下載本文檔
版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡(jiǎn)介
3.酵母菌的純培養(yǎng)分散的微生物在適宜的固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部可以繁殖形成肉眼可見的、有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細(xì)胞群體,這就是菌落。采用平板劃線法和稀釋涂布平板法能將單個(gè)微生物分散在固體培養(yǎng)基上,之后經(jīng)培養(yǎng)得到的單菌落一般是由單個(gè)微生物繁殖形成的純培養(yǎng)物。下面,我們嘗試在馬鈴薯瓊脂培養(yǎng)基上進(jìn)行酵母菌的純培養(yǎng)。目的要求1.學(xué)會(huì)配制培養(yǎng)酵母菌的培養(yǎng)基并倒平板。2.學(xué)會(huì)進(jìn)行無菌操作。3.嘗試通過平板劃線操作來獲得純化的酵母菌菌落。材料用具酵母菌培養(yǎng)液、馬鈴薯、葡萄糖(或蔗糖)、瓊脂、蒸餾水、天平、小刀、紗布、燒杯、錐形瓶、棉塞、牛皮紙(或報(bào)紙)、皮筋、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、酒精燈、超凈工作臺(tái)、高壓蒸汽滅菌鍋、干熱滅菌箱和恒溫培養(yǎng)箱等。方法步驟1.制備培養(yǎng)基配制培養(yǎng)基稱取去皮的馬鈴薯200g,切成小塊,加水1000mL,加熱煮沸至馬鈴薯軟爛,用紗布過濾。向?yàn)V液中加入20g葡萄糖(也可用蔗糖代替),15~20g瓊脂,用蒸餾水定容至1000mL。滅菌將配制好的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移到錐形瓶中,加棉塞,包上牛皮紙,并用皮筋勒緊,再放入高壓蒸汽滅菌鍋中,在壓力為100KPa、溫度為121℃的條件下,滅菌1~30min。將5~8套培養(yǎng)皿包成一包,用幾層牛皮紙包緊,放入干熱滅菌箱內(nèi),在160~170℃滅菌2h。倒平板待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時(shí),在酒精燈火焰附近倒平板。倒平板的具體操作步驟如下。將瓶口迅速通過火焰將瓶口迅速通過火焰用拇指和食指將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙,將培養(yǎng)基(10-20mL)倒入培養(yǎng)皿,立即蓋上皿蓋等待培養(yǎng)基冷卻凝固后,將培養(yǎng)皿倒過來放置。拔出錐形瓶的棉塞拔出錐形瓶的棉塞2.接種和分離酵母菌通過接種環(huán)在固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作,將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。經(jīng)數(shù)次劃線后培養(yǎng),可以分離得到單菌落。平板劃線的具體操作見下面的流程圖。將接種環(huán)放在火焰上灼燒,指導(dǎo)接種環(huán)的金屬絲燒紅。將接種環(huán)放在火焰上灼燒,指導(dǎo)接種環(huán)的金屬絲燒紅。在火焰旁冷卻接種環(huán)。同時(shí),拔出裝有酵母菌培養(yǎng)液試管的棉塞將試管口通過火焰。在火焰附近用接種環(huán)蘸取一環(huán)菌液。將試管口通過火焰,并賽上棉塞。在火焰附近將皿蓋貸款一條縫隙,用接種環(huán)在培養(yǎng)基表面迅速劃三至五條平行線,蓋上皿蓋。灼燒接種環(huán),待其冷卻后,從第一次劃線的末端開始作第二次劃線。重復(fù)以上操作,作第三、四、五次劃線。注意不要將最后一次的劃線與第一次的劃線相連。問1.培養(yǎng)基滅菌后,需要冷卻到50℃左右時(shí),才能用來倒平板。你用什么辦法來估計(jì)培養(yǎng)基的溫度?提示:可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶,感覺溫度下降到剛剛不燙手即可。問2.在倒平板的過程中,如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位,這個(gè)平板還能用來培養(yǎng)微生物嗎?為什么?提示:最好不要用這個(gè)平板培養(yǎng)微生物。防止空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生。問3.平板冷凝后,為什么要將平板倒置?提示:平板冷凝后,皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠,凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高,將平板倒置,既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā),又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基,造成污染。問4.怎么確定所倒平板未被雜菌污染?提示:將所倒平板放入37℃的恒溫箱中培養(yǎng)12h~24h,觀察是否有菌落存在以確定是否被污染或滅菌是否徹底。問5.為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)?在劃線操作結(jié)束時(shí),仍然需要灼燒接種環(huán)嗎?為什么?灼燒時(shí)期目的取菌種前殺死接種環(huán)上原有微生物每次劃線前殺死上次劃線時(shí)殘留菌種,使下一次劃線的菌種直接來源上次劃線的末端,從而使每次劃線時(shí)菌種數(shù)目逐漸減少,直至得到單個(gè)細(xì)胞接種結(jié)束后殺死接種環(huán)上殘留的菌種,避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者3.培養(yǎng)酵母菌完成平板劃線后,待菌液被培養(yǎng)基吸收,將接種后的平板和一個(gè)未接種的平板倒置,放入28℃左右(培養(yǎng)溫度因酵母菌種類的不同而稍有差異)的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24~48h。結(jié)果分析與評(píng)價(jià)1.在未接種的培養(yǎng)基表面是否有菌落生長(zhǎng)?如果有,說明了什么?提示1:在未接種的培養(yǎng)基表面應(yīng)該沒有菌落生長(zhǎng),如果有,說明培養(yǎng)基被雜菌污染。2.在接種酵母菌的培養(yǎng)基上,你是否觀察到了單菌落?這些菌落
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 人人文庫網(wǎng)僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 《湖湘文學(xué)教育論》課件
- 《竹與中國文化》課件
- 小學(xué)一年級(jí)10到20加減法練習(xí)題口算
- 防校園欺凌講座心得體會(huì)
- 《病例神經(jīng)內(nèi)科》課件
- 服裝行業(yè)前臺(tái)服務(wù)要點(diǎn)
- 礦產(chǎn)行業(yè)人才培養(yǎng)總結(jié)
- 課堂氛圍與學(xué)習(xí)積極性提升計(jì)劃
- 家政服務(wù)行業(yè)客服工作總結(jié)
- 安徽省宿州市埇橋區(qū)教育集團(tuán)2022-2023學(xué)年九年級(jí)上學(xué)期期末質(zhì)量檢化學(xué)試題
- 2025五金配件購銷合同范本
- 《鋰離子電池用二氟草酸硼酸鋰》
- 【MOOC】《形勢(shì)與政策》(北京科技大學(xué))中國大學(xué)MOOC慕課答案
- 湖南省部分學(xué)校2023-2024學(xué)年高二上學(xué)期期末聯(lián)合考試政治試卷 含解析
- 中學(xué)生心理健康教育主題班會(huì)課件
- 電大《人力資源管理》期末復(fù)習(xí)綜合練習(xí)題答案(2024年)
- 西師版數(shù)學(xué)(四上題)2023-2024學(xué)年度小學(xué)學(xué)業(yè)質(zhì)量監(jiān)測(cè)(試卷)
- 2022-2023學(xué)年廣東省廣州市白云區(qū)華南師大附屬太和實(shí)驗(yàn)學(xué)校九年級(jí)(上)期末數(shù)學(xué)試卷(含答案)
- 2024年煤礦安全生產(chǎn)知識(shí)競(jìng)賽題庫及答案(共100題)
- 強(qiáng)制報(bào)告制度課件
- 《礦山隱蔽致災(zāi)因素普查規(guī)范》解讀培訓(xùn)
評(píng)論
0/150
提交評(píng)論