《動物細(xì)胞工程》

衡東二中生物組制作：張先華動物細(xì)胞工程第一輪復(fù)習(xí)課件1整理課件1.動物細(xì)胞培養(yǎng)2.核移植技術(shù)3.動物細(xì)胞融合4.單克隆抗體高考考點(diǎn)解讀2整理課件例1.動物細(xì)胞體外培養(yǎng)時，通常要在培養(yǎng)基中補(bǔ)充一定濃度的某些物質(zhì)。以下圖是血清對正常細(xì)胞和癌細(xì)胞培養(yǎng)影響的實(shí)驗結(jié)果。由此獲得的不正確結(jié)論是A.正常細(xì)胞與癌細(xì)胞的增殖速率相同B.有無血清對正常細(xì)胞培養(yǎng)的影響不同C.培養(yǎng)基中補(bǔ)充血清有助于正常細(xì)胞的培養(yǎng)D.培養(yǎng)基中是否補(bǔ)充血清對癌細(xì)胞的培養(yǎng)影響不大3整理課件考點(diǎn)一：動物細(xì)胞培養(yǎng)1.概念：從動物有機(jī)體中取出相關(guān)的組織，將它分散成

，然后放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細(xì)胞生長和增殖。2.動物細(xì)胞培養(yǎng)的條件：①無菌、無毒的環(huán)境(無菌處理：)②營養(yǎng)〔加等〕③溫度和pH〔36.5、7.2—7.4〕④氣體環(huán)境〔〕單個細(xì)胞抗生素動物血清O2和CO24整理課件3.過程取動物組織塊胰蛋白酶或膠原蛋白酶剪碎單個細(xì)胞配制細(xì)胞懸浮液細(xì)胞貼壁原代培養(yǎng)分瓶培養(yǎng)傳代培養(yǎng)10~50代細(xì)胞細(xì)胞核型發(fā)生變化有癌變特點(diǎn)獲得不死性接觸抑制5整理課件4.動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用：⑴生產(chǎn)有價值的蛋白質(zhì)制品〔如病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體〕⑵培養(yǎng)基因工程的受體細(xì)胞⑶檢測有毒物質(zhì)⑷用于生理、病理、藥理等研究6整理課件5.植物組織培養(yǎng)和動物細(xì)胞培養(yǎng)的比較比較工程原理培養(yǎng)基性質(zhì)培養(yǎng)基特有成分培養(yǎng)結(jié)果培養(yǎng)目的植物組織培養(yǎng)細(xì)胞的全能性固體培養(yǎng)基蔗糖、植物激素植物體快速繁殖培育無病毒植株等動物細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞增殖液體培養(yǎng)基葡萄糖、動物血清細(xì)胞群體獲得細(xì)胞或細(xì)胞產(chǎn)物等相同點(diǎn)：①無菌無毒條件②合成培養(yǎng)基③適宜的溫度和PH7整理課件考點(diǎn)二：動物體細(xì)胞核移植

技術(shù)和克隆動物1、動物核移植的概念：動物核移植是將動物的一個細(xì)胞的細(xì)胞核，移如入一個已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎，這個新的胚胎最終發(fā)育為動物個體。〔克隆動物〕2、動物核移植的類型：體細(xì)胞核移植〔難度高〕受體細(xì)胞：胚胎細(xì)胞核移植MⅡ期的卵母細(xì)胞8整理課件3、動物核移植的過程：高產(chǎn)奶牛（供體）從屠宰場收集牛卵巢，采集卵母細(xì)胞，在體外培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期MⅡ期卵母細(xì)胞用物理或化學(xué)方法〔如電脈沖、鈣離子載體、乙醇、蛋白酶合成抑制劑等〕激活受體細(xì)胞，使其完成減數(shù)分裂和發(fā)育進(jìn)程生出與供體奶牛遺傳根底相同的犢牛將胚胎移入受體（代孕）母牛體內(nèi)從供體高產(chǎn)奶牛身體的某一部位〔如耳〕上取體細(xì)胞〔供體〕去核的卵母細(xì)胞9整理課件核移植“多莉羊〞的誕生早期胚胎培養(yǎng)胚胎移植蘇格蘭黑面母羊芬蘭白面母羊去核卵細(xì)胞卵核乳腺細(xì)胞早期胚胎電脈沖融合核10整理課件4、體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景〔1〕改進(jìn)動物品種〔2〕保護(hù)瀕危動物〔3〕克隆動物作為生物反響器，生產(chǎn)醫(yī)用蛋白〔4〕治療人類疾病，作為異種移植的供體5、體細(xì)胞核移植技術(shù)存在的問題：a.成功率非常低b.絕大多數(shù)克隆動物存在健康問題c.對克隆動物食品的平安性問題也存在爭議11整理課件例：現(xiàn)有A和B兩個肉牛品種，A品種牛的細(xì)胞組成可表示為A細(xì)胞核、A細(xì)胞質(zhì)，B品種牛那么為B細(xì)胞核、B細(xì)胞質(zhì)?！?〕如果要獲得一頭克隆牛，使其細(xì)胞由A細(xì)胞核和B細(xì)胞質(zhì)組成，根本步驟是，從A品種牛體內(nèi)取出體細(xì)胞，進(jìn)行體外培養(yǎng)。然后再從培養(yǎng)細(xì)胞中取出_______注入B品種牛的_____卵母細(xì)胞，經(jīng)過刺激和培養(yǎng)后，可形成胚胎，該胚胎被稱為_______，將該胚胎移入代孕母牛的______中，通過培育可到達(dá)目的。細(xì)胞核去核重組胚胎子宮12整理課件〔2〕一般來說，要想大量獲得這種克隆牛比較難，原因之一是卵母細(xì)胞的數(shù)量______，為解決這一問題，可以用______激素處理B品種母牛?！?〕克隆牛的產(chǎn)生說明具有全能性。克隆牛的性狀主要表現(xiàn)品種牛的特征。由A、B兩品種雜交得到的牛與克隆牛相比，雜交牛細(xì)胞核的遺傳物質(zhì)來自______個親本，細(xì)胞質(zhì)來自______性親本，克隆牛和雜交牛的遺傳物質(zhì)組成______〔相同，不同〕。缺乏促性腺A兩雌不同動物體細(xì)胞核13整理課件考點(diǎn)三：動物細(xì)胞融合1、概念：指兩個或多個動物細(xì)胞結(jié)合形成一個細(xì)胞的過程。2、結(jié)果：形成雜交細(xì)胞3、原理：細(xì)胞膜的流動性4、誘導(dǎo)融合方法物理法：離心、振動、電激化學(xué)法：聚乙二醇〔PEG)生物法：滅活的病毒14整理課件5、過程不同DNA的滅活的病毒融合有絲分裂兩個完整的有絲分裂15整理課件6、意義：〔1〕突破了有性雜交方法的局限，使遠(yuǎn)緣雜交〔種間、屬間、科間、動植物之間〕成為可能。〔2〕成為研究細(xì)胞遺傳、細(xì)胞免疫、腫瘤和生物新品種培育等的重要手段〔3〕特別是利用雜交瘤技術(shù)制造單克隆抗體。16整理課件7、植物體細(xì)胞雜交和動物細(xì)胞融合的比較比較工程原理植物體細(xì)胞雜交動物細(xì)胞融合融合前的處理用途誘導(dǎo)融合方法細(xì)胞的全能性細(xì)胞膜的流動性細(xì)胞膜的流動性(酶解法)使細(xì)胞形成單個細(xì)胞去掉細(xì)胞壁分離出原生質(zhì)體（同左）滅活的病毒物理（離心、振動、電刺激）化學(xué)（聚乙二醇）主要用于制備單克隆抗體獲得雜種植株17整理課件例1:右圖為細(xì)胞融合的簡略過程，請據(jù)圖答復(fù)：〔1〕假設(shè)A、B是動物細(xì)胞，一般自，然后用，使其分散開來，A、B到C的過程中，常用的不用于植物細(xì)胞的手段是，所形成的D稱為。動物胚胎或幼齡動物的組織、器官雜種細(xì)胞胰蛋白酶滅活的病毒誘導(dǎo)〔2〕假設(shè)該過程是制備單克隆抗體，A為小鼠B淋巴細(xì)胞，那么，在獲得此細(xì)胞之前，小鼠已被注射了。注射后小鼠身體產(chǎn)生了相應(yīng)的生成了。圖中的B是。骨髓瘤細(xì)胞抗原免疫反響漿細(xì)胞、抗體、記憶細(xì)胞18整理課件〔3〕假設(shè)該過程仍是制備單克隆抗體，在A、B到C的過程中，所形成的C有種，用來培養(yǎng)的D的細(xì)胞應(yīng)該是。從中選擇出它的方法是培養(yǎng)，獲得D后，常用的培養(yǎng)方法是體外培養(yǎng)液中培養(yǎng)和。小鼠腹腔增殖3雜交瘤細(xì)胞用特定的選擇培養(yǎng)基19整理課件考點(diǎn)四：單克隆抗體1、傳統(tǒng)的抗體制備方法及問題：反復(fù)注射X先把抗原做成乳劑小鼠體內(nèi)有多種B淋巴細(xì)胞可分泌不同抗體-a-b-c-d-a-b-c-d缺乏：產(chǎn)量低、純度低、特異性差20整理課件2、單克隆抗體的概念單個B細(xì)胞通過無性繁殖形成的細(xì)胞群分泌的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體。3.單克隆抗體的應(yīng)用：單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)：〔1〕作為診斷試劑：優(yōu)點(diǎn)：準(zhǔn)確、高效、簡易、快速?！?〕用于運(yùn)載藥物：制成“生物導(dǎo)彈”治療疾?。褐饕糜诎┌Y治療既不損傷正常細(xì)胞，又減少了用藥劑量特異性強(qiáng)、靈敏度高、產(chǎn)量大。21整理課件4、制備過程思考：將抗原注射到老鼠體內(nèi)的目的，兩次篩選的目的？22整理課件例2:制備單克隆抗體所采用的細(xì)胞工程技術(shù)包括①細(xì)胞培養(yǎng)②細(xì)胞融合③胚胎移植④細(xì)胞核移植A．①②B．①③C．②③D．③④例3：利用細(xì)胞工程方法，以SARS病毒核衣殼蛋白為抗原制備出單克隆抗體。以下相關(guān)表達(dá)正確的選項是A.用純化的核衣殼蛋白反復(fù)注射到小鼠體內(nèi)，產(chǎn)生的血清抗體為單克隆抗體B.體外培養(yǎng)單個效應(yīng)B細(xì)胞可以獲得大量針對SARS病毒的單克隆抗體C.將等量效應(yīng)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞混合，經(jīng)PEG誘導(dǎo)融合后的細(xì)胞均為雜交瘤細(xì)胞D.利用該單克隆抗體與SARS病毒核衣殼蛋白特異性結(jié)合的方法可診斷出病毒感染者23整理課件例4：以下圖表示用生物工程制備人抗A抗體的過程。請答復(fù)以下問題:〔1〕人的紅細(xì)胞膜外表有被稱為凝集原的特異_____，從免疫學(xué)角度看，這種凝集原是_____。糖蛋白抗原〔2〕圖中細(xì)胞中1是小鼠體內(nèi)注入人A型血紅細(xì)胞后而獲得的_____細(xì)胞，這種細(xì)胞具有產(chǎn)生_____的特點(diǎn)，但難以在體外培養(yǎng)。甲培養(yǎng)皿中培養(yǎng)的細(xì)胞2，是從患骨髓瘤的小鼠體內(nèi)獲取的骨髓瘤細(xì)胞，這種細(xì)胞在體外培養(yǎng)時能____，但不會產(chǎn)生抗體。漿特異性抗體快速大量增殖24整理課件〔3〕為了能充分發(fā)揮上述兩種細(xì)胞各自的特點(diǎn)，經(jīng)特殊處理，在促細(xì)胞融合因子的作用下，使兩種細(xì)胞發(fā)生融合，形成圖中的細(xì)胞3，這種細(xì)胞稱為