12-03-15高二生物《DNA的粗提取與鑒定》()省公開(kāi)課一等獎(jiǎng)全國(guó)示范課微課金獎(jiǎng)?wù)n件

1.生物體遺傳物質(zhì)是什么？討論第1頁(yè)2.真核生物遺傳物質(zhì)存在于哪里？1.生物體遺傳物質(zhì)是什么？討論第2頁(yè)2.真核生物遺傳物質(zhì)存在于哪里？1.生物體遺傳物質(zhì)是什么？3.怎樣才能將真核細(xì)胞內(nèi)遺傳物質(zhì)

分離來(lái)？討論第3頁(yè)DNA粗提取與判定第4頁(yè)用什么材料提取DNA？為何？(一)試驗(yàn)材料選?。旱?頁(yè)(一)試驗(yàn)材料選?。弘u血細(xì)胞做試驗(yàn)材料。原因：1.雞血細(xì)胞核DNA含量豐富，材料易得2.雞血細(xì)胞極易吸水脹破3.植物細(xì)胞外有細(xì)胞壁，其它動(dòng)物細(xì)胞制取

DNA有時(shí)需勻漿和離心，對(duì)設(shè)備要求較高，

操作繁瑣，歷時(shí)較長(zhǎng)。第6頁(yè)(二)破碎細(xì)胞，獲取含DNA濾液1.若是動(dòng)物細(xì)胞，怎樣獲取DNA濾液？第7頁(yè)2.若是植物細(xì)胞，怎樣獲取DNA濾液？(二)破碎細(xì)胞，獲取含DNA濾液1.若是動(dòng)物細(xì)胞，怎樣獲取DNA濾液？第8頁(yè)加入洗滌劑和食鹽作用分別是？假如研磨不充分，會(huì)對(duì)試驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生什么影響？第9頁(yè)加入洗滌劑和食鹽作用分別是？假如研磨不充分，會(huì)對(duì)試驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生什么影響？洗滌劑是一些離子去污劑，能溶解細(xì)胞膜，有利于DNA釋放；食鹽有利于DNA溶解第10頁(yè)加入洗滌劑和食鹽作用分別是？假如研磨不充分，會(huì)對(duì)試驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生什么影響？洗滌劑是一些離子去污劑，能溶解細(xì)胞膜，有利于DNA釋放；食鹽有利于DNA溶解會(huì)使細(xì)胞核內(nèi)DNA釋放不完全，提取DNA量變少，影響試驗(yàn)結(jié)果，造成看不到絲狀沉淀物、用二苯胺判定不顯示藍(lán)色等第11頁(yè)濾液中雜質(zhì)可能有哪些細(xì)胞成份？(三)去除濾液中雜質(zhì)第12頁(yè)可能有核蛋白、多糖和RNA等雜質(zhì)。(三)去除濾液中雜質(zhì)濾液中雜質(zhì)可能有哪些細(xì)胞成份？第13頁(yè)依據(jù)DNA理化性質(zhì)，能夠用哪些方法來(lái)去除濾液中雜質(zhì)？(三)去除濾液中雜質(zhì)第14頁(yè)為何重復(fù)地溶解與析出DNA，能夠除去雜質(zhì)？(注意：兩種食鹽溶液濃度和作用)(三)去除濾液中雜質(zhì)第15頁(yè)(三)去除濾液中雜質(zhì)為何重復(fù)地溶解與析出DNA，能夠除去雜質(zhì)？(注意：兩種食鹽溶液濃度和作用)用高濃度鹽溶液能除去高鹽中不能溶解雜質(zhì)；用低鹽濃度使DNA析出，能除去在低鹽溶液中雜質(zhì)。所以，重復(fù)溶解與析出DNA，就能除去與DNA溶解度不一樣各種雜質(zhì)。第16頁(yè)析出：濾液+同體積95%冷卻酒精白色絲狀物(四)DNA析出第17頁(yè)(五)DNA判定怎樣判定？對(duì)比反應(yīng)是為了證實(shí)什么？原理？第18頁(yè)DNA＋二苯胺藍(lán)色物沸水浴(五)DNA判定怎樣判定？對(duì)比反應(yīng)是為了證實(shí)什么？原理？第19頁(yè)三、操作提醒1.以血液為試驗(yàn)材料，每100ml加入3g檸檬酸鈉，作為抗凝劑。第20頁(yè)2.加入酒精和用玻璃棒攪拌時(shí)，動(dòng)作要輕緩，以免加劇DNA分子斷裂，造成DNA分子不能形成絮狀沉淀。三、操作提醒1.以血液為試驗(yàn)材料，每100ml加入3g檸檬酸鈉，作為抗凝劑。第21頁(yè)2.加入酒精和用玻璃棒攪拌時(shí)，動(dòng)作要輕緩，以免加劇DNA分子斷裂，造成DNA分子不能形成絮狀沉淀。3.二苯胺試劑要現(xiàn)配現(xiàn)用，不然會(huì)影響判定效果。三、操作提醒1.以血液為試驗(yàn)材料，每100ml加入3g檸檬酸鈉，作為抗凝劑。第22頁(yè)試驗(yàn)第23頁(yè)第24頁(yè)①加入檸檬酸鈉溶液目標(biāo)是預(yù)防血凝固第25頁(yè)①加入檸檬酸鈉溶液目標(biāo)是預(yù)防血凝固②加速血細(xì)胞破裂第26頁(yè)①加入檸檬酸鈉溶液目標(biāo)是預(yù)防血凝固②加速血細(xì)胞破裂

③溶解DNA

第27頁(yè)①加入檸檬酸鈉溶液目標(biāo)是預(yù)防血凝固②加速血細(xì)胞破裂

③溶解DNA

④使2mol/LNaCl溶液稀釋至0.14mol/L使得

DNA最大程度地析出

第28頁(yè)①加入檸檬酸鈉溶液目標(biāo)是預(yù)防血凝固②加速血細(xì)胞破裂

③溶解DNA

④使2mol/LNaCl溶液稀釋至0.14mol/L使得

DNA最大程度地析出

⑥使含DNA黏稠物盡可能多溶解于溶液中第29頁(yè)①加入檸檬酸鈉溶液目標(biāo)是預(yù)防血凝固②加速血細(xì)胞破裂

③溶解DNA

④使2mol/LNaCl溶液稀釋至0.14mol/L使得

DNA最大程度地析出

⑥使含DNA黏稠物盡可能多溶解于溶液中⑦除去含DNA濾液中雜質(zhì)第30頁(yè)①加入檸檬酸鈉溶液目標(biāo)是預(yù)防血凝固②加速血細(xì)胞破裂

③溶解DNA

④使2mol/LNaCl溶液稀釋至0.14mol/L使得

DNA最大程度地析出

⑥使含DNA黏稠物盡可能多溶解于溶液中⑦除去含DNA濾液中雜質(zhì)⑧提取DNA第31頁(yè)①加入檸檬酸鈉溶液目標(biāo)是預(yù)防血凝固②加速血細(xì)胞破裂

③溶解DNA

④使2mol/LNaCl溶液稀釋至0.14mol/L使得

DNA最大程度地析出

⑥使含DNA黏稠物盡可能多溶解于溶液中⑦除去含DNA濾液中雜質(zhì)⑧提取DNA⑨A出現(xiàn)藍(lán)色B無(wú)改變第32頁(yè)討論此試驗(yàn)過(guò)程中有幾次過(guò)濾，幾次析出？

分別在哪一步？第33頁(yè)答:整個(gè)試驗(yàn)共“兩次過(guò)濾，兩次析出”此試驗(yàn)過(guò)程中有幾次過(guò)濾，幾次析出？

分別在哪一步？討論第34頁(yè)兩次過(guò)濾第35頁(yè)兩次過(guò)濾第一次：DNA存在于濾液里第一步第二次：DNA存在于濾液里第六步第36頁(yè)過(guò)濾時(shí)使用紗布層數(shù)與需用濾液或

黏稠物相關(guān)，第二次要用其濾出黏稠物

相關(guān)，所以要使用多層紗布，第一次和第

三次均要用其濾液，使用紗布為1－2層兩次過(guò)濾第一次：DNA存在于濾液里第一步第二次：DNA存在于濾液里第六步第37頁(yè)③兩次析出第38頁(yè)③兩次析出第一次：用0.14mol／LNaCI溶液第39頁(yè)③兩次析出第一次：用0.1