體驗制備細(xì)胞膜的方法教學(xué)設(shè)計,DOC

僅供個人學(xué)習(xí)參考僅供個人學(xué)習(xí)參考體驗制備細(xì)胞膜的方法教學(xué)設(shè)計背景資料生物膜的研究發(fā)展迅速。要研究生物膜的組成、結(jié)構(gòu)及功能，首先必須分離出純凈的細(xì)胞膜。分離得到的哺乳動物的紅細(xì)胞膜，一般稱為“血影” 。哺乳動物成熟的紅細(xì)胞中沒有一般真核細(xì)胞所具有的細(xì)胞核和細(xì)胞器，容易用它制備純凈的細(xì)胞膜。此外，哺乳動物的血液也比較容易獲得，因而是研究細(xì)胞膜的理想材料。□□□□□□□□□□□□□□□,□□□□□□□□□□□□□□□□□□□,□□□□□□□□□□□□□□□□□,□□□□□□□□□□□□,□□□□□,□□□□□ □□□□□□□□□□□□□□□,□□□□□□□□□, □□□□□□□□, □□□□□□□□□□ 第三□□□□□□□□□□□□□□□□□□□ 洗滌，□□□□□□□□□□□□□□□, 最終獲得□□□□□□□□□11材料 □□□□□□□□□21用具 □□□,□□□,□□,□□□,□□□,□□□,□□□,□□□□31試劑 □□□□□□□□□□□□,□□□□□□□□□□ 019%的NaCl□□□,□□□□清水。41操作要點□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□,□□□□□□,□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□1mL□□□□,□□□□□□,□□□□□□ 2mL,在 2000r/min□□□□□ 5min。去□□□,□□□□□□□□□□□ 2mL,□□□□□,□□□□□,□□□□□□□□□□□□□□□□□□□,□□□□□□□□□□□□□,□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□1）取一個 5mL□□□□,□□□□□□ 213mL。2）用滴管在沉淀的下層吸取一小滴血細(xì)胞,滴入小燒杯的生理鹽水中,以達(dá)到稀釋紅細(xì)胞的目的,以免觀察時,由于細(xì)胞密度太大,影響觀察效果。3）取另一個滴管,在小燒杯中輕輕攪拌,然后吸取少量的血細(xì)胞稀釋液,在載玻片的中央滴很小的一滴,加蓋玻片。4）先在低倍鏡下觀察紅細(xì)胞的正常形態(tài),可見其邊緣完整發(fā)亮。僅供個人學(xué)習(xí)參考僅供個人學(xué)習(xí)參考（5）在蓋玻片的一側(cè)加一滴蒸餾水或清水，在另一側(cè)非常小心地用吸水紙慢慢地吸引，防止把紅細(xì)胞全部吸入吸水紙中而影響觀察。邊加水邊觀察，注意紅細(xì)胞的形態(tài)變化。紅細(xì)胞會隨著水流向一側(cè)漂移，觀察時注意移動玻片。紅細(xì)胞體積逐漸變大，變得非常鼓脹，在視野中可以找到少數(shù)脹破的紅細(xì)胞，它們已失去完整發(fā)亮的邊緣，變成彌散狀。5．需要注意的幾個問題（1）制作臨時裝片時，紅細(xì)胞必須稀釋，而且取紅細(xì)胞的量要少。（2）在高倍鏡下觀察，待觀察清晰時，在蓋玻片的一側(cè)滴加蒸餾水，同時在另一側(cè)用吸水紙吸引。上述操作均在載物臺上進(jìn)行，并隨時調(diào)整鏡筒高度，持續(xù)觀察細(xì)胞的變化。在蓋玻片一側(cè)滴不要將血吸引。上述操作均在載物臺上進(jìn)行，并隨時調(diào)整鏡筒高度，持續(xù)觀察細(xì)胞的變化。在蓋玻片一側(cè)滴不要將血細(xì)胞吸走。400倍以上。31400倍以上。41操作中要認(rèn)真觀察才能看到連續(xù)的變化過程。具體教學(xué)步驟11分析實驗原理□□□□□□□□□□□□□□,□□□□□□□□,□□□□□□□□□□,□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□,□□□□□□□□□□□□,□□□□□□□□□□□□□□□□,而□□□□□□□□□□□□□□□□□□□,□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□?□□□□□□□?□□□□□□□□?根據(jù)學(xué)生的回答，肯定溶血的方法。再進(jìn)一步提問，如何將細(xì)胞膜與細(xì)胞其他成分分離開？引導(dǎo)學(xué)生了解離心技術(shù)的應(yīng)用。由于細(xì)胞膜非常薄，通常要在心多次，才能得到純凈的細(xì)胞膜。由于時間和條件的限制，5000r/min及9000r/min條件下反復(fù)離我們在課上只用顯微鏡來觀察紅細(xì)胞溶血前后細(xì)胞邊界的變化，以此來體驗細(xì)胞膜的存在，并對細(xì)胞膜的制備方法有一個初步的體驗。2．明晰實驗步驟讓學(xué)生討論，設(shè)計具體的實施步驟。教師對學(xué)生設(shè)計的步驟進(jìn)行補(bǔ)充完善。具體實施步驟參見“操作指南”。關(guān)于操作要點和難點，可以提出以下問題引發(fā)學(xué)生思考。例如，在載玻片上滴加的血細(xì)胞多些好還是少些好？在蓋玻片另一側(cè)用吸水紙吸引時， 要注意什么？如何把握觀察溶血后的紅細(xì)胞的最好時機(jī)？教師針對問題，指出操作要點并講明原因。3．分組實驗學(xué)生進(jìn)行分組實驗，教師給予具體的指導(dǎo)和評價。4．展示和討論實驗結(jié)果□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□,□□□□□□實驗反思■本實驗中可以考查學(xué)生的基本實驗技能有：臨時裝片的制作，顯微鏡的使用等。21關(guān)于實驗結(jié)果的評價。如果實驗成功，可以看到近水部分的部分紅細(xì)胞體積增大，很快會□□□□□□□□□□□□□,□□□□□31影響實驗結(jié)果的因素可能有以下幾個方面。11紅細(xì)胞發(fā)生溶血的比例與操作是否得當(dāng)有關(guān)。21顯微鏡使用是否熟練。31是否認(rèn)真、連續(xù)地觀察。教學(xué)反思□