常溫物質(zhì)經(jīng)某種波長(zhǎng)的入射光(通常是紫外線或X射線)照射,吸收光能后進(jìn)入激發(fā)態(tài),并且立即退出激發(fā)態(tài)并發(fā)出比入射光的的波長(zhǎng)長(zhǎng)的出射光(通常波長(zhǎng)在可見光波段);而且一旦停止入射光,發(fā)光現(xiàn)象也隨之立即消失。具有這種性質(zhì)的出射光就被稱之為熒光。一般把余輝時(shí)間≤10-8s者稱為熒光,而余
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