實驗七 酵母菌的形態(tài)觀察與死活細(xì)胞鑒別

實驗七酵母菌的形態(tài)觀察與死活細(xì)胞鑒別目的要求

1、觀察酵母菌的形態(tài)及出芽生殖方式2、學(xué)習(xí)區(qū)分酵母菌死活細(xì)胞的方法實驗原理

酵母菌是單細(xì)胞真核微生物，其大小為常見細(xì)菌的幾倍至幾十倍。大多數(shù)酵母采用出芽方式進(jìn)行繁殖。美藍(lán)是一種弱氧化劑，其氧化態(tài)呈藍(lán)色，還原態(tài)呈無色。用美藍(lán)對酵母細(xì)胞進(jìn)行染色時，由于新陳代謝，活細(xì)胞具有較強(qiáng)的還原能力，可使美藍(lán)由藍(lán)色的氧化型轉(zhuǎn)變?yōu)闊o色的還原型，染色后細(xì)胞呈無色。死細(xì)胞或代謝能力弱的衰老細(xì)胞其還原能力弱，染色后細(xì)胞呈藍(lán)色。

實驗材料1.培養(yǎng)2d的面包酵母斜面培養(yǎng)物2.0.1%呂氏堿性美藍(lán)染液實驗方法1.滴一滴呂氏堿性美藍(lán)染液于載玻片中央，無菌操作取酵母培養(yǎng)物置于染液中，混合均勻。2.取蓋玻片，將蓋玻片一端與菌液接觸，緩慢將蓋玻片傾斜并蓋在菌液上。3min后，鏡檢。觀察酵母菌形態(tài)及出芽情況，并根據(jù)細(xì)胞顏色區(qū)別死活細(xì)胞。4.30min后，再次觀察。

美藍(lán)染液水浸片法實驗報告繪圖說明面包酵母形態(tài)特征及出芽生殖情況繪圖說明曲霉和青霉的形態(tài)特征第1組：牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基，1000ml，121℃滅菌20min，P241第2組：伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基（EMB培養(yǎng)基）：伊紅美藍(lán)瓊脂22.5g,水600ml,121℃滅菌20min

20%乳糖水溶液120ml：24g加水120ml，115℃滅菌20min

第3組：3倍濃縮乳糖蛋白胨培養(yǎng)基100ml：蛋白胨3g，氯化鈉1.5g，水100ml1.6%溴甲酚紫乙醇溶液0.5ml，每管加5ml，共15管,內(nèi)裝倒置小管，121℃滅菌20min。第4-5組：普通濃度乳糖蛋白胨發(fā)酵培養(yǎng)基700ml：P244蛋白胨7g，氯化鈉3.5g，水700ml1.6%溴甲酚紫乙醇溶液1.2ml，每管加7ml，共45管，內(nèi)裝倒置小管每管加10ml，共35管，內(nèi)裝倒置小管，121℃滅菌20min。第6組：固體淀粉培養(yǎng)基：600ml，P243蛋白胨6g，氯化鈉3g，牛肉膏3g，可溶性淀粉1.2g，水600ml，瓊脂10g，121℃滅菌20min。第7組：明膠培養(yǎng)基，500ml，P243蛋白胨5g，氯化鈉2.5g，牛肉膏1.5g，明膠80g，水500ml，每管7ml，121℃滅菌20min。第8組：蛋白胨水培養(yǎng)基：250ml，p