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2014-06-26解。從哪里說起呢，剛開始，我準(zhǔn)備做一個qPCR驗室準(zhǔn)備做一個qPCR了。他們都說師兄只會瞎侃，但我覺得神師兄是僅次于莫愁師姐的，特別有智慧且靠譜的一個。聊著聊著，師兄就問我：小林子啊，你為啥要做SYBRgreen染料法的文章介紹過，SYBRgreen來做qPCR的話，是會有很嚴(yán)重問題的。因為SYBRgreen會抑制PCR反應(yīng)，得出來的結(jié)果沒有探針來的效果好，其實價于是一周后，我迷迷瞪瞪地就設(shè)計Taqman的時候，師兄正好又順路來了一趟實驗室。聊著聊著他就說：小林子啊，你為啥要檢測mRNA呢？檢測蛋白表達(dá)才是王道嘛！mRNA表蛋白表達(dá)會降低呢！因為如果蛋白的泛素化停滯，蛋白就會累積；又或者蛋白的磷酸化不斷激活，也會導(dǎo)致蛋白作用的變化。所以用Taqman如用WesternBlot來得直接，直接檢測蛋白表達(dá)、磷酸化、泛素化的變于是一周后，我忽忽悠悠地就查了各種抗體的供應(yīng)商，但剛要下單的時候，師兄又來了。他看到我定抗體，要做Western。于是又開始跟我聊了起來：我說小林子啊，你要研究基因表達(dá)變化，干嘛不就做一張芯片呢？一下子就出來全部基因組里的表達(dá)變化，多好！想要啥就有啥，里面2w隨你挑！跟這個基因表達(dá)相關(guān)的上下游通路，啥都一清二楚，絕對是居家旅片、miRNA芯片、LNCRNA芯片，剛詢完價，你猜的沒錯，神師兄又出現(xiàn)1、SYBRGreen是會抑制PCR反應(yīng)，但是是在高濃度
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