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文檔簡介
分子生物學(xué)復(fù)習(xí)框架分子生物學(xué)復(fù)習(xí)框架1緒論DNA作為遺傳物質(zhì)的載體的兩個(gè)經(jīng)典實(shí)驗(yàn):1、美國著名微生物學(xué)家Avery:肺炎雙球菌的轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)2、美國冷泉港卡耐基遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)室科學(xué)家Hershey和他的學(xué)生Chase在1952年做的噬菌體侵染細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)。緒論DNA作為遺傳物質(zhì)的載體的兩個(gè)經(jīng)典實(shí)驗(yàn):2第一章染色體與DNA本章要點(diǎn):1真核生物的基因1)、從結(jié)構(gòu)角度解釋DNA被廣泛作為遺傳信息的承載者的原因2)、真核生物染色體上組蛋白的種類,組蛋白的生物學(xué)特性,組蛋白修飾的種類及其生物學(xué)意義3)、真核生物染色體的裝配過程2原核生物的DNA的基本特征第一章染色體與DNA本章要點(diǎn):33、DNA的復(fù)制1)、復(fù)制的主要方式2)、原核生物DNA聚合反應(yīng)有關(guān)的酶類3、DNA的復(fù)制4(1)DNA聚合酶(DNApolymetases)(2)引物酶(peimase)和引發(fā)體(primosome):啟動(dòng)RNA引物鏈的合成。
(3)DNA連接酶(DNAligase)(4)DNA解鏈酶(DNAhelicase)什么是解旋酶(helicase)?請(qǐng)?jiān)O(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)并畫設(shè)計(jì)圖證明一個(gè)DNA解旋酶是具有3’→5’還是5’→3’解旋活性?(2007年武漢大學(xué)分子生物學(xué)研究生入學(xué)考試簡答題第3題)
(5)單鏈結(jié)合蛋白(single-strandbindingprotein,SSB):結(jié)合在解開的DNA單鏈上,防止重新形成雙螺旋。
(6)拓?fù)洚悩?gòu)酶(topoisomerase):兼具內(nèi)切酶和連接酶活力,能迅速將DNA超螺旋或雙螺旋緊張狀態(tài)變成松馳狀態(tài),便于解鏈。原核生物DNA聚合反應(yīng)有關(guān)的酶類(1)DNA聚合酶(DNApolymetases)原核生物53)、復(fù)制過程1.DNA復(fù)制的起始---形成復(fù)制叉、合成引物2.DNA鏈的延長3.RNA引物的切除和缺口的填補(bǔ)4.DNA片段的連接5.復(fù)制的終止線性DNA的末端復(fù)制問題及解決方法6.端粒的復(fù)制3)、復(fù)制過程1.DNA復(fù)制的起始---形成復(fù)制叉、合成引物6真核和原核DNA細(xì)胞復(fù)制比較細(xì)胞原核細(xì)胞真核細(xì)胞起始位點(diǎn)一個(gè)多個(gè)(多至千個(gè))引物長短50~100個(gè)核苷酸10個(gè)核苷酸岡崎片段長短1000~2000個(gè)核苷酸100~200個(gè)核苷酸RNA引物水解DNA聚合酶Ⅰ核酸酶H修補(bǔ)缺口DNA聚合酶ⅠDNA聚合酶β復(fù)制速度快慢復(fù)制方向雙向?yàn)橹?,也有單向雙向所需酶類DNA聚合酶Ⅰ,Ⅱ,ⅢDNA聚合酶αβγ復(fù)制次數(shù)復(fù)制起點(diǎn)多次發(fā)動(dòng)
只發(fā)動(dòng)一次真核和原核DNA細(xì)胞復(fù)制比較細(xì)胞原核細(xì)胞真核細(xì)胞起始位點(diǎn)一個(gè)74、損傷、突變和修復(fù)1)引起DNA突變的因素、類型和突變的意義A、點(diǎn)突變(pointmutation)轉(zhuǎn)換(transition):發(fā)生在同型堿基之間的置換;顛換(transversion):發(fā)生在異型堿基之間的置換
B、缺失(deletion)和插入(insertion)缺失:一個(gè)堿基或一段核苷酸鏈從DNA大分子上消失插入:
DNA大分子上多了一個(gè)堿基或一段核苷酸鏈4、損傷、突變和修復(fù)1)引起DNA突變的因素、類型和突變的意82)DNA修復(fù)系統(tǒng)DNA修復(fù)系統(tǒng)功能錯(cuò)配修復(fù)恢復(fù)錯(cuò)配堿基切除修復(fù)切除突變的堿基核甘酸切除修復(fù)修復(fù)被破壞的DNADNA直接修復(fù)重組修復(fù)SOS修復(fù)修復(fù)嘧啶二聚體或甲基化DNA對(duì)復(fù)制起始時(shí)未修復(fù)的DNA進(jìn)行修復(fù)應(yīng)急反應(yīng),DNA嚴(yán)重?fù)p傷或復(fù)制系統(tǒng)受抑制時(shí)啟動(dòng)2)DNA修復(fù)系統(tǒng)DNA修復(fù)系統(tǒng)功能錯(cuò)配修復(fù)恢復(fù)錯(cuò)配堿基切除95、轉(zhuǎn)座子的類型、結(jié)構(gòu)特征、作用機(jī)制、遺傳學(xué)意義5、轉(zhuǎn)座子的類型、結(jié)構(gòu)特征、作用機(jī)制、遺傳學(xué)意義10第二章轉(zhuǎn)錄1、轉(zhuǎn)錄和復(fù)制的區(qū)別2、轉(zhuǎn)錄過程1)起始:轉(zhuǎn)錄的起始過程所需酶類:原核生物RNA聚合酶(各亞基功能);真核生物RNA聚合酶Ⅱ轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合物蛋白因子在裝配順序及其作用。原核生物、真核生物啟動(dòng)子的結(jié)構(gòu)第二章轉(zhuǎn)錄1、轉(zhuǎn)錄和復(fù)制的區(qū)別112)延伸:延伸的過程3)終止原核生物終止子的機(jī)構(gòu)、作用方式真核生物的終止模型(魚雷模型、變構(gòu)模型)2)延伸:延伸的過程123、原核生物、真核生物mRNA的特征比較真核生物mRNA的5’端的“帽子”結(jié)構(gòu)的功能和加工過程真核生物mRNA的poly(A)尾部的功能和加工過程3、原核生物、真核生物mRNA的特征比較134、增強(qiáng)子的定義和作用機(jī)制5、真核生物rRNA基因,tRNA基因和mRNA基因的轉(zhuǎn)錄機(jī)制6、內(nèi)含子的剪接、編輯及化學(xué)修飾4、增強(qiáng)子的定義和作用機(jī)制14類型豐度機(jī)制催化機(jī)器細(xì)胞核pre-mRNA很常見,適用于大多數(shù)真核基因兩步轉(zhuǎn)脂反應(yīng),分支點(diǎn)為A主要和次要剪接體II型(GroupⅠ)自剪接內(nèi)含子罕見,見于細(xì)胞器的真核基因和原核基因與pre-mRNA相同內(nèi)含子編碼的核酶I型(GroupⅠ)自剪接內(nèi)含子罕見,見于細(xì)胞核的rRNA,細(xì)胞器的真核基因和原核基因兩步轉(zhuǎn)脂反應(yīng),分支點(diǎn)為G內(nèi)含子編碼的核酶RNA剪接的3種類型類型豐度機(jī)制催化機(jī)器細(xì)胞核pre-mRNA很常見,適用于大多157、RNA的編輯和化學(xué)修飾1)、概念2)、RNA編輯的方式3)、RNA編輯的生物學(xué)意義7、RNA的編輯和化學(xué)修飾16第三章翻譯1、遺傳密碼的破譯方式、生物學(xué)特性2、tRNA的結(jié)構(gòu),功能與種類3、核糖體(原核、真核各自的組成)4、蛋白質(zhì)合成的生物學(xué)機(jī)制氨基酸的活化翻譯的起始肽鏈的延伸肽鏈的終止第三章翻譯1、遺傳密碼的破譯方式、生物學(xué)特性178、蛋白質(zhì)運(yùn)轉(zhuǎn)機(jī)制蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)可分為兩大類:1、翻譯轉(zhuǎn)運(yùn)同步機(jī)制:蛋白質(zhì)的合成和轉(zhuǎn)運(yùn)同時(shí)發(fā)生;2、翻譯后轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制:蛋白質(zhì)從核糖體上釋放后才發(fā)生轉(zhuǎn)運(yùn)。8、蛋白質(zhì)運(yùn)轉(zhuǎn)機(jī)制18第四章
原核基因的表達(dá)與調(diào)控1、乳糖操縱子的結(jié)構(gòu)模型、基本內(nèi)容、調(diào)控方式2、色氨酸操縱子的結(jié)構(gòu)組成、調(diào)控機(jī)制3、轉(zhuǎn)錄后水平上的調(diào)控第四章原核基因的表達(dá)與調(diào)控1、乳糖操縱子的結(jié)構(gòu)模型、基本19第五章真核基因表達(dá)調(diào)控的一般規(guī)律第五章真核基因表達(dá)調(diào)控的一般規(guī)律20第一節(jié)真核生物的基因組一、真核基因組結(jié)構(gòu)特點(diǎn)二、真核細(xì)胞與原核細(xì)胞在基因轉(zhuǎn)錄、翻譯及DNA的空間結(jié)構(gòu)方面存在以下7個(gè)方面的差異三、基本概念1、簡單多基因家族2、復(fù)雜多基因家族3、發(fā)育控制的復(fù)雜多基因家族第一節(jié)真核生物的基因組21●基因丟失基因擴(kuò)增基因重排DNA甲基化狀態(tài)與調(diào)控●●●抗體分子的形成Ti質(zhì)粒轉(zhuǎn)座子第二節(jié)真核生物DNA水平上
的基因表達(dá)調(diào)控●基因丟失基因擴(kuò)增基因重排DNA甲基化狀態(tài)與調(diào)控●●●抗體分22轉(zhuǎn)錄機(jī)器的主要組成1、啟動(dòng)子2、轉(zhuǎn)錄模板3、RNA聚合酶II
4、增強(qiáng)子5、反式作用因子轉(zhuǎn)錄機(jī)器的主要組成1、啟動(dòng)子23DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)錄活化結(jié)構(gòu)域反式作用因子連接區(qū)DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)錄活化結(jié)構(gòu)域反式作用因子連接區(qū)241、DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域:螺旋-轉(zhuǎn)折-螺旋(Helix-turn-helix,H-T-H)鋅指結(jié)構(gòu)(zincfinger)堿性-亮氨酸拉鏈(basic-leucinezipper)堿性-螺旋-環(huán)-螺旋(basic–helix/loop/helix,bHLH)1、DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域:25分子遺傳學(xué)、實(shí)驗(yàn)方法和基因工程部分:轉(zhuǎn)座子的種類、作用機(jī)制DNA聚合酶的類型、作用限制性核酸內(nèi)切酶的類型載體的類型、結(jié)構(gòu)特點(diǎn)和應(yīng)用PCR(注意RT-PCR,熒光定量PCR)DNA文庫、cDNA文庫的構(gòu)建染色體步移(大題或名詞解釋)反向遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)方法(大題或名詞解釋)(從未出現(xiàn))
酵母雙雜交系統(tǒng)基因敲除技術(shù)、雜交技術(shù)分子遺傳學(xué)、實(shí)驗(yàn)方法和基因工程部分:26全書大綜合知識(shí)點(diǎn):1、遺傳信息傳遞準(zhǔn)確性的機(jī)制2、甲基化在遺傳信息傳遞過程中的作用3、RNA的種類、作用4、DNA的損傷和修復(fù)綜合類型全書大綜合知識(shí)點(diǎn):27參與蛋白質(zhì)生物合成體系的組分有哪些?它們具有什么功能?簡述Lac操縱子模型的主要內(nèi)容
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