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②適宜pH:⑷氣體環(huán)境:主要是和,前者是所必需的,后者的主要作用是維持培養(yǎng)液的。[拓展提升]1,動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),為什么選用幼齡的動(dòng)物或組織?2,使組織分散為單個(gè)細(xì)胞時(shí),能不能用胃蛋白酶?請(qǐng)闡述理由。3,制成細(xì)胞懸液的主要的目的是什么?4,請(qǐng)給傳代培養(yǎng)下個(gè)定義。5,為什么對(duì)動(dòng)物細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)時(shí)通常要加血清?6,體外培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)需要提供那些物質(zhì)?7,體外培養(yǎng)的細(xì)胞需要什么樣的環(huán)境條件?知識(shí)點(diǎn)二:動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物【學(xué)習(xí)目標(biāo)】說(shuō)出體細(xì)胞核移植的過(guò)程,了解應(yīng)用。1動(dòng)物核移植概念:將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的,移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的中,使其并發(fā)育成一個(gè),這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體。2描述體細(xì)胞核移植的過(guò)程供體體細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)()()注入()減Π中期卵巢卵母細(xì)胞去核()與供體遺傳基礎(chǔ)(——)的幼體代孕動(dòng)物()重組胚胎【拓展提升】1,克隆動(dòng)物與植物細(xì)胞的組織培養(yǎng)的原理是相同的嗎?說(shuō)明理由??寺?dòng)物的本質(zhì)是什么?3體細(xì)胞的核移植是真的將供體的細(xì)胞核轉(zhuǎn)入受體的去核的卵母細(xì)胞體內(nèi)嗎?在體細(xì)胞的細(xì)胞核一直到受體卵母細(xì)胞之前,為什么必須先去掉受體卵母細(xì)胞的核?5用于核移植的供體細(xì)胞一般都選用傳代10代以?xún)?nèi)的細(xì)胞,動(dòng)物細(xì)胞工程練習(xí)題1,右圖是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的基本過(guò)程示意圖。請(qǐng)據(jù)此回答:(1)容器A中放置的是動(dòng)物器官或組織。它一般取自。(2)容器A的動(dòng)物器官或組織首先要進(jìn)行的處理是,然后用酶處理,這是為了使細(xì)胞分散開(kāi)。這樣做的目的是。(3)培養(yǎng)首先在B瓶中進(jìn)行。瓶中的培養(yǎng)基成分有等。在此瓶中培養(yǎng)一段時(shí)間,這時(shí)的培養(yǎng)稱(chēng)為。(4)為了把B瓶中的細(xì)胞分裝到C瓶中,用處理,然后配置成,再分裝,繼續(xù)培養(yǎng),稱(chēng)為。(5)在C瓶中正常培養(yǎng)了一段時(shí)間后,發(fā)現(xiàn)細(xì)胞全部死亡。原因是。.2現(xiàn)有A和B兩個(gè)肉牛品種,A品種牛的細(xì)胞組成可表示為A細(xì)胞核、A細(xì)胞質(zhì),B品種牛則為B細(xì)胞核、B細(xì)胞質(zhì)。
(1)如果要獲得一頭克隆牛,使其細(xì)胞由A細(xì)胞核和B細(xì)胞質(zhì)組成,基本步驟是,從A品種牛體內(nèi)取出體細(xì)胞,進(jìn)行體外培養(yǎng)。然后再?gòu)呐囵B(yǎng)細(xì)胞中取出_______注入B品種牛的_________卵母細(xì)胞,經(jīng)過(guò)某處刺激和培養(yǎng)后,可形成胚胎,該胚胎被稱(chēng)為_(kāi)______,將該胚胎移入代孕母牛的_______中,通過(guò)培育可達(dá)到目的。
(2)一般來(lái)說(shuō),要想大量獲得這種克隆牛比較難,原因之一是卵母細(xì)胞的數(shù)量______。
(3)克隆牛的產(chǎn)生說(shuō)明_____具有全能性??寺∨5男誀钪饕憩F(xiàn)____品種牛的特征。由A、B兩品種雜交得到的牛與克隆牛相比,雜交牛細(xì)胞核的遺傳物質(zhì)來(lái)自______個(gè)親本,細(xì)胞質(zhì)來(lái)自______性親本,克隆牛和雜交牛的遺傳物質(zhì)組成______(相同,不同)。3.下圖為細(xì)胞融合的示意圖,據(jù)圖回答:(1)若A、B是植物細(xì)胞,A、B到C的過(guò)程中,常用到的化學(xué)試劑是__________。融合完成的標(biāo)志是_________。將D培育成植株需要應(yīng)用_________技術(shù)。(2)若A、B用于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng),則A、B一般取自___________________________動(dòng)物的器官或組織。(3)若該過(guò)程用來(lái)制備單克隆抗體,在A、B到C的過(guò)程中,形成的C有_________種,用來(lái)培養(yǎng)符合要求的D細(xì)胞應(yīng)該是_________,與常規(guī)抗體相比,單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)是_________。(4)用病毒作為融合劑是因?yàn)椴《镜谋砻婧衉__________________________能夠與細(xì)胞膜發(fā)生作用,使細(xì)胞凝集并發(fā)生融合。4.2003年1月5日18時(shí)28分,已在太空遨游92圈的“神舟四號(hào)”運(yùn)行至主著陸場(chǎng),隨后成功回收?!吧裰鬯奶?hào)”飛船上曾進(jìn)行了B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞的融合、黃花煙草原生質(zhì)體和“革新”一號(hào)煙草原生質(zhì)體的融合兩個(gè)科學(xué)實(shí)驗(yàn),在電融合儀內(nèi)經(jīng)過(guò)160min后,終于獲得成功。⑴細(xì)胞融合技術(shù)與傳統(tǒng)的有性雜交相比,其優(yōu)越性在于。⑵動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)最重要的用途是。⑶人工誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的技術(shù)除物理法、化學(xué)法外,還可用作為誘導(dǎo)劑。根據(jù)上述材料,你認(rèn)為在“神舟四號(hào)”飛船上所用的誘導(dǎo)方法是。5.如下圖為某同學(xué)根據(jù)雜交瘤技術(shù)的方法,設(shè)計(jì)的生產(chǎn)破傷風(fēng)桿菌抗體的實(shí)驗(yàn)方案,據(jù)圖回答:(1)該方案能達(dá)到預(yù)期效果嗎?_________原因是_______________________________。(2)圖中②為_(kāi)________過(guò)程,常用___________________作為誘導(dǎo)劑,該細(xì)胞繼承了______________,因此不僅能分泌_________,還有_________________本領(lǐng)。(3)該過(guò)程進(jìn)行了兩次篩選,第一次用,得到了融合的。該細(xì)胞的特點(diǎn)是。第二次進(jìn)行和,最終得到能產(chǎn)生特定抗體的。(4)破傷風(fēng)桿菌的抗體最終可以從_________和_________中提取。(5)該方案的目的是_________________。(6)整個(gè)過(guò)程所用到的技術(shù)的基礎(chǔ)是。6下圖表示表示人體內(nèi)各類(lèi)血細(xì)胞生成的途徑。a—f表示不同種類(lèi)的細(xì)胞.①—⑥表示有關(guān)過(guò)程。(1)造血干細(xì)胞形成各種血細(xì)胞,需要經(jīng)歷細(xì)胞的和過(guò)程。成熟紅細(xì)胞失去全能性的原因是。(2)各類(lèi)血細(xì)胞均采自于造血干細(xì)胞,但它們的功能各不相同.根本原因是。(3)圖中f代表的細(xì)胞名稱(chēng)是,需要抗原刺激才能發(fā)生的過(guò)程有(填數(shù)字)。(4)效應(yīng)B細(xì)胞不能無(wú)限增殖,若要大量生產(chǎn)某種抗體,可通過(guò)細(xì)胞工程中的技術(shù)形成雜交瘤細(xì)胞。雜交瘤細(xì)胞合成抗體的翻譯過(guò)程需要作為模板。單克隆抗體具有高度的,在疾病的診斷和治療等方面具有廣闊的應(yīng)用前景。7.已知細(xì)胞合成DNA有D和S兩條途徑,其中D途徑能被氨基嘌呤阻斷。人淋巴細(xì)胞中有DNA的這兩種合成途徑,但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤細(xì)胞中盡管沒(méi)有S途徑,但能不斷分裂增殖,將這兩種細(xì)胞在試管中混合,加聚乙二醇促融,獲得雜種細(xì)胞。
請(qǐng)回答:
(1)試管中除融合的雜種細(xì)胞外,還有_______種融合細(xì)胞。
(2)設(shè)計(jì)一方法(不考慮機(jī)械方法),從培養(yǎng)液中分離出雜種細(xì)胞,并說(shuō)明原理。
方法:_____________________________________________。
原理:_____________________________________________。
(3)將分離出的雜種細(xì)胞在不同條件下繼續(xù)培養(yǎng),獲得A、B、C三種細(xì)胞株。各細(xì)胞株內(nèi)含有的人染色體如下表(“+”表示有,“-”表示無(wú)),測(cè)定各細(xì)胞株中人體所具有的五種酶的活性。結(jié)果是:B株有a酶活性;②.A、B、C株均有b酶活性;③.A、B株有c酶活性;④.C株有d酶活性;⑤.A、B、C株均無(wú)e酶活性。
若人基因的作用不受鼠基因影響,則支配a、b、c、d和e酶合成的基因依次位于人的_______、_______、_______、_______和_______號(hào)染色體上。1答案:(1)胚胎或幼齡動(dòng)物(2)剪碎組織胰蛋白使細(xì)胞與培養(yǎng)液充分接觸(3)糖、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、動(dòng)物血清原代培養(yǎng)(4)胰蛋白酶細(xì)胞懸液傳代培養(yǎng)(5)細(xì)胞沒(méi)有發(fā)生癌變2(1)細(xì)胞核去核
重組胚胎
子宮
(2)不足
促性腺
(3)動(dòng)物體細(xì)胞核
A
兩
雌
不同3答案:(1)聚乙二醇或PEG產(chǎn)生細(xì)胞壁植物組織培養(yǎng)或組織培養(yǎng)(2)動(dòng)物胚胎或出生不久的幼齡(3)3雜交瘤細(xì)胞特異性強(qiáng),靈敏度高(4)糖蛋白和一些酶4,答案:⑴克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙⑵制備單克隆抗體⑶滅活的病毒物理方法5(1)不能因?yàn)闆](méi)有將抗原注入小鼠體內(nèi),無(wú)法獲得產(chǎn)生此種抗體的效應(yīng)B細(xì)胞(2)細(xì)胞融合滅活的病毒(或聚乙二醇)雙親細(xì)胞的遺傳物質(zhì)特異性抗體在體外培養(yǎng)條件下大量繁殖(3)特定的選擇性培養(yǎng)基進(jìn)行篩選雜種細(xì)胞迅速大量繁殖,能產(chǎn)生專(zhuān)一的抗體克隆化培養(yǎng)和抗體的陽(yáng)性檢測(cè)單個(gè)的雜交瘤細(xì)胞(雜種細(xì)胞)(4)培養(yǎng)液小鼠腹水(5)制備單克隆抗體(6)動(dòng)物細(xì)胞
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