選修三二輪復(fù)習(xí)基因工程課件

《系統(tǒng)》P111《系統(tǒng)》P1111一、基因工程的概念辨析別名____________操作環(huán)境生物體外操作對象_____操作水平____________優(yōu)點克服

的障礙，

生物性狀結(jié)果創(chuàng)造出人類需要的新的_________和_________DNA重組技術(shù)或基因拼接技術(shù)基因DNA分子水平生物類型生物產(chǎn)品（基因重組）遠(yuǎn)緣雜交不親和定向改造一、基因工程的概念辨析別名____________操作環(huán)境生2二、DNA重組技術(shù)的基本工具1.限制性核酸內(nèi)切酶(也稱“限制酶”):(1)來源:主要來自于_________。(2)特點:具有專一性。①識別雙鏈DNA分子的某種_______________。②切割特定核苷酸序列中的特定位點。(3)作用:斷開每一條鏈中_________的兩個核苷酸之間的___________。(4)結(jié)果:產(chǎn)生_________或_______。原核生物特定核苷酸序列特定部位磷酸二酯鍵黏性末端平末端《系統(tǒng)》p112二、DNA重組技術(shù)的基本工具原核生物特定核苷酸序列特定部位磷32.DNA連接酶:(1)作用:將_

_________“縫合”起來,恢復(fù)被_______切開的兩個核苷酸之間的___________。(2)種類:種類來源特點________DNA連接酶__________只能“縫合”具有_____________的雙鏈DNA片段T4DNA連接酶T4噬菌體既可以“縫合”雙鏈DNA片段互補的_________,又可以“縫合”雙鏈DNA片段的_______雙鏈DNA片段限制酶磷酸二酯鍵E·coli互補黏性末端黏性末端平末端桿菌大腸2.DNA連接酶:種類來源特點____________4限制酶、DNA連接酶、聚合酶與解旋酶的比較:(1)相同點:都是作用于DNA分子中的化學(xué)鍵。(2)不同點:作用部位不同,前三者作用于磷酸二酯鍵,后者作用于氫鍵。關(guān)注《系統(tǒng)》P114（一）限制酶、DNA連接酶、聚合酶與解旋酶的比較:關(guān)注《系統(tǒng)》P153.基因進入受體細(xì)胞的載體:DNA分子λ噬菌體一個至多個限制酶切割位點，供外源基因插入標(biāo)記基因，供重組DNA的鑒定和選擇攜帶外源DNA片段進入受體細(xì)胞3.基因進入受體細(xì)胞的載體:DNA分子λ噬菌體一個至多個限制6三、基因工程的基本操作程序

的獲取↓

_____________的構(gòu)建↓將_________導(dǎo)入；↓目的基因的___________基因表達載體目的基因檢測與鑒定為什么要構(gòu)建載體？怎樣構(gòu)建載體？將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞方法：將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞方法：將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞方法：檢測轉(zhuǎn)基因生物的染色體DNA上是否插入了目的基因檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA檢測目的基因是否翻譯出蛋白質(zhì)目的基因受體細(xì)胞從基因文庫中獲取目的基因利用PCR技術(shù)擴增目的基因人工合成（核心）進行個體生物學(xué)水平鑒定——生物性狀判斷三、基因工程的基本操作程序基因表達載體目的基因檢測與鑒定為什7基因表達載體的構(gòu)建1.基因表達載體的功能:通過基因表達載體將________導(dǎo)入受體細(xì)胞。2、目的：使其在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并可遺傳至下一代，使目的基因能夠表達和發(fā)揮作用。3.基因表達載體組成:啟動子終止子——終止轉(zhuǎn)錄標(biāo)記目的基因——鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含目的基因的細(xì)胞篩選出來?！猂NA聚合酶識別和結(jié)合的部位基因表達載體的構(gòu)建3.基因表達載體組成:啟動子終止子——終止8【易錯·警示】6.啟動子、終止子：(1)啟動子(DNA片段)≠起始密碼子(位于RNA上)。(2)終止子(DNA片段)≠終止密碼子(位于RNA上)?！疽族e·警示】94.構(gòu)建方法:【易錯·警示】3.使用限制酶的注意點：(1)一般用同一種限制酶切割載體和獲取目的基因。(2)不同的限制酶也能切割出相同的黏性末端。4.構(gòu)建方法:【易錯·警示】10(2)利用PCR技術(shù)擴增目的基因:①含義:是一項在生物體外_____________的技術(shù)。②原理:____________。③條件:_____、DNA模板、_____

_、四種脫氧核苷酸。復(fù)制DNA片段DNA雙鏈復(fù)制引物④過程:目的基因DNA受熱_____后解鏈為單鏈↓_____與單鏈相應(yīng)互補序列結(jié)合↓在__________作用下進行_____↓重復(fù)循環(huán)多次變性引物Taq酶延伸DNA聚合酶變性復(fù)性延伸↓↓dNTP(2)利用PCR技術(shù)擴增目的基因:復(fù)制DNA片段DNA雙鏈復(fù)113.轉(zhuǎn)化方法:(1)導(dǎo)入植物細(xì)胞:方法_____________：雙子葉植物或_____植物基因槍法：___________花粉管通道法農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法裸子單子葉植物方法：_____________顯微注射技術(shù)(導(dǎo)入受精卵)(2)導(dǎo)入動物細(xì)胞(3)導(dǎo)入微生物細(xì)胞方法:a.用___

_處理細(xì)胞,使細(xì)胞處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)(這種細(xì)胞稱為__________

_)。b.感受態(tài)細(xì)胞吸收___________________

_。重組表達載體DNA分子Ca2+感受態(tài)細(xì)胞3.轉(zhuǎn)化方法:_____________：雙子葉植物或___12(3)目的基因表達與鑒定的“四個層面”染色體DNA上標(biāo)記的DNA分子，即探針，是用帶有放射性同位素的有特定序列的單鏈DNA。它能與自己互補配對的序列結(jié)合。(3)目的基因表達與鑒定的“四個層面”染色體DNA上標(biāo)記的D13四、基因工程的應(yīng)用1.基因工程的應(yīng)用(1)動物基因工程：用于提高動物

從而提高產(chǎn)品產(chǎn)量；用于改善畜產(chǎn)品品質(zhì)；用轉(zhuǎn)基因動物生產(chǎn)

；用轉(zhuǎn)基因動物作器官移植的

等。(2)植物基因工程：培育抗蟲轉(zhuǎn)基因植物、抗病轉(zhuǎn)基因植物和

轉(zhuǎn)基因植物；利用轉(zhuǎn)基因改良植物的

。生長速度藥物供體抗逆品質(zhì)四、基因工程的應(yīng)用1.基因工程的應(yīng)用(1)動物基因工程：用于(3)比較基因治療與基因診斷：

原理操作過程進展基因治療利用

導(dǎo)入有基因缺陷的細(xì)胞中，以表達出正常性狀來治療(疾病)臨床實驗基因診斷制作特定

與病人樣品DNA混合，分析雜交帶情況臨床應(yīng)用基因表達正?；驂A基互補配對DNA探針(3)比較基因治療與基因診斷：

原理操作過程進展基因治療利用盲點判斷【盲點判斷】1.限制酶只能用于切割目的基因所在的DNA片段.()

2.(2013·安徽高考T6C)重組質(zhì)粒與探針能進行分子雜交是因為DNA分子脫氧核糖和磷酸交替連接。()3.要獲得轉(zhuǎn)基因植物,可選用植物的體細(xì)胞作受體細(xì)胞,然后通過組織培養(yǎng)技術(shù)獲得;如果要獲得轉(zhuǎn)基因動物,可選用動物的體細(xì)胞作受體細(xì)胞,然后通過動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)獲得。()4.質(zhì)粒是小型環(huán)狀DNA分子,是基因工程常用的載體。()5.用限制性核酸內(nèi)切酶切割得到的人胰島素基因,導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞后能得到有效的表達。()×××√×也能用于切割載體DNA分子雜交原理是相應(yīng)堿基序列的互補配對動物細(xì)胞不具全能性蛋白質(zhì)表達還需要特定的細(xì)胞器高爾基體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等,而大腸桿菌中缺少這些細(xì)胞器盲點判斷【盲點判斷】×××√×也能用于切割載體DNA分子雜交16第二課時第二課時172.蛋白質(zhì)工程(1)概念理解①基礎(chǔ)：蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系。②操作：

或基因合成。③結(jié)果：改造了現(xiàn)有蛋白質(zhì)或制造出

。④目的：根據(jù)人們對蛋白質(zhì)功能的特定需求，對

進行分子設(shè)計。(2)蛋白質(zhì)工程的設(shè)計流程基因修飾新的蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)功能蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)氨基酸序列脫氧核苷酸序列2.蛋白質(zhì)工程(1)概念理解基因修飾新的蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)功能二、基因工程與蛋白質(zhì)工程的比較項目基因工程蛋白質(zhì)工程操作對象基因基因操作水平DNA分子水平DNA分子水平基本過程目的基因的獲取→基因表達載體的構(gòu)建→將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞→目的基因的檢測與鑒定預(yù)測蛋白質(zhì)的功能→設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測蛋白質(zhì)應(yīng)有的氨基酸序列→找到對應(yīng)的基因→基因工程→表達出蛋白質(zhì)實質(zhì)定向改造生物的遺傳特性定向改造或生產(chǎn)人類所需的蛋白質(zhì)結(jié)果生產(chǎn)人類需要的基因產(chǎn)物(自然界已有的蛋白質(zhì))可以生產(chǎn)自然界沒有的、不存在的新蛋白質(zhì)聯(lián)系蛋白質(zhì)工程是以基因工程為基礎(chǔ)的二、基因工程與蛋白質(zhì)工程的比較項目基因工程蛋白質(zhì)工程操作對象19題組通關(guān)：2.(2015·全國卷Ⅱ)已知生物體內(nèi)有一種蛋白質(zhì)(P)，該蛋白質(zhì)是一種轉(zhuǎn)運蛋白，由305個氨基酸組成。如果將P分子中158位的絲氨酸變成亮氨酸，240位的谷氨酰胺變成苯丙氨酸，改變后的蛋白質(zhì)(P1)不但保留P的功能，而且具有了酶的催化活性?；卮鹣铝袉栴}：(1)從上述資料可知，若要改變蛋白質(zhì)的功能，可以考慮對蛋白質(zhì)的____________進行改造。(2)以P基因序列為基礎(chǔ)，獲得P1基因的途徑有修飾___基因或合成_____基因。所獲得的基因表達時是遵循中心法則的，中心法則的全部內(nèi)容包括____________的復(fù)制；以及遺傳信息在不同分子之間的流動，即：____________________________________________。(3)蛋白質(zhì)工程也被稱為第二代基因工程，其基本途徑是從預(yù)期蛋白質(zhì)功能出發(fā)，通過____________和____________，進而確定相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列，據(jù)此獲得基因，再經(jīng)表達、純化獲得蛋白質(zhì)，之后還需要對蛋白質(zhì)的生物_______進行鑒定。氨基酸序列PP1DNA和RNADNA→RNA、RNA→DNA、RNA→蛋白質(zhì)(或轉(zhuǎn)錄、逆轉(zhuǎn)錄、翻譯)設(shè)計蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)推測氨基酸序列功能題組通關(guān)：2.(2015·全國卷Ⅱ)已知生物體內(nèi)有一種蛋白質(zhì)20P86典例1【解題技法】——關(guān)鍵詞突破法1.點睛：(1)快速找出每道小題的“題眼”或關(guān)鍵詞。(2)答題時一定要用專業(yè)術(shù)語或教材原話。2.答題分析：(1)關(guān)鍵詞1：目的蛋白。①合成途徑：RNA→____________→_________________→受體細(xì)胞→目的蛋白。②作為抗原：可刺激機體產(chǎn)生抗體，抗體可與目的蛋白(抗原)_______結(jié)合。cDNA(或DNA)構(gòu)建基因表達載體特異性P86典例1【解題技法】——關(guān)鍵詞突破法2.答題分析：cDN21【母題探究】——借題猜押其他命題點押題點1：人工合成目的基因常用的方法有哪些？________________________________。押題點2：基因工程常考熱點：(1)基因工程的核心步驟是___________________?；瘜W(xué)合成法、反轉(zhuǎn)錄法和PCR擴增法基因表達載體的構(gòu)建(2)常用工具。①限制酶：獲取_________和切割_____。②DNA連接酶的種類：___________連接酶和_____連接酶。③載體。a.能在細(xì)胞內(nèi)_________：穩(wěn)定保存。b.具有切割位點：供____________插入其中。c.具有_________：供重組DNA的鑒定和選擇。目的基因載體E·coliDNAT4DNA自我復(fù)制外源DNA片段標(biāo)記基因【母題探究】——借題猜押其他命題點化學(xué)合成法、反轉(zhuǎn)錄法和PC22【題組過關(guān)】1.(新題預(yù)測)下列是生物學(xué)技術(shù)制備抗體的兩個途徑模式簡圖。(1)過程①得到的Y細(xì)胞稱為____________。過程①和②得到的單克隆抗體最主要的優(yōu)點是__________________________。(2)抗體1與抗體2的氨基酸排列順序相同，兩者的空間結(jié)構(gòu)是否相同？__________，為什么？______________________________________。(3)在基因表達載體中，啟動子是________識別和結(jié)合的部位，它的作用是驅(qū)動V1基因的__________。(4)質(zhì)粒上的標(biāo)記基因的作用是______________________________________________________________。(5)過程④要用到的主要酶是__________________。雜交瘤細(xì)胞特異性強、靈敏度高、并可大量制備不同抗體2形成過程沒有經(jīng)過內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體的加工，抗體1形成過程經(jīng)過了內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體的加工RNA聚合酶轉(zhuǎn)錄從而將有目的基因的受體細(xì)胞篩選出來鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，逆轉(zhuǎn)錄酶【題組過關(guān)】(1)過程①得到的Y細(xì)胞稱為__________233.(2016·全國卷Ⅲ)圖(a)中的三個DNA片段上依次表示出了EcoRⅠ、BamHⅠ和Sau3AⅠ三種限制性核酸內(nèi)切酶的識別序列與切割位點，圖(b)為某種表達載體的示意圖(載體上的EcoRⅠ、Sau3AⅠ的切點是唯一的)。根據(jù)基因工程的有關(guān)知識，回答下列問題：(1)經(jīng)BamHⅠ酶切后得到的目的基因可以與上述表達載體被____________酶切后的產(chǎn)物連接，理由是___________________________________________________。(2)若某人利用圖(b)所示的表達載體獲得了甲、乙、丙三種含有目的基因的重組子，如圖(c)所示。這三種重組子中，不能在宿主細(xì)胞中表達目的基因產(chǎn)物的有______，不能表達的原因是__________________________________________________。Sau3AⅠ兩種酶切割后產(chǎn)生的片段具有相同的黏性末端甲和丙目的基因不是在啟動子和終止子之間，無法完成轉(zhuǎn)錄3.(2016·全國卷Ⅲ)圖(a)中的三個根據(jù)基因工程的有關(guān)24【方法技巧】“四步法”解決基因工程操作程序題第一步“三辨”：分辨限制酶的種類、識別序列和切割位點。第二步“三找”：找出標(biāo)記基因、目的基因及其插入位點。第三步“一析”：分析目的基因插入質(zhì)粒后是否破壞了標(biāo)記基因。第四步“一理”：理清判斷目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞的方法。一般用含有某種抗生素的培養(yǎng)基培養(yǎng)受體菌，如果有兩種抗生素抗性基因，還需判斷用哪一種抗生素來檢測。【方法技巧】“四步法”解決基因工程操作程序題第四步“一理”：256.(2016·全國卷Ⅰ)某一質(zhì)粒載體如圖所示，外源DNA插入Ampr或Tetr中會導(dǎo)致相應(yīng)的基因失活(Ampr表示氨芐青霉素抗性基因，Tetr表示四環(huán)素抗性基因)。有人將此質(zhì)粒載體用BamHⅠ酶切后，與用BamHⅠ酶切獲得的目的基因混合，加入DNA連接酶進行連接反應(yīng)，用得到的混合物直接轉(zhuǎn)化大腸桿菌，結(jié)果大腸桿菌有的未被轉(zhuǎn)化，有的被轉(zhuǎn)化。被轉(zhuǎn)化的大腸桿菌有三種，分別是含有環(huán)狀目的基因、含有質(zhì)粒載體、含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌?；卮鹣铝袉栴}：(1)質(zhì)粒載體作為基因工程的工具，應(yīng)具備的基本條件有____________________________(答出兩點即可)。而作為基因表達載體，除滿足上述基本條件外，還需具有啟動子和終止子。能自我復(fù)制、具有標(biāo)記基因6.(2016·全國卷Ⅰ)某一質(zhì)粒載體如圖所示，外源DNA插26(2)如果用含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基進行篩選，在上述四種大腸桿菌細(xì)胞中，未被轉(zhuǎn)化的和僅含環(huán)狀目的基因的細(xì)胞是不能區(qū)分的，其原因是______________；并且____________和________________________的細(xì)胞也是不能區(qū)分的，其原因是__________________________________。在上述篩選的基礎(chǔ)上，若要篩選含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌單菌落，還需使用含有________________的固體培養(yǎng)基。(3)基因工程中，某些噬菌體經(jīng)改造后可以作為載體，其DNA復(fù)制所需的原料來自____________。二者均不含有氨芐青霉素抗性基因，在該培養(yǎng)基上均不生長含有質(zhì)粒載體含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒二者均含有氨芐青霉素抗性基因，在該培養(yǎng)基上均能生長四環(huán)素受體細(xì)胞（宿主細(xì)胞）(2)如果用含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基進行篩選，在上述四種大腸桿274.(2016·海南高考)基因工程又稱為DNA重組技術(shù)，回答相關(guān)問題：(1)在基因工程中，獲取目的基因主要有兩大途徑，即_______和從________中分離。(2)利用某植物的成熟葉片為材料，同時構(gòu)建cDNA文庫和基因組文庫，兩個文庫相比，cDNA文庫中含有的基因數(shù)目比基因組文庫中的少，其原因是____________________________________________________。(3)在基因表達載體中，啟動子是__________聚合酶識別并結(jié)合的部位。若采用原核生物作為基因表達載體的受體細(xì)胞，最常用的原核生物是____________。(4)將目的基因通過基因槍法導(dǎo)入植物細(xì)胞時，常用的攜帶目的基因的金屬顆粒有________和________顆粒。人工合成生物材料（課本P10）cDNA文庫中只含有葉細(xì)胞已轉(zhuǎn)錄的基因，而基因組文庫中含有該植物的全部基因RNA大腸桿菌金粉鎢粉4.(2016·海南高考)基因工程又稱為DNA重組技術(shù)，回答285.(2016·天津高考)人血清白蛋白(HSA)具有重要的醫(yī)用價值，只能從人血漿中制備。下圖是以基因工程技術(shù)獲取重組HSA(rHSA)的兩條途徑。(1)為獲取HSA基因，首先需采集人的血液，提取_____合成總cDNA，然后以cDNA為模板，采用PCR技術(shù)擴增HSA基因。下圖中箭頭表示一條引物結(jié)合模板的位置及擴增方向，請用箭頭在方框內(nèi)標(biāo)出另一條引物的位置及擴增方向。(2)啟動子通常具有物種及組織特異性，構(gòu)建在水稻胚乳細(xì)胞內(nèi)特異表達rHSA的載體，需要選擇的啟動子是________(填寫字母，單選)。A.人血細(xì)胞啟動子B.水稻胚乳細(xì)胞啟動子C.大腸桿菌啟動子 D.農(nóng)桿菌啟動子mRNAB(3)利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化水稻受體細(xì)胞的過程中，需添加酚類物質(zhì)，其目的是________________。(4)人體合成的初始HSA多肽，需要經(jīng)過膜系統(tǒng)加工形成正確的空間結(jié)構(gòu)才能有活性。與途徑Ⅱ相比，選擇途徑Ⅰ獲取rHSA的優(yōu)勢是_______________。(5)為證明rHSA具有醫(yī)用價值，須確認(rèn)rHSA與________的生物學(xué)功能一致。吸引農(nóng)桿菌移向水稻受體細(xì)胞，有利于目的基因成功轉(zhuǎn)化水稻細(xì)胞能對初始rHSA多肽進行加工，而大腸桿菌是原核生物，沒有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體等，不能對初始rHSA多肽進行加工。天然的HSA5.(2016·天津高考)人血清白蛋白(HSA)具有重要的醫(yī)29《系統(tǒng)》P119《系統(tǒng)》P11930限時訓(xùn)練提升考能限時訓(xùn)練提升考能312.(2015·四川卷，9)將蘇云金桿菌Bt蛋白的基因?qū)朊藁?xì)胞中，可獲得抗棉鈴蟲的轉(zhuǎn)基因棉，其過程如下圖所示：(注：農(nóng)桿菌中Ti質(zhì)粒上只有T-DNA片段能轉(zhuǎn)移到植物細(xì)胞中)。(1)過程①需用同種___________酶對含Bt基因的DNA和Ti質(zhì)粒進行酶切。為將過程②獲得的含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌篩選出來，應(yīng)使用________培養(yǎng)基。(2)過程③中將棉花細(xì)胞與農(nóng)桿菌混合后共同培養(yǎng)，旨在讓________進入棉花細(xì)胞；除盡農(nóng)桿菌后，還須轉(zhuǎn)接到含卡那霉素的培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)，目的是______________________。限制選擇T-DNA篩選出含有目的基因的棉花細(xì)胞(3)若過程④僅獲得大量的根，則應(yīng)在培養(yǎng)基中增加__________________以獲得芽；部分接種在無激素培養(yǎng)基上的芽也能長根，原因是______________________。(4)檢驗轉(zhuǎn)基因棉的抗蟲性狀，常用方法是__________________。種植轉(zhuǎn)基因抗蟲棉能減少________的使用，以減輕環(huán)境污染。細(xì)胞分裂素芽頂端合成的生長素向基部運輸，促進根的分化投放棉鈴蟲農(nóng)藥2.(2015·四川卷，9)將蘇云金桿菌Bt蛋白的基因?qū)朊?.(2015·山東淄博模擬)農(nóng)桿菌侵染植物細(xì)胞后，能將Ti質(zhì)粒上的T-DNA插入到植物基因組中。圖示為利用農(nóng)桿菌培育轉(zhuǎn)基因植物的基本流程，請據(jù)圖作答：(1)剪除Ti質(zhì)粒的某些片段、替換復(fù)制原點O與添加抗生素的抗性基因T的過程①中，需用_______

_處理DNA以防止DNA片段的自身環(huán)化，需用_______

_“縫合”雙鏈DNA片段的平末端。(2)目的基因是指編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因和一些________。由過程②形成的運載體中，目的基因的首端具有________識別和結(jié)合的部位。(3)過程③常用________處理使農(nóng)桿菌成為感受態(tài)細(xì)胞。在過程⑤⑥前，常采用________技術(shù)檢測農(nóng)桿菌和愈傷組織細(xì)胞中是否有目的基因及轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物。(4)過程④需對植物細(xì)胞做沖洗和________處理，然后用_______

_去除細(xì)胞壁。多種限制酶T4DNA連接酶具調(diào)控作用的因子RNA聚合酶Ca2＋分子雜交消毒纖維素酶和果膠酶1.(2015·山東淄博模擬)農(nóng)桿菌侵多種限制酶T4DNA連332.下圖是利用牛乳腺生產(chǎn)人生長激素的流程圖，回答相關(guān)問題(1)圖中B過程需要________酶。③是_______

_。含有啟動子的是________(填“目的基因Ⅰ”或“目的基因Ⅱ”)。(2)大量擴增目的基因可采用的方法是________。(3)④為牛的________，b過程常用的方法為________。圖示過程中，為使人生長激素基因在牛乳腺細(xì)胞中表達，需將該基因與____________等調(diào)控組件重組在一起。(4)檢測人生長激素基因在牛的乳腺細(xì)胞中是否轉(zhuǎn)錄需用____________法。逆轉(zhuǎn)錄cDNA文庫目的基因ⅠPCR技術(shù)受精卵顯微注射法乳腺蛋白基因的啟動子分子雜交2.下圖是利用牛乳腺生產(chǎn)人生長激素的流程圖，回答相關(guān)問題逆轉(zhuǎn)343.(2015·江蘇單科，32節(jié)選)胰島素A、B鏈分別表達法是生產(chǎn)胰島素的方法之一。圖1是該方法所用的基因表達載體，圖2表示利用大腸桿菌作為工程菌生產(chǎn)人胰島素的基本流程(融合蛋白A、B分別表示β-半乳糖苷酶與胰島素A、B鏈融合的蛋白)。請回答下列問題：(1)圖1基因表達載體中沒有標(biāo)注出來的基本結(jié)構(gòu)是______。(2)圖1中啟動子是________酶識別和結(jié)合的部位，有了它才能啟動目的基因的表達；氨芐青霉素抗性基因的作用是______________________________________________。(3)構(gòu)建基因表達載體時必需的工具酶有________。終止子RNA聚合將含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌篩選出來限制酶和DNA連接酶3.(2015·江蘇單科，32節(jié)選)胰島素A、B鏈分別表達法354.(2015·吉林長春調(diào)研)某實驗室通過基因工程成功培育出抗蟲植物，其培育過程大致如圖所示，請據(jù)圖分析回答問題。(1)抗蟲植物的培育過程中，目的基因是____________。目前獲取該基因的常用方法有____________和___________

_兩種。(2)目的基因獲取之后，需要構(gòu)建____________，啟動子是____________識別和結(jié)合的部位，有了它才能驅(qū)動目的基因轉(zhuǎn)錄。(3)圖示將獲取的目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法為________法，通過DNA重組將目的基因插入植物細(xì)胞中________上。目的基因是否成功導(dǎo)入植物細(xì)胞，可以用____________技術(shù)進行檢測。如果操作中將該基因?qū)刖€粒體DNA中，將來產(chǎn)生的配子中________(填“一定”或“不一定”)含有抗蟲基因?？瓜x基因從基因文庫中獲取利用PCR技術(shù)擴增基因表達載體RNA聚合酶農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化染色體DNADNA分子雜交不一定4.(2015·吉林長春調(diào)研)某實驗室通過基因工程成功培育出365.某二倍體植株的株高由等位基因G和g決定，GG為高稈，Gg為中稈，gg為矮稈。B基因是另一種植物的高稈基因，B基因與G基因在決定油菜的株高上有相同的效果，并且株高與這兩種基因的數(shù)量呈正相關(guān)。如圖是培育轉(zhuǎn)基因油菜的操作流程。請回答下列問題：(1)圖中的B基因稱為________，獲取該基因后常用________技術(shù)進行擴增。(2)步驟①中用到的工具酶是_______

_。圖中將重組基因?qū)胧荏w細(xì)胞的方法是_______

_。目的基因能否在受體細(xì)胞中穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵是檢測_________________________。(3)可用含________的培養(yǎng)基來篩選含有目的基因的油菜受體細(xì)胞。圖示培育轉(zhuǎn)基因油菜主要運用了轉(zhuǎn)基因技術(shù)和________技術(shù)。目的基因PCRDNA連接酶農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法目的基因是否成功導(dǎo)入受體細(xì)胞的染色體DNA上草丁膦植物組織培養(yǎng)5.某二倍體植株的株高由等位基因G和g決定，GG為高稈，Gg37[跟進題組]1.(2015·課標(biāo)卷Ⅰ，40)[生物——選修3：現(xiàn)代生物科技專題]HIV屬于逆轉(zhuǎn)錄病毒，是艾滋病的病原體?；卮鹣铝袉栴}：(1)用基因工程方法制備HIV的某蛋白(目的蛋白)時，可先提取HIV中的________，以其作為模板，在________的作用下合成________，獲取該目的蛋白的基因，構(gòu)建重組表達載體，隨后導(dǎo)入受體細(xì)胞。(2)從受體細(xì)胞中分離純化出目的蛋白，該蛋白作為抗原注入機體后，刺激機體產(chǎn)生的可與此蛋白結(jié)合的相應(yīng)分泌蛋白是________，該分泌蛋白可用于檢測受試者血清中的HIV，檢測的原理是________。(3)已知某種菌導(dǎo)致的肺炎在健康人群中罕見，但是在艾滋病患者中卻多發(fā)。引起這種現(xiàn)象的根本原因是HIV主要感染和破壞了患者的部分________細(xì)胞，降低了患者免疫系統(tǒng)的防衛(wèi)功能。(4)人的免疫系統(tǒng)有________癌細(xì)胞的功能。艾滋病患者由于免疫功能缺陷，易發(fā)生惡性腫瘤。RNA逆轉(zhuǎn)錄酶DNA抗體抗原抗體特異性結(jié)合T監(jiān)控和清除[跟進題組]1.(2015·課標(biāo)卷Ⅰ，40)[生物——選修32.(2015·全國卷Ⅱ，40)已知生物體內(nèi)有一種蛋白質(zhì)(P)，該蛋白質(zhì)是一種轉(zhuǎn)運蛋白，由305個氨基酸組成。如果將P分子中158位的絲氨酸變成亮氨酸，240位的谷氨酰胺變成苯丙氨酸，改變后的蛋白質(zhì)(P1)不但保留P的功能，而且具有了酶的催化活性。回答下列問題：(1)從上述資料可知，若要改變蛋白質(zhì)的功能，可以考慮對蛋白質(zhì)的________________進行改造。(2)以P基因序列為基礎(chǔ)，獲得P1基因的途徑有修飾____基因或合成_____基因，所獲得的基因表達時是遵循中心法則的，中心法則的全部內(nèi)容包括___________________的復(fù)制：以及遺傳信息在不同分子之間的流動，即：___________________。(3)蛋白質(zhì)工程也被稱為第二代基因工程，其基本途徑是從預(yù)期蛋白質(zhì)功能出發(fā)，通過____________________________________