獸醫(yī)傳染病概述

第八章兔、犬、貓和貂的傳染病第一節(jié)病毒性傳染病一、概述本節(jié)介紹的兔、犬、貓等小動物的病毒性傳染病共17種，涉及9個病毒科，即痘病毒（兔黏液瘤?。⑾俨《荆ㄈ《拘愿窝祝?、皰疹病毒（犬皰疹病毒感染、貓傳染性鼻氣管炎）、反轉錄病毒（貓白血病和貓艾滋?。?、呼腸孤病毒（貓呼腸孤病毒感染）、冠狀病毒（犬冠狀病毒感染和貓傳染性腹膜炎）、杯狀病毒（兔病毒性出血癥、貓杯狀病毒感染）、副黏病毒（犬瘟熱、犬副黏病毒感染）、細小病毒（犬細小病毒感染、貓泛白細胞減少癥、貂病毒性腸炎、貂阿留申病）。其中較重要的有兔黏液瘤病、兔病毒性出血癥、犬瘟熱、犬病毒性肝炎、犬細小病毒感染、貂病毒性腸炎、貂阿留申病。這些病大多發(fā)病率和病死率都較高，好在目前這些病大多都有疫苗可用。二、兔黏液瘤病兔黏液瘤?。╮abbitmyxonlatosis）是由黏液瘤病毒引起兔的一種高度接觸傳染性疫病，其典型特征為全身皮膚，尤其是面部和天然孔周圍皮膚發(fā)生黏液瘤樣腫脹。因切開黏液瘤會流出黏液蛋白樣滲出物而得名。本病有極高病死率，常給養(yǎng)兔業(yè)造成毀滅性損失。兔黏液瘤病是一種自然疫源性疾病，最早在1896年發(fā)現(xiàn)于烏拉圭，隨后不久即傳到巴西、阿根廷、哥倫比亞和巴拿馬等國家，至今這些國家仍然有散發(fā)病例。此后，該病傳人歐美多國，到目前為止已發(fā)生過本病的至少有56個國家和地區(qū)，其中以捷克和澳大利亞最為嚴重?！静≡筐ひ毫霾《荆∕yxomavirus）是痘病毒科（Poxviridae）、兔痘病毒屬（Leporipoxvirus）的成員。病毒粒子呈卵圓形或橢圓形，大小為230?280nmX75nm。病毒DNA約為160kb。負染檢查，病毒粒子表面呈串珠狀，由線狀或管狀不規(guī)則排列的物質和含有密集電子的中心體構成。本病毒只有一個血清型，但不同毒株的毒力和抗原性存在很大差異，弱毒株引起的死亡率低于30%，強毒株引起的死亡率高于90%，這種毒力的差異可能是病毒基因組大小不同造成的。強毒株如Larsanne株的DNA為163kb，并具有約10kh的末端重復序列（TIR），而弱毒株尤其是疫苗株可缺失多于10kb的DNA。在已鑒定的毒株中，以南美毒株和美國加州毒株具有代表性。本病毒易在10?12日齡的雞胚絨毛尿囊膜上生長繁殖，并形成痘斑。南美毒株產生的痘斑大，加州毒株產生的痘斑小，黏液瘤病毒不產生或產生的痘斑很小。病毒還可在雞胚成纖維細胞、兔-腎細胞和睪丸細胞及人羊膜細胞上繁殖，產生典型的細胞病變，即形成胞質包涵體和合胞體。本病毒存在于病兔全身體液和臟器中，尤以眼垢和病變部皮膚滲出物中含量最高。病毒對理化因素的抵抗力較其他大多數痘病毒低。對熱敏感，26~30℃時能存活10d，56℃經20min或50℃經1h以上即被滅活；對乙醚敏感；不耐pH4.6以下的酸性環(huán)境；能抵抗去氧膽酸鹽和胰蛋白酶。在干燥的黏液瘤結節(jié)中可保持毒力3周之久；8?10℃可保持毒力達3個月以上；如置50%0甘油鹽水中，則可長期保持其活力。對石炭酸、硼酸、升汞和高錳酸鉀有較強的抵抗力，但用0.5%?2%福爾馬林處理1h則很快死亡。【流行病學】本病只侵害家兔和野兔，其他動物不易感。家兔和歐洲野兔最為易感，可引起全身嚴重性、病死率很高的疾病，棉尾兔和田兔有抵抗力，北美野兔僅引起局部良性纖維瘤。據觀察，1月齡以上幼兔較成年兔有抵抗力。病兔和帶毒兔是傳染源，與病兔或帶毒兔的直接接觸，或通過污染物的間接接觸而發(fā)生傳染。在自然界中主要是通過吸血昆蟲機械傳播，蚊子、兔蚤、刺蠅、蜱和螨等昆蟲，或許還有禿鷹和烏鴉等鳥類可傳播病毒。止匕外，可經呼吸道飛沫傳播。本病呈季節(jié)性發(fā)生，每年8?10月.在蚊子大量滋生季節(jié)，是發(fā)病高峰季節(jié).尤其是低洼潮濕地帶發(fā)病最多。冬季蚤類是主要的傳播媒介。黏液瘤病毒在兔、蚤體內能存活105d以上，在蚊體內可越冬。本病還有周期性趨向，每8?10年流行一次?！九R床癥狀】潛伏期4?11d,平均約5d。由于毒株間毒力差異以及兔的不同品種、品系間對病毒的易感性不同，所以臨床癥狀比較復雜。用南美強毒株感染時，3?4d即可看到最早的腫瘤，但要6?7d才出現(xiàn)全身性腫瘤。病兔發(fā)熱、不愿活動，眼瞼、鼻、唇和耳水腫，兩眼充血、流淚，眼鼻分泌物先是乳白色呈黏性，以后發(fā)展為膿性，病兔呼吸困難、噴鼻，頭部廣泛性腫脹，呈“獅子頭”狀。肛門、母兔陰唇、公兔陰囊處顯著水腫。隨后身體多處皮下出血.出現(xiàn)腫塊。初期硬而凸起.進而充血、破潰，流出淡黃色的漿液，病兔直到死前不久仍保持食欲。病程一般8?15d,死前出現(xiàn)驚厥。毒力較強的歐洲毒株感染時，病兔全身各部都可出現(xiàn)腫瘤，但耳部較少見到，10d后腫瘤破潰，流出漿液性液體。顏面明顯水腫，頭呈“獅子頭”外觀。眼鼻流出漿液性或膿性分泌物。病死率100%。加州毒株感染后6?7d,病兔眼瞼、肛門、外生殖器及日鼻周圍發(fā)生炎性水腫。9?10d時，皮膚出血，伴有壞死。病兔腫瘤癥狀不明顯。病死率90%以上，死前也常有驚厥。毒力較弱的南美毒株或澳大利亞毒株感染時，病兔僅表現(xiàn)輕度水腫，有少量鼻液和眼垢及界限明顯的結節(jié)，病死率低。自然致弱的歐洲毒株，所致疾病比較輕微，腫塊扁平，病死率較低。近年來，該病常表現(xiàn)為呼吸型。潛伏期長達20~28d,經接觸性傳染，無媒介昆蟲參與，一年四季都可發(fā)生。表現(xiàn)初期為卡他性繼而膿性的鼻炎和結膜炎，皮膚損傷輕微，僅在耳部和外生殖器的皮膚上見有炎癥斑點，少數病例的背部皮膚有散在性腫瘤結節(jié)?！静±碜兓孔铒@著的肉眼可見病理變化是皮膚腫瘤結節(jié)（加州毒株所致的黏液瘤外）、皮膚和皮下組織水腫，尤其是顏面和身體天然孔周圍的皮下組織充血、水腫，皮下黃色膠凍狀液體聚集。心內外膜和胃腸漿膜下可見淤血和出血點，內臟器官廣泛出血，有時淋巴結和肺水腫或出血，脾腫大。皮膚腫瘤切片檢查，可見許多大型的星狀細胞（未分化的間質細胞）、上皮細胞腫脹和空泡化，同時有炎性細胞浸潤。在上皮細胞胞質內有嗜酸性包涵體。包涵體內有藍染的球菌樣小顆粒，即原生小體。【診斷】根據本病的特征性臨床癥狀和病理變化，結合流行病學資料可做出初步診斷。對新疫區(qū)或弱毒株所致的非典型病例或因兔群抵抗力較高，臨床癥狀和病理變化不明顯時，則診斷較為困難。確診需進行以下實驗室檢查。.組織病理學診斷采取病變組織，用10%中性甲醛溶液固定，石蠟包埋后切片，HE染色，顯微鏡檢查。在黏液瘤細胞及病變部皮膚上皮細胞內可見有胞質內包涵體。.病毒分離無菌采取病變組織，用磷酸鹽緩沖液清洗，按1：5?1：10研磨制成勻漿，反復凍融3次或以超聲波裂解細胞，釋放出病毒粒子或病毒抗原，懸液經1500r/min離心10min,上清液接種兔腎原代細胞、雞胚成纖維細胞或RK13傳代細胞單層，24?48h后出現(xiàn)典型的瘤病毒細胞病變（細胞融合形成合胞體，細胞核發(fā)生變化，細胞質包涵體）。感染細胞變圓、萎縮和核濃縮，細胞單層溶解脫壁。也可將病料接種11?13日齡雞胚絨毛尿囊膜孵育4?6d,觀察絨毛尿囊膜上病毒產生的灶性痘斑?；蛉⌒迈r病料磨碎后經皮下接種幼齡易感兔，2?5d內接種部位出現(xiàn)病損，并可用血清學方法檢查存活的兔。.瓊脂擴散試驗1%瓊脂糖磷酸鹽緩沖液高壓溶解后制成瓊脂板，打直徑5mm的小孔,分別在小孔內加入標準陽性血清和接種細胞用的被檢病料抗原。如在12?24h內出現(xiàn)2?3條沉淀線。表明有黏液瘤病毒抗原存在。此法準確率極高，適用于臨床診斷和口岸檢疫。.血清學診斷在感染后8?13d兔體內可產生病毒抗體，抗體效價在20?60d時最高，在6?8個月后消失?？刹捎铆傊瑪U散試驗、ELISA、dot—ELISA、間接熒光抗體技術、補體結合試驗、血清中和試驗等血清學方法進行檢測。.鑒別診斷主要應與兔纖維瘤病相區(qū)別，后者用瓊脂擴散試驗檢查時僅出現(xiàn)1條沉淀線。將前述病料人工接種易感兔，產生高度致死性疾病的是黏液瘤病，兔纖維瘤病僅在局部發(fā)生纖維瘤。電鏡檢查有病變部位的滲出物或涂片，觀察病毒特征性形態(tài)，可與痘病毒相區(qū)別?！痉揽亍磕壳?，我國尚無此病的發(fā)生，因此應嚴防傳人。嚴禁從有本病的國家或地區(qū)進口兔及其產品。毗鄰國家流行本病時，應封鎖國境。引進兔種及兔產品時，應嚴格口岸檢疫。新引進兔必須在防昆蟲動物房內隔離飼養(yǎng)14d,檢疫合格者方可混群飼養(yǎng)。做好兔場清潔衛(wèi)生工作，采取殺滅吸血昆蟲的措施，防止吸血昆蟲叮咬。嚴防野兔進入飼養(yǎng)場。一旦發(fā)生本病，應立即采取撲殺措施，并進行徹底消毒。本病目前無特效的治療方法，預防主要依靠疫苗接種。國外使用的疫苗有Shope纖維瘤病毒疫苗或加州I及法國生產的弱毒疫苗，3周齡以上的兔接種，4?7d產生免疫力，免疫保護期5年，免疫保護率90%以上。近年來推薦使用的MSD/S株和Mml6005株疫苗，均安全可靠，免疫效果更好。三、兔病毒性出血癥兔病毒性出血癥(rabbitheorrhagicdisease,RHD)又名兔出血性肺炎、兔出血癥、兔瘟，是由兔出血癥病毒引起的一種急性、敗血性的高度接觸性傳染病。以呼吸系統(tǒng)出血，實質器官水腫、淤血、出血和肝臟壞死為特征。該病潛伏期短、發(fā)病急、病程短、傳播快，發(fā)病率及病死率極高，對易感兔致病率可達90%,病死率可達lOO%。該病常呈暴發(fā)性流行，是兔的一種毀滅性傳染病，可給養(yǎng)兔業(yè)造成極大經濟損失，已成為危害養(yǎng)兔業(yè)最嚴重的一種疾病。本病于1984年初首先在我國江蘇無錫等地暴發(fā)，隨即蔓延到全國多數地區(qū)。此后，世界上許多國家和地區(qū)也報道了本病，迄今朝鮮、韓國、意大利、法國、德國、捷克、美國及新西蘭等國家均有本病的流行。歐洲對兔病毒性出血癥的病毒學和血清學回顧性調查發(fā)現(xiàn)1982年保存的病料中含有RHDV相關的病毒，且早于中國首次發(fā)生12?13年之前的兔血清樣品RHD抗體也呈陽性，表明該病在歐洲的兔群中已經存在了多年，因此該病實際上起源于歐洲?！静≡客贸鲅Y病毒(Rabbithemorrhagicdiseasevirus,RHDV)屬于嵌杯病毒科(Caliciviridae)、兔病毒屬(Lagovirus)。病毒粒子呈球形，直徑32?36nm,為二十面體對稱結構，無囊膜，表面有短的纖突。RHDV基因組為單股正鏈RNA,全長7437個核苷酸?；蚪M含有兩個開放閱讀框架(ORF),3'端的ORF編碼VPl0,含量較低。功能尚不明確。5'末端的ORF編碼一個2344氨基酸的多聚蛋白前體，該前體被病毒蛋白酶進一步分解為衣殼蛋白和非結構蛋白，其中衣殼蛋白VP60為RHDV唯一的結構蛋白。與誘導抗病毒感染的免疫反應直接相關。除基因組RNA外，在病毒顆粒和感染的組織中，還含有2.4kb的亞基因組RNA,也編碼衣殼蛋白VP60。從不同地區(qū)分離出的RHDV的基因組序列大致相同，說明病毒未發(fā)生大的變異。本病毒對綿羊、雞、鵝和人O型紅細胞有凝集作用。本病毒不能適應細胞培養(yǎng)或雞胚培養(yǎng)。曾試用乳兔肝、肺、睪丸、腎等原代細胞和腎傳代細胞，IBRS—2、PK—15、MA104、Vero、Hela等傳代細胞系及兔肺二倍體細胞株進行增殖，但均未獲得適應，不能穩(wěn)定傳代。但可以在乳鼠體內生長繁殖，引起規(guī)律性發(fā)病和死亡.因此可以利用乳鼠進行種毒保存。病毒在病兔肝組織中滴度最高，其次是脾、腎、肺等組織。本病毒對乙醚、氯仿等有抵抗力，能耐pH3和50℃40min處理；感染家兔的血液在4℃經9個月，感染的臟器在20℃經3個月仍保持活性，含毒的肝臟一20℃經560d或室外污染環(huán)境經135d仍保持有致病性。對紫外線、日光、熱敏感。常用消毒劑需作用足夠的時間，如1%氫氧化鈉需4h.1%?2%的甲醛、l%漂白粉需3h,2%農樂需1h才能殺滅病毒?！玖餍胁W】本病僅發(fā)生于兔，長毛兔尤為敏感，年齡上差異很大.主要發(fā)生于3月齡以上的青年兔或成年兔.2月齡以下仔兔，尤其吮乳兔多具有抵抗力，極少發(fā)病或不發(fā)病。病兔與帶毒兔為傳染源，其分泌物、排泄物均可帶毒，可通過直接接觸或間接接觸方式傳播。皮下注射、肌肉注射、靜脈注射、滴鼻和口服等途徑人工感染均可引起發(fā)病，一般認為該病主要經消化道、呼吸道、皮膚等途徑感染；蚊、蠅也可起到機械性傳播的作用，但尚無由昆蟲、嚙齒動物或經胎盤垂直傳播的證據。在人工接種牛和豬方面.未檢出抗體；在牛、羊、豚鼠、犬、貓、鴨、鴿、相思鳥等能測出特異性抗體；在倉鼠、大鼠和小鼠雖無明顯癥狀，但都不同程度地有與兔相似的組織病理學變化，這些動物可能成為隱性帶毒者。本病全年均可發(fā)生，但以氣溫較低的秋冬、春季更為多見，夏秋溫暖季節(jié)較少發(fā)生。購進新兔、配種、剪毛，兔毛及兔皮的購銷等，都可促進本病的發(fā)生和流行。病原一旦侵入易感兔群，常呈暴發(fā)性流行，來勢兇猛，幾天之內青壯年及成年兔90%以上發(fā)病和死亡，發(fā)病率可達100%,病死率達90%。但免疫兔群如有發(fā)生，多為散發(fā)或慢性型，特點是病程明顯延長。自然康復兔及人工感染耐過兔，能產生堅強的免疫力?！九R床癥狀】潛伏期短.自然感染多為1?2d,人工感染時則僅需12~72h。根據其病程、臨床表現(xiàn)可分為三型。?最急性型多見于新疫區(qū)或流行初期，常無任何前驅臨床癥狀而突然發(fā)病死亡，死前抽搐慘叫四肢呈劃水狀，可視黏膜發(fā)紺，死后呈角弓反張姿勢，天然孔流出泡沫狀血樣液體。病程10h以內。?急性型多見于流行中期，體溫升高至41℃或更高，稽留數小時至24h后下降。病兔精神沉郁，被毛粗亂，伏臥籠內，食欲減退甚至廢絕，渴欲增加，呼吸困難，迅速消瘦。瀕死時也常見有神經癥狀，如興奮、四肢強直、啃咬籠架、掙扎犴奔或劇烈地翻轉，最后抽搐、痙攣、尖叫而死，少數兔死前肛門松弛，被毛有黃色黏液污染。病程1?2d。死后呈角弓反張.鼻孔流出泡沫性液體。.慢性型（溫和型）多見于老疫區(qū)、流行后期或幼齡兔。病兔體溫升高到41℃左右，精神沉郁、食欲不振，從鼻孔流出黏性或膿性分泌物，被毛雜亂無光.迅速消瘦、衰弱而死，多數有流涎。個別兔前肢向兩側伸開，頭抵籠底，有時拱背或癱瘓，5?6d后衰竭死亡。有的可耐過，但生長發(fā)育不良，仍帶毒成為傳染源?！静±碜兓勘静∫詫嵸|器官淤血、出血為主要特征。肝、脾、腎等器官淤血、腫大，鼻腔、喉頭、氣管黏膜淤血及出血十分明顯，有“紅氣管”之稱；典型病例均可在氣管內發(fā)現(xiàn)多量血色泡沫液體。肺臟高度淤血、水腫.有散在出血點或彌漫性出血斑，具有特征性。肝臟淤血、腫大、質脆，呈土黃色，肝小葉問質增寬，表面有淡黃色或灰白色條紋與壞死灶，有散在出m點，切面粗糙；膽囊腫大，充滿膽汁。脾淤血腫大，邊緣鈍圓，呈藍紫色。腎臟也見淤血、腫大，暗紅色，表面有散在針頭大小出血點或灰白色或灰黃色壞死區(qū)。膀胱翠辱，充滿黃褐色尿液。心包出血、積水，心肌松弛，心內、外膜有散在出血點。胃內充滿拿糜，胃腸黏膜脫落，并有散在出血點和淤血塊，腸系膜淋巴結腫大，部分腸腔內充滿淡黃色膠樣液體。胸腺水腫。母兔子宮多見出血?！驹\斷】根據本病的流行病學特點、臨床表現(xiàn)及典型病理變化，可以做出初步診斷，確診應進行實驗室診斷。L微生物學檢驗用無菌方法采集心血涂片鏡檢，采取肝、脾做觸片鏡檢。或將病料接種于血液瓊脂和肉湯培養(yǎng)基，37℃培養(yǎng)24h，如未發(fā)現(xiàn)有細菌生長，可排除細菌性疾病。.血凝與血凝抑制試驗(HA和HI)無菌采取病兔的肝，剪碎后加生理鹽水制成1：10(m/V)懸浮液，凍融3次，3000r/min離心30min，取上清液做血凝試驗。把待檢的上清液連續(xù)作2倍稀釋，然后加入1%人0型紅細胞，在22~25℃作用lh后觀察結果。以出現(xiàn)完全凝集的抗原最大稀釋度為該抗原的血凝滴度，血凝滴度大于i：160判定為陽性。如果血凝試驗陽性并能被已知陽性血清抑制，即可確診。血凝抑制試驗多用于本病的流行病學調查和疫苗免疫效果的檢測。.其他血清學試驗包括瓊脂擴散試驗(AGP)、酶標抗體技術、間接熒光抗體技術、玻片免疫酶染色試驗、免疫印跡法、斑點El。ISA(dot-ELISA)、兔體血清中和保護試驗等.可根據實際條件有選擇地采用。.分子生物學技術近年來，RT-PCR、實時熒光定量PCR已用于可疑病料中病原的快速檢測，后者還能對病料中的病毒進行定量。.鑒別診斷主要應與兔巴氏桿菌病區(qū)別，可取病死兔的心血或肝臟、肺臟等病料作涂片，染色、鏡檢；或用病料進行細菌分離鑒定，或接種小鼠，即可做出鑒別。【防控】本病發(fā)病急、傳播迅速、流行面廣，又無特效治療方法，因此重在預防。平時堅持自繁自養(yǎng)，加強飼養(yǎng)管理，重視飼養(yǎng)質量，平衡飼草料營養(yǎng)水平，在日糧中適量增加維生素A、維生素B12、維生素C、維生素E。注意避免過大的溫、濕度差，增強機體抵抗力。強化獸醫(yī)衛(wèi)生防疫制度，搞好環(huán)境衛(wèi)生，做好兔舍、兔籠、用具及周圍環(huán)境的定期消毒工作，每周至少對兔舍、兔籠及周圍環(huán)境消毒一次。從無疫區(qū)購買種兔及產品，引進種兔時應進行嚴格檢疫與隔離觀察，及時注射兔瘟滅活苗。引進后隔離觀察至少15d確認無病時方可混群。禁止外人進入兔房。兔群定期注射兔瘟疫苗、兔瘟和巴氏桿菌二聯(lián)菌或兔瘟、產氣莢膜梭菌病和巴氏桿菌病三聯(lián)苗(兔三聯(lián)苗)，肌肉注射lmL/只，5?7d后產生堅強的免疫力，免疫期可達6個月：實際生產中首免最好是用兔瘟單苗，聯(lián)苗作為加強免疫用時。一般情況下仔兔20~25日齡后，母源抗體已接近臨界值，加之本病流行有趨幼齡化傾向，故在25日齡接種兔瘟滅活苗比較合適，60日齡進行二免。國外在新型疫苗的研究也有新的探索，例如用表達RHDV衣殼蛋白的重組兔黏液瘤病毒及用桿狀病毒、酵母系統(tǒng)表達的衣殼蛋白VP60等作為免疫原。此外，還利用兔腸內發(fā)現(xiàn)的一種與RHDV抗原相關但無致病性的兔杯狀病毒，使兔獲得抗RHD的抵抗力。一旦發(fā)生兔瘟，要停止兔及兔毛交易。及時隔離病兔，封鎖疫點，重病兔淘汰，病死兔應焚燒或深埋，不得取皮或食用。嚴格消毒污染的環(huán)境。對未發(fā)病的兔可全群進行緊急預防接種，以減輕損失、控制疫情。對病兔可疑兔立即注射兔瘟高免血清。對所有存欄兔用板藍根注射液2mL、鹽酸嗎啉胍注射液1?2mL混合肌肉注射，每天一次.連用3d。水槽和料槽等用0.1%新潔爾滅浸泡、刷洗，金屬籠具可用火焰噴燈徹底消毒，兔舍可用百毒殺帶兔消毒，環(huán)境、地面、籠具、用具等用1%氫氧化鈉、5%?10%漂白粉、20%石灰乳、抗毒威等消毒劑進行徹底消毒。兔毛和兔皮可用福爾馬林熏蒸消毒或0.3%過氧乙酸噴霧消毒。四、犬瘟熱犬瘟熱（caninedisease,CD）是由犬瘟熱病毒引起犬科、鼬科和部分浣熊科動物的急性、熱性、高度接觸性傳染病。其主要特征為雙相熱，眼、鼻、消化道等處黏膜炎癥，以及卡他性肺炎、皮膚濕疹和神經癥狀。1905年Carre首次發(fā)現(xiàn)CDV，故本病也曾稱為Carre病。先后在銀黑狐、貉、紫貂、北極狐等動物中發(fā)現(xiàn)和確診病例。我國從1972年起陸續(xù)在水貂、狐、貉等毛皮動物中發(fā)生犬瘟熱。國內的熊貓、東北虎、獅子、猞猁、熊、狼、藏獒等動物均有感染CDV的報道?！静≡咳翢岵《荆–aninedistempervirus，CDV）屬于副黏病毒科（Paramyxoviridae）、麻疹病毒屬（Morbillivirus）。病毒基因組為不分節(jié)段的負鏈RNA，病毒粒子呈圓形或不規(guī)則形，有時也呈長絲狀，直徑為120?300nm，其中心含有寬徑15?17nm的螺旋形核衣殼。病毒顆粒主要是由核衣殼蛋白（N或NP）、磷蛋白（P）、基質膜蛋白（M）、融合蛋白（F）、血凝蛋白（H或HA）和大蛋白組成。CDV與麻疹病毒、牛瘟病毒在抗原性上密切相關，但各自具有完全不同的宿主特異性。CDV能適應多種細胞培養(yǎng)物，包括原代或繼代犬腎細胞、雪貂腎細胞、犢牛腎細胞、雞胚成纖維細胞、Vero細胞等，但毒株之間有差異，其中Vero細胞最常用。分離培養(yǎng)時需要在細胞培養(yǎng)液中加入適量胰酶，并在細胞傳代的同時接毒。在犬腎細胞上，CDV產生的細胞病變包括細胞顆粒變性和空泡形成，形成巨細胞和合胞體，并在胞質中（偶爾在核內）出現(xiàn)包涵體。CDV抵抗力不強，對熱、干燥、紫外線和有機溶劑敏感，易被日光、酒精、乙醚、甲醛和來蘇兒等殺滅。50?60℃經30min可被滅活。3%福爾馬林、5%石炭酸及3%氫氧化鈉等對病毒具有良好的殺滅作用。經0.1%甲醛滅活后，仍能保留其抗原性。最適生長pH為7.0，在pH4.5?9.0條件下可存活。在一70℃可存活數年，凍干可長期保存?！玖餍胁W】在自然條件下，犬瘟熱可感染犬科（犬、澳洲野狗、狐貍、郊狼、豺、狼）、浣熊科（浣熊、長吻浣熊、熊貓）和鼬科（鼬鼠、雪貂、水貂、獾臭鼬、水獺等）的多種動物，在貓科動物（如獅、虎、豹）中也出現(xiàn)過感染。此外，海獅和猴也能自然感染。目前，犬瘟熱的宿主范圍在不斷地擴大。病犬是最主要的傳染源，患病的毛皮動物也具有傳染性。病毒集中存在于感染或患病動物的唾液以及其他分泌物中。病犬的血液、淋巴結、肝脾、腹水、腦脊液等也含有病毒。水貂和犬養(yǎng)殖場也可能存儲病毒。此病主要通過消化道和呼吸道進行傳播，也可通過眼結膜和胎盤感染。污染的飼料、飲水、墊草、食具、用具，飼養(yǎng)人員的工作服、手套，獸醫(yī)人員的體溫計、注射器及注射針頭等，均有傳播作用。飼養(yǎng)場內的禽類、野鼠、家鼠及吸血昆蟲也可起傳播作用。據丹麥報道，風亦是傳播本病的主要媒介，借助風力可使半徑100m內的鄰近飼養(yǎng)場內的動物發(fā)病。本病多發(fā)生于寒冷季節(jié)（每年10月到翌年的2月），但其他季節(jié)也可發(fā)生。犬最易感，毛皮動物中，貉易感性最高，一般先發(fā)病，然后是狐和水貂。毛皮動物流行季節(jié)主要集中在8?11月，呈散發(fā)、地方流行性或暴發(fā)。犬瘟熱病毒除了在同類物種之間傳播，還在不同群體、不同物種之間交叉?zhèn)鞑?，還可能跨國界傳播?！局虏C制】自然感染時主要通過呼吸道上皮和飛沫傳播。病毒主要從鼻、咽進入，在淋巴結和扁桃體中增殖，繼而在組織巨噬細胞中增殖，然后進入血液形成病毒血癥，并擴散到全身淋巴器官、骨髓及肝、脾，從而表現(xiàn)出一定的臨床癥狀。人工感染后24h，病毒在組織巨噬細胞內倍增，之后從這些局限性淋巴細胞向扁桃體和支氣管淋巴結傳播。接種后2?4d,病毒主要出現(xiàn)于扁桃體、咽喉和支氣管淋巴結內。接種后4?6d,病毒在脾臟、胃黏膜固有層、小腸、腸系膜淋巴結、肝枯否細胞的淋巴小結增殖，此時機體開始出現(xiàn)體溫升高和白細胞減少。這是由于病毒對淋巴細胞，包括T細胞和B細胞的大量破壞，引起淋巴細胞減少。在接種后8?9d,病毒進一步傳播到上皮細胞和中樞神經系統(tǒng)的組織中，引起血液傳播。在接種后14d,動物依賴CDV特異性抗體和細胞介導的細胞毒性反應能清除絕大部分組織中的病毒，此時臨床癥狀消失，但仍可能向外排毒。【臨床癥狀】潛伏期為3?6doCDV主要侵害易感犬的呼吸系統(tǒng)、消化系統(tǒng)以及神經系統(tǒng)。.犬如果病毒侵害呼吸系統(tǒng)為主，病犬初期表現(xiàn)為體溫升高，并呈雙相熱，鼻端干燥，鼻、眼流漿液性至膿性液體，咳嗽，呼吸加快，肺部聽診有啰音等肺炎呼吸道癥狀（此時易被誤診為感冒或肺炎）。病犬眼瞼腫脹，呈化膿性結膜炎。后期?？砂l(fā)生角膜潰瘍；有的病犬下腹部和股內側皮膚上有米粒大紅點、水腫和化膿性丘疹。如果病毒侵害消化系統(tǒng)為主，則表現(xiàn)不同程度的嘔吐，初便秘，不久腹瀉，糞便惡臭，有時混有血液和氣泡。幼犬在腹瀉嚴重的情況下，往往會繼發(fā)腸套疊，少數病例此時死亡。如果病毒侵人神經系統(tǒng)，10%?30%的病犬出現(xiàn)神經癥狀，由于侵害部位不同，臨床癥狀有所差異，表現(xiàn)好動和精神異常、癲癇、轉圈（大腦受害）；步態(tài)及站立姿勢異常（延髓和中、小腦受害）；共濟失調和反射異常（脊髓受害）；感覺過敏和頸部強直（腦膜受害）。常見癥狀是咀嚼肌群反復出現(xiàn)陣發(fā)性顫動，終因麻痹衰竭而死亡。這三種癥狀往往多數病例都有，隨著病情的發(fā)展，呼吸系統(tǒng)癥狀、消化系統(tǒng)癥狀和神經系統(tǒng)癥狀先后出現(xiàn)，據此也可以簡單的視作為病程的前、中、后期。病死率可高達30%?80%o其中神經癥狀是不可逆的，即使病愈，也會留下麻痹、癱瘓等后遺癥。皮膚癥狀較少見，偶爾在皮膚少毛處出現(xiàn)米粒至豆粒大小的痘樣疹，水皰樣至化膿性，少數病例腳墊的表皮過度增生、角化。妊娠犬感染CDV后可出現(xiàn)流產、產死胎和弱仔等癥狀。幼犬經胎盤感染后可在28?42d產生神經癥狀。新生幼犬在永久齒長出之前感染CDV,可造成牙釉質的嚴重損傷，牙齒生長不規(guī)則。人工感染小于7日齡的幼犬時還可表現(xiàn)心肌病，雙目失明。.水貂按病程可分為急性型和慢性型兩類。急性型發(fā)病突然，無任何前驅癥狀。病貂表現(xiàn)癲癇樣發(fā)作，口咬籠網，發(fā)出刺耳的尖叫聲，抽搐、口吐白沫，反復發(fā)作幾次后死亡。慢性型表現(xiàn)為食欲減退或拒食，鼻鏡干燥。眼部出現(xiàn)漿液性、黏液性乃至化膿性眼眵，病重者將眼糊死，時而睜開，時而又粘在一起，如此反復交替發(fā)生。體溫高達40?41℃,呈現(xiàn)雙相熱。病初糞便正常，或排出黏液性稀便，后期糞便呈黃褐色或煤焦油樣。病貂爪趾（指）間皮膚潮紅，隨病程發(fā)展趾（指）爪、足墊出現(xiàn)水腫，有的病貂口腔、眼瞼、肛門或外陰腫脹。獅、虎、豹等野生大型貓科動物發(fā)生犬瘟熱時，最初癥狀為食欲喪失，并發(fā)生消化道和呼吸道癥狀，病理剖檢變化與犬相同。【病理變化】本病是一種泛嗜性感染，病變分布廣泛。病理變化隨病程長短、臨床病型和繼發(fā)感染的不同而異。單純感染的病犬，早期僅見胸腺萎縮與膠樣浸潤，脾臟、扁桃體等臟器中的淋巴細胞減少。繼發(fā)細菌感染的病犬，則可見化膿性鼻炎、結膜炎、支氣管肺炎或化膿性肺炎。消化道則可見卡他性乃至出血性腸炎。死于神經癥狀的病犬，眼觀僅見腦膜充血、腦室擴張及腦脊液增多等非特異性腦炎變化。對病犬進行組織學檢查可以發(fā)現(xiàn)，在很多組織細胞中有嗜酸性的核內和胞質內包涵體，呈圓形或橢圓形，直徑1?2肛m。胞質內包涵體主要見于泌尿道、膀胱、呼吸系統(tǒng)、膽管、大小腸黏膜上皮細胞以及腎上腺髓質、淋巴結、扁桃體和脾臟的某些細胞中。核內包涵體主要見于膀胱細胞，但一般難查到。表現(xiàn)神經癥狀的病犬，可見有腦血管袖套，非化膿性軟腦膜炎以及白質出現(xiàn)空泡，浦肯野細胞變性以及小腦神經膠質瘤病?！驹\斷】根據流行病學特點和臨床癥狀，可以做出初步診斷，確診需要實驗室檢查。.包涵體檢查包涵體檢查是診斷犬瘟熱的重要輔助方法。包涵體主要存在于膀胱黏膜、支氣管上皮細胞和腎盂上皮細胞內，且多數在細胞質內，1個細胞可能有l(wèi)?10個，呈圓形或橢圓形。首選材料是靠近肺門部的支氣管組織，膀胱黏膜也是必采的病料。.電鏡及免疫電鏡檢查這是檢查CDV感染簡便快速的方法，常采用磷鎢酸（PTA）負染色法、液相免疫電鏡和超薄切片法制備電鏡樣品。電鏡觀察的最佳材料是糞便，從制樣到。電鏡觀察，整個過程只需要2?3h,可用于病毒粒子的快速檢查。.病毒分離培養(yǎng)CDV是具有囊膜的病毒，結構較脆，易被光和熱滅活，對環(huán)境的抵抗力非常弱，因此病毒的分離成功率很低。病毒分離率受病料采樣部位和時間、樣品的處理、病程類型、患病動物的抗體水平等因素的影響。.動物回歸試驗雪貂最易感，病死率接近100%,任何途徑接種后均可在8?14d內死亡?；蛘哌x用斷乳15d后的幼犬，皮下、肌肉或腹腔注射10倍稀釋的病料懸液3?5mL。也可在雞胚、小鼠、倉鼠中適應生長，但敏感性較低。.血清學診斷瓊脂擴散試驗、協(xié)同凝集試驗、EUSA、免疫過氧化物酶染色法和抗體中和試驗等血清學方法均可用于病原鑒定或抗體檢測。.分子生物學診斷國內外均建立了RT-PCR用于檢測臨床疑似病例的血清、全血、腦脊液樣品中的犬瘟熱病毒基因，顯現(xiàn)出高度的特異性和敏感性。【防控】目前尚無特效藥物治療方法。平時應嚴格做好獸醫(yī)衛(wèi)生防疫措施，加強免疫注射，發(fā)現(xiàn)疫情應立即隔離病犬，深埋或焚毀病死犬尸，用3%福爾馬林、3%氫氧化鈉或5%石炭酸等對污染的環(huán)境、用具等徹底消毒。對未出現(xiàn)癥狀的同群犬和其他受威脅的易感犬進行緊急免疫接種。病犬及早應用單克隆抗體或高免血清（皮下或肌肉注射，每千克體重1?3mL）、免疫球蛋白，結合使用免疫增強劑、抗菌藥物、皮質激素類藥物、維生素和對癥支持療法（如輸液、輸血、脫敏、退熱、鎮(zhèn)靜、止痛、收斂及循環(huán)興奮劑等）進行治療，配合良好的護理，對早期病犬可獲一定的療效。預防犬瘟熱的有效方法是給犬接種疫苗。犬用的疫苗有甲醛滅活疫苗、雪貂傳代的減毒活疫苗、用不同組合方式制成的多價苗和麻疹疫苗。我國目前使用的疫苗有單價苗（雞胚細胞弱毒凍干苗）、三聯(lián)苗（犬瘟熱、犬傳染性肝炎和犬細小病毒?。⑽迓?lián)苗（犬瘟熱、犬傳染性肝炎、犬細小病毒性腸炎、犬副流感和狂犬病）以及麻疹苗等多種疫苗。幼犬的免疫效果與其母源抗體水平關系很大。當血液中中和抗體滴度下降到1：20以下時較為易感，1：100以上則不易感。因此血液中抗體效價1：100以下是免疫接種的指示滴度。在疫區(qū)，缺乏初乳的犬，首免可提前到4?6周齡，一般母犬抗體效價不明的幼犬初免為9周齡，二免15周齡，以后每年加強免疫一次。母犬配種前免疫接種，妊娠犬一般不進行免疫接種。在毛皮動物中，犬瘟熱弱毒活疫苗一般于接種后7?15d產生抗體，30d后免疫陽性率達到90%?100%。皮下注射的劑量為：狐、貉3mI。，仔狐、仔貉2mL,貂1mL。妊娠獸亦可接種，無不良后果。麻疹弱毒疫苗對8周齡以上的幼犬免疫效力好，注射后8h即產生保護力，保持免疫保護力達8月之久。所以在疫區(qū)對剛斷乳的易感犬，先注射2?3份的人用麻疹弱毒凍干苗，半個月后再以2?3周的間隔注射2?3次犬瘟熱弱毒疫苗，可獲較好的免疫效果。水貂發(fā)病時，取病死水貂腦、淋巴結等組織按1：10（m/V）比例制成組織滅活苗，對貂群免疫接種。或對發(fā)病貂及假定健康貂群用抗犬瘟熱血清進行緊急注射，隔天連用2?3次。同時發(fā)病貂用卡那霉素、利巴韋林等進行輔助治療，連續(xù)使用3?5d,防止繼發(fā)感染。成犬接種犬瘟熱弱毒疫苗時偶有發(fā)生接種性腦炎，母犬分娩后3d注射疫苗時易使其仔犬發(fā)生腦炎，應予以注意。近年來，國內外開展了對該病基因工程重組活疫苗和亞單位疫苗的研究，并證明其有免疫保護作用。五、犬傳染性肝炎犬傳染性肝炎(infectiouscaninehepatitis，ICH)又稱為犬病毒性肝炎(canineviralhepatitis，CVH)，是由犬腺病毒引起的一種高度接觸性傳染病，其特征為肝小葉中心壞死，肝實質和內皮細胞出現(xiàn)核內包涵體，特別是幼犬，感染發(fā)病率很高，給養(yǎng)犬業(yè)造成了巨大的損失本病最早于1947年由Rubarth發(fā)現(xiàn)，所以也稱為Rubarth病。1954年由Cabasso等首次從患犬體內成功分離到該病毒。該病廣泛分布于世界各地，發(fā)病率達40%?70%,病死率10%?40%,是養(yǎng)犬業(yè)和養(yǎng)狐業(yè)危害嚴重的疾病之一。1983年我國發(fā)現(xiàn)此?。幌南讨扔?984年首次分離到犬傳染性肝炎病毒(A8301)；1989年，鐘志宏等從患腦炎的狐貍中分離到了犬腺病毒I型，即狐貍腦炎病毒。隨后，哈爾濱、北京、上海、昆明等地也相繼分離【病原】犬腺病毒(Canineadenovirus,CAV)又稱為犬傳染性肝炎病毒(Infectiouscaninehepatitisvirus),屬于腺病毒科(Adenoviridae)、哺乳動物腺病毒屬(Mastadenovirus)。病毒基因組為線狀雙股DNA。病毒粒子直徑為70~80nm,無囊膜，呈二十面立體對稱。犬腺病毒可分為I型和^型，I型￡八丫一I)引起犬傳染性肝炎和狐貍腦炎，還可引起呼吸道病、眼病、慢性肝炎和間質性腎炎；II型3丫-II,代表株TorontoA26/6l株)只引起呼吸器官疾病，包括喉氣管炎、扁桃體炎、支氣管炎和支氣管性肺炎。CAV-I在4℃pH5?8.0時能凝集雞的紅細胞，在pH6.5?7.5時能凝集人o型紅細胞、豚鼠紅細胞和雞紅細胞，這種血凝作用能被特異性抗血清所抑制。利用這種特性可進行血凝抑制實驗。CAV一II僅能凝集人。型紅細胞。兩者血細胞凝集范圍不同，據此可以加以區(qū)分。本病毒易在犬腎細胞和睪丸細胞內增殖，也可在豬、豚鼠和水貂等動物的肺和腎細胞中增值，并出現(xiàn)CPE,主要特征是細胞腫脹變圓、聚集成葡萄串樣，也可產生直徑l?3|Jm的蝕斑。感染細胞內常有核內包涵體，但不產生干擾素，核內病毒粒子呈晶格狀排列。已感染犬瘟熱病毒的細胞，仍可感染和增值本病毒。本病毒的抵抗力強大，對乙醚和氯仿有抵抗力；在pH3?9均可存活，最適pH6.0?8.5。在室溫下能抵抗75%乙醇達24h；在0.2%石炭酸中可存活數天。病犬肝、血清和尿液中的病毒在20℃下可存活3d,在污染物上能存活10~14d。在37℃可存活2?9d,在室溫下能存活70?91d,在4℃可存活270d。低溫條件下在50%甘油中可保存數年，凍干可長期保存【流行病學】CAV-I除能感染狐和犬外，還能感染狼、貉、山犬、黑熊、負鼠和臭鼬。Shortidge等人通過血清學調查認為馬、兔、松鼠、刺猬和黑猩猩也是犬腺病毒的易感動物。本病毒能實驗感染豚鼠，也能使大熊貓發(fā)生感染。人群中抗體陽性率很高(35%),獸醫(yī)人員更高(49%),而且也能檢出補體結合反應抗原，但不表現(xiàn)任何臨床癥狀，由此可見人也能隱性感染。不同品種和年齡的犬均易感，自然發(fā)病僅見于1歲內未進行免疫的犬，且病死率高于其他年齡的犬。本病無明顯季節(jié)性。病犬和帶毒犬是本病的主要傳染源。病犬在發(fā)病初期，血液含毒較多。隨后病毒見于所有分泌物和排泄物中，嚴重污染環(huán)境?？祻腿I臟中持續(xù)帶毒，可經尿排毒達6?9個月，成為重要傳染源。本病主要通過消化道感染，也可經胎盤感染，造成新生幼犬死亡。呼吸型犬傳染性肝炎也可能經飛沫通過呼吸道傳播。外部寄生蟲可能也是本病的傳播媒介?！局虏C制】自然發(fā)病主要經消化道感染。病毒通過扁桃體和小腸上皮經由淋巴和血液而廣泛散播。肝實質和多種組織器官的血管內皮細胞是病毒定位和損害的主要靶細胞。肝臟是受損害的首要部位，常發(fā)生變性、壞死等退行性變化或慢性肝炎變化。病毒可在腎臟長期存在，開始局限于腎小球血管內皮細胞，導致蛋白尿，隨后出現(xiàn)在腎小管上皮細胞，引起局灶性問質性腎炎。在疾病的急性發(fā)熱期，病毒可侵人眼而引起虹膜睫狀體炎和角膜水腫?！九R床癥狀】根據臨床癥狀可分為三型，即犬肝炎型、犬呼吸型和狐腦炎型，其中以犬肝炎型分布最廣。.犬肝炎型又稱為古典型，由CAV?I引起，潛伏期6?9d。病犬體溫升高至40?41℃,持續(xù)1d,又降至常溫，持續(xù)1d,再次升高，呈雙相熱型。心跳加強，呼吸加快；步樣不靈活，無力，弓背；腹部有壓痛，食欲不振，口渴，腹瀉，嘔吐；眼瞼、頭、頸及腹部皮下發(fā)生水腫；扁桃體腫大，黏膜潮紅；齒齦、口腔有點狀出血。常有蛋白尿。白細胞數減少到健康時的1/2?2/3,血液凝固時問延長。一般不發(fā)生神經癥狀，也很少出現(xiàn)黃疸。病程較犬瘟熱短，多在感染后2?12d死亡或康復，幼犬若能耐過48h則多能康復。成年犬多能耐過。在恢復期，病犬往往見角膜渾濁（眼色素層炎），1?2d內可迅速發(fā)現(xiàn)白色乃至藍白色的角膜翳（稱為肝炎性藍眼），持續(xù)2?3d,不經治療即可逐漸恢復.不留任何痕跡。耐過犬可產生堅強免疫力。.犬呼吸型主要由CAV一II引起，在美國和加拿大多見。潛伏期5?6d,發(fā)熱持續(xù)1?3d。發(fā)生粗厲干咳，持續(xù)1周左右，嚴重的發(fā)生致死性肺炎。病犬表現(xiàn)精神委頓、食欲減退，呼吸困難，肌肉震顫，流漿液性或黏膿性鼻液。有些病例發(fā)生嘔吐，糞便變軟帶黏液。.狐腦炎型主要見于狐貍和黑熊等野生動物，潛伏期6?7d,常突然發(fā)病，病程一般不超過24h,在出現(xiàn)食欲喪失后很快死亡。有時可見發(fā)熱、眼球震顫、流鼻液和腹瀉。神經癥狀包括過度興奮、痙攣、共濟失調、麻痹、癱瘓和昏迷。發(fā)病率5%,病死率幾乎100%。每年可反復發(fā)生，造成嚴重經濟損失。【病理變化】.犬肝炎型急性死亡病例，可見腹腔內有血樣腹水，遇空氣則凝固。肝腫大.包膜緊張，肝小葉清晰，實質呈黃褐色，并雜有多數暗紅色斑點。膽囊壁由于高度水腫而顯著肥厚，腸系膜有纖維蛋白滲出物，并可見體表淋巴結、頸淋巴結和腸系膜淋巴結腫大、出血。脾腫大，胸腺點狀出血。組織病理變化主要是肝實質呈現(xiàn)不同程度的變性、壞死，竇狀隙內皮細胞核內有富爾根（Feulgen）反應陽性小體.是核內包涵體，每個核內只有1個。有包涵體的核，核膜肥厚、濃染，包涵體和核膜之間存在狹小的輪狀透明帶。其他臟器細胞核內也有包涵體。.犬呼吸型剖檢病變主要局限于呼吸道，肺充血和膨脹不全，并常有實變病灶。肺淋巴結和支氣管淋巴結充血或出血。鏡檢病變?yōu)椴煌潭鹊姆窝鬃兓?，支氣管黏膜上皮、肺泡上皮和鼻甲骨黏膜上皮見有CowdryA型核內包涵體。.狐腦炎型剖檢見全身各組織、器官，尤其是腦和脊髓均有出血性變化。鏡檢見全身內皮細胞，尤其是血管內皮受損嚴重，主要表現(xiàn)內皮變性、壞死和出血，腦脊髓和軟腦膜血管呈袖套現(xiàn)象。在各器官的內皮細胞特別是血管內皮、腦膜和肝細胞內也可發(fā)現(xiàn)核內包涵體。本型病例神經癥狀的明顯程度與腦血管受損輕重呈正相關?！驹\斷】根據流行病學、臨床表現(xiàn)和病理變化特點，可做出初步診斷，但確診有賴于病毒分離和血清學檢查。.病毒分離和鑒定可采取發(fā)熱期的血液和尿液，扁桃體拭子或死亡動物的肝、脾等材料，處理后接種犬腎原代細胞或繼代細胞，細胞病變最早出現(xiàn)于接毒后30h,但有時需6?7do應用中和試驗，可進一步鑒定病毒的型。.病毒抗原的檢查應用補體結合試驗，可檢出急性病犬肝臟、血清、腹水及細胞培養(yǎng)物中的病毒抗原。對于病死動物，可用瓊脂擴散試驗檢查感染組織塊（一般使用肝組織塊）中的特異性沉淀原。應用熒光抗體技術，可以直接檢測扁桃體涂片，以提供早期診斷。還可用電鏡直接檢查病犬肝臟中的典型腺病毒粒子。.血清學檢查采取發(fā)病初期和其后14d的雙份血清，進行人0型紅細胞凝集抑制試驗，當抗體升高4倍以上時即可作為現(xiàn)癥感染的證明。此外，上述補體結合試驗、瓊脂擴散試驗、中和試驗及皮內變態(tài)反應等亦可用于診斷。.PCR通過選擇基因序列的保守區(qū)(如六鄰粒蛋白基因)設計出能對所有腺病毒進行特異性擴增的引物，可以區(qū)分CAV—I、CAV—II及其他病毒。.鑒別診斷本病的犬肝炎型早期臨床癥狀與犬瘟熱、鉤端螺旋體病相類似，且有時混合感染，應注意區(qū)別?！痉揽亍勘静o特異性療法，一般采用補液、保肝、輸血、輸液、注射葡萄糖、投給蛋氨酸、膽堿、膽汁酸鹽等對癥療法，以抗生素預防繼發(fā)感染。在發(fā)病早期，可用高免血清皮下或肌肉注射或用免疫犬全血、血球蛋白靜脈滴注，有較好的療效。對CAV一II引起的呼吸道感染的治療同犬副流感，抗生素可選用林可霉素、先鋒霉素、泰妙菌素或利高霉素等。人工接種疫苗是預防本病的根本方法。我國當前使用的是犬傳染性肝炎與犬瘟熱、狂犬病、犬細小病毒性腸炎、副流感的五聯(lián)苗。幼犬于6?8周齡時進行初次免疫，10?12周齡時進行第二次免疫，13?15周齡時進行第三次免疫。成年犬每年免疫一次，即可達到有效的免疫目的。六、犬細小病毒病犬細小病毒病(canineparvovirusdisease)是犬細小病毒(CPV)引起犬的一種高度接觸性傳染病。對幼犬危害較大，發(fā)病率和病死率較高。本病可分為腸炎型和心肌炎型，腸炎型以劇烈嘔吐、小腸出血性壞死性炎和白細胞顯著減少為特征，心肌炎型則表現(xiàn)為急性非化膿性心肌炎。1977年，Eugster和Naira在美國通過電鏡在出血性腹瀉犬的糞便中首先發(fā)現(xiàn)了細小病毒粒子。1978年，McCandlish首次應用犬腎細胞從患有腸炎的病犬中分離出細小病毒?，F(xiàn)在世界各地都有本病暴發(fā)的報道，給養(yǎng)犬業(yè)造成極大威脅，是危害犬群的最主要傳染病之一。我國于1982年首次分離出犬細小病毒，隨后本病在東北、華北和西南等地區(qū)的警犬和良種犬中陸續(xù)發(fā)生和報道?！静≡咳毿〔《?Canineparvovirus,CPV)屬于細小病毒科(Parvoviridae)、細小病毒屬(Parvovirus)。CPV粒子呈圓形或六邊形，直徑為21?24nm。二十面體對稱，由32個長為3?4nm的殼粒組成，無囊膜。病毒基因組為單股線狀DNA,全長5323bp,含有兩個開放閱讀框(ORF),分別編碼結構蛋白VPl、VP2和非結構蛋白NSl、NS2?？找職さ鞍字兄缓蠽Pl、VP2兩種蛋白，在衣殼裝配和病毒基因組包裝之后的完整的病毒粒子中還含有VP3多肽。犬細小病毒具有2個型：CPV-1和CPV-2。CPV-1在宿主細胞范圍、特異性凝集紅細胞、基因特征和抗原性等方面與PcV-2有顯著的區(qū)別。cPV-1與cPV-2是不同的病毒，用幾種限制性內切酶分析兩者的DNA證明它們沒有同源性。CPV-2可引起高接觸性并常常是致死性的疾病，該病毒不斷分化、變異，可分為CPV-2a、cPV-2b、CPV-2c3個亞型，目前多數地區(qū)以CPV-2a和CPV-2b為主要流行株。CPV具有較強的血凝活性，在4℃條件下可凝集豬和恒河猴的紅細胞。因此，血凝和血凝抑制試驗常用于犬細小病毒鑒定和血清學分析。CPV在抗原性上與貓泛白細胞減少癥病毒(FPV)和水貂腸炎病毒(MEV)密切相關。與多數細小病毒不同，CPV可在多種細胞培養(yǎng)物中生長，如原代貓?zhí)ツI、肺細胞，原代犬胎腸細胞、CRFK細胞、MDCK細胞以及F81細胞增殖，以F81和MDCK等傳代細胞常用于CPV分離培養(yǎng)。細小病毒的DNA復制發(fā)生在細胞核內，其復制過程出現(xiàn)于細胞周期的S期。所以當體外進行該病毒培養(yǎng)傳代時，必須同步接種到細胞傳代培養(yǎng)物，這樣才能達到使病毒增殖的目的。CPV對多種外界理化因素有較強的抵抗力。在pH為3~11范圍內穩(wěn)定。能耐受65℃加熱30min而不喪失感染性，低溫長期存放對其感染性無明顯影響?？稍跓o生命物體如衣物、食盤、籠子的地板上存活5個月乃至更久，在糞便中可存活數月乃至數年。對乙醚、醇類、氯仿、去氧膽酸鹽有抵抗力。甲醛、羥胺、氧化劑和紫外線均可將其滅活?！玖餍胁W】犬是主要的自然宿主，也有浣熊、貂、貉、狐、狼和鬣狗等感染發(fā)病的報道。豚鼠、倉鼠、小鼠等實驗動物也可感染。人工感染可致水貂和貓發(fā)病。CPV-2的3個亞型均可感染貓，從日本、德國和美國貓細小病毒感染病例中的分離成功率可達10%?20%。CPV主要感染犬，不同年齡、性別、品種的犬均可以感染，但以6周至6月齡的幼犬較多發(fā)，病情也更為嚴重。引起犬全身性和腸道感染。斷乳前后的仔犬易感性最高，往往以同窩暴發(fā)為特征。3~4周齡犬感染后呈急性致死性心肌炎的為多；8?10周齡的犬則以腸炎為主。小于4周齡的仔犬和大于5歲齡的老犬發(fā)病率較低（分別為2%和16%）。純種犬比雜種犬和土犬易感性高。病犬和帶毒犬是傳染源，在CPV-2感染3?4d后開始，即在臨床癥狀出現(xiàn)之前就可排毒.病犬可通過糞便、尿、唾液和嘔吐物排毒。在7?10dCPV在糞便中的排毒量達到最大，傳染性最強。發(fā)病急性期，嘔吐物和唾液中也含有病毒。9?14d后排毒量趨于減少，但傳染性可持續(xù)30d到8個月。發(fā)生過病毒血癥的康復犬仍可通過糞尿向外長期排毒。康復后的病犬往往是被人們忽視的傳染源，無癥狀的帶毒犬也是重要的傳染源。有證據表明人、虱、蠅、蚊和蟑螂可成為CPV的機械攜帶者。需要強調的是，CPV可以由犬傳染給貓，而貓感染后很少出現(xiàn)臨床疾病，因此貓作為傳染源和環(huán)境污染源的作用不可輕視。在自然條件下，消化道是主要的感染途徑，經胎盤垂直感染也有可能。一年四季均可發(fā)病，但以冬春和冬季多發(fā)。另外，群居犬比家庭寵物犬多發(fā)。在新疫區(qū)可導致暴發(fā)性流行，病死率較高。飼養(yǎng)管理條件驟變、衛(wèi)生不良、長途運輸、寒冷、擁擠均可促使本病發(fā)生?！局虏C制】關于犬細小病毒的致病機制目前尚不清楚，一般認為CPV對快速分裂的細胞有嗜性，哺乳幼犬心肌迅速生長，而腸上皮很少更新，因此CPV感染可導致心肌炎；但有學者認為心肌細胞在幼犬出生后是不分裂的，心肌中的衛(wèi)星細胞對CPV的復制可提供DNA功能的需要。犬細小病毒主要通過消化道感染。病毒首先在口咽、局部淋巴組織（如扁桃體），然后在胸腺和腸系膜淋巴結復制，并通過病毒血癥散播到小腸的隱窩。感染后1?5d即可出現(xiàn)病毒血癥。CPV-2主要集中在口腔和食管的黏膜上皮，小腸的淋巴組織以及胸腺、淋巴結和骨髓。有時可以從肺臟、脾臟、肝臟、腎臟和心肌中分離到病毒。血清抗體效價最早可于感染后3?4d就檢測到，并且至少可以維持1年。正常情況下，犬細小病毒在腸道內可殺死腸腺上皮細胞，使上皮脫落、絨毛變短，導致出血性、壞死性腸炎，臨床上表現(xiàn)嘔吐和腹瀉。嚴重感染的病例，通常會發(fā)生嗜中性粒細胞減少癥和淋巴細胞減少癥。繼發(fā)革蘭陰性和需氧兼厭氧的細菌感染會引起與腸損傷、菌血癥、內毒素血癥以及彌散性血管內凝血相關的綜合性癥狀。【臨床癥狀】CPV感染在臨床上表現(xiàn)各異，單純細小病毒感染臨床癥狀較輕，多數病例是由于細菌、寄生蟲混合感染或繼發(fā)感染而出現(xiàn)明顯癥狀。本病在臨床上分為兩個型，即腸炎型和心肌炎型，多數呈現(xiàn)腸炎綜合征，少數為心肌炎綜合征。個別病例也兼有兩種臨床癥狀。有時某些腸炎型病例也伴有心肌炎變化。有些不表現(xiàn)臨床癥狀。.腸炎型潛伏期自然感染的為7?14d，人工感染的4?5d。多見于青年犬。CPV-2型腸炎的病程迅速。尤其是感染CPV-2新的毒株。病初精神沉郁，食欲廢絕，體溫升到40℃以上。嚴重嘔吐，初期嘔吐物為食物，隨后伴有黏液或血液。接著出現(xiàn)腹瀉，并迅速出現(xiàn)脫水。糞便先為黃色或灰黃色，覆以多量黏液、偽膜和血液，接著呈番茄汁樣，具有難聞的腥臭味。同時排便次數明顯增多。排尿量減少，呈茶色。血液濃稠，血清總蛋白減少，但氨基轉移酶指數上升，白細胞減少癥具有特征性，尤其在病初的4?5d內，減少顯著，為50()?2000個mm3,并出現(xiàn)大量的異型淋巴細胞，呈典型的病毒感染血象(正常犬血液中白細胞數為6000?17000個/mm3),有一定的參考意義。對于腸道出血嚴重的病例，由于腸內容物腐敗可造成內毒素中毒和彌散性血管內凝血，加之病犬反復嘔吐，迅速脫水、休克，出現(xiàn)心音減弱，呼吸困難，可視黏膜蒼白，體溫降至常溫以下，急性衰竭而死。病程短的2?5do長的1月以上，病死率達40%?50%。有些病犬只表現(xiàn)問歇性腹瀉或僅排軟便。較小的幼齡犬不會出現(xiàn)嘔吐，但其病死率很高。成年病犬一般不發(fā)熱，病情較輕且治愈率高。.心肌炎型多見于8周齡以下、剛斷乳的幼犬，常突然發(fā)病.數小時內死亡。通常同窩的幼犬都可感染。在腸炎型中可能突然發(fā)生心力衰竭而沒有任何先兆。感染犬精神、食欲正常，偶見嘔吐，或有輕度腹瀉和體溫升高，或有呼吸困難，持續(xù)20?30min。脈快而弱，可視黏膜蒼白。聽診心律不齊。心電圖R波降低，S-T波升高。常因急性心力衰竭而死亡。血液生化檢查，天門冬氨酸氨基轉移酶、乳酸脫氫酶、肌酸激酶活性增高。病死率60~100%,只有極少數輕癥病例可以治愈?！静±碜兓?腸炎型眼球下陷?腹部蜷縮，極度消瘦脫水，肛門周圍黏附血樣稀便。血液黏稠呈暗紫色。病理變化主要見于空腸、回腸，腸腔大多無食糜，部分犬十二指腸內含少量黃綠色半透明黏液或黏液與食糜的混合物。腸壁增厚，黏膜水腫。腸黏膜呈黃白色或紅黃色，彌漫性或局灶性充血，有的呈斑點狀或彌漫性出血。腸絨毛明顯萎縮，黏膜上被覆稀薄或黏稠的黏液。集合淋巴小結腫脹、凸出。小腸、結腸腸系膜淋巴結腫脹、充血、出血。大多數病犬的盲腸、結腸、直腸黏膜腫脹，呈黃白色。結腸和直腸內容物稀軟，醬油色，腥臭或惡臭。有的結腸和直腸黏膜表面散在針尖大出血點。.心肌炎型病變主要局限于心臟和肺。心臟擴張，心房和心室內有淤血塊。心房、心室有界限不明顯的蒼白區(qū)，心肌上有灰色條紋。心肌和心內膜有非化膿性心肌炎，在心肌內有多灶性淋巴細胞和血細胞浸潤并有壞死灶。心肌纖維嚴重損傷，出現(xiàn)出血性斑紋。心肌損傷部位的細胞內常見核內包涵體。肺水腫，由于局灶性充血、出血，致使肺表面色彩斑駁?！驹\斷】根據流行特點，結合臨床癥狀和病理變化可以做出初步診斷，確診需要進行實驗室檢查。.病料處理取病犬糞液或瀕死期撲殺犬的腸內容物，分為兩份：一份負染后直接用電鏡檢查，在疾病初期可見到大量大小均一的直徑20~24nm的圓形病毒粒子；疾病后期由于腸黏膜分泌性抗體的出現(xiàn)，?？梢姷酱髩K聚集狀態(tài)的病毒粒子。另一份加高濃度抗生素除菌，或加適量氯仿于4c過夜處理，離心后用于病毒分離。經氯仿處理的糞便標本還可直接做紅細胞凝集試驗。.病毒分離將病毒處理后接種MDCK細胞或F81細胞，分離病毒，觀察細胞病變及核內包涵體。注意在含毒樣品中加入胰蛋白酶消化的新鮮細胞培養(yǎng)液進行同步培養(yǎng)。如果沒有明顯細胞病變，應繼續(xù)盲傳2代才能做出結論。通?？刹捎脽晒饪贵w技術或血凝試驗鑒定新分離的病毒。.血凝試驗利用犬細小病毒能凝集豬紅細胞的特性，常用微量血凝試驗和血凝抑制試驗快速檢測糞便中的CPV和細胞培養(yǎng)物中的病毒。以0.5%?1%豬紅細胞作為指示系統(tǒng)，HA效價＞1：80可作為陽性感染的標準。血凝抑制試驗還可用于流行病學調查和抗體檢測。當發(fā)病初期與發(fā)病后期血清抗體效價相差4個滴度，則有診斷意義。.ELISA有間接法、競爭法和雙夾心法等，我國軍事醫(yī)學科學院已研制成功犬細小病毒病快速診斷試劑盒。它是采用單抗和多抗雙夾心酶標法，以單克隆與多克隆抗體相結合，可在30min內定性檢出犬糞便中的CPV，達到快速診斷的目的。其他的血清學診斷方法如熒光抗體技術、對流免疫電泳、中和試驗等也可用于本病的診斷。.PCR目前已研制出犬細小病毒PCR診斷試劑盒，通過特異性引物設計，可以區(qū)分CPV弱毒疫苗株和野毒株，還可區(qū)別出CPV―2a和CPV一2b等不同亞型。.鑒別診斷本病應注意與犬瘟熱、犬病毒性肝炎以及冠狀病毒感染相區(qū)別。特別是發(fā)病初期該病易與犬瘟熱混淆，因此臨床上必須結合腹瀉特征、嘔吐特點進行鑒別診斷，避免造成誤診。犬細小病毒感染的犬其嘔吐物為黃色泡狀液體，排泄物為番茄醬樣稀糞，病犬食欲廢絕，腹部有壓痛，鼻鏡干燥、流清涕，結膜淡紅或蒼白，體溫一般正常，肺部無明顯變化，無神經癥狀；患犬瘟熱的犬嘔吐物為膽汁狀液體，排黏液樣便，腋下有膿皰狀丘疹.流膿性鼻液，結膜暗紅有膿性分泌物，體溫升高、稽留，肺部剖檢有明顯病變，伴有震顫、抽搐、癲癇、痙攣等明顯的神經癥狀。【防控】.治療心肌炎型大多預后不良，只要出現(xiàn)心電圖變化都難免死亡。發(fā)現(xiàn)腸炎型病例應立即隔離飼養(yǎng)，加強護理，采用對癥療法、支持療法(如補液以防止酸中毒)和防止繼發(fā)感染等治療措施，可較快解除臨床癥狀和縮短病程，降低病死率。在實行強心、補液、抗菌、消炎、抗休克等綜合療法的同時，應注意病初應禁食1?2d；恢復期應控制飲食，給予易消化的食物，并少量多餐，嚴格限制病犬攝取難以消化的肉、蛋、奶等食物，多喝糖水或清潔飲水，逐漸恢復正常飲食。同時，也要注意保暖。污染的犬舍需用2%?4%的NaOH溶液或10%?20%漂白粉溶液，反復消毒、徹底消毒并空欄1個月后，方可啟用。.預防主要依靠疫苗注射和嚴格的檢疫制度。目前國內使用的疫苗有同源和異源滅活疫苗及弱毒疫苗兩類。異源苗是指貓泛白細胞減少癥滅活疫苗或弱毒疫苗，安全可靠，曾在法國和澳大利亞等國家廣泛使用過?，F(xiàn)在國外多傾向于使用同源苗，即犬細小病毒滅活疫苗或弱毒疫苗。國內也有多家單位生產單價疫苗、二聯(lián)苗(犬細小病毒病和傳染性肝炎)、三聯(lián)苗(犬瘟熱、犬細小病毒病和犬傳染性肝炎)和五聯(lián)苗(犬瘟熱、犬細小病毒病、犬傳染性肝炎、狂犬病和犬副流感)。滅活疫苗一般要接種兩次，間隔2?3周；弱毒疫苗接種一次，幼犬于7?8周齡首免，以后每年加強免疫一次。隨著細小病毒的范圍不斷增大，病原體在有選擇壓力的情況下變異也越來越復雜。CPV弱毒疫苗已不能獲得令人滿意的免疫效果，目前國內外正在開展CPV基因工程疫苗的研究,并已取得初步成果。七、犬冠狀病毒性腹瀉犬冠狀病毒性腹瀉(caninecoronavirusdiarrhea)又稱為犬冠狀病毒病(caninecoronavirusdisease),是由犬冠狀病毒引起的一種臨床上以嘔吐、腹瀉、脫水及易復發(fā)為特性的高度接觸性傳染病。該病對幼犬危害尤其嚴重，病死率很高，是目前對養(yǎng)犬業(yè)危害較大的疾病之一1974年，美國的Binn等首先從腹瀉的德國軍犬中檢出犬冠狀病毒，后英國、德國、比利時、法國等多個國家和地區(qū)相繼有大規(guī)模流行的報道。我國直到1997年才首次分離到該病毒?！静≡咳跔畈《?Caninecoronavirus,CCV)屬于冠狀病毒科(Coronaviridae),冠狀病毒科(Coronavirius)，具有冠狀病毒的一般特征，呈圓形或橢圓形，長徑80?120nm,寬徑75?80nm,有囊膜，囊膜表面有花瓣狀纖突，長約20nm，凍融極易脫落，從而失去感染性。核衣殼呈螺旋狀。病毒基因組為單股RNA。病毒在氯化銫中的浮密度為1.15?1.16g/mL。本病毒只有一個血清型，但不同的毒株間毒力有所不同。本病毒與豬傳染性胃腸炎病毒、貓傳染性腹瀉病毒和人冠狀病毒229E株有抗原相關性。本病毒能在犬腎和胸腺原代細胞及A72、CRFK等傳代細胞系上增殖，并產生CPE。病毒在宿主的細胞質內復制，在內質網和胞質空泡膜上出芽成熟。本病毒可被大多數去污劑和消毒劑滅活；對氯仿、乙醚、脫氧膽酸鹽敏感；對熱敏感，在糞便中.20℃時大約40h后就會喪失感染性，在戶外0c以下很長時問仍然具有感染性，4c冷藏可存活60h；用甲醛、紫外線、0.1%過氧乙酸及1%克遼林等可在短時間將其滅活;對胰蛋白酶和酸有抵抗力?！玖餍胁W】可感染人和很多種類的動物，包括牛、豬、犬、貓、馬、禽、鼠。犬科動物最易感，如犬、貂和狐貍等。本病的發(fā)生無品種、年齡、性別之分，但在犬群中流行時，通常都是幼犬先發(fā)病，然后波及其他年齡的犬。幼犬的發(fā)病率和病死率均高于成年犬，發(fā)病率幾乎100%,病死率50%。病犬和帶毒犬是主要傳染源。病毒通過直接接觸和間接接觸，經呼吸道和消化道傳染給健康犬及其他易感動物。感染犬可通過糞便排毒2周或更長時間，傳染性糞便污染的環(huán)境是傳染的主要原因。本病一年四季均可發(fā)生，但多發(fā)于寒冷的季節(jié)，傳播迅速，數日內常成窩暴發(fā)。氣候突變，衛(wèi)生條件差，犬群密度大，斷乳轉舍及長途運輸等可誘發(fā)本病?！局虏C制】感染3?14d的犬的糞便中即可分離到CCV。經口接種病毒2d后，CCV到達十二指腸上部，主要侵害小腸絨毛2/3處的消化吸收細胞。病毒經胞飲作用進入微絨毛之間的腸細胞，在胞質空泡的平滑膜上出芽。由于細胞膜破裂，病毒隨脫落的感染細胞進入腸腔內，再感染小腸整個腸段的絨毛上皮細胞，進而絨毛短粗、扭曲、脫落，腸黏膜由不斷增加的不成熟的細胞替代，消化酶和腸吸收功能喪失，導致腹瀉。以后隨著小腸結構的復原，臨床癥狀消失，排毒減少并終止，血清中產生中和抗體?！九R床癥狀】潛伏期很短：自然感染1?4d,人工感染只有24?48h。本病的臨床表現(xiàn)差別很大，與種類、年齡和性別有關。通常是2歲齡以下的犬感染，主要表現(xiàn)為嘔吐和腹瀉，嚴重者精神不振，嗜睡，食欲減少或廢絕，口渴、鼻鏡干燥，多數無體溫變化。感染犬通常突然開始腹瀉，問有嘔吐，嚴重的病例會出現(xiàn)水樣腹瀉，繼而出現(xiàn)脫水和電解質紊亂，同時伴有視覺和嗅覺障礙。糞便呈粥樣或水樣，紅色或暗褐色，或黃綠色，惡臭，混有黏液或少量血液。血液白細胞數正常。病程7?10d,有些病犬尤其是幼犬發(fā)病后1?2d內死亡，成年犬很少死亡?！静±碜兓枯p度感染不明顯，嚴重的病例腸壁菲薄，腸管膨脹，充滿稀薄、黃綠色或紫紅色血樣液體。胃腸黏膜充血、出血和脫落，胃內有黏液。腸系膜淋巴結和膽囊腫大。組織病理學檢查主要見小腸絨毛變短、融合，隱窩變深，絨毛長度與隱窩深度之比發(fā)生明顯變化。腸黏膜上皮細胞變平或變性，胞質出現(xiàn)空泡，杯狀細胞破損。固有層水腫，炎性細胞浸潤?！驹\斷】根據臨床癥狀，結合流行病學、病理變化可做出初步診斷，確診需要借助實驗室手段。.電鏡檢查采集病犬新鮮腹瀉糞便，離心取上清，負染后電鏡觀察可發(fā)現(xiàn)典型的冠狀病毒。收集病料要早，7d后病毒含量減少。.病毒分離鑒定應用犬原代腎細胞、胸腺細胞分離冠狀病毒，可觀察到細胞病變。用已知陽性血清做中和試驗鑒定病毒。從糞便和小腸內容物分離成功率最高。為提高病毒分離率，糞便要新鮮，避免反復凍結，最好先將病料感染健康犬，取典型發(fā)病犬腹瀉糞便作為樣品分離病毒。但實際操作時病毒分離很困難，因此不適宜作為常規(guī)診斷方法。.血清學試驗中和試驗、熒光抗體技術、乳膠凝集試驗、ELISA等方法也可用于檢測血清抗體。.基因診斷近幾年PCR技術發(fā)展迅猛，可作為準確快速的診斷方法。.鑒別診斷本病的臨床癥狀、流行病學與細小病毒、輪狀病毒感染相似，而且?；旌细腥荆o疾病的診斷增加了復雜性，需要注意鑒別?！痉揽亍磕壳氨静∩袩o有效疫苗用于預防，也無特效療法，主要采取一般性綜合措施發(fā)現(xiàn)病犬應及時隔離，并采取對癥治療，如止吐、止瀉、補液，用抗生素防止繼發(fā)感染.早期應用犬高免血清或球蛋白，具有較好的治療效果。止嘔可選用維生素B6、愛茂爾、甲氧氯普胺、舒必利、氯丙嗪、嘔瀉寧等。止血可選用安絡血、酚磺乙胺及氨甲苯酸：止痛可用阿托品或顛茄酊等。補液可選用乳酸林格氏液?？墒褂媚c黏膜保護劑，如次硝酸鉍、氫氧化鋁?？蓱昧蛩嵝旅顾氐瓤股胤乐估^發(fā)感染。同時，加強護理，如抗寒保暖等，可以減少病死率。幼犬要及時吃足初乳，以獲得母源抗體和免疫保護力。加強清潔衛(wèi)生，定期對犬舍、食具及周圍環(huán)境進行消毒。對引進犬實施隔離檢疫。對疫點的糞便、場地進行消毒處理，可用甲醛或漂白粉等經濟有效的消毒劑.防止病毒通過糞便在犬群中迅速傳播。八、犬副流感病毒感染犬副流感病毒感染(canineparainfluenzavirusinfection)是由犬副流感病毒(CPIV)引起犬的主要呼吸道傳染病。臨床上以發(fā)熱、流黏性鼻液、打噴嚏、咳嗽等急性呼吸道癥狀為主要特征。病理變化以卡他性鼻炎和支氣管炎為特征。1967年，Binn等人首次用犬腎細胞(MDCK)從具有呼吸道癥狀的病犬中分離獲得CPIV。后來發(fā)現(xiàn)，CPIV還可以引起急性腦脊髓炎和腦內積水，表現(xiàn)后驅麻痹和運動失調等臨床癥狀。目前世界上所有養(yǎng)犬的國家均有本病流行，嚴重影響犬和狐等養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展?！静≡咳绷鞲胁《?Canineparainfluenzavirus,CPIV)又稱為副流感病毒5型(Parainfluenzavirus5)，屬于副黏病毒科(Paramyxoviridae)、副黏病毒屬(Paramyxovirus)。病毒基因組為單股RNA。電鏡下，病毒粒子呈多形性，一般為球狀，直徑為50?300nm。粒子內部為螺旋對稱的核衣殼，外有囊膜，其表面有密集而整齊的纖突結構，含血凝素和神經氨酸酶。病毒在細胞質中復制，成熟后在細胞膜上出芽釋放。本病毒只有一個血清型，但毒力有所差異。CPIV在4℃和24℃條件下可凝集人0型紅細胞及綿羊、雞、豚鼠、大鼠、兔、犬、貓的紅細胞，其中對豚鼠紅細胞吸附作用最強。本病毒可在犬和猴腎原代或傳代細胞及Vero細胞上增殖并產生CPE，在感染細胞質內形成嗜酸性包涵體。病毒也可在雞胚羊膜腔內增殖，但雞胚不死亡，羊膜腔和尿囊液中均含有病毒，血凝效價可達1：128。在雞胚尿囊腔接種，病毒不增殖。本病毒對理化因素的抵抗力不強，對熱、乙醚不穩(wěn)定，在酸堿環(huán)境中易被破壞，在0.5%水解乳蛋白和0.5%牛血清Hank液中經24h感染性不變。一般消毒劑可將其殺死?！玖餍胁W】CPIV的宿主范圍較廣，自然感染宿主包括人、猴、犬、牛、羊、馬、家兔、豚鼠、倉鼠、小鼠、禽類以及某些野生動物等。各種玩賞犬、實驗犬和軍警犬，成年犬和幼齡犬均可感染，但幼齡犬病情較重。急性期病犬是主要的傳染源，通過呼吸道而感染。病毒主要存在于呼吸系統(tǒng)，如病犬鼻液和氣管、肺部的分泌物中含有大量病毒，可通過打噴嚏、咳嗽向外排出，易感動物吸入帶毒的飛沫后會感染發(fā)病。本病傳播迅速，并具有很強的傳染性，呈突然暴發(fā)。CPIV感染軍犬后常引發(fā)呼吸道病，在實驗犬產生犬瘟熱樣癥狀。自然條件下單獨感染CPIV的情況不多見，常與支原體或支氣管敗血波氏菌合并感染，使病情加重。【臨床癥狀】潛伏期較短，一般3?5d,大多數感染呈亞臨床性或僅表現(xiàn)輕微的臨床癥狀。病犬突然發(fā)熱，體溫39?41℃,流漿液性、黏液性甚至膿性鼻液。精神沉郁，厭食。扁桃體紅腫，結膜發(fā)炎，咳嗽和呼吸困難。一般2周左右可好轉。若與支氣管敗血波氏菌混合感染，則臨床表現(xiàn)更嚴重，整窩犬咳嗽、肺炎，病程3周以上，甚至死亡。11?12周齡幼犬病死率較高。成年犬病癥較輕，病死率較低。有的犬感染CPIV后表現(xiàn)后軀麻痹和運動失調等神經癥狀。有報道，7月齡犬感染后可表現(xiàn)后軀麻痹和運動失調等癥狀。病犬用后肢支撐軀體，不能行走。膝關節(jié)、腓腸肌反射和自體感覺不敏感?！静±碜兓孔匀桓腥緯r主要在呼吸道，以卡他性鼻炎和支氣管為特征。鼻孔周圍有黏性或漿液性鼻液；氣管、支氣管內有卡他性、黏液性、膿性或血性滲出物。氣管、支氣管、肺部有點狀出血；肺尖葉下部有時出現(xiàn)暗紅色實變區(qū)。扁桃體腫大。腦部感染出現(xiàn)急性腦脊髓炎和腦室積水，整個中樞神經系統(tǒng)和脊髓均有病變，前葉灰質最為嚴重。扁桃體、氣管、支氣管、咽后淋巴結腫大、潮紅。組織病理學檢查有不同程度的氣管、支氣管炎，病理變化從局灶性、表層壞死性炎癥至重度的黏液性、化膿性炎癥?！驹\斷】根據流行病學、臨床癥狀和病理變化可做出初步診斷，確診則需要做實驗室檢查。.病毒分離鑒定取病犬的咽部拭子、腦脊髓液、肺、脾、肝及腎等病料，適當處理后接種犬腎細胞，每隔4?5d進行一次豚鼠紅細胞吸附試驗，盲傳2?3代，出現(xiàn)CPE。再用特異性豚鼠免疫血清進行血凝抑制試驗，對病毒進行鑒定。.血清學試驗可應用犬副流感病毒特異性熒光抗體，在氣管、支氣管上皮細胞中檢出特異熒光細胞。也可采用血凝抑制試驗和血清中和試驗檢查病初和康復的雙份血清，測定抗體水平是否上升4倍，進行回顧性診斷?？旖菝舾械拿庖呓饦擞浄ê虴LISA,已廣泛用作副流感病毒抗原檢測或鑒定及抗體檢測。.RI-PCR應用特異性引物，進行RT-PCR診斷，可以替代傳統(tǒng)的病毒分離法?！痉揽亍勘静∧壳吧袩o特異性療法。動物多在長途運輸、環(huán)境突變、衛(wèi)生條件差、過度擁擠、受涼感冒時發(fā)病。因此在飼養(yǎng)過程中，應加強管理，注意防寒保暖，避免應激因素。發(fā)現(xiàn)病犬應及時隔離治療。并嚴格消毒，重病犬及時淘汰?？刹捎眯叵匐?、轉移因子和高免血清來增強機體免疫機能。當犬感染CPIV時，常常繼發(fā)支氣管敗血波氏菌、支原體等細菌感染。因此，應用抗生素或磺胺類藥物，補充維生素，對細菌性混合感染有一定療效。嚴重者進行強心、平喘、止咳等對癥治療，以減輕病情，促使病犬早日恢復。加強飼養(yǎng)管理.特別是犬舍周圍環(huán)境衛(wèi)生，對新購人犬進行檢疫、隔離和預防接種。疫苗免疫是預防本病的關鍵措施。用犬副流感疫苗2次免疫后，抗體水平可增高4倍。國外已有預防犬副流感、犬瘟熱、犬細小病毒病、犬病毒性肝炎的四聯(lián)苗。國內夏咸柱等研制的五聯(lián)苗中也包括犬副流感，解放軍第四軍醫(yī)大學也研制出五聯(lián)弱毒苗，可以減少免疫次數，達到一針防多病的效果。九、犬皰疹病毒感染犬皰疹病毒感染(Canineherpesvirusinfection)是由犬皰疹病毒引起犬的一種急性、全身出血性和壞死性傳染病，主要特征為仔犬呼吸困難、全身臟器出血壞死、急性致死以及母犬流產和繁殖障礙。本病于1965年由Carmichael和Stewart分別在美國和英國首先報道。此后，在日本、澳大利亞和許多歐洲國家相繼發(fā)現(xiàn)，現(xiàn)已分布于多數國家和地區(qū)?！静≡咳捳畈《靖腥?Canineherpesvirus,CHV)屬于皰疹病毒科(Herpesviridae)、水痘病毒屬(Varicellavirus)。細胞核內未成熟無囊膜病毒粒子直徑為90?100nm。有囊膜的成熟病毒直徑為120?200nm。呈二十面體對稱。病毒基因組為線狀雙股DNA,存在兩種異構體，分子量為92X106Da。病毒粒子在氯化銫中的浮密度為1.20?1.29g/mL。本病毒無血凝性，只有1個血清型，但不同毒株毒力有差異。CHV在基因結構上與牛傳染性鼻氣管炎病毒、馬鼻肺炎病毒、貓鼻氣管炎病毒和雞傳染性喉氣管炎病毒有較高的同源性，但血清學上與它們均不存在交叉抗原關系，只是與人單純皰疹病毒之間存在少量的交叉抗原關系。本病毒對犬胎腎和新生犬原代和傳代細胞系最易感，對犬肺和子宮組織細胞也敏感，35?37℃條件下可迅速增殖，感染后12?16h可出現(xiàn)CPE,初期呈局灶性細胞圓縮、變暗，逐漸向周圍擴展，隨后灶狀中心部細胞開始脫落。部分細胞核內出現(xiàn)著色不明顯的嗜酸性包涵體。本病毒還可形成界限明顯、邊緣不整的小型蝕斑。CHV對酸、熱的抵抗力很弱，56℃經4min被滅活；37℃經5h,病毒感染滴度下降50%；在一70℃時保存的病毒(含10%血清的病毒懸液)只能存活數月，但凍干毒種保存數年毒價無明顯變化。病毒對乙醚等脂溶劑、胰蛋白酶、酸性和堿性磷酸酶等敏感，乙醚作用12h可使其滅活。在pH低于5和高于8時極不穩(wěn)定，易失去感染力，如pH為4.5時經30min失去感染力?！玖餍胁W】本病感染僅限于家養(yǎng)和野生的犬科動物，自然感染和嚴重致死病例通常發(fā)生在l?2周齡以內的幼犬，1周齡以內的幼犬感染CHV后病死率可高達80%。幼犬發(fā)病主要是在分娩過程中與帶毒母犬產道接觸或出生后通過與母犬接觸而感染。成年犬感染后常無明顯臨床癥狀?；疾∽腥涂祻腿侵饕獋魅驹矗貏e是康復犬帶毒以及隱性感染犬長期帶毒。潛伏感染是本病毒的特征，病毒主要存在于犬的唾液、鼻液、尿液、陰道分泌物和精液中，還可通過胎盤感染胎兒，但母源抗體效價的高低可影響仔犬臨床癥狀的嚴重程度。本病無明顯季節(jié)性，傳播迅速，幼犬群幾乎在同一時問發(fā)病，流行時間不長?！九R床癥狀】潛伏期3?8d。新生仔犬感染后無明顯臨床癥狀，很快死亡。2周齡以內犬常呈急性型，開始精神沉郁、食欲不振，抑郁、癡呆，軟弱無力，排淡黃色或綠色稀便后期癥狀為厭食、呼吸困難、腹痛、嘔吐和持續(xù)吠叫，腹下皮膚，尤其下腹部、陰門、口腔等處皮膚出現(xiàn)紅色丘疹，繼之形成水皰，皮下水腫。常于ld內死亡。個別耐過仔犬常遺留中樞神經癥狀，如共濟失調，做圓周運動或失明等。2?5周齡仔犬或成年犬常呈輕度鼻炎和咽炎臨床癥狀，表現(xiàn)打噴嚏、干咳、流鼻涕等呼吸道癥狀，經2周左右自愈。5周齡以上的犬和成年犬呈隱性感染，偶爾表現(xiàn)輕微鼻炎、氣管炎或陰道炎。母犬的生殖道感染以陰道黏膜彌漫性小皰疹狀病變?yōu)樘卣?。母犬出現(xiàn)繁殖障礙，如流產、