細(xì)胞移植示蹤技術(shù)

細(xì)胞移植示蹤技術(shù)第1頁，課件共10頁，創(chuàng)作于2023年2月細(xì)胞移植替代療法是現(xiàn)代醫(yī)學(xué)中發(fā)展最為迅速的領(lǐng)域之一第2頁，課件共10頁，創(chuàng)作于2023年2月移植細(xì)胞的示蹤方法1.利用熒光染料標(biāo)記細(xì)胞2.改變細(xì)胞基因，使其表達(dá)特異性的標(biāo)志物3.選用雄性供體和雌性宿主，利用Y染色體作為標(biāo)記物4.用胸腺嘧啶類似物來標(biāo)記分裂細(xì)胞5.采用超順磁氧化鐵作為磁共振對比劑活體示蹤移植細(xì)胞第3頁，課件共10頁，創(chuàng)作于2023年2月熒光染料標(biāo)記示蹤技術(shù)熒光染料標(biāo)記示蹤技術(shù)是利用熒光染料標(biāo)記細(xì)胞，通過熒光顯微鏡、激光共聚焦顯微鏡、流式細(xì)胞儀等儀器檢測，達(dá)到定位、示蹤和定量等目的熒光色素主要有煙酸己可堿。3’-四甲基-吲哚-羧花青-高氯酸鹽、二脒基苯基吲哚等不足之處：隨著熒光衰減和細(xì)胞分裂而標(biāo)記強度下降，不適宜檢測1~2個月以上的細(xì)胞，需離體狀態(tài)下進行病理學(xué)切片分析第4頁，課件共10頁，創(chuàng)作于2023年2月改變細(xì)胞基因，使其表達(dá)特異性的標(biāo)志物綠色熒光蛋白、熒光素酶、堿性磷酸酶、新霉素磷酸轉(zhuǎn)移酶等。將目的基因?qū)藰?biāo)記細(xì)胞內(nèi)并維持其生物學(xué)功能。使其表達(dá)特異性的標(biāo)志物,熒光分子來作為生物體的標(biāo)記。第5頁，課件共10頁，創(chuàng)作于2023年2月利用Y染色體作為標(biāo)記物最大優(yōu)點標(biāo)記技術(shù)簡單，而標(biāo)記效率很高，利用FISH技術(shù)細(xì)胞進行觀察.Y染色體標(biāo)記的局限性是只能在雄性供體和雌性宿主之間標(biāo)記，不能進行自體細(xì)胞的標(biāo)記示蹤研究第6頁，課件共10頁，創(chuàng)作于2023年2月用胸腺嘧啶類似物來標(biāo)記分裂細(xì)胞利用5-溴脫氧尿嘧啶核苷、氚胸腺嘧啶核苷能競爭競爭性地參與細(xì)胞DNA合成，從而達(dá)到標(biāo)記分裂細(xì)胞的目的。標(biāo)記物具有放射性，易造成放射污染第7頁，課件共10頁，創(chuàng)作于2023年2月磁共振示蹤目前較理想磁共振示蹤劑是超順磁性氧化鐵磁共振示蹤突出的優(yōu)勢在于極佳的空間分辨力，能利用磁共振延遲增強掃描明確部位，實時顯像并能連續(xù)跟蹤標(biāo)記的細(xì)胞，同時能提供有關(guān)信息問題:

1）靈敏度相對不足

2）安全性有待進一步研究(影響分化能力）

3）非特異性顯像（鐵質(zhì)代謝）第8頁，課件共10頁，創(chuàng)作于2023年2月隨著細(xì)胞標(biāo)記示蹤技術(shù)的發(fā)展，可以在體外將細(xì)胞進行特異性標(biāo)記，根據(jù)特異性標(biāo)記可以追蹤到細(xì)胞，從而對細(xì)胞在體內(nèi)的遷移、增殖、分化和轉(zhuǎn)歸進行研究選擇一個合適的標(biāo)記方法是能夠成功追蹤到種子細(xì)胞并對其研究的基礎(chǔ)。第9頁，課件共10頁，創(chuàng)作于2023年2月理想的活體細(xì)胞示蹤劑應(yīng)具備以下幾個特征：（1）安全性：不影響細(xì)胞存活、生長、分化及其他生物學(xué)作用；不影響細(xì)胞基因組成；有其清除途徑（2）靈敏度：能準(zhǔn)確反映少量標(biāo)記細(xì)胞的行為（包括位置、移行）和標(biāo)記細(xì)胞的數(shù)量等。（3）特異性：能反映標(biāo)記細(xì)胞外移、死亡或被巨噬細(xì)胞吞噬等情況，間質(zhì)對標(biāo)記細(xì)胞或標(biāo)記物的非特異性處置不應(yīng)對靶細(xì)胞數(shù)量和生物學(xué)活動造成錯誤判斷。（4）長久性：示蹤時間較長，標(biāo)記物不會自動衰減或隨細(xì)胞分裂而稀釋，可用