小孢子淀粉測定

/中文文獻：1、花蕾中淀粉及可溶性糖含量的測定：3,5-二硝基水楊酸法——用體積分數(shù)80%乙醇提取可溶性糖，酸水解法將淀粉水解為還原糖。提取或水解的產(chǎn)物與3,5-二硝基水楊酸試劑供熱后在520nm波長下測定光密度值，通過計算還原性糖含量來算出可溶性糖及淀粉含量。乙醇提取硫酸蒽酮法：稱取50～100mg粉碎過100目篩的烘干樣品，置于15mL刻度試管中，加入6～7mL80％乙醇，在80℃水浴中提取30min，取出離心（3000rpm）5min，收集上清液。重復(fù)提取兩次（各10min）同樣離心，收集三次上清液合并于燒杯，置于85℃恒溫水浴，使乙醇蒸發(fā)至2～3mL，向沉淀中加蒸餾水3mL，攪拌均勻，放入沸水浴中糊化15min。冷卻后，加入2mL冷的9.2mol/L高氯酸，不時攪拌，提取15min后加蒸餾水至10mL，混勻，離心10min，上清液傾入50mL容量瓶。再向沉淀中加入2mL4.6mol/L高氯酸，攪拌提取15min后加水至10mL，混勻后離心10min，收集上清于容量瓶。然后用水洗沉淀1～2次，離心，合并離心液于50mL容量瓶用蒸餾水定容供測淀粉用。英文文獻：1、SucroseandstarchcatabolismintheantherofLiliumduringitsdevelopmentacomparativestudyamongtheantherwall,locularfluidandmicrosporepollenfractions分別在花粉的不同發(fā)育階段的不同部分測定淀粉含量。除Xuid室外，用研缽將不同組分在氮氣預(yù)冷液研磨均勻。對于每個樣品，取0.1g粉末放入1.5ml離心管中，并加入1mL的0.1M（？）的磷酸鈉鹽緩沖液（pH約為7.5），4℃、1000轉(zhuǎn)離心15min。吸取上清液用于測定可溶性糖（見下）；沉淀物用1mL的二甲基亞砜：8N（？）鹽酸（4:1）再次懸浮，然后60℃水浴加熱30min，并不斷攪拌。離心（1200轉(zhuǎn)）15min后，吸取100微升上清液，加入100微升Lugol酸性碘溶液（0.06%（w/v）的鉀化碘和0.003%（w/v）碘的005N的鹽酸溶液）和1mL的重水。將樣品放置室溫下約15min后在600nm的吸光度下檢測。另一方面，在花粉發(fā)育的各個時期葡萄糖、果糖和蔗糖通過德國造的ScilDiagnosticsGmbH,Viernheim裝置檢測。這樣，上清液和Xuid室中所含的可溶性糖便可檢測出。淀粉和可溶性糖的單位均為mg/g（花粉鮮重）。2、AntherstarchvariationsinLiliumduringpollendevelopment新鮮花粉和同花的花芽在室溫下用Fontainebleau砂和二甲基亞砜：8N鹽酸（8:2）的混合物研磨2分鐘，然后60℃加熱30分鐘并不斷攪拌使花粉完全溶解。用30ml蒸餾水冷卻后，過濾并將濾液稀釋至100ml。吸取100微升的樣品用于淀粉含量的檢測。在淀粉葡萄糖苷酶的作用下，淀粉水解為葡萄糖。葡萄糖被己糖激酶磷酸化葡糖-6-磷酸，接著在NADP的作用下氧化為葡糖-6-磷酸鹽，同時通過葡糖-