中藥靶向制劑治療腫瘤的研究進(jìn)展

中藥靶向制劑治療腫瘤的研究進(jìn)展

目前，腫瘤的治療包括手術(shù)、放療、化療、干預(yù)等手段，但死亡率仍然很高，現(xiàn)在上升到第一位。為此,許多腫瘤領(lǐng)域的專家、學(xué)者投入大量精力去研究和尋找治療腫瘤切實(shí)有效的方法。中醫(yī)藥作為我國的國粹,對于治療癌癥等疑難病癥有著悠久的歷史,特別是植物來源的藥物及其衍生物,如長春新堿、羥基喜樹堿、紫杉醇、多西紫杉醇等已廣泛應(yīng)用并作為一線用藥。世界腫瘤領(lǐng)域的藥物學(xué)家和臨床專家們開始密切關(guān)注我國傳統(tǒng)中醫(yī)藥的發(fā)展,其中抗癌中藥靶向給藥系統(tǒng)和中藥靶向治療的研究受到了極大關(guān)注。本文就近年來中藥制劑和中藥活性成分靶向治療腫瘤的基礎(chǔ)與臨床研究作一綜述。1中藥靶向制劑抗癌中藥靶向制劑的研究具有極大的創(chuàng)新性,大大改革了傳統(tǒng)的中藥制劑工藝和劑型。與此同時(shí),中藥與化療、生物靶向制劑聯(lián)合應(yīng)用,更進(jìn)一步加大了化療藥物、生物靶向藥物在靶器官的藥物濃度,使其靶向性更強(qiáng),同時(shí)也起到了增敏增效的作用。梁軍等制備了單克隆抗體3A5-復(fù)方中藥安迪無菌粉末偶聯(lián)物(3A5-Andi),經(jīng)小鼠抗腫瘤實(shí)驗(yàn)表明,其具有一定的腫瘤導(dǎo)向治療作用。張愛國等采用溶劑揮發(fā)法制備去甲斑蝥素(NC)靶向性微球,并進(jìn)行了小鼠體內(nèi)分布試驗(yàn)。結(jié)果顯示,小鼠肺內(nèi)藥物濃度明顯高于其它組織臟器,NC的肺內(nèi)相對分布由8.10%提高到32.51%,其半衰期也延長了4倍,等等。盡管上述研究成果取得了突破性進(jìn)展,但由于抗癌中藥成分復(fù)雜,中藥靶向制劑的原料藥現(xiàn)多采用從中藥中提取的單體或總成分,其藥物活性成分或有效成分難以精準(zhǔn)確定,存在著制定中藥質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)難度較大以及制劑學(xué)、體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)不易研究等問題。但隨著生物藥劑學(xué)、藥動(dòng)學(xué)、體內(nèi)藥效學(xué)研究和制藥工藝技術(shù)的不斷提高,中藥靶向制劑必將在未來腫瘤治療上發(fā)揮出巨大作用。2中藥中的靶向治療中藥靶向治療腫瘤是近年來興起的臨床腫瘤治療新方法,目前已受到腫瘤領(lǐng)域?qū)＜覀兊拿芮嘘P(guān)注。特別是三氧化二砷(As2O3)制劑的研發(fā)與臨床應(yīng)用,翻開了中藥抗腫瘤靶向治療領(lǐng)域發(fā)展的新篇章。中藥的靶向作用按照作用機(jī)制和靶點(diǎn)不同可以分為:抑制腫瘤新血管生成、抑制腫瘤細(xì)胞增殖、誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡等。2.1新血管生成抑制劑抑制腫瘤血管生成是控制腫瘤生長和轉(zhuǎn)移的重要途徑之一。以抑制腫瘤新血管生成的相關(guān)因子為靶點(diǎn)的新血管生成抑制劑研究已成為當(dāng)前基礎(chǔ)和臨床研究的熱點(diǎn)。近年來,大量的臨床和基礎(chǔ)試驗(yàn)研究顯示,許多中藥及其有效成分、復(fù)方制劑都具有抗腫瘤轉(zhuǎn)移和抗血管生成的作用。2.1.1異構(gòu)體對腫瘤細(xì)胞生長的抑制作用人參皂苷-Rg3是存在于人參中的四環(huán)三萜皂苷。ShinkaiK等將多種腫瘤細(xì)胞(小鼠腹水肝癌細(xì)胞MM-1、人小細(xì)胞肺癌OC-10和人胰腺癌細(xì)胞PSN-1等)接種在單層腸系膜細(xì)胞上,發(fā)現(xiàn)人參皂苷20(R)-Rg3異構(gòu)體能不同程度地抑制這些腫瘤細(xì)胞對單層膜的浸潤作用,尤其是對MM-1細(xì)胞浸潤作用的抑制率可達(dá)98.8%,并呈劑量相關(guān)性。王兵等將不同濃度的人參皂苷-Rg3液加入到胃癌細(xì)胞條件培養(yǎng)液下血管內(nèi)皮細(xì)胞(VEC)培養(yǎng)板中24h后觀察到,Rg3濃度為0.125~0.5mmol·mL-1時(shí),對胃癌MKN-45細(xì)胞條件培養(yǎng)液誘導(dǎo)的VEC增殖有誘導(dǎo)調(diào)亡作用(P<0.01),抑制率為13.10%~77.38%。高勇等采用雞胚絨毛尿囊膜(CAM)方法和Lewis肺癌模型開展了人參皂苷-Rg3影響腫瘤新生血管的生成和對腫瘤細(xì)胞生長抑制的研究。結(jié)果發(fā)現(xiàn),人參皂苷-Rg3在明顯抑制Lewis肺癌瘤體生長的同時(shí),對腫瘤誘導(dǎo)新生血管的形成同樣有明顯的抑制作用。2.1.2各組細(xì)胞內(nèi)皮細(xì)胞的遷移和血管生成尹麗慧等采用MTT法檢測參麥注射液對牛血清促進(jìn)的牛內(nèi)皮細(xì)胞、人肝癌細(xì)胞SMMC-772增殖的影響;用瓊脂糖刮除法檢測參麥注射液對牛血清促進(jìn)細(xì)胞遷移的影響;利用CAM模型觀察參麥注射液對CAM血管生成的影響。結(jié)果顯示,參麥注射液能明顯抑制牛內(nèi)皮細(xì)胞的增殖和遷移,并可抑制CAM的血管生成。180μL·mL-1的參麥注射液對SMMC-7721的抑制率只有31%,而對內(nèi)皮細(xì)胞的抑制率可高達(dá)82%。由此可見,參麥注射液對內(nèi)皮細(xì)胞具有選擇性抑制作用,是一種特異性內(nèi)皮細(xì)胞生長抑制劑。2.1.3血管生成模型陳達(dá)理等通過實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),鱉甲煎丸可以顯著降低荷瘤小鼠腫瘤的微血管計(jì)數(shù),這說明鱉甲煎丸可通過抑制荷瘤小鼠腫瘤的血管生成來達(dá)到抑瘤作用。LeeDY用原代培養(yǎng)的牛主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞在溶膠原蛋白三維培養(yǎng)基中生成的毛細(xì)血管樣網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)為模型,觀察蟾蜍靈對血管生成的影響。結(jié)果,小劑量蟾蜍靈即可顯著抑制毛細(xì)血管生成,VEC阻滯與G2/M期,細(xì)胞增殖受到抑制。2.1.4從抗菌藥、多糖藥物組成目前,已經(jīng)研究并報(bào)道的具有抑制腫瘤新血管生成的中藥和有效成分及其制劑有:康萊特注射液、川芎嗪注射液、固本消瘤膠囊、髓清丸、復(fù)方血瘤散、半枝蓮、鯊魚軟骨、莪術(shù)、郁金、海參、白及、白藜蘆醇、半邊旗二萜類、蟾蜍靈、姜黃素、青蒿琥酯、雷公藤紅素、昆布硫酸多糖、熊果酸、苦參堿、槲皮素、云芝多糖、綠茶提取物茶多酚等。2.2靶向治療藥物靶點(diǎn)的確定人體正常細(xì)胞的內(nèi)外環(huán)境在受到物理或化學(xué)等因素影響后,細(xì)胞微環(huán)境發(fā)生了改變,最終會造成人體局部組織細(xì)胞惡性增殖,凋亡減少,最終形成腫瘤,而細(xì)胞的增殖是受到細(xì)胞分裂周期監(jiān)控點(diǎn)和各種酶類或蛋白來調(diào)節(jié)的。因此,影響腫瘤細(xì)胞增殖的各種酶類、受體或各類細(xì)胞因子、受體成為了腫瘤靶向治療藥物的靶點(diǎn)。目前研究涉及到的因子主要有:表皮生長因子(VEGF)及受體、黏著斑激酶(FAK)、凋亡抑制蛋白(IAP)如Survivin、內(nèi)皮祖細(xì)胞(EPCs)、腫瘤生長因子(TGF-β)、凋亡執(zhí)行因子Caspase、Fas、Bax、堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)、Her-2、NF-κB等。2.2.1as2o3誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡BazarbachiA等研究報(bào)道,As2O3和IFN-α具有明顯的協(xié)同效應(yīng),可抑制HTLV-1轉(zhuǎn)化的APL細(xì)胞的生長,導(dǎo)致細(xì)胞G1期停滯,并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。最新的基因芯片檢測發(fā)現(xiàn),兩者聯(lián)合作用能夠降低HTLV-1、Tax蛋白的表達(dá)和逆轉(zhuǎn)Tax誘導(dǎo)的NF-κB的持續(xù)激活。王曉春等選用結(jié)腸癌SW620細(xì)胞系,運(yùn)用FCM檢測As2O3對結(jié)腸癌的抑制和誘導(dǎo)凋亡作用;用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)方法檢測MRP-mRNA的表達(dá)。結(jié)果,As2O3能下調(diào)MRP-mRNA表達(dá),對結(jié)腸癌SW620細(xì)胞具有抑制生長作用以及增加凋亡誘導(dǎo)率,不同濃度的As2O3均可誘導(dǎo)其凋亡。唐印華等利用皮下種植肝癌小鼠模型,觀察小鼠在超聲引導(dǎo)下瘤體內(nèi)注射As2O3溶液(2.5mg·kg-1)后腫瘤體積變化與抑瘤率。結(jié)果,As2O3能縮小腫瘤體積、增加抑瘤率,并能降低VEGF和COX-2的表達(dá)。劉連新等在探討As2O3對肝癌細(xì)胞系BEL-7402的影響及其作用機(jī)制時(shí)發(fā)現(xiàn),As2O3可以明顯增加肝癌細(xì)胞系半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白活性,誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞凋亡,凋亡的可能機(jī)制是通過Caspase-3起作用。徐丹等在探討As2O3和順鉑(DDP)對人大腸癌細(xì)胞株CCL-187端粒酶活性及細(xì)胞凋亡的影響的研究中發(fā)現(xiàn),1.0μmol·L-1As2O3對人大腸癌CCL-187細(xì)胞有促進(jìn)分化的作用,0.2μmol·L-1DDP和合用組有誘導(dǎo)凋亡的作用。其機(jī)制可能是下調(diào)細(xì)胞端粒酶hTERT-mRNA的基因表達(dá),從而抑制端粒酶的活性。胡云等在卵巢癌細(xì)胞系A(chǔ)2780中研究發(fā)現(xiàn),經(jīng)As2O3處理后,Bax表達(dá)增強(qiáng),Bcl-2表達(dá)下調(diào),使Bcl-2/Bax比值減少。結(jié)果表明,調(diào)節(jié)Bcl-2、Bax二者相對含量的變化是As2O3誘導(dǎo)A2780細(xì)胞凋亡的分子機(jī)制之一。張俊文等運(yùn)用MTT法觀察As2O3對人胃癌細(xì)胞系SGC-7901細(xì)胞黏附能力的影響,免疫細(xì)胞化學(xué)法觀察As2O3對SGC-7901細(xì)胞轉(zhuǎn)化生長因子-β1的影響等。結(jié)果,As2O3能降低細(xì)胞轉(zhuǎn)化生長因子-β1的表達(dá),表明As2O3能有效抑制胃癌侵襲轉(zhuǎn)移和血管形成。2.2.2華浚素對caspase-3表達(dá)的影響盛秀勝等報(bào)道,華蟾素作用K562細(xì)胞后,K562細(xì)胞Caspase-3表達(dá)增高并發(fā)生凋亡,且呈量效關(guān)系。由此推測,華蟾素有可能是通過影響Caspase-3的表達(dá)而誘導(dǎo)白血病細(xì)胞發(fā)生凋亡。韓仲等通過SP免疫組化技術(shù)對喉癌Hep-2細(xì)胞檢測p53、c-myc和Bcl-2基因蛋白的表達(dá)。結(jié)果發(fā)現(xiàn),華蟾素能使抑癌基因p53蛋白表達(dá)增加,c-myc和Bcl-2表達(dá)明顯下降。2.2.3激活的蛋白激酶安巍巍等研究表明,去甲斑蝥素誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡與半胱氨酸天冬氨酸酶家族和Bcl-2家族的激活、絲裂原激活的蛋白激酶(MAPK)和線粒體途徑的參與有關(guān)。2.2.4其他已經(jīng)研究并報(bào)道的具有抑制腫瘤細(xì)胞增殖、誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡的中藥制劑以及有效成分有:鴉膽子油乳、欖香烯乳、莪術(shù)油、益氣解毒片、肺巖寧肺、肺一丸、苦參堿、葫蘆素、秋水仙堿以及白花蛇舌草、白及、人參、斑蝥、蟾酥、紅豆杉、刺五加、黃芪等提取物。3質(zhì)量難以控制中藥靶向治療腫瘤的臨床研究目前還處于起步階段。目前臨床應(yīng)用的中藥制劑大多是復(fù)合藥物或復(fù)合成分,藥物體內(nèi)代謝、藥效學(xué)以及制劑研究困難,質(zhì)量難以控制,由此造成中藥制劑的腫瘤靶向治療作用很難評價(jià)。筆者建議,中藥制劑應(yīng)納入聯(lián)合治療方案中,發(fā)揮其腫瘤靶向治療的協(xié)同作用,同時(shí)可以降低靶向、化療藥物的毒副反應(yīng)。3.1各組鼻嗅原位腫瘤組織ang-1和ang-2蛋白表達(dá)比較林英城等針對鼻咽癌開展了放療與As2O3注射液聯(lián)合治療方案的臨床研究。結(jié)果顯示,放射治療20Gy后,全組鼻咽原發(fā)腫瘤組織Ang-1和Ang-2蛋白表達(dá)明顯下調(diào),但僅As2O3增敏組Ang-1和Ang-2下調(diào)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。由此推斷,As2O3通過干擾腫瘤Ang-1和Ang-2表達(dá)的失衡,從而達(dá)到干擾腫瘤性血管的有效生成,抑制腫瘤的生長。3.2治療組和對照組的化療方案王越華等對46例未能完全切除腫瘤的晚期結(jié)、直腸癌患者進(jìn)行隨機(jī)分組,對照組:化療用OFL方案;治療組:在同對照組的化療基礎(chǔ)上,加用KLT。結(jié)果顯示:對照組化療后血漿TNF-α和IL-lβ含量與治療組比較,明顯升高(P<0.05),治療結(jié)束后與治療組比較,升高愈加明顯(P<0.01)。4分子靶向藥物治療上世紀(jì)末至本世紀(jì)初,腫瘤分子靶向治療領(lǐng)域發(fā)展較快,已成為腫瘤臨床繼手術(shù)、放化療后的另一個(gè)亮點(diǎn)。近年來,抗腫瘤藥物市場誕生了許多新的腫瘤靶向治療藥物,如格列衛(wèi)(甲磺酸伊馬替尼)、易瑞沙(吉非替尼