化學(xué)品 沉積物-水系統(tǒng)中河蜆毒性試驗 征求意見稿

1GB/TXXXXX—XXXX化學(xué)品沉積物-水系統(tǒng)中河蜆毒性試驗本文件規(guī)定了化學(xué)品沉積物-水系統(tǒng)中河蜆毒性試驗的術(shù)語、定義、受試物信息、試驗原理、試驗系統(tǒng)、儀器設(shè)備、試驗程序、質(zhì)量保證與質(zhì)量控制、數(shù)據(jù)與報告。本文件宜采用河蜆作為受試生物，在不改變本標準基本試驗條件的情況下，其它合適的淡水貝類雙殼綱生物也可作為試驗物種。本文件適用于淡水水體沉積物中化學(xué)品對河蜆的毒性效應(yīng)測試。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。HJ/T153化學(xué)品測試導(dǎo)則HJ/T155化學(xué)品測試合格實驗室導(dǎo)則HJ494水質(zhì)采樣技術(shù)指導(dǎo)第4.4條底部沉積物采樣3術(shù)語和定義《化學(xué)品測試導(dǎo)則》（HJ/T153）和《化學(xué)品測試合格實驗室導(dǎo)則》（HJ/T155）界定的以及下列術(shù)語和定義適用于本文件。上覆水overlyingwater在試驗容器中位于沉積物上的水?？障端蚩紫端甶nterstitialwaterorporewater占據(jù)沉積物或土壤顆粒物空間的水。人工沉積物formulatedsediment由多種材料組成的用于模擬天然沉積物成分的混合物，又叫再造或合成沉積物。加標沉積物spikedsediment添加了受試物的沉積物。半數(shù)致死濃度50%oflethalconcentration,LC50引起一組受試實驗生物半數(shù)死亡的濃度。半數(shù)效應(yīng)濃度50%ofeffectiveconcentration,EC50引起一組受試實驗生物半數(shù)出現(xiàn)某種生物效應(yīng)的濃度。2來源、理化性質(zhì)(例如水溶解性、蒸氣壓、pKa值、在水中和沉積物中的穩(wěn)定性、正辛醇/水分配系數(shù))等。受試物在沉積物、上覆水、孔隙水中的定量分析方法(包括檢出限和準確度),非生物降解和生物選取大小一致、生理狀態(tài)相近的河蜆，暴露于含有一系列濃度毒物的沉積物-入經(jīng)曝氣48h的除氯水，并連續(xù)曝氣。水體pH6.5～8.0,水溫18℃~25℃,DO大于等于6mg/L,采用自然光照(16h光照，8h黑暗),馴養(yǎng)周期2周以上。根據(jù)一般水生生物實驗操作規(guī)范，建議每周換水1次～2次，并且每天清除排泄物。馴養(yǎng)初期河蜆會吐出泥沙并且對水質(zhì)敏g～0.2g。在馴養(yǎng)期間及時挑出死亡個體。河蜆馴養(yǎng)2周以上且死亡率小于10%,可以用于實驗。3GB/TXXXXX—XXXX在馴養(yǎng)成功、自然死亡率達標(河蜆群體死亡率小于10%)后，從死亡率達標成功馴養(yǎng)的河蜆群體總有機碳(TOC)、粒度分布(砂、淤泥和黏土含量)和含水率。配制沉積物的組成見附錄B,也可以直接深度范圍為1.5cm～3cm,加入上覆水使得沉積物-水深度比為1:到分配平衡，穩(wěn)定時間過長會導(dǎo)致很多化合物發(fā)生4在本標準規(guī)定的試驗條件下，以加標沉積物中最大受試行試驗，試驗周期96h。試驗結(jié)束時如果河蜆死亡(96h)沒有發(fā)生，則不再進行下一步試驗。試驗結(jié)10mg/kg、100mg/kg、1000mg/kg,也可根據(jù)需要選定其每個容器(1000mL燒杯)中放8只河蜆，調(diào)節(jié)并保持實驗溫度為19℃~23℃,根據(jù)受試終點的不同，設(shè)置試驗時間96h(死亡率),10d(存活率)或視情況而定。每天測定一次溶解氧濃度。試驗開始后每隔12h觀察并記錄河蜆的挖洞行為直到24h,之后每天觀察河蜆挖洞行為，統(tǒng)計下潛個數(shù)。每天根據(jù)試驗結(jié)果確定受試物96h的無死亡和最高死亡率濃度范圍，以設(shè)計以死亡率毒性正式試驗濃度范圍。根據(jù)試驗結(jié)果確定受試物10d最高和最低存活率濃度范圍，以設(shè)計以存活率作性質(zhì)(pH、電導(dǎo)率等)和溶解氧狀況，以保證毒性試驗的可靠性。生物數(shù)量。每隔7d補充一次上覆水，保證沉積物和上覆水的體積比一致。試驗中應(yīng)設(shè)置對b)急性毒性試驗期間不喂食，慢性毒性試驗期間可每5d喂食一次；c)加入河蜆后對試驗上覆水進行溫和曝氣，并持續(xù)整個試驗過程以保證溶解氧濃度不低于飽和溶氧的60%。而測試揮發(fā)性物質(zhì)時，則應(yīng)該考慮不對沉積物-水系統(tǒng)曝氣。在曝氣過程中要避d)在預(yù)試驗和正式試驗開始時測定上覆水pH值和電5暴露期結(jié)束后，對上覆水和沉積物進行受試物的濃度分析。9質(zhì)量保證與質(zhì)量控制試驗結(jié)束時，對照試驗中的生物不表現(xiàn)出顯著的毒性效應(yīng)和死亡。試驗結(jié)束時，對照組存活率必須至少為80%。試驗結(jié)束時，各實驗容器中溫度、溶解氧和pH應(yīng)保持在可接受的范圍內(nèi)。溶解氧至少應(yīng)為所用溫度下空氣飽和值的60%,所有容器中上覆水的pH值應(yīng)為6～9。水溫變化不超過±1℃。10數(shù)據(jù)與報告10.1試驗數(shù)據(jù)本試驗的目的是測定供試品在96h、10d試驗對河蜆死亡率及下潛率的影響。10.1.1死亡率測定每個容器中存活的河蜆個數(shù)m,除以引入的河蜆個數(shù)M。見式(1): (1)m——每個容器中存活的河蜆個數(shù)；M——每個容器中引入的河蜆個數(shù)。10.1.2下潛率 (1)a河蜆鉆入沉積物中的河蜆個體數(shù)量；b——引入沉積物中的河蜆個體數(shù)量。10.2試驗數(shù)據(jù)處理毒性試驗報告結(jié)果為LC??、EC(以下潛率作為觀察指標),NOEC、LOEC(以致死作為觀察指標)。通過劑量-反應(yīng)模型計算LC?、EC??、NOEC、LOEC,常用的方法有概率單位法、直線內(nèi)插法等。10.2.1概率單位圖解法用半對數(shù)坐標，以濃度對數(shù)為橫坐標，死亡百分率對數(shù)概率單位為縱坐標繪圖。將各實測值在圖上畫一條相關(guān)直線，從直線中讀出LC值。10.2.2直線內(nèi)插法采用線性刻度坐標，繪制死亡百分率對受試物濃度的曲線，從引起50%死亡率和下潛率的內(nèi)插濃度6GB/TXXXXX—XXXX10.2.3軟件算法采用合適的計算機軟件計算LC50、EC50值、NOEC和LOEC值。結(jié)果報告試驗報告應(yīng)至少包括以下內(nèi)容：a)受試物信息——名稱、結(jié)構(gòu)、純度、來源、理化性質(zhì)（水溶性、蒸氣壓、Kow、穩(wěn)定性）等。b)受試生物信息——名稱、來源、馴化和培養(yǎng)等。c)試驗程序——試驗系統(tǒng)：受試生物、試驗用水，沉積物；——試驗方法：靜態(tài)試驗；——試驗設(shè)計：受試實驗生物數(shù)量，受試物加標濃度和實測濃度；——試驗條件：暴露的時間和條件；——測定方法：受試物濃度測定方法和生物效應(yīng)測定方法。d)試驗結(jié)果——試驗濃度，加標濃度和實測濃度；——受試生物產(chǎn)生效應(yīng)（死亡率，下潛率等）的情況；——試驗終點（LC50、EC50、NOEC、LOEC）及統(tǒng)計方法。7GB/TXXXXX—XXXX（資料性）試驗用水的化學(xué)特征作為試驗中沉積物上覆水的試驗用水應(yīng)保證受試生物正常的存活、生長和繁殖，不使受試生物出現(xiàn)任何異常的外觀和行為。8GB/TXXXXX—XXXX（資料性）配制沉積物的組成試驗中使用配制沉積物，能夠最大限度地降低試驗條件的變異程度，并且避免引入其它生物。使用的沉積物應(yīng)保證受試生物正常的存活、生長和繁殖，不使受試生物出現(xiàn)任何異常的外觀和行為。配制沉積物的組成：a)4%～5%（干重）泥炭：使用粉末狀、中等分散度、磨細（小于等于0.5mm）、風(fēng)干的泥炭；b)20%±1%（干重）高嶺土：高嶺石含量高于30%；c)75%～76%（干重）石英砂：細砂，粒度小于等于2mm，50%以上的顆粒粒度在50μm～500μm；d)去離子水：加入沉積物干組分中，占最終沉積物重量的30%～50%；e)化學(xué)純CaCO3：調(diào)節(jié)最終沉積物pH值為7.0±0.5；f)2%±0.5%（干重）總有機碳（TOC）：根據(jù)a)和c)用適量泥炭和石英砂調(diào)節(jié)；g)0.4%～0.5%（干重）食物：以粉末狀加入干沉積物中。9GB/TXXXXX—XXXX參考文獻[1]環(huán)境保護部化學(xué)品登記中心等(2013).化學(xué)品測試方法（第2版）生物系統(tǒng)效應(yīng)卷.中國環(huán)境出版社[2]US-EPA(2000).MethodsforMeasuringtheToxicityandBioaccumulationofSediment-associatedContaminantswith