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水生動(dòng)物檢疫應(yīng)檢樣品分類表第一類活的水生動(dòng)物樣品名稱檢驗(yàn)項(xiàng)目檢疫方法處理方法親魚(yú)、魚(yú)苗、魚(yú)受精卵送檢 非種用魚(yú)外觀檢查,抽查送檢種用觀賞魚(yú)送檢 非種用觀賞魚(yú)外觀檢查,抽查送檢親蝦、蝦苗送檢非種用蝦 外觀檢查,抽查送檢龍蝦V.choleraeandV.parahaemoluticus 按規(guī)定方法檢查螯蝦、螯蝦苗 送檢種用蟹送檢食用蟹V.cholerae andV.parahaemolyticus 按規(guī)定方法檢查種用龜、龜苗送檢非種用龜Salmonellasp.按規(guī)定方法檢查親鱉、鱉苗、鱉受精卵送檢種用青蛙、蝌蚪送檢非種用青蛙V.cholerae 按規(guī)定方法檢查食用貝V.choleraeandV.parahaemolyticus按規(guī)定方法檢查第二類冰鮮水生動(dòng)物產(chǎn)品樣品名稱檢驗(yàn)項(xiàng)目檢疫方法處理方法冰鮮魚(yú)異尖線蟲(chóng),V.choleraeandV.parahaemolyticus按規(guī)定方法檢查,淡水產(chǎn)者檢V.cholerae冰鮮蝦V.cholerae andV.parahaemolyticus按規(guī)定方法檢查淡水產(chǎn)者只檢V.cholerae冰鮮蟹V.cholerae andV.parahaemolyticus按規(guī)定方法檢查淡水產(chǎn)者只檢V.cholerae其他冰鮮水生動(dòng)物V.cholerae andV.parahaemolyticus按規(guī)定方法檢查淡水產(chǎn)者只檢V.cholerae

第三類冰凍水生動(dòng)物產(chǎn)品樣品名稱檢驗(yàn)項(xiàng)目檢疫方法處理方法凍魚(yú)細(xì)菌總數(shù)和致病,性大腸桿菌按規(guī)定方法檢查凍河豚分類學(xué)檢查對(duì)照種類的毒性凍蝦V.choleraeV.parahaemolyticusand按規(guī)定方法檢查凍蟹V.choleraeV.parahaemolyticusand按規(guī)定方法檢查凍龜、凍鱉Salmonellasp.V.cholerae按規(guī)定方法檢查凍貝(帶殼或不帶殼)V.choleraeV.parahaemolyticusand其他冰凍水產(chǎn)品V.choleraeV.parahaemolyticusand按規(guī)定方法檢查第四類干的水生動(dòng)物產(chǎn)品樣品名稱檢驗(yàn)項(xiàng)目檢疫方法處理方法食用魚(yú)肚氣味檢查食用魚(yú)皮外觀、氣味檢查魚(yú)粉(作調(diào)味品)Salmonella按規(guī)定方法檢查蝦皮、蟹殼粉(作食品添加劑)Salmonella按規(guī)定方法檢查食用干海參外觀檢查水生動(dòng)物干粉(作飼料用)Salmonella按規(guī)定方法檢查魷魚(yú)干外觀檢查鯊魚(yú)鰭條(魚(yú)翅)外觀檢查小魚(yú)干Salmonella按規(guī)定方法檢查水生動(dòng)物病害檢疫

操作規(guī)程(試行)鰻鱺種苗檢疫方法1.總則本規(guī)程適合于對(duì)各種鰻鯽種苗進(jìn)行檢疫。試劑和設(shè)備魚(yú)傳代細(xì)胞(EPC25°C、RTG-2和PG20°C培養(yǎng))普通瓊脂培養(yǎng)基和愛(ài)德華氏菌分離培養(yǎng)基。見(jiàn)附件5微量生化培養(yǎng)管。可購(gòu)買。.鞭毛染色液.鑒定血清現(xiàn)場(chǎng)檢疫:活動(dòng)狀態(tài)一一是否活潑,有無(wú)死亡、變色(特別是發(fā)黑)現(xiàn)象?,F(xiàn)場(chǎng)取樣:取樣數(shù)量和部位:取整條魚(yú)苗。有癥狀或死亡的全取或10條(每5條作為一個(gè)樣品放在一起),常規(guī)抽樣要求取30條。樣品處理:用于檢查寄生蟲(chóng)感染的,必須取樣后立即觀察,不能凍存或放置。用于檢查細(xì)菌感染的,必須取樣后立即處理:體長(zhǎng)4cm以下的稚魚(yú),經(jīng)體表消毒后整尾(或多尾)用經(jīng)消毒的勻漿器勻漿后接種。體長(zhǎng)46cm的小魚(yú),用無(wú)菌方法取出整個(gè)內(nèi)臟,單個(gè)或混合勻漿后接種。體長(zhǎng)大于6cm的魚(yú),用無(wú)菌方法分別從內(nèi)臟器官(肝、脾、腎、心臟)、腹水(若有)穿刺接種。有皮膚病灶、爛鰓、爛鰭等癥狀的病魚(yú),從病灶處取樣接種。接種到培養(yǎng)基或增菌液中。如果接種后出現(xiàn)較多且較一致的菌落,可懷疑帶菌,需作進(jìn)一步鑒定。否則認(rèn)為是雜菌棄去。用于檢查病毒感染的,必須取樣后保存于4C24小時(shí)內(nèi)送檢或者保存于-18C凍存后盡快送檢,切忌反復(fù)凍融。檢驗(yàn)內(nèi)容:對(duì)鰻鱺種苗除仔細(xì)檢查有無(wú)可見(jiàn)的病癥及死亡外,主要是采取抽樣普查(即盲檢)的方法分離愛(ài)德華氏菌和某些病毒,及解剖鏡檢查擬指環(huán)蟲(chóng)。再就是根據(jù)近年來(lái)國(guó)際上的疫情報(bào)告分析可能帶有的病原作重點(diǎn)檢查或強(qiáng)制消毒。檢驗(yàn)方法細(xì)菌常規(guī)檢查按附件2的程序進(jìn)行。愛(ài)德華氏菌分離鑒定按附件4的程序進(jìn)行:分離病毒:體表徹底消毒后整條勻漿。分離鑒定按附件3的程序進(jìn)行.附:國(guó)內(nèi)外從鰻鱺中分離到的病毒:EVE(IPNV型):RTG-2、20°C、3-4天有CPE一病原性EVX和EVEX(彈狀病毒〕:RTG-2、20C、3-4天有CPE―非病原性EV、EV-1、EV-2正粘病毒:一病原性不清開(kāi)口?。ㄇ蛐尾《荆篍G細(xì)胞中30C、3-4天有CPE一病原性注:均不是OIE公布的一、二類傳染病。判斷與處理:細(xì)菌?。核幬锾幚?。常用的洗浴藥物有0.4-0.6ppm三氯異氤尿酸遍灑、3-5ppm呋喃唑酮(浸泡30分鐘+口服)寄生蟲(chóng)?。核幬锝荨3S玫南丛∷幬镉校?%的食鹽水5分鐘、810ppm硫酸銅30分鐘、10-20ppm高錳酸鉀30分鐘、0。5ppm敵白蟲(chóng)遍灑等。對(duì)蝦檢疫方法總則本規(guī)程適合于對(duì)活對(duì)蝦(包括親蝦、蝦苗、食用蝦和觀賞蝦)進(jìn)行檢疫。對(duì)蝦主要檢各種蝦病毒。并且以組織學(xué)檢查為主,如壓片、印片(涂片)、切片然后染色鏡檢。如發(fā)現(xiàn)問(wèn)題再做進(jìn)一步鑒定。IHHNV可用EPC細(xì)胞分離,白斑病可試做PCR檢查。試劑和設(shè)備常用切片和印片設(shè)備,以及各種染色液。(見(jiàn)附件)魚(yú)傳代細(xì)胞(EPC25°C培養(yǎng))PCR儀、水平電泳設(shè)備、紫外觀察燈。2.3.引物(編號(hào)146F1和146R1)及PCR常用試劑:dNTP,Tag酶現(xiàn)場(chǎng)檢疫:活動(dòng)狀一一是否活潑,反應(yīng)敏捷,在用于提起包裝袋時(shí)應(yīng)會(huì)游動(dòng)。體表—_體表光滑、干凈、顏色正常一致、無(wú)附著物、肌肉飽滿。其它——鰓部無(wú)爛鰓、黑鰓,肝胰腺無(wú)紅腫、變白濁不透明現(xiàn)象;附肢無(wú)潰爛、紅腫、斷殘等;尾部無(wú)腫爛、殘損等?,F(xiàn)場(chǎng)取樣:蝦苗取整條蝦(制片取10條,分離病毒取30條)。親蝦僅在產(chǎn)卵后取親蝦和子代蝦苗樣品。親蝦產(chǎn)卵后孵化的蝦苗取樣數(shù)量按“種用水生動(dòng)物產(chǎn)地檢疫取樣試驗(yàn)操作規(guī)程”要求取30尾。產(chǎn)卵前僅取親蝦新鮮糞便和病蝦、死蝦的肝胰腺、血淋巴、潰瘍部位。。用于鏡檢的要盡快涂片、壓片、整條或切成小塊固定。用于分離病毒的須取樣后迅速保存于-18C凍存并盡快送檢,切忌反復(fù)凍融。病毒---YBV、白斑病、BMNV、BP、IHHNV、MBV。其它項(xiàng)目根據(jù)OIE公報(bào)的疾病流行疫區(qū)(三年內(nèi)有效)決定。檢測(cè)方法:組織學(xué)檢查(主要用于查病毒包涵體):涂片、壓片和切片的制作和固定方法見(jiàn)附件6。用孔雀綠、蘇木精-伊紅、Giemsa或Fulgen染色。不同的染色方法及染液配方見(jiàn)附件7。BMNV――無(wú)包涵體,核極肥大(直徑大2-3倍),肝胰腺變白濁不透明。BP 細(xì)胞核內(nèi)有三角形嗜伊紅包涵體(嗜酸性,0.5-20p)MBV 細(xì)胞核內(nèi)有多個(gè)圓形嗜伊紅包涵體(3—叩)IHHNV——細(xì)胞核內(nèi)有圓形嗜伊紅包涵體,F(xiàn)ulgen染色陰性。HPV——細(xì)胞核內(nèi)有單個(gè)巨大圓形藍(lán)色包涵體耆堿性),F(xiàn)ulgen染色陽(yáng)性。YBV——取淋巴組織壓片,細(xì)胞質(zhì)內(nèi)可見(jiàn)濃染的嗜伊紅小體。病毒分離將樣品按附件3的要求處理并接種到EPC細(xì)胞,20-25^培養(yǎng)。IHHNV能在3-5天內(nèi)引起細(xì)胞出現(xiàn)CPE。再作進(jìn)一步鑒定。PCR用白斑病病毒特異性的引物做PCR檢測(cè)對(duì)蝦樣品。具體操作方法見(jiàn)“深圳動(dòng)植物檢疫局水生動(dòng)物檢疫操作規(guī)程:對(duì)蝦白斑病病毒PCR試驗(yàn)方法”。參考消毒方法:寄生蟲(chóng)?。核幬飳?duì)癥處理細(xì)菌?。核幬锝荩?-1.5ppm漂白粉遍灑,或2.5-5ppm高錳酸鉀3小時(shí))和口服(0.1%氯霉素或0.05%氟哌酸)。蝦卵消毒:收集受精卵^用干凈海水沖洗5分鐘T于200ppm福爾馬林浸泡30秒T再用干凈海水沖洗5分鐘t培育。龜類檢疫方法1.總則本規(guī)程適合于對(duì)各種活的龜類(種用、食用、觀賞的龜和甲魚(yú)等)進(jìn)行檢疫。現(xiàn)場(chǎng)檢疫:活動(dòng)狀態(tài)一一是否活潑好動(dòng),反應(yīng)敏捷,翻身是否困難、有無(wú)死亡。外表一一外形正常、甲殼圓滑、皮膚光亮、甲板完整。無(wú)爛殼、穿孔、紅斑潰瘍、紅脖子、腐皮、潰瘍、赤斑、附著物等現(xiàn)象?,F(xiàn)場(chǎng)取樣:取樣數(shù)量、部位和方法:有癥狀的全取或10只。無(wú)癥狀取35只。收集腎、脾、肝(去膽)、腸和血。霉菌等附著物直接取樣鏡檢。樣品處理:用于檢查細(xì)菌感染的,必須取樣后立即處理:體表徹底消毒后剪開(kāi)甲殼,用無(wú)菌方法從內(nèi)臟穿刺取樣。接種到培養(yǎng)基或增菌液中。如果接種后出現(xiàn)較多且較一致的菌落,可懷疑帶菌,需作進(jìn)一步鑒定。否則認(rèn)為是雜菌棄去。用于檢查病毒感染的,必須取樣后保存于4°C24小時(shí)內(nèi)送檢或者保存于-18°C凍存后盡快送檢,切忌反復(fù)凍融。檢驗(yàn)內(nèi)容:由于對(duì)龜類病害了解不多,OIE也未明確規(guī)定,但目前病害流行嚴(yán)重,并且有進(jìn)口帶入的跡象。因此采用常規(guī)檢查的方法。即仔細(xì)檢查有無(wú)可見(jiàn)的病癥和患病部位(如紅脖子、爛底板等)。種用龜則需要采取抽樣普查(即盲檢)的方法分離病毒和細(xì)菌。如果有近年來(lái)國(guó)際上有關(guān)于龜類疫情報(bào)告可能帶有的病原則作重點(diǎn)檢查。處理建議采用強(qiáng)制消毒的措施。檢驗(yàn)方法病毒常規(guī)分離鑒定按附件3的程序進(jìn)行:霉菌等直接取附著物壓片鏡檢。參考消毒方法:細(xì)菌病:1-2ppm呋喃唑酮浸泡48小時(shí)(或20-30ppm浸洗20-30分鐘)。水霉病:15-30ppm孔雀石綠浸洗20-30分鐘,或20ppm高錳酸鉀浸泡10-15分鐘。寄生蟲(chóng)?。?%食鹽水10-25分鐘。蛙類檢疫方法總則本規(guī)程適合于對(duì)各種活的蛙類(種用、食用等)進(jìn)行檢疫。現(xiàn)場(chǎng)檢疫:活動(dòng)狀態(tài)一一有無(wú)癱軟無(wú)力、活動(dòng)遲緩現(xiàn)象和死亡發(fā)生。外表一一腹部及腿部肌肉有無(wú)點(diǎn)狀充血甚至整個(gè)肌肉呈紅色等?,F(xiàn)場(chǎng)取樣:取樣數(shù)量、部位和方法:有癥狀的全取或10只。無(wú)癥狀取3-5只。收集內(nèi)臟。樣品處理及檢驗(yàn)方法:用于檢查細(xì)菌感染的,必須取樣后立即處理,體表徹底消毒后用無(wú)菌方法剪開(kāi),從內(nèi)臟穿刺取樣接種,接種到平板或增菌液中。如果接種后出現(xiàn)較多且較一致的菌落,可懷疑帶菌再作進(jìn)一步鑒定。細(xì)菌常規(guī)檢查按附件2的程序進(jìn)行。否則認(rèn)為是雜菌棄去。用于檢查病毒感染的,必須取樣后保存于4°C24小時(shí)內(nèi)送檢或者保存于-18°C凍存后盡快送檢,切忌反復(fù)凍融。病毒常規(guī)分離鑒定按附件3的程序進(jìn)行。檢驗(yàn)內(nèi)容:蛙類病害不多,重點(diǎn)檢查紅腿?。ú《静。?。因此對(duì)食用蛙僅作外觀檢查。如有異常則要取樣作常規(guī)分離病毒和細(xì)菌。對(duì)種用蛙則要作常規(guī)抽樣普查。參考消毒方法:可用0.15%的食鹽水洗浴5-10分鐘。種用蛙在隔離場(chǎng)用1ppm漂白粉全池潑灑。貝類檢疫方法1.總則本規(guī)程適合于對(duì)各種活的貝類(牡蠣、象拔蚌、帶子、鮑魚(yú)等)進(jìn)行檢疫。現(xiàn)場(chǎng)檢疫:健康的貝類反應(yīng)敏捷,拿出水面是斧足迅速收縮入殼內(nèi),兩殼緊閉,有的種能向外噴水。病貝打開(kāi)檢查時(shí)松弛無(wú)力,外套膜發(fā)黑或腫脹,鰓瓣變鐵銹色或腐爛,病附有污物,體內(nèi)有許多寄生蟲(chóng),斧足有銹斑狀出血點(diǎn),嚴(yán)重時(shí)足上有紅點(diǎn)或蘭點(diǎn)。檢查有無(wú)死亡?,F(xiàn)場(chǎng)取樣取樣數(shù)量部位和方法:有癥狀的全取或10只。無(wú)癥狀取3-5只。取樣體表消毒再開(kāi)蓋,再次消毒后取內(nèi)臟。樣品處理:檢查原蟲(chóng)的樣品盡快制片鏡檢。用于檢查細(xì)菌感染的,必須取樣后立即處理,經(jīng)體表消毒后用無(wú)菌方法分別從內(nèi)臟穿刺接種,接種到培養(yǎng)基或增菌液中。如果接種后出現(xiàn)較多且較一致的菌落,可懷疑帶菌,需作進(jìn)一步鑒定。否則認(rèn)為是雜菌棄去。用于檢查病毒感染的,必須取樣后保存于4°C24小時(shí)內(nèi)送檢或者保存于-18°C凍存后盡快送檢,切忌反復(fù)凍融。檢驗(yàn)內(nèi)容:由于貝類具有富集病害的能力,容易成為病原的攜帶者。因此主要進(jìn)行常規(guī)檢查(即盲檢),特別是根據(jù)所在地流行什么水生動(dòng)物疾病作為檢疫的重點(diǎn)。對(duì)貝類本身的病原,OIE規(guī)定要檢查五種原蟲(chóng)和一種虹彩病毒(Iridovirus)。建議僅檢疫種用貝類。食用貝按水產(chǎn)品要求檢疫。對(duì)種用貝類建議采用強(qiáng)制消毒的措施。細(xì)菌常規(guī)檢查按附件2的程序進(jìn)行。病毒常規(guī)分離鑒定按附件3的程序進(jìn)行:原蟲(chóng)用涂片和壓片法,H-E染色后鏡檢。參考消毒方法:細(xì)菌:5ppm呋喃唑酮浸泡原蟲(chóng):1—4%食鹽水或10-40ppm的高錳酸鉀浸泡5分鐘。總則本規(guī)程適合于對(duì)各種活的蟹類(種用、食用等)進(jìn)行檢疫。現(xiàn)場(chǎng)檢疫:活動(dòng)狀態(tài) 是否反應(yīng)敏捷、有無(wú)死亡。外表一一外形正常、甲殼圓滑完整無(wú)傷;無(wú)異常潰瘍、紅色或棕色斑點(diǎn)和附著物等現(xiàn)象。現(xiàn)場(chǎng)取樣:取樣數(shù)量、部位和方法:有癥狀的全取或10只。無(wú)癥狀取35只。收集鰓(查病毒)和內(nèi)臟(查病毒和細(xì)菌),霉菌等直接取附著物鏡檢。樣品處理:用于檢查細(xì)菌感染的,必須取樣后立即處理:經(jīng)體表消毒后用無(wú)菌方法取出整個(gè)內(nèi)臟,單個(gè)或混合勻漿后接種?;蛴脽o(wú)菌方法分別從內(nèi)臟器官穿刺接種。接種到培養(yǎng)基或增菌液中。如果接種后出現(xiàn)較多且較一致的菌落,可懷疑帶菌,需作進(jìn)一步鑒定。否則認(rèn)為是雜菌棄去。用于檢查病毒感染的,必須取樣后保存于4°C24小時(shí)內(nèi)送檢或者保存于-18°C凍存后盡快送檢,切忌反復(fù)凍融。檢驗(yàn)內(nèi)容:由于對(duì)蟹類病害了解不多,OIE也未明確規(guī)定。因此對(duì)食用蟹僅作外觀檢查。即仔細(xì)檢查有無(wú)可見(jiàn)的病癥和患病部位及死亡等異?,F(xiàn)象。如有則要取樣作常規(guī)檢查分離病毒和細(xì)菌。對(duì)種用的親蟹和蟹苗則要作常規(guī)抽樣普查。處理建議采用強(qiáng)制消毒的措施。檢驗(yàn)方法細(xì)菌常規(guī)檢查按附件2的程序進(jìn)行。病毒常規(guī)分離鑒定按附件3的程序進(jìn)行:5.3.附著物直接取后鏡檢。參考消毒方法:細(xì)菌?。?0-20ppm呋喃唑酮浸浸洗20-30分鐘。纖毛蟲(chóng)?。?ppm孔雀石綠或10-20ppm福爾馬林浸洗20-30分鐘??倓t本規(guī)程適合于對(duì)活魚(yú)(如親魚(yú)、食用魚(yú)、觀賞魚(yú)等各類淡海水魚(yú))進(jìn)行檢疫。冰鮮水產(chǎn)品和養(yǎng)殖的冰凍水產(chǎn)品(帶內(nèi)臟)除寄生蟲(chóng)可能被凍死外,其傳播病害的風(fēng)險(xiǎn)與活魚(yú)幾乎相同,因此也參照此方法執(zhí)行?,F(xiàn)場(chǎng)檢疫活動(dòng)狀態(tài) 是否活潑,反應(yīng)敏捷,有無(wú)死亡。鰓部 顏色無(wú)異常、無(wú)腐爛、殘損、無(wú)污泥或附著物。體表—體表光滑、干凈、顏色一致、全身無(wú)充血或出血部位。特別無(wú)異常如體表發(fā)黑、粘液異常分泌、魚(yú)鱗脫落和受傷、潰瘍、附著物(如水霉)、眼球突出或脫落等現(xiàn)象?,F(xiàn)場(chǎng)取樣取樣數(shù)量:有癥狀的全取或10條;常規(guī)抽樣按附件1要求取樣。因此種用魚(yú)應(yīng)以產(chǎn)地檢疫為主。在隔離場(chǎng)應(yīng)檢子代30條。每5條魚(yú)作為一個(gè)樣品放在一起。部位和方法:5厘米以下的魚(yú)收集整條魚(yú)作待檢材料。5厘米以上的魚(yú)應(yīng)收集腎、脾、肝(去膽)、腸和腦,如有需要加上血和糞便。親魚(yú)取精、卵液和糞便。樣品處理:用于檢查寄生蟲(chóng)感染的,必須取樣后立即觀察,不能凍存或放置。用于檢查細(xì)菌感染的,必須取樣后立即處理:體長(zhǎng)4cm以下的稚魚(yú),經(jīng)體表消毒后整尾(或多尾)用經(jīng)消毒的勻漿器勻漿后接種。體長(zhǎng)4~6cm的小魚(yú),用無(wú)菌方法取出整個(gè)內(nèi)臟,單個(gè)或混合勻漿后接種。體長(zhǎng)大于6cm的魚(yú),用無(wú)菌方法分別從內(nèi)臟器官(肝、脾、腎、心臟)、腹水(若有)穿刺接種。有皮膚病灶、爛鰓、爛鰭等癥狀的病魚(yú),從病灶處取樣接種。接種到培養(yǎng)基或增菌液中。如果接種后出現(xiàn)較多且較一致的菌落,可懷疑帶菌,需作進(jìn)一步鑒定。否則認(rèn)為是雜菌棄去。用于檢查病毒感染的,必須取樣后保存于4°C24小時(shí)內(nèi)送檢或者保存于-18°C凍存后盡快送檢,切忌反復(fù)凍融。檢疫內(nèi)容:對(duì)該類魚(yú)如作為食用只檢查有無(wú)可見(jiàn)的病癥和患病部位(如EUS)即可,種用魚(yú)主要是采取抽樣普查(即盲檢)的方法分離病毒和細(xì)菌,并檢查子代的帶毒狀況。重點(diǎn)是根據(jù)近年來(lái)國(guó)際上的疫情報(bào)告分析可能帶有的病原作重點(diǎn)檢查或強(qiáng)制消毒。檢驗(yàn)方法細(xì)菌常規(guī)檢查按附件2的程序進(jìn)行。病毒常規(guī)分離鑒定按附件3的程序進(jìn)行:參考消毒方法:細(xì)菌?。核幬锾幚?。常用的洗浴藥物有5-10ppm漂白粉、1-2ppm呋喃唑酮(浸泡+口服)寄生蟲(chóng)?。核幬锝荨3S玫南丛∷幬镉校?-4%的食鹽水、8ppm硫酸銅、10-20ppm高錳酸鉀、2-10ppm敵白蟲(chóng)、70ppm孔雀石綠等。水產(chǎn)品檢疫方法1.總則本規(guī)程適合于對(duì)水產(chǎn)品(指無(wú)內(nèi)臟的冰凍水產(chǎn)品如蝦仁,和雖有內(nèi)臟但是從自然海域捕撈的冰凍水產(chǎn)品如帶魚(yú)、十貨、加工后產(chǎn)品如魚(yú)粉等)進(jìn)行檢疫。冰鮮水產(chǎn)品和養(yǎng)殖的冰凍水產(chǎn)品(帶內(nèi)臟)檢疫參照“進(jìn)口活魚(yú)檢疫方法”的規(guī)定執(zhí)行。該類產(chǎn)品主要作為食用。由于已去掉內(nèi)臟,或者來(lái)自自然海域,帶水生動(dòng)物病害的風(fēng)險(xiǎn)已很低。因此重點(diǎn)在檢查變質(zhì)、污染情況?,F(xiàn)場(chǎng)檢疫:外表有無(wú)異常、異味、變色如發(fā)黑等?,F(xiàn)場(chǎng)取樣:3.1取樣數(shù)量、部位和方法:3.2.樣品處理:每份樣品分成3份,留2份作重復(fù)試驗(yàn)和核實(shí)用。接種到培養(yǎng)基或增菌液中。如果接種后出現(xiàn)較多且較一致的菌落,可懷疑帶菌,需作進(jìn)一步鑒定。否則認(rèn)為是雜菌棄去。5.檢疫內(nèi)容:查細(xì)菌總數(shù)。重點(diǎn)檢查01群霍亂弧菌、沙門(mén)氏菌和來(lái)自O(shè)-157疫區(qū)的水產(chǎn)品要檢O-157H7型大腸桿菌。干水產(chǎn)品和加工后產(chǎn)品如魚(yú)粉、魚(yú)飼料等一一重點(diǎn)檢沙門(mén)氏菌。懷疑變質(zhì)的水產(chǎn)品(如有異味、發(fā)黑等)一一測(cè)定細(xì)菌總數(shù)。種用水生動(dòng)物產(chǎn)地檢疫取樣方法1.總則本規(guī)程適合于對(duì)活的水生動(dòng)物(包括兩棲類、爬行類)在當(dāng)?shù)仞B(yǎng)殖場(chǎng)(待出口動(dòng)物)檢疫時(shí)取樣。試劑和設(shè)備無(wú)菌剪刀、鑷子、取樣袋(或瓶、盒)、冰袋、冰箱。保溫盒。方法3.1.取樣數(shù)量:有臨床癥狀或?yàn)l死的動(dòng)物:要全取或10條。無(wú)癥狀動(dòng)物:,須按照下表所示數(shù)量取足夠樣品,否則在樣品檢查為陰性時(shí)不能保證樣品所在的那一群動(dòng)物都是陰性。表1。根據(jù)魚(yú)群大小和假設(shè)病原的感染率所需取樣數(shù)目*魚(yú)群大小2%受感染時(shí)需取樣數(shù)5%受感染時(shí)需取樣數(shù)10%受感染時(shí)需取樣數(shù)50503520100754523250110502550013055261,00014055271,50014055272,00014560274,000145602710,0001456027100,000以上1506030*摘自O(shè)IE的“水產(chǎn)動(dòng)物病害診斷手冊(cè)”1995年版,第四頁(yè)。取樣數(shù)量是假設(shè)感染率分別為整群動(dòng)物的2%、5%、和10%是仍有95%的把握找到病原為根據(jù)。2%的感染率意味著患病魚(yú)很少,3.2.取樣時(shí)間:為了確定待檢動(dòng)物群體的健康狀況,應(yīng)每年查二次,連續(xù)查二年。時(shí)間根據(jù)相應(yīng)的生活階段、溫度與季節(jié)變化給觀察癥狀和分離病原以最好機(jī)會(huì)而定。如有魚(yú)產(chǎn)卵,其中一次應(yīng)取卵液。在特別不方便取樣的情況下每年可只取一次,但必須取最老的魚(yú)和卵液作樣品。如果某漁場(chǎng)經(jīng)二年檢查已確認(rèn)無(wú)某種特定病原,每年繼續(xù)檢查二次可保持確認(rèn)健康狀況,其每次取樣數(shù)可減少50%。如果在監(jiān)視過(guò)程中接種細(xì)胞的培養(yǎng)物出現(xiàn)CPE或可疑一、二類傳染病細(xì)菌病原,則停止確認(rèn)其健康狀況直到經(jīng)檢查后排除可疑為止。3.3取樣部位:按具體各類動(dòng)物檢疫操作規(guī)程中有關(guān)“取樣部位”的要求執(zhí)行。原則上:剛孵化出的魚(yú)苗取整條魚(yú),如果帶卵黃囊需去掉卵黃;4-6厘米的小魚(yú)取整個(gè)內(nèi)臟包括腎和腦;6厘米以上的魚(yú)取腎、肝和腦;親魚(yú)取卵巢液或按各病毒鑒定的檢疫操作規(guī)程中要求的部位取樣。3.4.樣品預(yù)處理:樣品魚(yú)活著或分別包好放在有冰的容器里盡快送檢驗(yàn)室,盡量不要凍起來(lái)。特別推薦在現(xiàn)場(chǎng)取樣后立即收集內(nèi)臟并立即保存或制備樣品。樣品必須打上標(biāo)簽標(biāo)明樣品名稱、取樣時(shí)間及地點(diǎn)。5條魚(yú)作為一組,其內(nèi)臟或卵巢液放入無(wú)菌管中并于4°C保存直到在實(shí)驗(yàn)室抽提病毒。病毒抽提應(yīng)在取樣后48小時(shí)內(nèi)完成。實(shí)在來(lái)不及必須凍存時(shí)切忌反復(fù)凍融。用于分離病毒的樣品可以放在細(xì)胞培養(yǎng)液或Hank’^中送往實(shí)驗(yàn)室,其培養(yǎng)液的體積至少是樣品體積的5倍。同時(shí)加抗菌素抑制污染的細(xì)菌。通常使用抗菌素的濃度為慶大霉素1,000pg/ml,或者青霉素800u/ml加鏈霉素800pg/ml??姑咕苿┤缰泼咕鼗蚨悦顾谺也可一起加入,其最終濃度是400u/ml。如果

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