顯微鏡的結構及油鏡的使用

實驗一顯微鏡的結構及油鏡的使用實驗目的1.學習并掌握普通光學顯微鏡的構造和油鏡的使用技術及維護的基本知識2.初步認識細菌的形態(tài)特征二、實驗原理顯微鏡的構造1.光學部分:目鏡、物鏡、照明裝置(聚光鏡、虹彩光圈、反光鏡等)。它使檢視物放大,生成物象。2.機械部分:鏡座、鏡臂、鏡筒、物鏡轉換器、載物臺、載物臺轉移器、粗調節(jié)器、細調節(jié)器等部件.它起著支持調節(jié)固定等作用.顯微鏡的放大倍數和分辨率1.放大倍數：物鏡放大倍數×目鏡放大倍數2.顯微鏡的分辨率:是表示顯微鏡辨析兩點之間距離的能力。可用公式表示為：D=λ/2N.A=λ/2n·sin(α/2)式中D：物鏡分辨出物體兩點間的最短距離。λ：可見光的波長（平均0.55m)n:物鏡和被檢標本間介質的折射率。α：鏡口角（即入射角）。D值越小，分辨率越高，看到的物象越清晰。油鏡使用的原理油鏡，即油浸接物鏡。當光線由反光鏡通過玻片與鏡頭之間的空氣時，由于空氣與玻片的密度不同，使光線受到曲折，發(fā)生散射，降低了視野的照明度。若中間的介質是一層油（其折射率與玻片的相近），則幾乎不發(fā)生折射，增加了視野的進光量，從而使物象更加清晰。根據公式D=λ/2n·sin(α/2)，增大分母，使得D值減小，分辨率增大。實驗材料金黃色葡萄球菌、四聯球菌、枯草芽孢桿菌等示范片實驗步驟（油鏡的使用）1.低倍鏡觀察：粗調、細調。依次再進行中倍、高倍觀察2.油鏡觀察：高倍鏡下找到清晰的物象后，提升聚光鏡，在標本中央滴一滴香柏油，使油鏡鏡頭浸入香柏油中，細調至看清物象為止。3.換片：另換新片，必須從第一條開始操作。4.用后復原：觀察完畢，上懸鏡筒，先用擦鏡紙擦去鏡頭上的油，然后再用擦鏡紙沾取少量二甲苯擦去殘留的油，最后用擦鏡紙擦去殘留的二甲苯，后將鏡體全部復原。

注意：油鏡使用完畢后一定要用二甲苯擦拭鏡頭試驗結果金黃色葡萄球菌100X枯草芽孢桿菌（手繪）100X實驗討論使用油鏡時，為什么必須用香柏油？當使用普通高倍或低倍物鏡時，透鏡的孔徑較大，所以射入物鏡的光線因為折射而損失的比率不高，對觀察影響不大。但油鏡由于需要放大更高的倍數，其鏡孔徑很小，射入的光線很少，視野不明亮，物象模糊不清。加油的目的就是讓油鏡與載物玻片之間加一層與玻璃折光率相近的香柏油介質，使通過的光線不產生或少產生折射，增加進入透鏡的光線，使視野亮度增加，能更清楚的觀察物象。鏡檢標本時，為什么先用低倍鏡觀察，而不是直接用高倍鏡或油鏡觀察？因為低倍鏡下視野較大，易于發(fā)現目標和確定檢查的位置，而如果直接用高倍鏡觀察，因其視野較小，不易找到觀察的目標，浪費時間。用低倍鏡方便調焦,而且物鏡離樣品比較遠,不會碰壞物鏡或者樣品。。七、顯微鏡保養(yǎng)和使用中的注意事項1.不準擅自拆卸顯微鏡的任何部件,以免損壞。2.鏡面只能用擦鏡紙擦，不能用手指或粗布，以保證光潔度3.觀察標本時，必須依次用低、中、高倍鏡，最后用油鏡。當目視接目鏡時，特別在使用油鏡時，切不可使用粗調節(jié)器，以免壓碎玻片或損傷鏡面。4.拿顯微鏡時，一定要右手拿鏡臂，左手托鏡座，不可單手拿，更不可傾斜拿。5.顯微鏡應存放在陰涼干燥處，以免鏡片滋生霉菌而腐蝕鏡片。實驗小結本次實驗讓我受益良多，首先，清晰觀察到了球菌和桿菌的不同形態(tài)以及排列方式，將書本理論知識結合實際