豬瘟的診斷與防治

豬瘟的診斷與防治

豬瘟疫（hc）也被稱為經(jīng)典豬瘟疫（csf），是由豬充血病毒（csfv）引起的高度接觸性熱性傳染病。以出血和發(fā)熱為主要特征,并引起妊娠母豬流產(chǎn)、胎兒畸變、慢性營養(yǎng)性消耗、淋巴細(xì)胞和血小板減少等免疫系統(tǒng)受損、繼發(fā)或并發(fā)細(xì)菌或其他病毒感染等臨床表現(xiàn),呈急性或慢性經(jīng)過,是一種對豬危害性極大的傳染病,1984年被國際獸疫局(OIE)列為A類動物傳染病。盡管每年我國都投入大量的人力、物力進(jìn)行豬瘟疫病的防疫和科研工作,使該病得到了較大程度的控制,但由于種種原因,近年來仍有豬瘟發(fā)生。因此,如何提高豬瘟免疫效果,是當(dāng)前獸醫(yī)工作者需要解決的重點課題。本文就豬瘟疫苗免疫程序研究進(jìn)展作簡要概述,以期為豬瘟的最終控制和消滅提供理論依據(jù)。1免豬合并重免疫后抗體檢測結(jié)果目前國內(nèi)還沒有統(tǒng)一的CSF免疫程序。多數(shù)豬場采用,仔豬育肥豬20～28日齡首免和60～70日齡二免,種豬每年2次免疫的免疫程序(母豬的免疫應(yīng)避開配種和妊娠期,以免引起胎盤感染)。林毅等采用DotELISA檢測豬瘟母源抗體消長規(guī)律和4種豬瘟免疫程序。1)超前一次免疫組:新生仔豬在吃初乳前接種2頭份豬瘟單價疫苗,注苗后1h讓其吃初乳。2)超前二次免疫組:按超前一次免疫后,45日齡用2頭份三聯(lián)苗加強免疫。3)20日齡首免2頭份豬瘟單價苗,60日齡二免2頭份三聯(lián)苗組。4)28日齡首免豬瘟單價苗,70日齡二免三聯(lián)苗,分為1和2頭份免疫組)的免疫效果。結(jié)果,在7、14、21、28和35日齡時,豬瘟母源抗體陽性率分別為80.0%、60.0%、33.3%、13.4%和6.7%,其抗體效價幾何平均值(GMT)分別為1∶88、1∶69、1∶59、1∶40和1∶35。4種免疫程序的豬瘟抗體檢測結(jié)果為,超前一次免疫和超前二次免疫2倍量豬瘟單價苗,在6月齡時,其抗體陽性率分別為85%和80%,GMT分別為1∶105和1∶85。20日齡首免2倍量豬瘟單價苗后,60日齡二免2倍量豬瘟豬肺疫豬丹毒三聯(lián)苗,在60日齡和6月齡時,抗體陽性率分別為90.0%和87.0%,GMT分別為1∶135和1∶103.28日齡首免豬瘟單價苗,70日齡加免三聯(lián)苗,免疫1和2頭份組在65日齡時,陽性率分別為78.0%和92.0%,6月齡時分別為73.0%和86.0%。結(jié)果表明,免疫2頭份比1頭份的效果好,4種免疫程序的效果都較理想。吳楚泓在廣東廣三保養(yǎng)豬公司的試驗結(jié)果表明,在無豬瘟流行的地區(qū),仔豬在65日齡時進(jìn)行一次性大劑量(5頭份)免疫,抗體有效效價高于2次免疫豬(35日齡首免3頭份;65日齡二免5頭份),與2次免疫相比,既節(jié)省免疫費用,又可獲得較好的免疫保護(hù)力。蔡葵蒸等試驗指出,在豬瘟威脅區(qū),免疫母豬所產(chǎn)仔豬以28日齡首免4頭份疫苗,55日齡二免2頭份疫苗的免疫程序效果較為可靠。2免疫工程的科學(xué)研究2.1豬模型免疫的研究乳前免疫也稱零時免疫、超前免疫(簡稱“超免”),即仔豬出生后去除體表黏液,頸側(cè)消毒后肌肉注射豬瘟兔化弱毒苗,與母豬隔離一段時間后再吃初乳的免疫方法。這種免疫方法最早是法國學(xué)者Coitheier于1979年提出的。他認(rèn)為初生仔豬在吮乳前注射豬瘟兔化弱毒苗可以產(chǎn)生主動免疫。原因有三:1)豬的免疫系統(tǒng)發(fā)育早,仔豬出生時免疫系統(tǒng)已相當(dāng)成熟。2)對仔豬吮乳后得到的母源抗體水平進(jìn)行檢測,發(fā)現(xiàn)吃乳后3h,仔豬血液中已可檢出母源抗體,6～12h母源抗體的含量達(dá)到高峰。所以在血液中母源抗體達(dá)到峰值前進(jìn)行免疫,可使疫苗毒在仔豬體內(nèi)有足夠的時間增殖而不被血液中的母源抗體中和。3)豬瘟兔化弱毒株對仔豬安全、無殘毒。同期法國及中國臺灣的實驗也證實了Coitheier的上述觀點。乳前免疫的一般做法是仔豬出生后肌肉注射豬瘟疫苗1頭份、2～4h后吃初乳。關(guān)于乳前免疫的主要爭論在于注射疫苗后吃初乳的時間問題。衣翠玲試驗結(jié)果表明,初生仔豬接種疫苗后間隔60～120min吸吮初乳的免疫效果最好。羅才文等將仔豬出生后立即與母豬隔開,肌肉注射豬瘟疫苗1頭份,注苗后2h哺初乳;對照組注射1mL生理鹽水。超前免疫組仔豬,發(fā)生豬瘟的68頭,發(fā)病率為6.48%,死亡仔豬44頭,死亡率為4.20%。對照組仔豬,發(fā)生豬瘟87頭,發(fā)病率為78.37%,死亡仔豬69頭,死亡率為62.16%。超前免疫組發(fā)病率比對照組下降71.89個百分點;仔豬死亡率比對照組下降57.96個百分點。超前免疫組仔豬育成率為95.80%,對照組仔豬育成率為37.84%,育成率免疫組比對照組高出57.96個百分點。仔豬斷乳平均體重,免疫組比對照組高出1.4kg。張銀河等奶前60min接種豬瘟疫苗的仔豬20日齡時其抗體陽性檢出率最高(91.6%);其次是奶前30min接種豬瘟疫苗的仔豬陽性率為55.5%;而90min接種豬瘟疫苗的仔豬陽性率最低。認(rèn)為新生仔豬進(jìn)行豬瘟超前免疫時,應(yīng)選擇在接種后60min吃初乳為最佳時間。顧春海等認(rèn)為仔豬超免豬瘟疫苗1頭份、0.5h之后吃初乳的效果好;于泰等進(jìn)行的超免研究發(fā)現(xiàn):仔豬注射豬瘟兔化弱毒苗1頭份、3h后吃初乳的免疫方法,對仔豬豬瘟的保護(hù)長達(dá)1年。早期的超免研究多認(rèn)為一次超免即可提供對豬瘟的終生保護(hù)。林毅等在超前免疫后180d,檢測豬瘟抗體的陽性率為85%,據(jù)此他認(rèn)為一次超免可保證絕大多數(shù)豬出欄。但許多學(xué)者認(rèn)為這種做法是危險的。因為一旦豬群中存在豬瘟強毒,將會迅速增殖蔓延,造成惡果。近年來的實踐越來越支持加大超免劑量和進(jìn)行加強免疫的免疫方法。何存利等進(jìn)行了仔豬豬瘟免疫程序的研究。他們建立在乳前免疫方法是:初生仔豬注苗2頭份,2h后放回母豬身邊吃乳。實驗表明,150日齡時超免仔豬血清陽性率僅73.68%,已不能對豬群提供全保護(hù)。在豬瘟疫區(qū)和受威脅區(qū),采取乳前免疫和常規(guī)免疫相結(jié)合的方式,才能確保豬群免遭豬瘟侵襲。他們還發(fā)現(xiàn),通過加大免疫劑量來中和殘余母抗的方法,常規(guī)免疫就能起到很好的效果;張曹民也認(rèn)為只要解決好母源抗體干擾的問題,不必在所有的豬場都施行超前免疫;朱建國等的實驗也支持超前免疫后進(jìn)行加強免疫的做法,他們認(rèn)為首免為超免、二免在30～35日齡的豬瘟免疫程序在豬瘟流行區(qū)切實可行;王紅寧等在四川南充、內(nèi)江和成都等地規(guī)?；i場的實驗表明,超前免疫預(yù)防豬瘟的效果良好,他們推薦的免疫程序為:超前免疫2頭份,6月份加強免疫1次。此外,胡薛英、郭金海、王世權(quán)等均有超前免疫后需做2次免疫的報道。2.2血清學(xué)和免疫豬近年來,豬瘟兔化弱毒口服免疫的研究日趨增多?？诜庖呖梢詷O大地減少豬瘟免疫的工作強度,使用簡便。Chenut等等利用C株口服免疫家豬、野豬、綿羊、家兔及野兔,結(jié)果家豬免后4d扁、脾、淋巴結(jié)、胸腺、糞及尿中分離不到病毒,3周血清學(xué)陽轉(zhuǎn),免疫后6周攻毒,能完全保護(hù)強毒攻擊;7/8野豬免后血清抗體陽性,扁和脾分離不到病毒;綿羊接種后不表現(xiàn)臨床癥狀,血清抗體陰性;家兔接種后表現(xiàn)輕度熱反應(yīng);野兔則無癥狀;家兔和野兔二者有少數(shù)表現(xiàn)血清學(xué)抗體陽性。Kaden等以C株對斷奶仔豬進(jìn)行口服免疫,結(jié)果進(jìn)行大劑量Koslov強毒株攻擊的免疫豬死亡;3/5進(jìn)行小劑量Alfort187強毒株攻擊的免疫豬存活,血清抗體陽性,但從鼻腔排毒,其中4只豬表現(xiàn)瞬時病毒血癥;而所有進(jìn)行MV140/Riems低毒力毒株的免疫豬均存活,表現(xiàn)短時病毒血癥,均有抗體,但所有存活豬體內(nèi)均無CSFV或CSFVRNA。同年Soos等報道以C株在分娩前167～217d口服免疫母豬,結(jié)果所有3周齡及80%6周齡仔豬中和抗體滴度為1∶40、25%、10周齡仔豬中和抗體滴度達(dá)到1∶20,所有仔豬ELISA抗體檢測均為陽性。2.3豬私免疫試驗結(jié)果除了免疫時間以外,免疫劑量也是影響免疫效果的一個重要因素。近年來,按照常規(guī)劑量免疫,抗體效價低,維持時間短,有些地方和豬場采用2頭份、4頭份,甚至6頭份劑量免疫,以達(dá)到較好的免疫。采用大劑量豬瘟疫苗接種可以在最短的時間內(nèi)激發(fā)機體的免疫防御系統(tǒng),從而對抗病原的進(jìn)一步侵入。丁國華等在室內(nèi)、室外分別對豬接種不同劑量的豬瘟弱毒疫苗和牛睪丸細(xì)胞苗,免疫期106～130d攻擊石門系豬瘟強毒,室內(nèi)接種組攻毒結(jié)果為:豬瘟乳兔苗頭劑量0.5mL150個免疫量,保護(hù)率100%(5/5);頭劑量1.0mL150個免疫量,保護(hù)率100%(5/5);頭劑量1.0mL300個免疫量,保護(hù)率100%(4/4);牛睪丸細(xì)胞苗頭劑量0.5mL300個免疫量,保護(hù)率100%(4/4);室外接種組攻毒結(jié)果為:豬瘟乳兔苗頭劑量0.5mL150個免疫量,保護(hù)率25%(1/5);頭劑量1.0mL150個免疫量,保護(hù)率80%(4/5);攻毒對照豬發(fā)病4/4,死亡3/4。試驗證明室外接種0.5mL150個免疫量,保護(hù)率極低。張須莊等通過不同劑量豬瘟疫苗抗體檢測試驗研究認(rèn)為強化母豬豬瘟免疫,于配種前7～15d肌注4～5頭份豬瘟細(xì)胞苗,才能保護(hù)仔豬在哺乳期的安全。仔豬應(yīng)在20～25日齡防疫注射3～4頭份量豬瘟細(xì)胞苗,必要時2月后再加強免疫一次。蔣冬福等用70日齡未免豬,無母源抗體干擾且免疫系統(tǒng)已近成熟,然而用生理鹽水稀釋組免疫后3周豬瘟抗體幾何平均值僅為1∶8,抗體滴度之低,遠(yuǎn)未達(dá)到抵抗強毒攻擊的最低保護(hù)線(1∶32)。說明生產(chǎn)中如按1頭份常規(guī)劑量免疫,仍存在很大的安全隱患。建議各地根據(jù)豬群母抗的水平,適當(dāng)加大免疫劑量,母抗高的豬群可用到每豬4頭份,反之則用2頭份。張?zhí)K強報道,采用母豬免疫宜在哺乳后期和斷乳時,避開配種和懷孕期,免疫劑量為4頭份/頭。種公豬,每年3、9月份各接種一次。4頭份/頭。新生仔豬未吃初乳時,首免:2頭份/頭(注苗2h后吃初乳)70日齡二免,4頭份/頭的免疫程序;發(fā)現(xiàn)疫情后實行超劑量免疫,立即對全場所有豬實行豬瘟兔化弱毒疫苗超劑量緊急接種8頭份/頭的緊急免疫措施可以有效控制豬瘟的發(fā)生和流行。譚海等使用豬瘟弱毒疫苗,每頭仔豬在初乳前、25日齡、60日齡進(jìn)行3次免疫,初乳前接種1頭份、25日齡接種2頭份、60日齡接種3頭份;全群種豬進(jìn)行緊急免疫,每頭接種4頭份,以后每年的3月、9月各接種4頭份可以有效控制豬瘟的發(fā)生和流行。黃鑒明在母豬配種前2～3周接種4頭份豬瘟疫苗有效防止了繁殖障礙型豬瘟的發(fā)生。隆先覺按體重計算用苗頭份,10～30kg體重的豬瘟發(fā)病組首次接種5～15頭份、次日再接種5～15頭份可以有效治療豬瘟,初發(fā)病病豬康復(fù)率高達(dá)86.1%,對假定健康豬接種5頭份,保護(hù)率達(dá)100%。但也有試驗證明無需增加疫苗劑量,金柏新等試驗證明仔豬30日齡每頭注射豬瘟疫苗1頭份劑量,30日齡第二次加強免疫注射1頭份劑量的情況下,至180日齡時仍具有保護(hù)力。在30和60日齡同樣進(jìn)行二次免疫,而每次增加疫苗頭份量,未見有增加抗體效價的作用,1頭份與2頭份、4頭份間無顯著性差異,因而認(rèn)為在豬瘟免疫中,沒有必要增加劑量。2.4豬模型抗體水平,其造成的免疫抑制作用發(fā)揮得顯由于種種原因,在臨床上豬瘟仍難以很好地控制,近年來仍有豬瘟發(fā)生。在生產(chǎn)中采取乳前免疫或加大免疫劑量的免疫方法,仍然有抗體水平未達(dá)到最低保護(hù)線(1∶32,IHA法)的豬只存在。為此通過使用免疫增強劑的途徑來提高動物免疫力,提高豬瘟的免疫效果的研究成為豬瘟防制的熱點之一。駱延波等以免疫活性因子作為豬瘟疫苗稀釋液給豬接種1頭份,疫苗接種后10d、100d的豬瘟抗體水平較對照組(生理鹽水稀釋液)顯著提高(P<0.05),疫苗接種后10d、40d,外周血中T淋巴細(xì)胞的百分率比對照組顯著提高(P<0.05),表明在接種豬瘟疫苗時,使用免疫活性因子可以促進(jìn)T淋巴細(xì)胞的增殖,增強其免疫力,有效提高豬瘟疫苗的免疫效果。王川慶等試驗表明:將囊素(bursin,是禽類法氏囊組織產(chǎn)生的一種三肽物質(zhì),主要存在于法氏囊組織提取液中)與豬瘟兔化弱毒疫苗同時接種于被免疫豬,無不良反應(yīng),安全可靠?？贵w測定結(jié)果表明囊素與豬瘟兔化弱毒疫苗同時使用,可明顯提高豬體內(nèi)特異性抗體水平,說明囊素對哺乳動物的免疫功能有明顯的促進(jìn)作用。從接種豬瘟疫苗和囊素后不同時間所測血清中的豬瘟抗體水平比較可以看出:免疫后2周內(nèi)對照組抗體水平較免疫前有所下降,而試驗組的抗體水平卻有所上升,說明試驗組抗體被疫苗中和后抗體上升快,空白期短。免疫后4周抗體達(dá)到最高峰時試驗組比對照組高出近2個滴度(Log2)。免疫后6周抗體水平有所下降以后,試驗組仍比對照組高出1.4(Log2),說明試驗組的抗體整體水平和上升幅度均比對照組高得多,持續(xù)時間長,意味著其免疫保護(hù)力更強。差異顯著性檢驗(單測t檢驗),表明試驗組與對照組差異顯著。進(jìn)一步研究表明,囊素最佳使用劑量為0.06mL/kg。蔣冬福等試驗結(jié)果表明1%健康兔脾淋組織液對豬瘟兔化弱毒細(xì)胞培養(yǎng)苗有明顯的免疫增強作用,與用生理鹽水稀釋豬瘟細(xì)胞苗相比兩者差異極顯著。試驗一在試驗豬具有較高抗體水平(1∶45～49),且仔豬的免疫系統(tǒng)尚未完全成熟的條件下進(jìn)行,但A組(兔脾淋組織液稀釋組)的豬瘟幾何平均抗體效價升至1∶215;B組(生理鹽水稀釋組)的僅升到1∶86。試驗二用的是70日齡未免豬,無母源抗體干擾且免疫系統(tǒng)已近成熟,然而用生理鹽水稀釋組免疫后3周豬瘟抗體幾何平均值僅為1∶8,抗體滴度之低,遠(yuǎn)未達(dá)到抵抗強毒攻擊的最低保護(hù)線(1∶32)。說明生產(chǎn)中如按1頭份常規(guī)劑量免疫,仍存在很大的安全隱患。建議各地根據(jù)豬群母抗的水平,適當(dāng)加大免疫劑量,母抗高的豬群可用到每豬4頭份,反之則用2頭份。李敬璽等用亞硒酸鈉(0.1mg/kg體重)作為豬瘟兔化弱毒疫苗的強化劑對60日齡仔豬進(jìn)行免疫接種,結(jié)果表明,硒可以使動物外周血液中B淋巴細(xì)胞增數(shù),血清免疫抗體水平提高,且出現(xiàn)較早,維持時間較長而且穩(wěn)定。周旭峰等將豬瘟疫苗用玉米花粉多糖稀釋(肌肉注射)高劑量組,2mL/頭(含2頭份疫苗和90mg多糖)20頭;豬瘟疫苗玉米花粉多糖稀釋(肌肉注射)低劑量組,2mL/頭(含2頭份疫苗和30mg多糖)20頭;豬瘟疫苗用生理鹽水稀釋(肌肉注射)對照組,2mL/頭(含2頭份疫苗)20頭。20日齡仔豬首免,多糖一次性給予,首免后7d,14d,21d,35d及60日齡二免后10d耳靜脈采血,分離血清,用ELISA測其抗體水平。結(jié)果表明首免后7d,高劑量組、對照組與低劑量組之間均有顯著差異(P<0.05)14d時,高劑量組、低劑量組均明顯高于