4種植物精油與丁氟螨酯復(fù)配對朱砂葉螨的增效作用研究

4種植物精油與丁氟螨酯復(fù)配對朱砂葉螨的增效作用研究

曹榮，胡月，田立超(1.重慶市璧山區(qū)園林綠化管理所，重慶402760；2重慶市風(fēng)景園林科學(xué)研究院，重慶401329；3.川渝共建鄉(xiāng)土植物種質(zhì)創(chuàng)新與利用重慶市重點實驗室，重慶401329)1引言植物源殺蟲劑因其高效、低毒、對環(huán)境友好等特點受到普遍關(guān)注，并逐漸成為新型農(nóng)藥研究的熱點之一[1]。其中植物精油是植物在與環(huán)境的長期不斷協(xié)同進(jìn)化中產(chǎn)生的次生代謝物質(zhì)[2]，其可表現(xiàn)出不同的生物活性，如拒食、引誘、驅(qū)避和毒殺作用[3]，此外，植物精油還具有一定的增效活性[4]。如王芳等[5]采用浸蟲法測定d-檸檬烯對吡蟲啉防治枸杞棉蚜的增效作用及其機(jī)制，結(jié)果表明，添加0.1%d-檸檬烯后吡蟲啉對枸杞棉蚜的增效比達(dá)93.11%，提高了藥劑在枸杞葉片上的最大持留量和沉積量。吳華等[6]研究了3種植物精油對草菇害蟲雙額巖小糞蠅的熏殺擊倒及其混配增效作用，在肯定了植物精油熏殺活性的同時，指出月桂烯與α-蒎烯5∶5混配時具有明顯增效作用。但國內(nèi)植物精油增效研究多集中在增效劑或精油之間的復(fù)配，與農(nóng)藥復(fù)配增效研究的相關(guān)報道較少[7]。農(nóng)藥復(fù)配是指將兩種或兩種以上具有不同殺蟲(病)原理的農(nóng)藥，按一定比例混合加工后生產(chǎn)出的新農(nóng)藥品種[8]，常具有增強(qiáng)防治效果、擴(kuò)大防治譜、降低用藥量和生產(chǎn)成本等特點[9]，而生物材料和化學(xué)農(nóng)藥合理復(fù)配既具有化學(xué)農(nóng)藥成本低、防治效果好的優(yōu)點，又具有生物農(nóng)藥環(huán)境相容性好的特點，近年來獲得了較大的發(fā)展[10]。本研究采用共毒因子和共毒系數(shù)的方法，篩選了不同植物精油與丁氟螨酯復(fù)配對朱砂葉螨的增效作用，并獲得優(yōu)選配比。2材料與方法2.1供試材料供試藥劑：95.5%丁氟螨酯原藥(蘇州富美實植物保護(hù)劑公司)；廣藿香精油(100%純精油，產(chǎn)地印度尼西亞)；山雞椒精油(100%純精油，產(chǎn)地中國)；檸檬草精油(100%純精油，產(chǎn)地尼泊爾)；亞洲薄荷精油(100%純精油，產(chǎn)地尼泊爾)；丙酮(重慶化學(xué)試劑有限公司)；吐溫-80(天津市致遠(yuǎn)化學(xué)試劑有限公司)。供試對象：朱砂葉螨(來自西南大學(xué)植保學(xué)院)。2.2試驗方法2.2.1單劑毒力測定首先將供試藥劑用丙酮稀釋成母液，再用0.1%的吐溫-80水溶液按照等比稀釋至5個濃度梯度。選擇生長一致的豇豆葉片剪成長2cm，寬2cm大小，在培養(yǎng)皿內(nèi)放置一塊濕海綿，其上放濾紙，濾紙上放剪好的葉片，選擇室內(nèi)飼養(yǎng)，生理狀態(tài)一致的朱砂葉螨雌成螨于豇豆葉背面上，然后置于Potter噴霧塔下噴霧處理1mL，然后置于恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)，24h后調(diào)查害蟲死亡情況[11]。2.2.2共毒因子測定假設(shè)經(jīng)毒力測定A、B兩單劑的LC50分別為a和b，選擇等效線法中相加作用線的六等分點設(shè)置5個配比，即a/5b、a/2b、a/b、2a/b、5a/b。這5個配比混劑的濃度分別為(a+5b)/6、(a+2b)/3、(a+b)/2、(2a+b)/3、(5a+b)/6，通過共毒因子法評價A+B混劑的增效作用。具體方法為將各單劑配制成LC50濃度藥液，再按體積比1∶5、1∶2、1∶1、2∶1、5∶1混合，用于初步評價4種藥劑按不同比例復(fù)配的聯(lián)合作用。計算公式如下：(1)共毒因子≥20，表示有增效作用；共毒因子≤-20，表示有拮抗作用；-20<共毒因子<20，表示為相加作用[12]。2.2.3共毒系數(shù)測定以共毒因子大于20的配比作參考，再根據(jù)死亡率設(shè)置5個濃度梯度測定其對朱砂葉螨的聯(lián)合毒力，計算LC50及線性回歸方程，根據(jù)共毒系數(shù)法計算共毒系數(shù)值(CTC)，CTC≥120判斷為增效作用；CTC≤80判斷為拮抗作用；80<ctc<120判斷為相加作用[13]。共毒系數(shù)計算公式如下：<p>共毒系數(shù)(CTC)=(2)式(2)中，M為混合藥劑，A、B分別為組成M的各單劑，A、B有效成分百分含量分別為PA、PB。3試驗結(jié)果與分析3.1單劑毒力測定結(jié)果生物測定結(jié)果表明丁氟螨酯對朱砂葉螨具有較高活性，LC50為2.215mg/L，4種植物精油中檸檬草和廣藿香LC50都超過10000mg/L，顯著低于國家農(nóng)藥產(chǎn)品微毒(>5000mg/L)劑量標(biāo)準(zhǔn)，對朱砂葉螨無效；而山雞椒精油和亞洲薄荷精油對朱砂葉螨均具有一定殺蟲活性，LC50分別為分別為772.801和1040.187，相比其他2種精油更適合用于與丁氟螨酯復(fù)配防治朱砂葉螨。表15種供試藥劑對朱砂葉螨雌成螨的毒力3.2共毒因子法定性篩選結(jié)果丁氟螨酯與山雞椒、亞洲薄荷復(fù)配組合如表2所示，由表可知，在試驗的復(fù)配組合中，共毒因子大于20的組合僅有1組，為丁氟螨酯與亞洲薄荷1∶94復(fù)配。丁氟螨酯與山雞椒精油復(fù)配未表現(xiàn)增效作用，且隨著山雞椒精油含量的增加，共毒因子有降低趨勢，當(dāng)復(fù)配比例為1∶700和1∶1750時，表現(xiàn)為拮抗作用。丁氟螨酯與亞洲薄荷精油復(fù)配增效也隨著亞洲薄荷精油含量的增加而降低，當(dāng)丁氟螨酯與亞洲薄荷精油為1∶2353時具有拮抗作用。表2各復(fù)配組合對朱砂葉螨共毒因子測定3.3共毒系數(shù)法定量篩選結(jié)果在共毒因子法測定結(jié)果的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步通過共毒系數(shù)法測定不同配比組合的增效作用。由共毒系數(shù)法定量篩選的結(jié)果可知，在所設(shè)配比中，丁氟螨酯與山雞椒復(fù)配時，5個配比的共毒系數(shù)在80～120，表現(xiàn)為相加作用；丁氟螨酯與亞洲薄荷1∶90復(fù)配時共毒系數(shù)大于120，表現(xiàn)為增效作用，配比1∶50、1∶350、1∶500表現(xiàn)為相加作用，配比1∶250表現(xiàn)為拮抗作用，與共毒因子法試驗結(jié)果基本一致。因此可明確丁氟螨酯與亞洲薄荷1∶90復(fù)配時具有增效作用。表3各復(fù)配組合不同配比對朱砂葉螨的共毒系數(shù)測定4結(jié)論與討論朱砂葉螨是一種極易產(chǎn)生抗藥性的重點害蟲[14]，長期單一使用化學(xué)農(nóng)藥，可致使藥效降低，增大用藥量，則會造成環(huán)境污染[15]，因此針對朱砂葉螨開展復(fù)配藥劑開發(fā)研究具有重要意義。本文通過共毒因子法與共毒系數(shù)法，開展了植物精油與丁氟螨酯復(fù)配增效研究，結(jié)果表明：丁氟螨酯與亞洲薄荷精油1∶90復(fù)配時共毒系數(shù)最大，具有增效作用。丁氟螨酯屬新型殺螨劑，具有持