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主干知識·歸納整合整體認(rèn)知加深知識理解醋酸菌巴氏消毒法碳源、氮源、水、細(xì)胞的全能性膜的流動性細(xì)胞核的全能性獲能桑葚胚、囊胚將內(nèi)細(xì)胞團均等分割DNA連接酶基因表達(dá)載體的構(gòu)建基因濕熱滅菌法無機鹽等稀釋涂布平板法細(xì)胞增殖遺點必查01疑點必清02難點必明03遺點必查012.(選擇性必修3P12探究·實踐)微生物的接種方法最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法,后者可用于活菌計數(shù)。1.(選擇性必修3P7正文)醋酸菌是好氧細(xì)菌,當(dāng)O2、糖源都充足時能通過復(fù)雜的化學(xué)反應(yīng)將糖分解為乙酸;當(dāng)缺少糖源時則直接將乙醇轉(zhuǎn)化為乙醛,再將乙醛變?yōu)橐宜?。多?shù)醋酸菌的最適生長溫度為30~35℃。3.(選擇性必修3P18正文)用稀釋涂布平板法計數(shù)時,統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目少,這是因為當(dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起時,平板上觀察到的只是一個菌落。4.(選擇性必修3P45正文)動物組織經(jīng)胰蛋白酶、膠原蛋白酶等處理后的初次培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng),分瓶后的細(xì)胞培養(yǎng)稱為傳代培養(yǎng)。5.(選擇性必修3P48~49

圖2-16)單克隆抗體制備過程中涉及兩次篩選,第一次是利用選擇培養(yǎng)基,篩選出雜交瘤細(xì)胞;第二次是克隆化培養(yǎng)和抗體檢測,目的是篩選出足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細(xì)胞。6.(選擇性必修3P54相關(guān)信息)目前動物細(xì)胞核移植技術(shù)中普遍使用的去核方法是顯微操作法。也有人采用梯度離心、紫外線短時間照射和化學(xué)物質(zhì)處理等方法。這些方法是在沒有穿透卵母細(xì)胞透明帶的情況下去核或使其中的DNA變性。7.(選擇性必修3P58相關(guān)信息)常以觀察到兩個極體或者雌、雄原核作為受精的標(biāo)志。8.(選擇性必修3P62正文)在進行胚胎分割時,應(yīng)選擇發(fā)育良好、形態(tài)正常的桑葚胚或囊胚。分割囊胚階段的胚胎時,要注意將內(nèi)細(xì)胞團均等分割。9.(選擇性必修3P80正文)啟動子位于基因的上游,是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位;終止子位于基因的下游,使轉(zhuǎn)錄在所需要的地方停下來。10.(選擇性必修3P81資料卡)農(nóng)桿菌細(xì)胞內(nèi)含有Ti質(zhì)粒,當(dāng)它侵染植物細(xì)胞后,能將Ti質(zhì)粒上的T-DNA轉(zhuǎn)移到被侵染的細(xì)胞,并且將其整合到該細(xì)胞的染色體DNA上。02疑點必清×(2)在制作果酒、果醋時,適當(dāng)加大接種量可以提高發(fā)酵速率、抑制雜菌生長繁殖。

(

)1.判斷有關(guān)發(fā)酵工程應(yīng)用說法的正誤√(3)發(fā)酵工程與傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)最大的區(qū)別是前者可以用微生物進行發(fā)酵。

(

)(4)對細(xì)菌進行計數(shù)能采用稀釋涂布平板法,也能用平板劃線法。

(

)(5)分解尿素的細(xì)菌在分解尿素時,可以將尿素轉(zhuǎn)化為氨,使得培養(yǎng)基的酸堿度降低。

(

)(6)剛果紅可以與纖維素形成透明復(fù)合物,所以可以通過是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌。

(

)××××(1)醋酸菌在無氧條件下利用乙醇產(chǎn)生乙酸。

(

)(4)動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中需將動物細(xì)胞放于含95%氧氣和5%CO2的CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 (

)(7)胚胎分割過程中,可取滋養(yǎng)層細(xì)胞做DNA分析,鑒定性別。

(

)2.判斷有關(guān)動植物細(xì)胞工程和胚胎工程說法的正誤×(2)用纖維素酶和果膠酶水解法獲得的植物原生質(zhì)體失去了全能性。(

)(3)植物體細(xì)胞雜交所獲得的雜種植株的變異類型屬于染色體變異。(

)(5)體外培養(yǎng)的動物細(xì)胞一類能懸浮在培養(yǎng)液中生長增殖,另一類需要貼附于某些基質(zhì)表面才能生長增殖。

(

)(6)多種B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合篩選后,還需經(jīng)克隆化培養(yǎng)和抗體檢測,才能獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞。

(

)×√×√√√(1)愈傷組織是外植體通過脫分化和再分化后形成的。

(

)3.判斷有關(guān)基因工程和蛋白質(zhì)工程說法的正誤(3)啟動子是一段有特殊序列結(jié)構(gòu)的DNA片段,它是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部分,有了它才能驅(qū)動DNA的復(fù)制過程。

(

)(4)轉(zhuǎn)化是指目的基因進入受體細(xì)胞內(nèi),并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程。

(

)(5)生殖性克隆人破壞了人類基因多樣性的天然屬性,不利于人類的生存和進化。

(

)××√√√(1)限制酶能夠識別雙鏈DNA分子中特定核苷酸序列,并且使每一條鏈中特定部位的氫鍵斷開。

(

)03難點必明1.平板劃線法在做第二次以及其后的劃線操作時,為什么總是從上一次劃線的末端開始劃線?提示:劃線后,線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處要少,每次從上一次劃線的末端開始,能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少,最終能得到由單個細(xì)菌繁殖而來的菌落。2.某同學(xué)在純化土壤中的細(xì)菌時,發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上的菌落連成了一片,最可能的原因是什么?

提示:最可能的原因是菌液濃度過高或劃線時在劃下一區(qū)域前未將接種環(huán)灼燒滅菌。3.平板劃線法不能用于測定活菌的數(shù)量的原因是什么?提示:由于在所劃的線中,一般只有最后一次劃線的末端才會形成只由一個活菌形成的菌落,而其他一些菌落往往由兩個活菌或多個細(xì)胞連接在一起,而在計數(shù)時一個菌落對應(yīng)著一個活菌,這樣在劃線所得的平板中,菌落數(shù)目遠(yuǎn)低于活菌的實際數(shù)值,所以不能用平板劃線法測定活菌數(shù)量。4.在傳統(tǒng)發(fā)酵食品的制作過程中,為什么發(fā)酵食品的品質(zhì)往往不穩(wěn)定?提示:沒有接種菌種,而是利用了天然存在的菌種,菌種差異、雜菌情況不明和發(fā)酵過程的控制缺乏標(biāo)準(zhǔn)等,往往會造成發(fā)酵食品的品質(zhì)不一。5.作物脫毒時應(yīng)選取哪些部位的組織進行組織培養(yǎng)?原因是什么?提示:一般選取根尖或莖尖的分生區(qū)。植物分生區(qū)的病毒極少,甚至無病毒,用分生區(qū)細(xì)胞進行組織培養(yǎng),能得到大量的脫毒苗。6.對囊胚階段的胚胎進行分割時,為什么要將內(nèi)細(xì)胞團均等分割?提示:若分割時不能將內(nèi)細(xì)胞團均等分割,會出現(xiàn)含內(nèi)細(xì)胞團多的部分正常發(fā)育的能力強,少的部分發(fā)育受阻或發(fā)育不良,甚至不能發(fā)育等問題。7.構(gòu)建基因表達(dá)載體時,目的基因和載體分別使用兩種限制酶切割,這樣做的優(yōu)點是什么?提示:用兩種不同的限制酶進行切割能夠使目的基因和載體定向連接,避免目的基因和載體分別發(fā)生自身環(huán)化以及目的基因與載體的反向連接,提高連接的有效性。8.生產(chǎn)乳腺生物反應(yīng)器構(gòu)建基因表達(dá)載體時有什么特別要求?為什么?提示:必須把藥用蛋白基因與乳腺中特異表達(dá)的基因的啟動子等調(diào)控元件重組在一起。因為只有連接了乳腺中特異表達(dá)的

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