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一、試驗(yàn)?zāi)繕?biāo)1.了解細(xì)胞膜表面結(jié)構(gòu);2.了解細(xì)胞膜滲透性及各種物質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞膜速度。細(xì)胞凝集反應(yīng)細(xì)胞膜的滲透性第1頁二、試驗(yàn)原理1、細(xì)胞凝集反應(yīng)凝集素是一類可逆結(jié)合特異糖基蛋白質(zhì),能與細(xì)胞外被寡糖鏈相連接,使細(xì)胞發(fā)生凝集。2、細(xì)胞膜滲透性在低滲液中,細(xì)胞很快吸水而脹裂,稱為溶血。在等滲液中,因?yàn)橛行┤苜|(zhì)會進(jìn)入紅細(xì)胞內(nèi)、引發(fā)細(xì)胞滲透壓升高,細(xì)胞也會吸水脹裂,因?yàn)楦鞣N物質(zhì)透入細(xì)胞速度不一樣,溶血時間不一樣。細(xì)胞凝集反應(yīng)細(xì)胞膜的滲透性第2頁三、試驗(yàn)用具1.器材:顯微鏡、天平、載玻片、滴管、離心管、燒杯、10ml移液管、試管、試管架2.材料:土豆塊莖3.試劑:2%鴨血紅細(xì)胞、抗凝血劑、PBS、土豆塊莖、0.17mol/L氯化鈉和其它等滲液。細(xì)胞凝集反應(yīng)細(xì)胞膜的滲透性第3頁四、試驗(yàn)步驟細(xì)胞凝集反應(yīng)細(xì)胞膜的滲透性第4頁(一)細(xì)胞凝集反應(yīng)1.
2%鴨血紅細(xì)胞懸液制備新鮮鴨血加抗凝劑,生理鹽水洗5次,每次2000r/min,離心5min,按紅細(xì)胞壓積用生理鹽水配成2%鴨血紅細(xì)胞懸液。2.土豆凝集素制備土豆2克,加10mlPBS,浸泡2h3.細(xì)胞凝集反應(yīng)土豆凝集素1滴、2%鴨血紅細(xì)胞液1滴載玻片上混勻,靜置20min,4.對照PBS1滴、2%鴨血紅細(xì)胞液1滴細(xì)胞凝集反應(yīng)細(xì)胞膜的滲透性第5頁細(xì)胞凝集反應(yīng)細(xì)胞膜的滲透性第6頁細(xì)胞凝集反應(yīng)細(xì)胞膜的滲透性第7頁(二)細(xì)胞膜滲透性1.低滲溶液試管一支:鴨血紅細(xì)胞液1ml蒸餾水10ml結(jié)果溶血,溶液變透明2.等滲溶液0.17mol/L氯化鈉、0.17mol/L氯化銨、0.17mol/L醋酸銨、0.17mol/L硝酸銨、0.12mol/L草酸銨、0.12mol/L硫酸銨、0.32mol/L葡萄糖、0.32mol/L甘油、0.32mol/L乙醇、0.
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