實驗：檢測生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì)課件

實驗1：檢測生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì)必修一實驗:檢測生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì)1可編輯課件PPT一.實驗原理：某些化學(xué)試劑能夠使生物組織中的有關(guān)有機化合物產(chǎn)生特定的顏色反應(yīng)。如：①.還原性糖的鑒定：還原性糖+②.脂肪的鑒定：

脂肪+脂肪+

③.蛋白質(zhì)的鑒定：蛋白質(zhì)+④淀粉+斐林試劑磚紅色沉淀蘇丹Ⅲ染液橘黃色蘇丹Ⅳ染液紅色雙縮脲試劑紫色碘藍色2可編輯課件PPT二.目的要求：嘗試用化學(xué)試劑檢測生物組織中糖類、脂肪和蛋白質(zhì)1、還原糖的檢測和觀察：選材應(yīng)該選擇含

量高.顏色為

以蘋果.梨為最好。糖白色或近于白色制備組織樣液：制漿過濾取液三.實驗過程:用一層紗布的植物組織，3可編輯課件PPT可溶性還原糖與斐林試劑在加熱的過程中生成磚紅色沉淀，說明植物組織樣液中含有還原糖。注入2mL蘋果組織樣液注入1mL剛配制好的斐林試劑水浴加熱約2min呈色反應(yīng)變成磚紅色50----650C的溫水結(jié)論：甲乙液等量混勻現(xiàn)配現(xiàn)用振蕩、混合搖勻呈現(xiàn)藍色4可編輯課件PPT①還原糖有

。

②試劑：

.（甲液：0.1g/ml

的

,乙液：0.05g/ml的

.）甲乙液必須

后再加入樣液中，

。

③必須

。葡萄糖，果糖，麥芽糖用水浴加熱斐林試劑NaOHCuSO4等量混合均勻現(xiàn)配現(xiàn)用注意事項：④顏色變化：淺藍色棕色磚紅色5可編輯課件PPT思考：

1.為什么加入斐林試劑甲液和斐林試劑乙液時必須混合后再加入？因為若先加入NaOH溶液，還原性糖中的還原性半縮醛羥基易被氧化而失去還原性，再加入CuSO4溶液后不能產(chǎn)生Cu2O磚紅色沉淀，只有將其先配成Cu(OH)2懸濁液，才可產(chǎn)生磚紅色沉淀。6可編輯課件PPT2.斐林試劑甲液和乙液既然混合后使用，為什么不能在實驗前配制好，一定要使用時臨時配制？

由一分析可知，鑒定試劑實質(zhì)上是Cu(OH)2懸濁液，很不穩(wěn)定，容易生成藍色Cu(OH)2沉淀，所以應(yīng)將甲液、乙液分別配制儲存，使用時再臨時配制7可編輯課件PPT二、脂肪的檢測方法一：制作臨時切片（1）選材：經(jīng)浸泡去種皮的花生種子。（2）檢測過程：制片選取最薄的切片置于潔凈的載玻片中央制成臨時裝片：滴12滴蒸餾水，蓋上蓋玻片染色：在薄片上滴加23滴蘇丹Ⅲ染液，染色23min洗去浮色：用吸水紙吸去染液，滴加體積分數(shù)為50%的酒精12滴鏡觀察：在低倍鏡下尋找到已著色的圓形小顆粒，然后用高倍鏡觀察。切片：花生種子（浸泡３－４h），去皮，將子葉削成薄片。視野中有橘黃色顆粒8可編輯課件PPT9可編輯課件PPT橘黃色小圓顆粒即為脂肪顆粒脂肪+蘇丹Ⅲ（或蘇丹Ⅳ）染液橘黃色（或紅色）10可編輯課件PPT注意事項：

①切片要薄，如厚薄不均就會導(dǎo)致觀察時有的地方清晰有的地方模糊。

②酒精的作用是：

。

③需使用顯微鏡觀察

④使用不同的染色劑染色時間不同顏色變化：

。洗去浮色橘黃色或紅色11可編輯課件PPT3、蛋白質(zhì)的檢測和觀察：選材應(yīng)該選擇含

豐富的豆?jié){或雞蛋清溶液（避免材料自身的顏色對實驗變化顏色的掩蓋）蛋白質(zhì)黃豆?jié){濾液或蛋清稀釋液制備組織樣液呈色反應(yīng)組織樣液2mL雙縮脲試劑A液1mL雙縮脲試劑B液4滴搖勻后變成紫色結(jié)論：說明組織樣液中存在蛋白質(zhì)。12可編輯課件PPT（3）注意事項：①試劑：

（

A液：0.1g/ml的

；B液：0.01g/ml的

）先加

，再加

。注意：先加入試劑A，造成堿性環(huán)境，而只有在堿性環(huán)境中，蛋白質(zhì)才容易與Cu離子發(fā)生顏色反應(yīng)，形成紫色的絡(luò)合物。

B液要求量適中，否則多余的B液將會與A液發(fā)生反應(yīng)生成大量藍色Cu(OH)2沉淀而遮蓋試驗中所產(chǎn)生的紫色。同樣為了防止生成較Cu(OH)2沉淀遮蔽實驗結(jié)果，在配制溶液時，雙縮脲試劑B比斐林試劑乙液濃度小得多，這也是斐林試劑和雙縮脲試劑不能互換使用的道理。②鑒定前，留出一部分組織樣液，以便對比。

③用于蛋白質(zhì)鑒定的蛋清必須稀釋，以免實驗后粘住試管壁，不易洗刷雙縮脲試劑A液1mlB液4滴NaOHCuSO4蛋白質(zhì)的檢測結(jié)果13可編輯課件PPT斐林試劑與雙縮脲試劑的比較：A液:0.1g/mLNaOHB液:0.01g/mLCuSO4甲液:0.1g/mLNaOH乙液:0.05g/mLCuSO4紫色物質(zhì)生成磚紅色沉淀先加A液，再加B液，不需加熱甲液與乙液先混再用，且現(xiàn)配現(xiàn)用，需加熱蛋白質(zhì)還原性糖試劑組成檢驗結(jié)果試劑用法檢測對象雙縮脲試劑斐林試劑14可編輯課件PPT15可編輯課件PPT斐林試劑與雙縮脲試劑都由NaOH和CuSO4組成，但二者有如下三點不同：①溶液濃度不同。斐林試劑中NaOH的濃度為0.1g/mL，CuSO4的濃度為0.05g/mL；雙縮脲試劑中NaOH的濃度為0.1g/mL，CuSO4的濃度為0.01g/mL。②使用原理不同。斐林試劑實質(zhì)是新配制的Cu(OH)2溶液；雙縮脲試劑實質(zhì)是在堿性環(huán)境下的Cu2＋。③使用方法不同。使用斐林試劑時，先把NaOH溶液和CuSO4溶液混合，然后立即使用。使用雙縮脲試劑時，先加入NaOH溶液，然后再加入CuSO4溶液。16可編輯課件PPT淀粉的檢測和觀察：取材：馬鈴薯勻漿檢測組織樣液2mL碘液2滴結(jié)論：說明組織樣液中存在淀粉。注意：常用材料：馬鈴薯試劑：

。顏色變化：

。碘液變藍搖勻后變成藍色17可編輯課件PPT四種物質(zhì)顏色反應(yīng)的對比還原糖蛋白質(zhì)淀粉脂肪18可編輯課件PPT下列關(guān)于實驗操作步驟的敘述中，正確的是

Ａ．用于鑒定可溶性還原糖的斐林試劑甲液和乙液，可直接用于蛋白質(zhì)的鑒定

Ｂ.脂肪的鑒定需要用顯微鏡才能看到被