無菌生產(chǎn)概念及非最終滅菌注射劑生產(chǎn)和質(zhì)量控制張華

無菌藥品的高風(fēng)險分析第一頁，共一百二十六頁。注射劑的特點藥效迅速、作用可靠可用于不宜口服給藥的患者可用于不宜口服的藥物發(fā)揮局部定位作用注射給藥不方便且注射時疼痛

直接入血制劑，質(zhì)量要求比其他劑型更嚴(yán)格，使用不當(dāng)更易發(fā)生危險制造過程復(fù)雜，生產(chǎn)費用較大，價格較高第二頁，共一百二十六頁。注射劑的一般質(zhì)量要求無菌

成品中不得含有任何活的微生物無熱原

特別是供靜脈及脊椎注射的制劑澄明度

不得有肉眼可見的渾濁或異物安全性

不能引起對組織的刺激性或發(fā)生毒性反應(yīng)，特別是一些非水溶劑及一些附加劑，必須經(jīng)過必要的動物實驗，以確保安全第三頁，共一百二十六頁。注射劑的一般質(zhì)量要求滲透壓

與血漿的滲透壓相等或接近pH

要求與血液相等或接近（血液pH7.4）必要的物理和化學(xué)穩(wěn)定性，以確保產(chǎn)品在儲存期內(nèi)安全有效降壓物質(zhì)

有些注射液，如復(fù)方氨基酸注射液，其降壓物質(zhì)必須符合規(guī)定，確保安全第四頁，共一百二十六頁。注射劑生產(chǎn)的風(fēng)險分析內(nèi)源性的影響因素系統(tǒng)設(shè)備工藝過程物料和中間體的質(zhì)量外源性的影響因素人員第五頁，共一百二十六頁。無菌藥品生產(chǎn)的管理要點防止微生物污染防止熱原或細(xì)菌內(nèi)毒素的污染防止產(chǎn)品中有異物裝量準(zhǔn)確第六頁，共一百二十六頁。廠房設(shè)計、潔凈度級別和環(huán)境監(jiān)控第七頁，共一百二十六頁。國內(nèi)企業(yè)常見缺陷采用無菌工藝制造的潔凈區(qū)內(nèi)，無菌的操作區(qū)與有菌的操作區(qū)未完全分開凍干灌裝區(qū)所用工器具滅菌后，經(jīng)事實上的非無菌區(qū)進入無菌區(qū)，帶來微生物污染風(fēng)險無菌區(qū)設(shè)水池及潔具間，或設(shè)地漏無菌區(qū)設(shè)單獨的廢物區(qū)潔凈區(qū)壓差監(jiān)控不到位采用最終滅菌工藝生產(chǎn)的灌裝間倒壓差廠房有重大變更，不做確認(rèn)和驗證第八頁，共一百二十六頁。無菌操作區(qū)布局示例圖一第九頁，共一百二十六頁。無菌操作區(qū)布局示例圖二第十頁，共一百二十六頁。潔凈度級別比較WHO（GMP）美國（209E）美國（習(xí)慣分類）ISO/TC（209）EEC（GMP）AM3.5100ISO5ABM3.5100ISO5BCM4.510000ISO7CDM6.5100000ISO8D第十一頁，共一百二十六頁。WHOGMP2002標(biāo)準(zhǔn)

級別靜態(tài)動態(tài)最大允許粒子數(shù)/立方米最大允許粒子數(shù)/立方米0.5-5.0μm>5.0μm0.5-5.0μm>5.0μmA3500035000B350003500002000C3500002000350000020000D350000020000不作規(guī)定不作規(guī)定注：新標(biāo)準(zhǔn)分為動態(tài)及靜態(tài)，差一個級別；A級沒有要求連續(xù)微粒測試引自WHO技術(shù)報告902，2002第十二頁，共一百二十六頁。WHOGMP2002微生物指標(biāo)級別空氣樣CFU/m3沉降碟(

90mm)CFU/4小時接觸碟(

55mm)CFU/碟5指手套CFU/手套A＜3＜3＜3＜3B10555C1005025－D20010050－注：沉降碟的暴露時間，一般4小時，我國為0.5小時

引自WHO技術(shù)報告902，2002第十三頁，共一百二十六頁。浮游菌采樣儀MERCKMAS-100Millipore第十四頁，共一百二十六頁。FDA對潔凈區(qū)劃分的標(biāo)準(zhǔn)－2004潔凈區(qū)級別(0.5μm塵粒數(shù)/立方英尺)ISO名稱0.5μm塵粒數(shù)/立方米浮游菌糾偏限度(cfu/m3)沉降菌糾偏限度

(φ90mm;cfu/4h)10053,520111000635,2007310,0007352,000105100,00083,520,00010050所有級別均依據(jù)生產(chǎn)活動時在鄰近暴露物料/物品處測試的數(shù)據(jù)浮游菌、沉降菌糾偏限度表示建議的環(huán)境質(zhì)量水平。企業(yè)也可根據(jù)作業(yè)或分析方法的類型確定微生物糾偏措施標(biāo)準(zhǔn)引自GuidanceforIndustrySterileDrugProductsProducedbyAsepticProcessing—CurrentGoodManufacturingPractice,FDA第十五頁，共一百二十六頁。中國GMP（1998修訂）潔凈級別塵粒數(shù)/立方米微生物最大允許數(shù)≥0.5μm≥5μm浮游菌CFU/立方米沉降菌CFU/皿(Ф90mm半小時)10035000511000035000020001003100000350000020000500103000001050000060000100015我國百級標(biāo)準(zhǔn)采用了國際標(biāo)準(zhǔn)中B級（亂流百級）的限度標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)沒有闡明對氣流組織的要求第十六頁，共一百二十六頁。關(guān)鍵操作區(qū)空氣流向控制要求比較潔凈度級別WHO美國歐盟中國A100A100空氣流向單向流單向流單向流無要求風(fēng)速0.45m/s±20%0.45m/s±20%產(chǎn)粉塵的操作區(qū)風(fēng)速應(yīng)更高0.36-0.54m/s無要求第十七頁，共一百二十六頁。潔凈區(qū)壓差控制要求比較WHO美國歐盟中國不同級別相鄰房間的壓差10-15Pa10-15Pa10-15Pa

>5Pa其它壓差潔凈區(qū)過濾空氣的送風(fēng)應(yīng)能確保在任何運行狀態(tài)下對周圍低級別區(qū)保持正壓及氣流方向，并有足夠的自凈能力無菌操作間對相鄰非潔凈區(qū)操作間應(yīng)始終保持正壓（如至少12.5Pa）潔凈區(qū)過濾空氣的送風(fēng)應(yīng)能確保在任何運行狀態(tài)下對周圍低級別區(qū)保持正壓及氣流方向，并有足夠的自凈能力潔凈區(qū)與室外大氣的靜壓差>10Pa第十八頁，共一百二十六頁。潔凈區(qū)環(huán)境監(jiān)控要求比較WHO美國歐盟中國關(guān)鍵操作區(qū)的塵粒為控制各級別的潔凈區(qū)操作時的塵粒數(shù)，應(yīng)對塵粒進行監(jiān)測每一生產(chǎn)班次應(yīng)定期進行監(jiān)控；粒子計數(shù)探頭的安放位置應(yīng)能取到有代表性的樣品

應(yīng)對A級區(qū)的空氣粒子進行連續(xù)測定，并建議對B級區(qū)也連續(xù)進行測定

潔凈室(區(qū))內(nèi)空氣的微生物數(shù)和塵粒數(shù)應(yīng)定期監(jiān)測，監(jiān)測結(jié)果應(yīng)記錄存檔。潔凈室(區(qū))在靜態(tài)條件下檢測的塵埃粒子數(shù)、浮游菌數(shù)或沉降菌數(shù)必須符合規(guī)定，應(yīng)定期監(jiān)控動態(tài)條件下的潔凈狀況。關(guān)鍵操作區(qū)的微生物無菌操作時，應(yīng)頻繁對微生物進行動態(tài)監(jiān)測；關(guān)鍵操作結(jié)束后，應(yīng)對表面和人員的微生物進行監(jiān)測；應(yīng)制定微生物監(jiān)控的警戒和糾偏標(biāo)準(zhǔn)，以監(jiān)控空氣質(zhì)量的趨勢關(guān)鍵區(qū)出現(xiàn)微生物污染時，要進行必要的調(diào)查無菌操作時，應(yīng)頻繁對微生物進行動態(tài)監(jiān)測；除在生產(chǎn)過程中需進行微生物監(jiān)控外，系統(tǒng)驗證、清潔和消毒等操作后，也應(yīng)進行微生物監(jiān)控；應(yīng)對塵粒和微生物監(jiān)控制定適當(dāng)?shù)木浜图m偏標(biāo)準(zhǔn)關(guān)鍵操作區(qū)的壓差應(yīng)設(shè)送風(fēng)故障報警系統(tǒng)；壓差十分重要的毗鄰級別區(qū)之間應(yīng)安裝壓差表并定期記錄壓差每一班操作過程中，房間的壓差應(yīng)連續(xù)監(jiān)控并經(jīng)常記錄。所有報警應(yīng)有記錄，超過設(shè)定限度的各種偏差應(yīng)進行調(diào)查。可列入批記錄中應(yīng)設(shè)送風(fēng)故障報警系統(tǒng)；壓差十分重要的毗鄰級別區(qū)之間應(yīng)安裝壓差表；壓差數(shù)據(jù)應(yīng)定期記錄或者歸入有關(guān)文檔中無要求第十九頁，共一百二十六頁。關(guān)鍵操作區(qū)氣流方向示例一MMSCIP滅菌直接包材接觸部100級10000級第二十頁，共一百二十六頁。關(guān)鍵操作區(qū)氣流方向示例二MMSCIP滅菌直接包材接觸部0.45±20%m/sGrade”A”Grade”B”關(guān)鍵點操作者不能進入Grade”A”區(qū)域。第二十一頁，共一百二十六頁。廠房的檢查要點廠房布局和建造潔凈度級別的標(biāo)準(zhǔn)關(guān)鍵操作區(qū)的空氣流向潔凈區(qū)的壓差潔凈區(qū)的清潔和消毒環(huán)境監(jiān)控HVAC系統(tǒng)的維護和監(jiān)控第二十二頁，共一百二十六頁。設(shè)備第二十三頁，共一百二十六頁。國內(nèi)企業(yè)常見缺陷儲存除菌過濾后藥液的高位槽呼吸口未安裝呼吸器與藥品直接接觸的壓縮空氣、惰性氣體未確認(rèn)是否符合生產(chǎn)要求滅菌和凍干設(shè)備管理不到位溫度探頭或控制儀未校準(zhǔn)溫度探頭損壞維修不及時（干熱、濕熱）滅菌、凍干設(shè)備無自動記錄裝置（干熱、濕熱）滅菌、凍干設(shè)備的自動記錄未歸檔未使用聯(lián)動生產(chǎn)線，采用單機灌封第二十四頁，共一百二十六頁。滅菌設(shè)備自動記錄曲線圖示例第二十五頁，共一百二十六頁。設(shè)備的檢查要點適用于產(chǎn)品的生產(chǎn)、清潔、消毒或滅菌盡可能采用密閉系統(tǒng)合理布置和安裝關(guān)鍵參數(shù)控制和記錄儀表的校準(zhǔn)設(shè)備的確認(rèn)、維護和維修設(shè)備的清潔、消毒或滅菌共用設(shè)備應(yīng)有防止交叉污染的措施設(shè)備應(yīng)在確認(rèn)的范圍內(nèi)使用第二十六頁，共一百二十六頁。密閉系統(tǒng)示例第二十七頁，共一百二十六頁。生產(chǎn)用隔離器示例一第二十八頁，共一百二十六頁。生產(chǎn)用隔離器示例二第二十九頁，共一百二十六頁。生產(chǎn)用隔離器示例三第三十頁，共一百二十六頁。國內(nèi)企業(yè)常見缺陷注射用水和純化水標(biāo)準(zhǔn)不符合藥典標(biāo)準(zhǔn)工藝用水未做微生物限度的檢測注射用水和純化水的微生物限度檢查未采用薄膜過濾法注射用水循環(huán)系統(tǒng)溫度檢測點安裝位置不合理，不能反映系統(tǒng)保持65℃以上循環(huán)未監(jiān)測注射用水關(guān)鍵使用點的細(xì)菌內(nèi)毒素第三十一頁，共一百二十六頁。生產(chǎn)用水的檢查要點水處理設(shè)施及其分配系統(tǒng)的設(shè)計、安裝和維護應(yīng)能確保供水達到適當(dāng)?shù)馁|(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。水系統(tǒng)的運行不應(yīng)超越其設(shè)計能力。注射用水的生產(chǎn)、貯存和分配方式應(yīng)能防止微生物生長，例如，在70℃以上保持循環(huán)水源、水處理設(shè)施及水的化學(xué)和生物學(xué)污染狀況應(yīng)定期監(jiān)測，必要時還應(yīng)監(jiān)測細(xì)菌內(nèi)毒素。監(jiān)測結(jié)果以及所采取糾偏措施的記錄應(yīng)予歸檔第三十二頁，共一百二十六頁。生產(chǎn)工藝第三十三頁，共一百二十六頁。生產(chǎn)工藝配制過濾無菌灌裝凍干從“欣弗”事件談滅菌工藝第三十四頁，共一百二十六頁。無菌藥品生產(chǎn)管理的要點生產(chǎn)加工的每個階段（包括滅菌前的各階段）都必須采取預(yù)防措施，以盡可能降低污染第三十五頁，共一百二十六頁。配制國內(nèi)企業(yè)常見缺陷提高稱量配制區(qū)域的潔凈度級別，使其與灌裝區(qū)域一致，共用同一潔凈區(qū)的更衣設(shè)施、走廊和HVAC系統(tǒng)稱量操作位置的正上方安裝高效空氣層流不注意物料稱量的先后順序整包裝的物料不稱量即投料不按照規(guī)定的處方配制稱量記錄不完整操作區(qū)域受到活性炭污染第三十六頁，共一百二十六頁。配制區(qū)域的潔凈度級別應(yīng)單獨設(shè)置，注意稱量區(qū)的空氣流向，防止粉塵擴散應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品的特性設(shè)定相應(yīng)的潔凈度級別

歐盟無菌藥品的GMP附錄規(guī)定：原輔料和大多數(shù)產(chǎn)品的準(zhǔn)備/配制應(yīng)至少在D級區(qū)進行，以降低塵粒和微生物污染的風(fēng)險，適于過濾及滅菌操作微生物污染風(fēng)險比較高時，如容易長菌的產(chǎn)品、配制后要等相當(dāng)長時間方可滅菌的產(chǎn)品或因故主要不在密閉容器內(nèi)進行配制操作的產(chǎn)品，配制必須在C級環(huán)境中進行第三十七頁，共一百二十六頁。稱量必須按照注冊批準(zhǔn)的處方配料稱量中應(yīng)特別注意防止交叉污染一次稱量一種物料通常先稱量輔料，后稱量原料藥活性炭應(yīng)在單獨區(qū)域中稱量，稱量后放在水溶液中衡器使用前應(yīng)檢查校準(zhǔn)稱量記錄最好采用客觀的記錄如實記錄衡器的讀數(shù)復(fù)核第三十八頁，共一百二十六頁。配制工序的檢查要點操作區(qū)的設(shè)置和潔凈度級別配料處方稱量操作稱量記錄防止污染和交叉污染的措施第三十九頁，共一百二十六頁。過濾國內(nèi)企業(yè)常見缺陷過濾器的安裝位置遠(yuǎn)離灌裝點采用無菌制造工藝時，除菌過濾的有菌操作區(qū)與無菌操作區(qū)未分隔未記錄所用過濾器的型號、來源、批號不做過濾器的完整性試驗過濾器完整性試驗的合格標(biāo)準(zhǔn)設(shè)定不正確過濾后的溶液存放在開口的容器中第四十頁，共一百二十六頁。過濾器的安裝除菌過濾用過濾器通常使用2只串聯(lián)方式，確保過濾的可靠性可能情況下，應(yīng)在緊挨灌裝點的位置，用除菌過濾器將所有藥液，特別是大容量注射劑進行除菌過濾采用無菌制造工藝時，除菌過濾操作區(qū)域不得設(shè)在無菌操作區(qū)內(nèi)，可通過管道傳送濾液第四十一頁，共一百二十六頁。過濾器的完整性試驗過濾器的相關(guān)信息應(yīng)具有可追溯性完整性試驗的合格標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)參照供應(yīng)商的說明書設(shè)定應(yīng)在過濾前、過濾后分別測試測試方法起泡點試驗前進流試驗微生物挑戰(zhàn)性試驗由供應(yīng)商做，以避免污染產(chǎn)品第四十二頁，共一百二十六頁。起泡點試驗示意圖

壓縮空氣或氮氣壓力表閥門壓力表濾芯外殼

排污閥閥門親水濾器起泡點試驗水劑產(chǎn)品以產(chǎn)品或水濕潤濾膜0.2μ參考壓力

>0.31MPa0.45μ參考壓力

>0.23MPa詳見供貨商說明書疏水性濾器起泡點60％(v/v)異丙醇水溶液60-70％(v/v)乙醇水溶液第四十三頁，共一百二十六頁。前進流試驗示意圖

壓縮空氣或氮氣閥門

壓力表濾芯外殼閥門前進流測試儀

排污閥前進流試驗在~80％起泡點壓力下進行詳見供貨商說明書第四十四頁，共一百二十六頁。過濾工序的檢查要點過濾器的安裝位置過濾器的相關(guān)信息過濾器完整性試驗的方法過濾前后的完整性試驗和記錄過濾器的更換、消毒或滅菌發(fā)現(xiàn)過濾器出問題后的處理第四十五頁，共一百二十六頁。無菌灌裝國內(nèi)企業(yè)常見缺陷關(guān)鍵操作區(qū)空氣流向為亂流，而不是層流關(guān)鍵操作區(qū)不便于在潔凈區(qū)外進行監(jiān)控人員的無菌操作不規(guī)范不做或未定期做培養(yǎng)基模擬灌裝驗證培養(yǎng)模擬灌裝驗證的合格標(biāo)準(zhǔn)設(shè)定不正確培養(yǎng)基模擬灌裝未模擬最差生產(chǎn)條件未對培養(yǎng)基模擬灌裝陽性樣品進行調(diào)查培養(yǎng)模擬灌裝驗證數(shù)據(jù)作假第四十六頁，共一百二十六頁。培養(yǎng)基模擬灌裝驗證目的確定實際生產(chǎn)中（如開機前的調(diào)試、加入無菌原輔材料、無菌連接、灌裝和密封）產(chǎn)品污染的概率基本思路應(yīng)綜合考慮生產(chǎn)線可能造成污染的各種因素，并能對工藝受控的狀態(tài)做出準(zhǔn)確的評估應(yīng)盡可能模擬實際生產(chǎn)的無菌操作，可能時，應(yīng)包括最差條件的相關(guān)活動，以挑戰(zhàn)無菌操作第四十七頁，共一百二十六頁。無菌灌裝檢查要點關(guān)鍵操作區(qū)和生產(chǎn)設(shè)備清潔、消毒或滅菌無菌灌裝用各類物料、器具的準(zhǔn)備或滅菌處理生產(chǎn)用氣體人員的無菌操作裝量控制培養(yǎng)基模擬灌裝驗證無菌檢驗樣品的取樣檢查時應(yīng)不能影響正常的生產(chǎn)第四十八頁，共一百二十六頁。凍干國內(nèi)企業(yè)常見缺陷不測共晶點批量不固定不同裝量的產(chǎn)品同時凍干凍干操作人員需在凍干過程中隨時調(diào)整參數(shù)設(shè)置未對不同裝量、不同批量的產(chǎn)品分別進行凍干工藝驗證凍干工藝未經(jīng)驗證第四十九頁，共一百二十六頁。影響凍干產(chǎn)品質(zhì)量的主要因素凍結(jié)產(chǎn)品溶液處方冷凍速率冷凍方式產(chǎn)品裝量和數(shù)量干燥擱板溫度產(chǎn)品溫度冷凝器溫度和真空度冷凍干燥室的真空度產(chǎn)品裝量和數(shù)量第五十頁，共一百二十六頁。凍干工藝的關(guān)鍵控制參數(shù)冷凍速率擱板溫度產(chǎn)品溫度冷凝器溫度和真空度冷凍干燥室的真空度第五十一頁，共一百二十六頁。凍干機的滅菌乙醇只能起到消毒的作用，不能做到滅菌普遍認(rèn)可的方法為濕熱滅菌法氮氣、空氣過濾器和進氣口管道應(yīng)滅菌完全冷凍干燥室的滅菌應(yīng)使蒸汽在擱板間自由流通冷凍干燥室在各批次間應(yīng)進行滅菌滅菌程序的驗證應(yīng)采用生物指示劑冷凝器應(yīng)滅菌滅菌應(yīng)有完整的記錄第五十二頁，共一百二十六頁。凍干檢查要點凍干產(chǎn)品的包裝形式、裝量凍干產(chǎn)品的裝載方式和裝載數(shù)量凍干工藝和曲線凍干工藝的驗證凍干產(chǎn)品進出冷凍干燥室的操作凍干機的滅菌凍干機關(guān)鍵參數(shù)控制和記錄儀表的校準(zhǔn)管路的連接凍干的記錄第五十三頁，共一百二十六頁。從“欣弗”事件談滅菌工藝欣弗事件的發(fā)生2006年7月安徽華源克林霉素磷酸酯葡萄糖注射液不良事件報告81例，涉及10個省份第五十四頁，共一百二十六頁。欣弗到底怎么了？第五十五頁，共一百二十六頁?？肆置顾亓姿狨プ⑸鋭┊a(chǎn)品的調(diào)查克林霉素磷酸酯氯化鈉注射（100ml:0.6g）采用半無菌工藝生產(chǎn)滅菌條件 100℃、7分鐘貯存條件 陰涼有效期 1年有些企業(yè)的處方中含有苯甲醇穩(wěn)定性考察 有一批留樣的有關(guān)物質(zhì)為7.9％有關(guān)物質(zhì) 總雜不得過8.0％ 單雜不得過5.0％第五十六頁，共一百二十六頁?？肆置顾亓姿狨プ⑸鋭┊a(chǎn)品的調(diào)查克林霉素磷酸酯注射液（2ml:0.3g）滅菌條件 100℃、3～10分鐘貯存條件 遮光、密閉保存有效期 2年處方中含有苯甲醇有關(guān)物質(zhì) 總雜不得過6.0％（2004年底改為8.0％） 單雜不得過4.0％第五十七頁，共一百二十六頁?？肆置顾亓姿狨プ⑸鋭┊a(chǎn)品的調(diào)查注射用克林霉素磷酸酯（0.3g或0.6g）凍干粉針貯存條件 遮光、密閉，在陰涼處保存有效期 2年有的處方中含有苯甲醇有關(guān)物質(zhì) 總雜不得過4.0％ 單雜不得過2.5％第五十八頁，共一百二十六頁?？肆置顾亓姿狨プ⑸鋭┊a(chǎn)品

質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中有關(guān)物質(zhì)項比較有關(guān)物質(zhì)LVP（100ml）SVP(2ml)粉針劑原料藥總雜≤8.0%≤8.0%≤4.0%≤4.0%單雜≤5.0%≤4.0%≤2.5%≤2.5%第五十九頁，共一百二十六頁?？肆置顾亓姿狨ニ芤?/p>

熱穩(wěn)定性研究江蘇省的一家藥廠經(jīng)試驗發(fā)現(xiàn)，克林霉素磷酸酯水溶液加熱到60℃，含量下降86%因無法采用滅菌工藝生產(chǎn)，該企業(yè)最終申報了克林霉素磷酸酯的凍干粉針劑第六十頁，共一百二十六頁。從上述調(diào)查

看國內(nèi)滅菌注射劑生產(chǎn)的缺陷對滅菌的認(rèn)識不正確產(chǎn)品研發(fā)未考慮滅菌工藝的可行性忽視工藝的可行性，盲目跟風(fēng)報批注射劑用原料藥的雜質(zhì)控制不嚴(yán)忽視產(chǎn)品的安全性第六十一頁，共一百二十六頁?！吨袊t(yī)藥報》2007年1月4日A6版第六十二頁，共一百二十六頁。滅菌工藝的選擇濕熱滅菌法干熱滅菌法除菌過濾法環(huán)氧乙烷滅菌法輻射滅菌法第六十三頁，共一百二十六頁。無菌藥品常用滅菌工藝的比較類別Fo值微生物存活概率要點說明過度殺滅法Fo≥12≤10-6熱穩(wěn)定性產(chǎn)品以殺滅微生物作為實現(xiàn)無菌的手段殘存概率法8<Fo<12≤10-6熱穩(wěn)定性較差產(chǎn)品工藝過程將防止產(chǎn)品被耐熱菌污染放在首位而不是依賴最終滅菌去消除污染流通蒸汽法不計算Fo≤10-3熱不穩(wěn)定產(chǎn)品加熱是除菌過濾的補充手段除菌過濾法LRV>7≤10-3不能加熱的產(chǎn)品不能除去病毒、支原體等微生物L(fēng)RV=logreductionvalue過濾對數(shù)下降值一般上游為107下游為1，則LRV=7由于操作較多，最終產(chǎn)品達到的無菌保證水平遠(yuǎn)低于除菌過濾的水平第六十四頁，共一百二十六頁。影響濕熱滅菌效果的因素待滅菌產(chǎn)品中含有微生物的種類和數(shù)量待滅菌產(chǎn)品的包裝形式待滅菌產(chǎn)品的裝載方式和裝載數(shù)量濕熱滅菌工藝條件濕熱滅菌設(shè)備第六十五頁，共一百二十六頁。無菌保證水平SAL無菌保證水平（SterilityAssuranceLevel）表示物品被滅菌后的無菌狀態(tài)按國際標(biāo)準(zhǔn)，濕熱滅菌法的無菌保證值不得低于10-6，即滅菌后微生物存活的概率不得大于百萬分之一。第六十六頁，共一百二十六頁。滅菌工藝驗證的必要性滅菌產(chǎn)品的無菌保證不能依賴于最終產(chǎn)品的無菌檢驗，而是取決于生產(chǎn)過程中采用合格的滅菌工藝、嚴(yán)格的GMP管理和良好的無菌保證體系滅菌工藝的驗證是無菌保證的必要條件滅菌工藝經(jīng)過驗證后，方可正式用于生產(chǎn)第六十七頁，共一百二十六頁。國內(nèi)企業(yè)滅菌工藝驗證常見缺陷無包裝規(guī)格無裝載方式未對每一種產(chǎn)品每一種包裝規(guī)格的每一種裝載方式進行驗證采用留點溫度計監(jiān)測溫度無溫度探頭校準(zhǔn)記錄驗證的滅菌工藝與實際工藝不一致未驗證最差滅菌條件設(shè)定的驗證合格標(biāo)準(zhǔn)達不到無菌保證水平（SAL）10-6生物指示劑使用不規(guī)范第六十八頁，共一百二十六頁。滅菌工藝檢查要點生產(chǎn)環(huán)境和待滅菌產(chǎn)品中含有微生物的種類和數(shù)量研究和監(jiān)控待滅菌產(chǎn)品的包裝形式、裝載方式和裝載數(shù)量滅菌工藝條件滅菌設(shè)備關(guān)鍵控制參數(shù)的控制和記錄儀表的校準(zhǔn)設(shè)備維護和維修滅菌的記錄滅菌工藝的驗證選用的生物指示劑熱分布試驗，找出最冷點位置無菌檢驗樣品的取樣第六十九頁，共一百二十六頁。無菌檢查第七十頁，共一百二十六頁。國內(nèi)企業(yè)常見缺陷未對無菌檢驗方法進行驗證未測試培養(yǎng)基的靈敏度未對每柜滅菌產(chǎn)品進行取樣并進行無菌檢驗未考慮產(chǎn)品本身的抑菌作用無菌種分離鑒別的條件出現(xiàn)陽性結(jié)果時的調(diào)查不完整第七十一頁，共一百二十六頁。無菌檢查的局限性無菌的定義理論上：無菌＝?jīng)]有任何活的微生物實際上：我們無法證明產(chǎn)品中沒有活微生物存在無法對整批產(chǎn)品進行100%檢驗無菌檢驗的結(jié)果只是一個基于“可能性”的判斷無菌檢驗用培養(yǎng)基有其局限性只進行細(xì)菌和真菌的檢驗對實驗結(jié)果的判定是基于“是否在培養(yǎng)基中生長”培養(yǎng)條件（如溫度和時間）是有限的我們的工作環(huán)境及操作是在相對無菌的狀態(tài)第七十二頁，共一百二十六頁。美國非腸道藥物學(xué)會注射劑無菌測試結(jié)果試驗?zāi)康模翰缓细竦目赡苄?%)試驗批量：60,000支試驗方法：按美國藥典無菌測試方法真實的不合格率測試20支樣品不合格的可能性測試40支樣品不合格的可能性1％18.2%33.1%5％64.2%87.2%15％96.1%99.8%30％99.9%100.0%第七十三頁，共一百二十六頁。上述無菌測試結(jié)果的啟示含有少量微生物污染產(chǎn)品的批次也有可能“通過”無菌檢驗一批產(chǎn)品的染菌率越低，根據(jù)無菌檢驗的結(jié)果來判定整批產(chǎn)品的無菌，其風(fēng)險就越大第七十四頁，共一百二十六頁。如何用無菌檢驗來證明整批產(chǎn)品無菌要求有一個取樣計劃來涵蓋整個批號有足夠的取樣量和檢驗量選擇適用的培養(yǎng)基采用經(jīng)驗證的無菌檢驗方法良好的環(huán)境監(jiān)控第七十五頁，共一百二十六頁。無菌檢驗的取樣計劃何時取?如何取?何處取？無菌灌裝產(chǎn)品批開始、結(jié)束及重大故障和調(diào)整后最多24小時為一批USP<1211>每天灌裝的產(chǎn)品應(yīng)分別做無菌檢驗最終滅菌產(chǎn)品從滅菌柜中最冷點取樣對經(jīng)不同滅菌柜滅菌的產(chǎn)品應(yīng)分別進行無菌檢驗第七十六頁，共一百二十六頁。無菌檢驗的取樣計劃取多少樣品（檢驗數(shù)量）？取決于產(chǎn)品的批量

CP2005年版大于500：取2%或20支（取少），用于每個培養(yǎng)基檢驗小于等于100：取10%或4個（取多），用于每個培養(yǎng)基檢驗取決于產(chǎn)品的數(shù)量CP2005年版劑量小于1毫升，就要取40支同時要考慮檢驗耗損和復(fù)試的需要第七十七頁，共一百二十六頁。無菌檢驗的取樣計劃每個樣品測試多少數(shù)量（檢驗量）？藥典上規(guī)定了每次檢驗的供試品總量裝量小于1ml

CP2005年版每支樣接入每個培養(yǎng)基為全量裝量大于等于1ml Ph.Eur半量，但不超過20ml CP2005年版半量，2-500ml第七十八頁，共一百二十六頁。無菌檢驗用培養(yǎng)基培養(yǎng)基的種類用于真菌培養(yǎng)的改良馬丁培養(yǎng)基，培養(yǎng)溫度23-28℃用于厭氧和需氧細(xì)菌培養(yǎng)的硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基，培養(yǎng)溫度30-35℃培養(yǎng)基的適用性檢查要有足夠的靈敏度能夠支持代表性菌種的生長培養(yǎng)基的儲存和控制儲存條件和有效期第七十九頁，共一百二十六頁。USP29無菌檢驗陽性對照菌的選擇名稱英名備注白色念珠菌CandidaalbicansATCC10231真菌/酵母①黑曲霉菌AspergillusnigerATCC16404真菌/霉菌①枯草芽孢桿菌Bacillussubtilis

ATCC6633需氧，條件致病菌，除炭疽熱類芽孢桿菌會引起大部分動物生病以外，本屬內(nèi)其它種都不會引起動物生病，但是Bacillussubtilis

卻會引起眼睛傷害，G+.銅綠假單胞菌Pseudomonasaeruginosa

ATCC9027需氧，G-,致病菌

②又叫綠膿桿菌金黃色葡萄球菌StaphylococcusaureusATCC6538需氧，G+,是致病菌

③梭狀芽孢桿菌ClostridiumsporogenesATCC7955厭氧，G+,非致病菌④產(chǎn)品中常見污染菌從日常監(jiān)控污染菌中分離企業(yè)自己分離第八十頁，共一百二十六頁。無菌檢驗方法主要有兩種方法直接接種法薄膜過濾法注意事項采用直接接種法時應(yīng)考慮產(chǎn)品是否有抑菌性第八十一頁，共一百二十六頁。無菌檢驗的環(huán)境控制應(yīng)在無菌環(huán)境下進行潔凈度（塵粒和微生物）應(yīng)與無菌生產(chǎn)廠房一致控制要求與生產(chǎn)區(qū)域一致，如：空調(diào)、更衣、清潔、緩沖、定期驗證應(yīng)有環(huán)境監(jiān)控程序并根據(jù)實際情況設(shè)定糾偏限度第八十二頁，共一百二十六頁。隔離器第八十三頁，共一百二十六頁。樣品表面的消毒處理在樣品進入無菌區(qū)前應(yīng)進行消毒處理在進行樣品外表面消毒時，應(yīng)確保樣品的完整性

考慮所用消毒液滲透過樣品容器的可能性，如：透過塑料容器消毒液應(yīng)無菌第八十四頁，共一百二十六頁。陽性檢驗結(jié)果的調(diào)查和處理無菌檢驗所用的設(shè)備及環(huán)境的微生物監(jiān)控結(jié)果不符合無菌檢查法要求回顧無菌檢驗過程，發(fā)現(xiàn)有可能引起微生物污染的因素陰性對照有菌生長供試品中生長的微生物經(jīng)鑒定后，確證是因無菌試驗中所用的物品和（或）無菌操作技術(shù)不當(dāng)引起要有調(diào)查程序和記錄第八十五頁，共一百二十六頁。無菌檢查的要點取樣計劃取樣量和檢驗量培養(yǎng)基和菌種管理無菌檢驗方法環(huán)境監(jiān)控樣品表面消毒處理陽性檢驗結(jié)果的調(diào)查和處理第八十六頁，共一百二十六頁。從“齊二藥”事件談物料和中間產(chǎn)品的質(zhì)量控制第八十七頁，共一百二十六頁?！褒R二藥”事件事件回顧2006年4月齊齊哈爾第二制藥有限公司亮菌甲素注射液將工業(yè)用二甘醇（乙二醇）作為藥用丙二醇投入注射劑的生產(chǎn)造成11人嚴(yán)重腎衰竭，4人死亡第八十八頁，共一百二十六頁?！褒R二藥”事件第八十九頁，共一百二十六頁?！褒R二藥”事件事件發(fā)生的原因企業(yè)改制，有實際工作經(jīng)驗的員工嚴(yán)重流失檢驗人員未經(jīng)培訓(xùn)，鑒別試驗出錯物料供應(yīng)商審計流于形式、疏于管理假丙二醇是由江蘇省中國地質(zhì)礦業(yè)公司泰興化工總廠生產(chǎn)事件的教訓(xùn)不合格的物料會威脅到用戶或病人的安全（嚴(yán)重傷害、嚴(yán)重疾病或死亡）第九十頁，共一百二十六頁。“齊二藥”事件對“齊二藥”的處理沒收查封扣押的假藥沒收其違法所得238萬元，并處貨值金額5倍罰款1682萬元，罰沒款合計1920萬元吊銷其《藥品生產(chǎn)許可證》撤銷其129個藥品批準(zhǔn)文號收回GMP認(rèn)證證書涉嫌將工業(yè)用二甘醇當(dāng)作藥用丙二醇供應(yīng)給“齊二藥”)的王桂平被江蘇省泰興市檢察院以涉嫌銷售假藥罪和虛報注冊資本罪批準(zhǔn)逮捕。第九十一頁，共一百二十六頁。國內(nèi)企業(yè)常見缺陷未根據(jù)產(chǎn)品特性、用途、工藝設(shè)定質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)物料質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)缺少鑒別和安全性指標(biāo)砷鹽、重金屬、細(xì)菌內(nèi)毒素重成品檢驗，輕物料檢驗未經(jīng)取樣的物料貼有取樣證取樣方法不規(guī)范含量等檢驗未做平行試驗供應(yīng)商審計流于形式，隨意變更供應(yīng)商無經(jīng)質(zhì)量部門批準(zhǔn)的合格供應(yīng)商清單第九十二頁，共一百二十六頁。物料的質(zhì)量控制應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品的特性、用途和工藝設(shè)定物料的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)用于無菌藥品的物料應(yīng)特別考慮安全性的指標(biāo)任何物料的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中一定要有鑒別WHO的GMP中要求對每一包裝的物料進行鑒別試驗物料的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和（或）來源應(yīng)符合注冊批準(zhǔn)的要求物料的取樣應(yīng)有代表性物料的檢驗應(yīng)嚴(yán)謹(jǐn)、規(guī)范第九十三頁，共一百二十六頁。物料供應(yīng)商管理對供應(yīng)商進行識別、評估、驗證、確認(rèn)和管理是供應(yīng)鏈管理中最關(guān)鍵的任務(wù)是最基本的質(zhì)量工作之一應(yīng)重點管理物料的生產(chǎn)商第九十四頁，共一百二十六頁。物料供應(yīng)商管理批準(zhǔn)供應(yīng)商清單業(yè)績評估供應(yīng)商批準(zhǔn)流程供應(yīng)商選擇供應(yīng)商嘉獎第九十五頁，共一百二十六頁。供應(yīng)商需求供應(yīng)商分類成品服務(wù)物料確定風(fēng)險等級確定批準(zhǔn)條件發(fā)給供應(yīng)商問詢表和供應(yīng)商質(zhì)量要求現(xiàn)場審核（如有要求）評估是否批準(zhǔn)否決批準(zhǔn)加入批準(zhǔn)供應(yīng)商清單文件存檔確定批準(zhǔn)分級供應(yīng)商批準(zhǔn)流程示例第九十六頁，共一百二十六頁。供應(yīng)商變更物料供應(yīng)商應(yīng)保持相對穩(wěn)定改變原料藥的生產(chǎn)商應(yīng)補充申報，經(jīng)藥監(jiān)部門批準(zhǔn)不同物料的生產(chǎn)商可能采用不同的生產(chǎn)工藝，導(dǎo)致物料的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)不完全相同應(yīng)評估對產(chǎn)品質(zhì)量的影響至少檢驗三批樣品必要時，還應(yīng)進行小試和產(chǎn)品穩(wěn)定性考察應(yīng)按供應(yīng)商批