circRACGAP1通過調(diào)控miR-22-3ENAKT信號通路抑制系統(tǒng)性紅斑狼瘡的研究演示稿件

circRACGAP1通過調(diào)控miR-22-3pPTENAKT信號通路抑制系統(tǒng)性紅斑狼瘡的研究匯報人：XXX2024-01-11引言circRACGAP1在系統(tǒng)性紅斑狼瘡中作用機制miR-22-3p在系統(tǒng)性紅斑狼瘡中作用機制PTENAKT信號通路在系統(tǒng)性紅斑狼瘡中作用機制circRACGAP1通過調(diào)控miR-22-3pPTENAKT信號通路抑制SLE機制探討總結(jié)與展望引言01系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）是一種典型的自身免疫性疾病，患者體內(nèi)產(chǎn)生大量自身抗體，攻擊多個器官和系統(tǒng)，導(dǎo)致廣泛的組織損傷和功能障礙。自身免疫性疾病SLE的臨床表現(xiàn)多樣，包括皮膚紅斑、關(guān)節(jié)炎、腎炎、心包炎、神經(jīng)系統(tǒng)癥狀等，病情輕重不一，嚴重者可危及生命。臨床表現(xiàn)多樣SLE的發(fā)病機制涉及遺傳、環(huán)境、免疫等多個方面，目前尚未完全闡明。發(fā)病機制復(fù)雜系統(tǒng)性紅斑狼瘡概述circRACGAP1的作用：circRACGAP1是一種環(huán)狀RNA，在SLE患者體內(nèi)表達異常，可能通過調(diào)控相關(guān)信號通路參與SLE的發(fā)病過程。miR-22-3pPTENAKT信號通路：miR-22-3p是一種microRNA，能夠靶向PTEN基因并調(diào)控其表達。PTEN是一種抑癌基因，具有抑制AKT信號通路活性的作用。AKT信號通路在細胞增殖、分化、凋亡等過程中發(fā)揮重要作用，與SLE的發(fā)病密切相關(guān)。circRACGAP1與miR-22-3pPTENAKT信號通路的聯(lián)系：研究表明，circRACGAP1可能通過調(diào)控miR-22-3p的表達，進而影響PTEN基因的表達和AKT信號通路的活性，參與SLE的發(fā)病過程。circRACGAP1與miR-22-3pPTENAKT信號通路關(guān)系揭示SLE發(fā)病機制通過深入研究circRACGAP1與miR-22-3pPTENAKT信號通路的關(guān)系，有助于揭示SLE的發(fā)病機制，為疾病的治療提供新的思路和方法。尋找新的治療靶點circRACGAP1作為SLE發(fā)病過程中的重要分子，可能成為新的治療靶點。通過干預(yù)circRACGAP1的表達或功能，有望為SLE的治療提供新的策略。促進轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)研究將基礎(chǔ)研究成果轉(zhuǎn)化為臨床應(yīng)用是轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)的重要任務(wù)。本研究不僅有助于深入了解SLE的發(fā)病機制，還可為藥物研發(fā)和臨床試驗提供理論支持和實驗依據(jù)，推動轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)的發(fā)展。研究目的和意義circRACGAP1在系統(tǒng)性紅斑狼瘡中作用機制02circRACGAP1表達水平檢測circRACGAP1在SLE患者外周血單個核細胞（PBMC）中的表達水平顯著降低，提示其可能參與SLE的發(fā)病過程。通過實時熒光定量PCR（qRT-PCR）技術(shù)檢測circRACGAP1在SLE患者和健康對照者PBMC中的表達差異，發(fā)現(xiàn)SLE患者PBMC中circRACGAP1的表達水平明顯低于健康對照者。過表達circRACGAP1可顯著抑制SLE患者PBMC的增殖，并促進細胞凋亡，表明circRACGAP1具有抑制SLE細胞生長的作用。circRACGAP1可通過調(diào)控自噬相關(guān)基因的表達，促進SLE患者PBMC的自噬過程，從而清除細胞內(nèi)異常的蛋白質(zhì)或細胞器，維持細胞內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定。circRACGAP1對SLE細胞增殖、凋亡和自噬影響VScircRACGAP1可顯著上調(diào)SLE患者PBMC中PTEN基因的表達，進而抑制AKT信號通路的活化，降低SLE細胞的增殖和生存能力。通過生物信息學(xué)分析和實驗驗證，發(fā)現(xiàn)circRACGAP1可作為miR-22-3p的海綿，抑制其表達和功能。miR-22-3p是一種促進SLE發(fā)病的microRNA，可靶向PTEN基因并抑制其表達。因此，circRACGAP1通過調(diào)控miR-22-3p/PTEN/AKT信號通路，發(fā)揮抑制SLE的作用。circRACGAP1對SLE相關(guān)基因表達調(diào)控miR-22-3p在系統(tǒng)性紅斑狼瘡中作用機制03miR-22-3p表達水平檢測通過實時熒光定量PCR技術(shù)，檢測系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）患者和健康對照者外周血中miR-22-3p的表達水平。qPCR檢測比較SLE患者和健康對照者miR-22-3p表達水平的差異，分析其與SLE發(fā)生發(fā)展的關(guān)系。表達差異分析細胞凋亡實驗利用流式細胞術(shù)或TUNEL染色等方法，觀察過表達或抑制miR-22-3p對SLE細胞凋亡的影響。細胞自噬實驗通過Westernblot檢測自噬相關(guān)蛋白（如LC3、p62等）的表達水平，評估過表達或抑制miR-22-3p對SLE細胞自噬的影響。細胞增殖實驗通過CCK-8或MTT等方法，檢測過表達或抑制miR-22-3p對SLE患者外周血單個核細胞（PBMC）或T淋巴細胞增殖的影響。miR-22-3p對SLE細胞增殖、凋亡和自噬影響miR-22-3p對SLE相關(guān)基因表達調(diào)控利用生物信息學(xué)方法預(yù)測miR-22-3p的靶基因，重點關(guān)注與SLE發(fā)生發(fā)展相關(guān)的基因。雙熒光素酶報告基因?qū)嶒灅?gòu)建包含預(yù)測靶基因3’UTR的熒光素酶報告基因質(zhì)粒，與miR-22-3p模擬物或抑制劑共轉(zhuǎn)染細胞，檢測熒光素酶活性變化，驗證miR-22-3p對靶基因的調(diào)控作用。Westernblot驗證通過Westernblot檢測過表達或抑制miR-22-3p后，SLE相關(guān)蛋白的表達水平變化，進一步確認miR-22-3p對SLE相關(guān)基因的調(diào)控作用。靶基因預(yù)測PTENAKT信號通路在系統(tǒng)性紅斑狼瘡中作用機制04PTEN和AKT蛋白表達水平檢測SLE患者體內(nèi)PTEN和AKT蛋白表達水平的變化導(dǎo)致PTEN/AKT比例失衡，進而影響下游信號通路的傳導(dǎo)。PTEN/AKT比例失衡在系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）患者的外周血單個核細胞（PBMC）和腎臟組織中，PTEN蛋白的表達水平顯著降低。PTEN蛋白表達水平與PTEN相反，SLE患者的PBMC和腎臟組織中AKT蛋白的表達水平顯著升高。AKT蛋白表達水平細胞增殖PTENAKT信號通路的激活可以促進SLE患者PBMC的增殖，從而加重炎癥反應(yīng)。細胞凋亡該信號通路通過抑制凋亡相關(guān)蛋白的表達，減少SLE患者體內(nèi)細胞的凋亡，導(dǎo)致炎癥持續(xù)存在。細胞自噬PTENAKT信號通路還可以影響SLE患者細胞的自噬過程，通過調(diào)節(jié)自噬相關(guān)蛋白的表達，影響細胞內(nèi)物質(zhì)的降解和再利用。PTENAKT信號通路對SLE細胞增殖、凋亡和自噬影響炎癥因子基因表達PTENAKT信號通路可以調(diào)控SLE患者體內(nèi)多種炎癥因子基因的表達，如TNF-α、IL-1β等，從而加重炎癥反應(yīng)。免疫相關(guān)基因表達該信號通路還可以影響SLE患者體內(nèi)免疫相關(guān)基因的表達，如T細胞受體基因、B細胞受體基因等，導(dǎo)致免疫功能紊亂。纖維化相關(guān)基因表達在SLE患者的腎臟組織中，PTENAKT信號通路還可以調(diào)控纖維化相關(guān)基因的表達，促進腎臟纖維化的發(fā)生和發(fā)展。010203PTENAKT信號通路對SLE相關(guān)基因表達調(diào)控circRACGAP1通過調(diào)控miR-22-3pPTENAKT信號通路抑制SLE機制探討05circRACGAP1與miR-22-3p相互作用驗證對熒光素酶報告基因?qū)嶒灲Y(jié)果進行分析，確定circRACGAP1與miR-22-3p是否存在相互作用。實驗結(jié)果分析通過生物信息學(xué)方法預(yù)測circRACGAP1與miR-22-3p的結(jié)合位點，為后續(xù)實驗驗證提供理論支持。circRACGAP1與miR-22-3p結(jié)合位點預(yù)測構(gòu)建circRACGAP1過表達或敲低細胞模型，通過熒光素酶報告基因?qū)嶒烌炞CcircRACGAP1與miR-22-3p的相互作用。circRACGAP1與miR-22-3p相互作用驗…010203miR-22-3p靶基因預(yù)測及驗證通過生物信息學(xué)方法預(yù)測miR-22-3p的靶基因，并通過實驗驗證預(yù)測的靶基因是否為PTEN。PTENAKT信號通路活性檢測實驗設(shè)計在circRACGAP1過表達或敲低細胞模型中，檢測PTENAKT信號通路關(guān)鍵蛋白的表達及磷酸化水平，評估信號通路活性。實驗結(jié)果分析對PTENAKT信號通路活性檢測結(jié)果進行分析，探討circRACGAP1是否通過調(diào)控miR-22-3p影響PTENAKT信號通路活性。circRACGAP1通過調(diào)控miR-22-3p影響PTENAKT信號通路活性驗證SLE細胞增殖、凋亡和自噬檢測實驗設(shè)計在circRACGAP1過表達或敲低細胞模型中，分別檢測SLE細胞的增殖、凋亡和自噬水平。實驗結(jié)果分析對SLE細胞增殖、凋亡和自噬檢測結(jié)果進行分析，探討circRACGAP1是否通過調(diào)控miR-22-3pPTENAKT信號通路抑制SLE細胞的增殖、凋亡和自噬。circRACGAP1通過調(diào)控miR-22-3pPTENAKT信號通路抑制SLE細胞增殖、凋亡和自噬驗證總結(jié)與展望06研究成果總結(jié)circRACGAP1對miR-22-3p的調(diào)控作用：研究證實circRACGAP1能夠通過與miR-22-3p的結(jié)合，調(diào)控其表達水平，從而影響下游信號通路。miR-22-3p對PTEN/AKT信號通路的影響：miR-22-3p能夠直接作用于PTEN基因，通過抑制其表達，進一步激活A(yù)KT信號通路，參與系統(tǒng)性紅斑狼瘡的發(fā)病過程。circRACGAP1對系統(tǒng)性紅斑狼瘡的抑制作用：通過上調(diào)circRACGAP1的表達，可以抑制miR-22-3p的功能，從而恢復(fù)PTEN基因的表達，抑制AKT信號通路的激活，最終達到治療系統(tǒng)性紅斑狼瘡的目的。深入研究circRACGAP1的生物學(xué)功能盡管已經(jīng)證實circRACGAP1能夠調(diào)控miR-22-3p的表達，但其具體的生物學(xué)