新版檢驗技術(shù)操作規(guī)程

1、檢驗技術(shù)操作規(guī)范目錄第一節(jié)全自動血液細胞分析儀操作規(guī)程第二節(jié)尿液分析儀使用規(guī)程第三節(jié)自動凝血儀操作規(guī)程第四節(jié)半自動生化分析儀操作規(guī)程第五節(jié)血常規(guī)檢驗操作規(guī)程第六節(jié)尿常規(guī)檢驗操作規(guī)程第七節(jié)肝功能檢驗操作規(guī)程第八節(jié)腎功能檢驗操作規(guī)程第九節(jié)血脂檢驗操作規(guī)程第十節(jié)血液葡萄糖測定技術(shù)操作規(guī)程第十一節(jié)凝血四項檢驗操作規(guī)程第十二節(jié)AB0血型正、反血型鑒定技術(shù)操作規(guī)程第十三節(jié)交叉配血試驗技術(shù)操作規(guī)程第一節(jié)全自動血液細胞分析儀操作規(guī)程1、樣品分析前準備1.1 開機前的檢查、準備在開啟分析儀電源之前，操作者須按以下要求進行檢查：1.1.1 檢查稀釋液、清洗液、溶血素是否充足，有無過期；試劑管路是否彎折，連接是否可

2、靠。1.1.2 電源線是否正確連接。1.1.3 廢液桶是否清空。1.1.4 UPS電是否足夠，打印紙安裝是否正確，是否足夠。1.1.5 確保鍵盤正確連接到鍵盤接口上。1.2 .開機1.2.1 打開分析儀后面的電源開關(guān)，電源指示燈亮，屏幕上顯示“Initializing”.1.2.2 分析儀進行初始化，整個初始化過程持續(xù)約47分鐘。1.2.3 初始化過程結(jié)束后，系統(tǒng)自動進入“計數(shù)”界面。1.3 動物類型選擇1.3.1 按菜單鍵，移動光標，選擇“動物”，按確認進入“動物”界面。1.3.2 操作者根據(jù)測量的動物類型，選擇需要分析的動物類型。2.1.1 按菜單鍵，選擇“計數(shù)”，進入“計數(shù)”界面。再按模

3、式鍵，將當前模式設(shè)置為“全血”模式。2.1.2 確認狀態(tài)指示區(qū)的計數(shù)狀態(tài)為“就緒”，工作模式為“全血”。2.1.3 將準備好的全血樣本放到采樣針下，使采樣針可以吸到樣本且針頭與容器底保持一定距離。2.1.4 按計數(shù)鍵，啟動樣本分析過程。此時，狀態(tài)指示區(qū)的計數(shù)狀態(tài)為“運行”。2.1.5 采樣針自動吸取13ul的樣本后蜂鳴器響，在采樣針抬起后，移開樣本。2.1.6 分析完成后，按F4鍵進入“樣本信息編輯”界面。按F9鍵進入漢字狀態(tài)。在漢字狀態(tài)下，按F8鍵在全拼和五筆輸入法之間進行切換，輸入樣本信息，輸入完成后，點擊“確認”，保存輸入的內(nèi)容并返回到“計數(shù)”界面。2.1.7 按打印鍵打印樣本分析報告。

4、2.1.8 按照此操作過程進行其余樣本的分析。2.2預(yù)稀釋樣本分析2.2.1 按菜單鍵，選擇“計數(shù)”，進入“計數(shù)”界面。再按模式鍵，將當前模式設(shè)置為“預(yù)稀釋”模式。按稀釋鍵，屏幕彈出“加稀釋液”對話框，取一個干凈的樣本杯放在采樣針下，按計數(shù)鍵，微傾斜樣本杯一定角度讓分析儀自動排出的1.6ml稀釋液沿管壁流入樣本杯中，避免產(chǎn)生氣泡或濺出。2.2.2 加完稀釋液后，按確認鍵，“加稀釋液”對話框關(guān)閉，分析儀自動清洗采樣針。2.2.3 采集20ul血液迅速注入盛有稀釋液的樣本杯中混勻。2.2.4 確認狀態(tài)指示區(qū)的計數(shù)狀態(tài)為“就緒”，工作模式為“預(yù)稀釋”。2.2.5 將準備好的預(yù)稀釋樣本放到采樣針下，使

5、采樣針可以吸到樣本且針頭與容器底保持一定距離。2.2.6 按計數(shù)鍵，啟動樣本分析過程。此時，狀態(tài)指示區(qū)的計數(shù)狀態(tài)為“運行”。2.2.7 采樣針自動吸取0.7ml的樣本后蜂鳴器響，在采樣針抬起后，移開樣本。2.2.8 分析完成后，按F4鍵進入“樣本信息編輯”界面。按F9鍵進入漢字狀態(tài)。在漢字狀態(tài)下，按F8鍵在全拼和五筆輸入法之間進行切換，輸入樣本信息，輸入完成后，點擊“確認”，保存輸入的內(nèi)容并返回到“計數(shù)”界面。2.2.9 按打印鍵打印樣本分析報告。2.2.10 按照此操作過程進行其余樣本的分析。3、樣品分析結(jié)束后3.1 按菜單鍵，彈出系統(tǒng)菜單，選擇“關(guān)機”。3.2 界面彈出“關(guān)機”對話框，點擊

6、“確認”進入關(guān)機界面。3.3 將E-Z清洗液放到采樣針下，按計數(shù)鍵，采樣針將自動吸取E-Z清洗液，執(zhí)行液路和計數(shù)池的清洗。3.4 按照界面提示信息，將E-Z清洗液放到采樣針下，按計數(shù)鍵，采樣針將再次自動吸取E-Z清洗液，執(zhí)行液路和計數(shù)池的清洗。3.5 執(zhí)行完成后，界面提示“請關(guān)閉電源”是，關(guān)閉分析儀的電源開關(guān)。3.6 關(guān)閉電源后檢查分析儀是否有滲漏，并將血液分析儀的周邊環(huán)境打掃干凈。第二節(jié)尿液分析儀使用規(guī)程本測試儀是一項精密儀器，為了更好的維護和使用本儀器必須遵照以下操作規(guī)程。一、操作步驟1 .尿液分析儀的通訊電纜與電腦背面的通訊端口相連，接通電源，先打開電腦，再打開分析儀；儀器啟動，風(fēng)扇轉(zhuǎn)動

7、，推進器移動，屏幕顯示“系統(tǒng)正在測試”，此時系統(tǒng)正在自檢，顯示屏顯示主菜單，工作臺檢條區(qū)有紅色光交替閃爍，用戶可以開始測試2 .點擊電腦桌面尿液分析軟件；3,將試紙條的試劑區(qū)完全浸入新鮮的、充分混合的、未離心的樣本中立即取出，將試紙條的側(cè)邊沿尿樣容器的管壁刮去多余尿液；4,將蘸有尿液的試紙平放在工作臺的檢條區(qū)，確保試紙同工作臺前壁接觸；5,儀器檢測到試紙存在后，推進器將試紙推到測試區(qū)進行測試；6 .當推進器退回原位，放下一條試紙，這樣實現(xiàn)連續(xù)測試；7 .當工作臺上所有的試紙條測試完畢，打印結(jié)果輸出結(jié)束后，按菜單鍵進入儀器設(shè)置，將電源開關(guān)撥到“斷（。）”位置，關(guān)閉儀器電源。二、儀器維護1 .不要

8、在儀器通電狀態(tài)下清潔儀器；2 .不要用汽油、油漆稀釋劑、苯化合物等可能腐蝕儀器的有機溶劑擦拭儀器；3 .不要用水清洗液晶屏，不要用任何會擦傷工作臺和白基準的物質(zhì)擦拭工作臺；4.不要用任何溶劑清潔白基準，如果白基準有明顯劃痕或損壞，請與供應(yīng)商聯(lián)系；5,用柔軟干布或沾有溫和去污劑的軟布擦拭儀器，保持儀器清潔；6,用柔軟、無磨損的布擦拭液晶屏；7.為使儀器正常運行并提供準確的測試結(jié)果，必須定期從儀器中取下推進器、工作臺、步進板、用清水沖洗，用軟布依次擦干保持工作臺的清潔。三、注意事項1.測試時不要將儀器放置在陽光直射的地方，以免影響測試精度；2,請在測試前核對尿液分析試紙型號，避免因使用的尿液分析試

9、紙型號不正確而導(dǎo)致測試結(jié)果錯誤；3 .請勿使用過有效期或變質(zhì)的尿液分析試紙；4 .尿樣本中血的濃度高時，可影響測試的準確性，儀器能夠識別出高濃度血尿并打印出“結(jié)果無效”的提示；5 .必須在推進器動作前，將待測試紙條放好；6 .在放置試紙條時應(yīng)確保試紙條前端接觸工作臺前壁；7 .如果儀器測試頭下發(fā)生故障導(dǎo)致紙條運行受阻。關(guān)掉儀器，拉出工作臺，取出受阻試紙條后，重新安裝工作臺。開機自檢后，對未得出結(jié)果的樣本重測。第三節(jié)自動凝血儀操作規(guī)程1、儀器的常規(guī)操作1.1 打開電源開關(guān)前的檢查。檢查廢液瓶及洗液瓶。如果洗液瓶中洗液的液面過低，請用蒸儲水或去離子水將罐充滿。清空廢液瓶。管道連接檢查各種管線的連接

10、。確保沒有管子脫落或扭結(jié)，電源線被安全的插入交流插座。確保打印機中有足夠的紙張以供打印當天所需處理的所有樣本結(jié)果。補充反應(yīng)杯丟棄用過的反應(yīng)杯，加入適量的干凈的反應(yīng)杯。1.2 打開電源開機順序：打印機一壓力單元一電源單元和主單元（右側(cè)）。打開電源后，儀器自動進入自檢。將病人樣本，質(zhì)控與試劑分別按要求準備就緒，進入分析過程：試劑準備一SetReagent一輸入確認試劑體積一補充反應(yīng)杯一安放樣本架1.3 樣本分析：WorkListIDNo.Entry一輸入樣本號一ENTER一選擇所需檢測的項目（變?yōu)?。?確認所有的設(shè)置結(jié)束后一ENTER一按屏幕右上方“Start”鍵，執(zhí)行分析。分析完畢，儀器進入準備

11、狀態(tài)。1.4 關(guān)機前的工作每日清潔所有樣本針和試劑針：在主菜單屏上按下【Rinseprobe鍵。將出現(xiàn)清洗針屏。按下【Excute】鍵。1.5 關(guān)機關(guān)閉電源。2.儀器保養(yǎng)2.1 每日保養(yǎng)清洗樣品針每次做完試驗都必須清洗樣品針，主要是預(yù)防堵針，執(zhí)行RinseProbe一Excute清空垃圾箱2.2 清空廢液查看儀器后面防逆流瓶TrapChamber有無水，防止因為有水而導(dǎo)致真空泵不能抽真空在洗液瓶中注蒸儲水，最高不要超過上面的凹槽，防止因水過滿，工作時水回流到壓力泵和壓力傳感器上導(dǎo)致人為破壞。2.3 每周保養(yǎng)做一次管路清潔，執(zhí)行SpecialOperate一Rinse&Prepare清潔

12、儀器2.4 每半年保養(yǎng)清洗洗液瓶內(nèi)部，清洗洗液瓶出水管上的過濾網(wǎng)一次。2.5 每三或六個月保養(yǎng)清潔傳動滑軌（X軸、Y軸）并上潤滑油。防止因積塵而使樣品針運行不到位，向下扎錯位置造成樣品針彎曲或斷裂第四節(jié)半自動生化分析儀操作規(guī)程【操作規(guī)程】1 .開機之前檢查電源線是否連接無誤，電源要求接地良好；連接打印機電源線，接通打印機電源開關(guān)；將廢液管插入廢液容器內(nèi)；接通顯示器開關(guān)及主機背部電源開關(guān)。2 .開機一自檢后一鍵入Enter,確定已設(shè)定測試參數(shù)一鍵入Enter,進入編制工作表一在設(shè)置欄，開啟聯(lián)機打印一儀器預(yù)熱20分鐘后，調(diào)用已設(shè)定測試項目進行樣品測定一打印結(jié)果一清洗儀器一關(guān)機。3 .吸液口由不銹鋼

13、保護管和鋼管內(nèi)聚四氟乙烯吸液管組成，應(yīng)注意保護，不要碰彎。4 .切忌在帶電狀態(tài)下連接任何連接口?！緝x器的保養(yǎng)與維護】1 .日常保養(yǎng)工作主要是清洗流動比色皿，每天工作結(jié)束后，要用蒸儲水清洗。具體方法如下：將吸液管插入蒸儲水中，向上扳動吸液開關(guān)，反復(fù)沖洗流動比色皿，直到蒸儲水的吸光度值正常為止。2 .每周要用專門的清洗劑清洗一次流動比色皿，清洗時，讓清洗劑停留在比色皿中約半小時，然后排掉，再用蒸儲水沖洗干凈，最后注入蒸儲水。3 .不使用儀器時，流動比色皿內(nèi)一定要保證充滿蒸儲水。4 .更換打印機色帶時，嚴格遵照打印機操作手冊，避免不規(guī)范操作。5 .光源燈更換時一定要先切斷儀器的電源，手不可觸摸光源燈

14、的玻璃部分，萬一光源燈的玻璃部分弄臟了，可用無水乙醇將污物除去。6 .更換的蠕動泵管尺寸材料應(yīng)與原泵管一致，如不一致則要重新調(diào)整吸液量。第五節(jié)血常規(guī)檢驗操作規(guī)程【標本】抗凝靜脈血（有些儀器也可用末梢血）?！痉椒ā垦杭毎詣臃治鰞x測定法?！驹噭垦杭毎詣臃治鰞x配套試劑?！静僮鳌吭斠娧杭毎詣臃治鰞x使用手冊?！靖阶ⅰ?. 血常規(guī)包括白細胞計數(shù)及分類、紅細胞計數(shù)、血紅蛋白濃度、紅細胞比積、血小板計數(shù)等項目。這些項目亦有相應(yīng)的手工方法，詳見有關(guān)資料。2. 半自動及全自動血液細胞分析儀從設(shè)計上均要求用抗凝靜脈血。其優(yōu)點為：（1）靜脈血能正確地反映病人實際情況，重復(fù)性好；（2）利于延長儀器的使用壽

15、命；（3）解決了采血盤的交叉感染問題等。3. 血細胞計數(shù)應(yīng)用EDTAK2：為抗凝劑（EDTAE-2H2O1.52.2mg可抗凝1ml血）。4. 貯血容器應(yīng)選用有蓋塑料管?？鼓杉笤谑覝刂匈A存應(yīng)不超過6h;如需制作血涂片應(yīng)在2h內(nèi)完成。5. 測定前必須將EDTA-&抗凝血充分混勻。6. 血細胞分析儀測定最適溫度為1822C,低于15c或高于30C,均可使細胞體積發(fā)生改變，影響各參數(shù)的結(jié)果。7.血細胞分析儀用于白細胞分類只能當作一種過篩手段，當白細胞、紅細胞、血紅蛋白和血小板的任何一項有明顯升高或降低；白細胞分類出現(xiàn)異常結(jié)果（中間細胞群百分率8.0%）;紅細胞、白細胞和血小板的任何一個

16、直方圖出現(xiàn)異常圖形等情況，須用顯微鏡檢查及分類。第六節(jié)尿常規(guī)檢驗操作規(guī)程【標本】新鮮尿液?！痉椒ā炕瘜W(xué)試帶法?！驹噭扛餍吞柲蛞夯瘜W(xué)分析儀配套試帶?！静僮鳌吭斠娔蛞夯瘜W(xué)分析儀使用手冊?！靖阶ⅰ?. 尿常規(guī)檢查使用尿液化學(xué)分析儀，目前能進行810項檢測（PH蛋白、葡萄糖、酮體、隱血、尿膽紅素、尿膽素原、亞硝酸鹽、比重、白細胞）。這些項目亦有相應(yīng)的手工方法，詳見有關(guān)資料。2. 必須了解所用試帶各膜塊注意事項、藥物干擾。3. 要注意尿液化學(xué)分析儀測定結(jié)果與手工法的差異，必要時用手工法復(fù)查。4. 尿液化學(xué)分析儀檢測僅是一個過篩手段，當?shù)鞍住㈦[血、白細胞等出現(xiàn)異常結(jié)果（如尿蛋白"十”或以上）時

17、，應(yīng)進行鏡檢。5.尿液顏色、透明度等一般性狀異常時也應(yīng)報告。第七節(jié)肝功能檢驗操作規(guī)程血清總膽紅素（TBIL）和結(jié)合膽紅素（DBIL）測定改良JG法【試劑參照書刊文獻（如全國臨床檢驗操作規(guī)程第二版）自配，配制標準液的膽紅素應(yīng)符合如下標準，純膽紅素的氯仿溶液在25c當光徑1.000±0.001Cm,波長453nm條件下其摩爾吸光系數(shù)應(yīng)在60700±1600范圍內(nèi)，偶氮膽紅素的摩爾吸光系數(shù)應(yīng)在74380±866范圍內(nèi)，配制標準液的稀釋劑須含白蛋白，可用牛血清白蛋白或人血清代替人血清白蛋白。標準液應(yīng)貯於棕色瓶中避光保存，在市售試劑中以含堿性酒石酸的靈敏度特異性高?！静僮鳌?/p>

18、按試劑盒說明書或相應(yīng)書刊文獻規(guī)程手工操作，比色測定，波長600nm.制作準曲線。血樣測定，從標準曲線上求TBIL及DBIL的含量以umo1/L報告。也可按廠家提供的試劑及儀器使用的說明書的要求將相應(yīng)的程序及參數(shù)設(shè)入，用自動生化分析儀測定?！緲吮尽垦?，空腹血為宜，脂血、脂溶性色素及嚴重溶血干擾此測定，暫不能測定的標本應(yīng)避光保存，室溫可穩(wěn)定8h,28c可保存48h。含疊氮鈉作防腐劑的質(zhì)控血清不宜用此法測定膽紅素。膽紅素氧化酶（BOD法【試劑市售成套試劑。BOD式劑復(fù)溶后28c可保存一周?！静僮鳌堪磸S家提供的試劑及儀器說明書要求設(shè)置程序輸入?yún)?shù)用自動生化分析儀測定。波長450或460nm【標本】血

19、清要求與改良J一G法相似。二甲亞楓（DMSO法【試劑市售現(xiàn)成試劑?！静僮鳌堪丛噭┖姓f明書手工操作比色測定或用自動生化儀測定。波長560nmo【標本】血清、輕度脂血，溶血標本對結(jié)果無明顯影響、重度脂血、溶血標本須作標本空白進行較正。血氨測定【方法】酶兩點法?！驹噭┦惺鄢商自噭?。【操作】按試劑及儀器使用說明書要求，設(shè)入相應(yīng)的程序及各項參數(shù)、用自動生化分析儀測定。波長340nm【標本】EDTA.Na2抗凝血漿。靜脈采血后與EDTA.Na混勻，立即置冰水中盡快分離出血漿，加塞置24c保存，在23h內(nèi)分析，-20C可穩(wěn)定24h。溶血標本忌用。第八節(jié)腎功能檢驗操作規(guī)程尿素氮1 .檢測目的:檢測血清、血漿或

20、尿液中尿素的含量，為臨床對相關(guān)疾病的診斷、觀察疾病的變化及治療效果，以及對健康人群正常生理指標的監(jiān)測提供重要的參考價值。2 .標本要求：2.1 病人準備：空腹12小時。2.2 標本類型：血清、月f素化的血漿或24小時尿。3 .設(shè)備和試劑：3.1 儀器設(shè)備：邁瑞半自動生化分析儀3.2 試劑材料：試劑3.3 試劑的貯存：3.3.1 28c密閉避光貯存至標簽所注失效期。3.3.2 開蓋上機28c避光穩(wěn)定30天。3.3.3 變質(zhì)指示：試劑混濁變色或空白吸光度值<1.000時，不能繼續(xù)使用。3.4 注意：此試劑為體外診斷用，禁止入口，吞下有害。試劑含有疊氮化鈉，誤入眼、口中或沾染到皮膚上請立即用清

21、水徹底沖洗，必要時到醫(yī)院就診。疊氮化鈉可以和銅、鉛等金屬反應(yīng)形成爆炸性化合物，故廢棄時請充分稀釋廢液和沖洗排水管。3.5 試劑準備：即開即用的，無需特殊準備。4 .操作步驟：見生化分析儀操作流程。5 .質(zhì)量控制：5.1 質(zhì)控物：RANDO涔項人基質(zhì)血清5.2 質(zhì)控措施：5.2.1 室內(nèi)質(zhì)控：每日日常工作前進行。5.2.2 室間質(zhì)控：參加北京臨床檢驗中心臨床化學(xué)室間質(zhì)評。6 .干擾因素：總膽紅素w40mg/dL,血紅蛋白w450mg/dL,抗壞血酸w400mg/dL對本法無干擾。7 .參考區(qū)間及可報區(qū)間：7.1 參考范圍：血清/血漿2.868.20mmol/L24小時尿1535g/24h7.2

22、可報范圍：0.0035.00mmol/L。樣品Urea含量超過線性范圍應(yīng)用生理鹽水稀釋重做,結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。8 .異常結(jié)果處理：結(jié)果異常、與臨床診斷不符，應(yīng)復(fù)查或與臨床聯(lián)絡(luò)。肌酊1.檢測目的：檢測血清、血漿或尿液中肌酎的含量，為臨床對相關(guān)疾病的診斷、觀察疾病的變化及治療效果，以及對健康人群正常生理指標的監(jiān)測提供重要的參考價值。3 .標本要求：3.1 病人準備：空腹12小時。3.2 標本類型：血清、肝素化的血漿或尿液。4 .設(shè)備和試劑：4.1 儀器設(shè)備：邁瑞半自動生化分析儀4.2 試劑材料：試劑4.3 試劑的貯存：4.3.1 28c密閉避光貯存至標簽所注失效期。4.3.2 開蓋上機28c避光穩(wěn)

23、定30天。4.3.3 變質(zhì)指示：試劑混濁變色或空白吸光度值>0.050時，不能繼續(xù)使用。4.4 注意：此試劑為體外診斷用，禁止入口，吞下有害。試劑含有疊氮化鈉，誤入眼、口中或沾染到皮膚上請立即用清水徹底沖洗，必要時到醫(yī)院就診。疊氮化鈉可以和銅、鉛等金屬反應(yīng)形成爆炸性化合物，故廢棄時請充分稀釋廢液和沖洗排水管。4.5 試劑準備：即開即用的，無需特殊準備。5 .操作步驟：見半自動生化分析儀操作流程。6 .質(zhì)量控制：6.1 質(zhì)控物：RANDO涔項人基質(zhì)血清6.2 質(zhì)控措施：6.2.1 室內(nèi)質(zhì)控：每日日常工作前進行。6.2.2 室間質(zhì)控：參加臨床化學(xué)室間質(zhì)評。7 .干擾因素：直接膽紅素w257d

24、mol/L,血紅蛋白w0.5g/L,抗壞血酸w3mmol/L,甘油三酯w15.0mmol/L,肝素w50KU/L,枸檬酸鈉w10g/L對本法無干擾。8 .參考區(qū)間及可報區(qū)間：8.1 參考范圍：血清/血漿53.0123.0科mol/L（男性）44.0106.0.mol/L（女性）首次晨尿153015320科mol/L24小時尿6.615.0mmol/24h8.2可報范圍：0.08840.0科mol/L。樣品Crea含量超過線性范圍應(yīng)用生理鹽水稀釋重做，結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。9.異常結(jié)果處理：結(jié)果異常、與臨床診斷不符，應(yīng)復(fù)查或與臨床聯(lián)絡(luò)。9.危急值及處理方法：>177科mol/L。及時與臨床聯(lián)絡(luò)

25、。10.實驗室解釋：增高：嚴重腎功能不全、各種腎障礙、肢端肥大癥等。降低：營養(yǎng)不良、多尿等。第九節(jié)血脂檢驗操作規(guī)程標本采集與處理1 .受檢者抽血前二周應(yīng)保持平衡的飲食習(xí)慣，近期體重穩(wěn)定無外傷，手術(shù)等意外情況。并注意如有使用降糖、降脂、降壓、避孕藥，3-受體阻滯劑，免疫抑制劑，激素藥物等，則應(yīng)根據(jù)所用藥物特性停藥數(shù)天或數(shù)周后再作血液脂類檢測。2 .空腹抽血，TG脂蛋白，載脂蛋白測定應(yīng)至少禁食12小時（僅作膽固醇測定不必強求空腹）24小時內(nèi)不作劇烈運動。抽血前不要久站立。至少應(yīng)靜坐5分鐘。抽血時止血帶使用不可超過1分鐘。3 .標本用血清，也可用肝素或EDTA.Na抗凝之血漿。EDTA.Na濃度不宜

26、太高。4 ,血標本室溫放置不得超過3h,放置3045分鐘后應(yīng)即時分離出血清（漿）蓋封於4C冰箱中可穩(wěn)定至少4天，如需長期保存，應(yīng)於-70C中冰凍存放，不可反復(fù)凍融。血清總膽固醇（TQ測定酶法（CHODPAP）【試劑市售現(xiàn)成試劑?！静僮鳌堪丛噭┘皟x器使用說明書要求設(shè)定程序，輸入?yún)?shù)用自動或半自動生化分析儀測定（速率法）終點法可手工操作，用普通分光光度計比色測定。波長500nm或520ns【標本】血清（漿）參看本節(jié)的標本采集與處理?！靖阶ⅰ勘痉橹腥A醫(yī)學(xué)會檢驗學(xué)會推薦的TC測定常規(guī)方法（中華醫(yī)學(xué)檢驗雜志，1995、18:185）。膽固醇標準液以定值參考血清為宜，而不宜用Chol的水溶液作標準。Ch

27、ol定值質(zhì)控血清亦不應(yīng)用作標準液。主要技術(shù)指標：終點法批內(nèi)3<1.5%、批間CVC2.5%。靈敏度：顯色劑用酚時，TC5.2mmo1/L（200mg/dl）時的吸光度（A500nm）約0.300.35,故A500nm=0.005時TC濃度約為0.08mmo1/L（3mg/dL）。測定范圍：當血清與試劑用量之比為1:100時其測定的上界為13mmo1/L（500ng/dL）。血清甘油三酯（T。測定酶法（GPOPA法）【試劑市售現(xiàn)成試劑。有兩種。一步酶法單一試劑，二步酶法雙試劑。標準液（參考物）一步酶法之用三油酸甘油酯水溶液，也可用甘油，但甘油不適用於二步酶法?！静僮鳌堪丛噭┘皟x器使用說明書

28、要求設(shè)定程序和參數(shù)，用自動或半自動生化分析儀測定，終點法可用普通分光光度計手工操作，比色測定。波長500ns【標本】血清（漿）參看本節(jié)標本采集與處理?！靖阶ⅰ勘痉ㄔ诓僮鞒绦蛏戏譃橐徊矫阜ㄅc二步酶法，二步酶法為中華醫(yī)學(xué)檢驗學(xué)會的推薦方法（中華醫(yī)學(xué)檢驗雜志1995、18:249）?，F(xiàn)階段允許二法并存，要求逐步過渡到統(tǒng)一采用二步酶法，在方法尚未統(tǒng)一前，實驗室報告TG測定結(jié)果時應(yīng)注明“除FG值”或“未除FG值”。主要枝術(shù)指標：酶試劑用緩沖液配制后，2025c應(yīng)穩(wěn)定1天，4c可穩(wěn)定37天，試劑空白為A500nme0.05；顯色后穩(wěn)定>30min：測定上界11.3mmo1/L（100mg/dL）;精

29、密度：批內(nèi)C"3%批間CVC5%靈敏度：2mmo1/LTGA500nm>0.2。血清高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）測定磷鴇酸鎂沉淀法【試劑市售成套試劑，沉淀劑，酶試劑（同TG測定）?！静僮鳌堪丛噭┖姓f明書操作。1 .沉淀含apoB的脂蛋白。2 .測定上清液（只含HDL的膽固醇含量（方法同酶法TC測定）?！緲吮尽垦澹{）。硫酸葡聚糖一鎂沉淀法【試劑市售成套試劑：總HDL試劑，HDL3式劑，酶試劑（同TC試劑）?！静僮鳌堪丛噭┱f明書操作：1 .沉淀含apoB的脂蛋白，（總HDL試齊【J）;2 .沉淀含apoB的脂蛋白及HDL2（HDL3試劑）；3 .測定總HDL-CMHDL3C

30、（同酶法TC測定），并計算出HDL2C1。【標本】血清（漿）血樣在室溫中不宜久放，應(yīng)即時測定，原則應(yīng)低溫保存。直接HDLC1定法【試劑市售專門的試劑，無沉淀劑。酶試劑同TC測定。（如日本第一化學(xué)藥品株式會社的產(chǎn)品）【操作】按試劑盒及儀器使用說明書要求設(shè)置程序，輸入?yún)?shù)直接用自動或半自動生化分析儀測定，無須沉淀離心分離出HDL步驟?！緲吮尽垦澹{）。血清低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)測定1 .Friedwald工式計算法：(1) LDL-C=TC-HDL-rTG/5(以mg/dl為單位計)；(2) LDL-C=TC-HDL-C-TG/2.2(以mmo1/L為單位計)；(3)只有當血TG<

31、;4.52mmo/L結(jié)果才較準確；(4)只有TCTGHDL-C三項測定都準確且符合標準化要求時，才可計算出LDL-C的近似值。2 .聚乙烯硫酸沉淀法【試劑沉淀劑市售，酶試劑同TC測定?！静僮鳌? .TC測定。2 .選擇性沉淀血清中LDL,測定上清液之HDL-C與VLDL-C之和的量，(同TC測定)。3 .計算出LDLC的含量?！緲吮尽垦?。血清載脂蛋白A1(apoA1)測定免疫透射比濁法。波長340nm,本法批間CVc5%【試劑市售試劑盒，試劑28c保存，不同批號試劑不能混合使用，抗血清效價不應(yīng)低於16?！静僮鳌堪丛噭┘皟x器使用說明書要求，設(shè)定程序和參數(shù)用自動生化分析儀測定，也可用特定蛋白分析

32、儀作速率法散射比濁測定，或用含340nm的分光光度計手工操作測定?！緲吮尽垦?。血清載脂蛋白B(apoB)測定免疫透射比濁法。波長340nm,本法批間CVc5%【試劑】市售試劑，28c保存，不同批號試劑不能混合使用，抗血清效價不應(yīng)低於1：128?！静僮鳌繀⒖碼poA1測定?！緲吮尽垦?。第十節(jié)血液葡萄糖測定技術(shù)操作規(guī)程1.檢測目的：檢測血清或血漿中葡萄糖的含量，為臨床對相關(guān)疾病的診斷、觀察疾病的變化及治療效果，以及對健康人群正常生理指標的監(jiān)測提供重要的參考價值。3 .標本要求：3.1 病人準備：空腹12小時。3.2 標本類型：血清或NaF抗凝的血漿。采血后及時分離，以避免血清或血漿中葡萄糖被細

33、胞利用而降低。4 .設(shè)備和試劑：4.1 儀器設(shè)備：奧林巴斯AU600生化分析儀4.2 試劑材料：四川邁克公司試劑參與反應(yīng)成份：R1:酚(12.0mmol/L)R2:GOD(R35KU/L)、POD(>5KU/L)、4-AAP(1.20mmol/L)4.3 試劑的貯存：4.3.1 28c密閉避光貯存至標簽所注失效期。4.3.2 開蓋上機28c避光穩(wěn)定30天。4.3.3 變質(zhì)指示：試劑混濁變色或空白吸光度值>0.150時，不能繼續(xù)使用。4.4 注意：此試劑為體外診斷用，禁止入口，吞下有害。試劑含有疊氮化鈉，誤入眼、口中或沾染到皮膚上請立即用清水徹底沖洗，必要時到醫(yī)院就診。疊氮化鈉可以和

34、銅、鉛等金屬反應(yīng)形成爆炸性化合物，故廢棄時請充分稀釋廢液和沖洗排水管。4.5 試劑準備：即開即用的，無需特殊準備。5質(zhì)量控制：1.1 質(zhì)控物：RANDO涔項人基質(zhì)血清1.2 質(zhì)控措施：1.2.1 室內(nèi)質(zhì)控：每日日常工作前進行。1.2.2 室間質(zhì)控：參加北京臨床檢驗中心臨床化學(xué)室間質(zhì)評。6 .參考區(qū)間及可報區(qū)間：6.1 參考范圍：空腹3.896.11mmol/L餐后1小時7.788.89mmol/L餐后2小時3.897.78mmol/L6.2 可報范圍：0.0022.30mmol/L。樣品GLU含量超過線性范圍應(yīng)用生理鹽水稀釋重做,結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。7 .危急值及處理方法：<2.5mmol

35、/L或>10mmol/L。及時與臨床聯(lián)絡(luò)。第十一節(jié)凝血四項檢驗操作規(guī)程全血凝固時間檢驗(CD【標本】靜脈取血3ml?！痉椒ㄅc操作】試管法、硅管法操作參見全國臨床檢驗操作規(guī)程（第二版）?！靖阶ⅰ?, 靜脈取血要一針見血，盡量減少組織液和空氣混入。2, 水浴箱溫度要恒定，過高或過低，可影響結(jié)果?；罨糠帜蠲笗r間測定（APTT【標本】自靜脈取血，用109mmol/L枸椽酸鈉作1:9抗凝?！驹噭渴惺鄢商自噭??！痉椒ㄅc操作】按試劑及有關(guān)儀器說明書要求進行?！靖阶ⅰ?, 標本應(yīng)及時檢測，最遲不超過2h。2, 分離血漿應(yīng)在3000r/min,離心10min。3, 本試驗較試管法全血凝血時間敏感，

36、能檢出因子皿：Cv25%輕型血友病。血漿凝血酶原時間測定（PT,一期法）【標本】靜脈血1.8ml,用109mmol/L枸椽酸鈉0.2ml抗凝?！驹噭?. 組織凝血活酶浸出液；2. 0.025mol/LCaCl2液；【方法與操作】見全國臨床檢驗操作規(guī)程（第二版）?！靖阶ⅰ?, 采血后宜在1h內(nèi)完成，置冰箱4c保存，不應(yīng)超過4h,-20c下可放置2周，-70C可放置6個月。2, 水溫箱控制在37c±1C,過高過低均影響結(jié)果。簡易凝血活酶生成試驗（STGT【標本】取全血0.04ml加5ml蒸儲水，混勻，即成溶血液，備用?！痉椒ㄅc操作】見全國臨床檢驗操作規(guī)程（第二版）第十二節(jié)AB0血型正、

37、反血型鑒定技術(shù)操作規(guī)程1 .檢測目的用于檢測患者血型，實施輸血治療和組織器官移植等。2 .檢測原理（正定型法）根據(jù)igM類特異性血型抗體與紅細胞上特異性抗原結(jié)合能夠出現(xiàn)凝集反應(yīng)的原理，用已知igM類特異性標準抗血清與被檢紅細胞在室溫條件下反應(yīng)，若被檢紅細胞出現(xiàn)凝集現(xiàn)象，表明被檢紅細胞上有與血型抗體對應(yīng)的抗原。3 .標本要求新鮮全血。4 .試劑標準抗A、抗B血清。5 .操作步驟（玻片法）5.1 標記：取一載玻片，用蠟筆畫上直徑2cm左右的兩個圓圈，分別標記抗A、抗Bo5.2 抗血清：在玻片蠟筆圈內(nèi)按標記所示分別滴加抗A、抗B標準抗血清各一滴。5.3 紅細胞：在抗A、抗B圈內(nèi)加被檢者全血各一滴。用玻棒將紅細胞與抗體充分混勻，室溫下放置1830min（為防止天氣干燥造成玻片干涸，可把試驗玻片