泌尿系統(tǒng)感染的微生物學(xué)檢驗(yàn)

泌尿系統(tǒng)感染的微生物學(xué)檢驗(yàn)第1頁，課件共55頁，創(chuàng)作于2023年2月泌尿系統(tǒng)泌尿系統(tǒng)包括腎臟、輸尿管、膀胱和尿道。腎是泌尿器官，其余為貯尿和排尿器官。腎臟排泄代謝產(chǎn)物及異物和過剩物質(zhì)，調(diào)節(jié)水、電解質(zhì)的平衡和酸堿平衡，從而維持內(nèi)環(huán)境的相對(duì)穩(wěn)定。輸尿管、膀胱和尿道是排尿器官，分別有輸送、貯存和排尿的作用。尿道是從膀胱通向體外的管道。男性尿道細(xì)長，女性尿道粗而短。第2頁，課件共55頁，創(chuàng)作于2023年2月泌尿系統(tǒng)感染的微生物學(xué)檢驗(yàn)泌尿系統(tǒng)感染泌尿系統(tǒng)感染的臨床特征泌尿系統(tǒng)感染常見微生物泌尿系統(tǒng)感染微生物學(xué)檢驗(yàn)第3頁，課件共55頁，創(chuàng)作于2023年2月泌尿系統(tǒng)感染泌尿系統(tǒng)感染是細(xì)菌感染中最常見的類型之一，僅次于呼吸道感染，居第二位。尿路內(nèi)有微生物停留、繁殖并導(dǎo)致炎癥反應(yīng)發(fā)生（阻塞、尿路改造、尿道長度、膀胱輸尿管反流）上尿路感染：腎、輸尿管下尿路感染：膀胱、尿道泌尿道感染（UTI）是常見的醫(yī)院感染第4頁，課件共55頁，創(chuàng)作于2023年2月泌尿系統(tǒng)感染的臨床特征一般：尿頻、尿急、尿痛等膀胱刺激征，也稱尿道刺激征。單純膀胱炎引起發(fā)熱，恥骨上壓痛。尿液混濁，有時(shí)血尿。急性腎盂腎炎：以上，高熱寒戰(zhàn)、腰肋部疼痛，乏力、惡心嘔吐，低血壓等全身不適。新生兒尿路感染的癥狀往往是非特異性的、模糊的，可表現(xiàn)有厭食，嘔吐，倦怠，常有高熱；2歲以后的尿路感染才會(huì)有典型的臨床表現(xiàn)；老年患者的尿路感染常缺乏明顯的癥狀，更易造成菌血癥和急性腎功能衰竭，應(yīng)引起重視。

第5頁，課件共55頁，創(chuàng)作于2023年2月泌尿系統(tǒng)感染的臨床特征上尿路感染：發(fā)熱、腎區(qū)不適、膀胱壓痛，常與下尿路感染并存下尿路感染：膀胱刺激征；尿頻、尿急、尿痛。排尿次數(shù)明顯增加；尿意一來就要立即排尿；排尿時(shí)膀胱區(qū)及尿道口產(chǎn)生疼痛，為燒灼感或刺痛。第6頁，課件共55頁，創(chuàng)作于2023年2月膀胱刺激征原因激惹：炎癥性刺激，腎盂腎炎、膀胱炎、腎結(jié)石合并感染和泌尿系結(jié)核。急性炎癥和活動(dòng)性結(jié)核時(shí)明顯。非炎癥性刺激如結(jié)石、異物、腫瘤、妊娠壓迫等也可引起膀胱刺激征。膀胱容量減少：占位性病變或膀胱壁炎癥浸潤、硬化、攣縮。膀胱神經(jīng)功能調(diào)節(jié)失常：尿頻可見于精神緊張和癔病，可伴有尿意，但無尿痛。第7頁，課件共55頁，創(chuàng)作于2023年2月泌尿系統(tǒng)感染常見微生物

細(xì)菌G-菌中最常見大腸埃希菌、變形桿菌、銅綠假單胞菌、克雷伯菌屬。G+菌中常見為金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腸球菌屬。第8頁，課件共55頁，創(chuàng)作于2023年2月泌尿系統(tǒng)感染常見微生物第9頁，課件共55頁，創(chuàng)作于2023年2月MICROBIOLOGYCatheter-associated

urinarytractinfectionsarecausedbyavarietyofpathogens,including:-Escherichiacoli

-MRSA

-Klebsiella

-Proteus

-Enterococcus

-Pseudomonas

-Enterobacter：VRSA

-

Serratia

-Candida第10頁，課件共55頁，創(chuàng)作于2023年2月細(xì)菌乳酸桿菌、甲型溶血鏈球菌或厭氧菌等因難以在尿液中生長，當(dāng)其在尿液中被檢出時(shí)，一般認(rèn)為是污染所致。致病菌95％以上為單一細(xì)菌。90％門診和50％住院病原菌大腸埃希菌。10％一15％尿路感染由革蘭陽性細(xì)菌引起，主要為葡萄球菌屬和腸球菌屬。第11頁，課件共55頁，創(chuàng)作于2023年2月性病相關(guān)：淋病奈瑟菌尿痛常為發(fā)病的早期癥狀。尿道口紅腫溢膿，12~24小時(shí)后疼痛略微減輕，排出稀薄的粘液樣分泌物尿頻尿急與一般泌尿系感染類似會(huì)陰部墜脹痛及全身癥狀：發(fā)熱（體溫38℃左右），全身倦怠無力、不適，食欲不振，惡心、嘔吐。第12頁，課件共55頁，創(chuàng)作于2023年2月性病相關(guān)：淋病奈瑟菌尿道口紅腫充血、水腫，有時(shí)有小的、淺表性膿腫、糜爛或小潰瘍。第一周癥狀重，不治療或治療不徹底，2~3周后癥狀逐漸減輕，尿道分泌物減少，組織腫脹消退，一個(gè)月后癥狀完全消失。淋菌潛伏于瘢痕組織中緩慢生長，發(fā)展為慢性淋病。第13頁，課件共55頁，創(chuàng)作于2023年2月非淋菌性尿道炎臨床上最常見的一種性傳播疾病。嚴(yán)重危及人類健康。衣原體和支原體等引起。癥狀尿道刺癢、燒灼感和排尿疼痛，少數(shù)有尿頻。尿道口微紅，晨起尿道口少量粘液性分泌物，癥狀與淋菌性尿道炎相似，程度較輕。部分患者無癥狀。第14頁，課件共55頁，創(chuàng)作于2023年2月厭氧菌泌尿系統(tǒng)感染起病緩慢，發(fā)熱寒戰(zhàn)、煩躁不安、膀胱刺激征尿道炎、尿道周圍炎、尿道周圍蜂窩織炎和膿腫、前列腺炎、遷徙性腎臟感染、腎周膿腫、腎盂積膿、腹膜后積膿、腎切除傷口感染、腎移植感染、化膿性血栓性腎靜脈炎、膀胱壞疽等。常伴腎結(jié)石、惡性腫瘤、尿路梗阻、腎結(jié)核和先天性尿路解剖畸形。第15頁，課件共55頁，創(chuàng)作于2023年2月泌尿系統(tǒng)感染：結(jié)核泌尿系結(jié)核中腎結(jié)核是最為常見、最先發(fā)生，以后蔓延至整個(gè)泌尿系統(tǒng)。結(jié)核從腎臟而影響膀胱，造成膀胱結(jié)核時(shí)，有一系列癥狀出現(xiàn)：膀胱刺激癥血尿膿尿腰痛及全身癥狀并發(fā)膀胱攣縮、膀胱破裂第16頁，課件共55頁，創(chuàng)作于2023年2月病毒、真菌麻疹、腮腺炎病毒以及柯薩奇病毒可引起尿路感染，少見，臨床多無癥狀，腺病毒2型感染導(dǎo)致學(xué)齡期兒童發(fā)生急性出血性膀胱炎；巨細(xì)胞病毒偶可引起下尿路感染。真菌感染(主要為假絲酵母屬)多發(fā)生于留置導(dǎo)尿、糖尿病、使用廣譜抗生素或免疫抑制劑的患者。第17頁，課件共55頁，創(chuàng)作于2023年2月一般特征下尿路感染患者外周血白細(xì)胞通常在正常范圍，而尿中紅細(xì)胞增多，可伴鏡下血尿。尿液涂片染色及尿培養(yǎng)?？砂l(fā)現(xiàn)相應(yīng)致病微生物。上尿路感染的病人的尿檢結(jié)果常提示大量白細(xì)胞尿，甚至膿尿。中段尿培養(yǎng)甚至血液細(xì)菌培養(yǎng)常常發(fā)現(xiàn)致病微生物生長。第18頁，課件共55頁，創(chuàng)作于2023年2月泌尿系統(tǒng)感染實(shí)驗(yàn)室檢查

尿常規(guī)第19頁，課件共55頁，創(chuàng)作于2023年2月尿沉渣顯微鏡對(duì)離心后尿液的沉渣物（尿中有形成分）進(jìn)行檢查，尿液干化學(xué)分析儀不能替代。對(duì)泌尿系統(tǒng)疾病診斷十分重要。有時(shí)是無癥狀情況下的唯一的實(shí)驗(yàn)室取證。第20頁，課件共55頁，創(chuàng)作于2023年2月腎功能檢查尿素氮、肌酐、尿酸測(cè)定不是直接診斷指標(biāo)，但對(duì)患者處理有非常重要的參考價(jià)值，故必須常規(guī)進(jìn)行。第21頁，課件共55頁，創(chuàng)作于2023年2月微生物學(xué)檢查

采集指征：（1）有典型的尿路感染癥狀；(2）肉眼膿尿或血尿；（3）不明原因的發(fā)熱，無其他局部癥狀；（4）留置導(dǎo)尿管的患者出現(xiàn)發(fā)熱；（5）膀胱排空功能受損；(6）泌尿系統(tǒng)疾病手術(shù)前。

第22頁，課件共55頁，創(chuàng)作于2023年2月樣本采集

中段尿新鮮晨尿：夜間飲水少，尿液濃縮，提高檢出率，其他隨機(jī)留取的尿液也可。中段尿：尿液分為前段、中段、后段。因前段尿和后段尿容易被污染，因此一般都留取中段尿。尿常規(guī)檢查時(shí)，尿液不少于10毫升。清潔干燥的容器盡快送實(shí)驗(yàn)室檢查第23頁，課件共55頁，創(chuàng)作于2023年2月導(dǎo)尿管較好的無菌采集法。1．危重病人每小時(shí)尿量、尿比重。

2．盆腔手術(shù)排空膀胱。

3．手術(shù)后留置導(dǎo)尿管，便于引流和沖洗。

4．尿失禁或會(huì)陰部傷口的病人引流尿液，保持會(huì)陰部的清潔干燥。

5．為尿失禁病人行膀胱功能訓(xùn)練。

第24頁，課件共55頁，創(chuàng)作于2023年2月腎盂尿確定是否來自腎臟。沖洗膀胱，末次沖洗尿作對(duì)照。導(dǎo)尿管插入輸尿管，標(biāo)記左右側(cè)，各收集三次尿；輸尿管比對(duì)照尿菌數(shù)多或第三次尿比第一次多，該菌尿可能來自腎臟；反之，如果第一次尿多于第三次尿菌，可能來自膀胱。第25頁，課件共55頁，創(chuàng)作于2023年2月膀胱穿刺膀胱穿刺尿采集法：將病人恥骨上皮膚經(jīng)碘酒、酒精消毒后，以無菌針筒作膀胱穿刺。用于尿液中厭氧菌的培養(yǎng)，故在取得尿液后，針頭插于橡皮塞上送檢。兒童或嬰兒采集中段尿困難或培養(yǎng)結(jié)果與患者病情矛盾，可考慮用此法采集尿液。第26頁，課件共55頁，創(chuàng)作于2023年2月集尿24h的尿液，取沉淀于清潔瓶內(nèi)送檢。污染雜菌，無菌操作。立即送檢，病原菌增殖影響細(xì)菌計(jì)數(shù)的正確性。不加防腐劑，否則影響檢出的陽性率。第27頁，課件共55頁，創(chuàng)作于2023年2月注意事項(xiàng)嚴(yán)格無菌操作。用藥前采集標(biāo)本，不加防腐劑或消毒劑。晨起第一次尿液送檢立即送檢，否則導(dǎo)致感染菌和過度生長。臨時(shí)存放4℃冰箱不得超過2h。淋病奈瑟菌應(yīng)首選床邊接種，否則保溫送檢，不能存放于冰箱內(nèi)，以免影響檢出。第28頁，課件共55頁，創(chuàng)作于2023年2月直接鏡檢一般細(xì)菌：Gram染色淋病奈瑟菌假絲酵母菌抗酸桿菌第29頁，課件共55頁，創(chuàng)作于2023年2月分離培養(yǎng)鑒定一般細(xì)菌培養(yǎng)：涂布法、傾注法淋病奈瑟菌假絲酵母菌結(jié)核分枝桿菌厭氧菌支原體L型第30頁，課件共55頁，創(chuàng)作于2023年2月定量膀胱穿刺取尿作定性，只要培養(yǎng)出細(xì)菌，不論細(xì)菌數(shù)多少，均認(rèn)為是感染，不會(huì)出現(xiàn)假陽性。是避免尿培養(yǎng)污染的最好方法。缺點(diǎn)是患者有一定痛苦。尿液細(xì)菌培養(yǎng)：尿道口周圍亦有大量細(xì)菌。表皮葡萄球菌、鏈球菌、枯草桿菌、變形桿菌、大腸埃希菌、乳酸桿菌、卡他布蘭漢菌及恥垢分枝桿菌等。細(xì)菌常混入尿中，但細(xì)菌數(shù)小于103/毫升。第31頁，課件共55頁，創(chuàng)作于2023年2月定量

清潔中段尿涂布法目的是運(yùn)用中段尿培養(yǎng)菌落計(jì)數(shù)的方法鑒別是否為尿路感染。常用定量接種環(huán)法，取1μl\10μl的新鮮中段尿，均勻涂劃在血液瓊脂平板上，37℃，24小時(shí)孵育，整個(gè)平板上所見的菌落數(shù)乘以1000即得每毫升菌落數(shù)。計(jì)數(shù)生長的菌落數(shù)，生長過多不可計(jì)數(shù)時(shí)，報(bào)告>105cfu/ml即可。根據(jù)菌落形狀及涂片鏡檢特征，選擇相應(yīng)方法進(jìn)一步鑒定。48h無細(xì)菌生長方可報(bào)告“無細(xì)菌生長”。第32頁，課件共55頁，創(chuàng)作于2023年2月傾注法液體稀釋的方法分散細(xì)胞，最常用的液體稀釋方法為10倍系列稀釋，參考下圖：隨著稀釋程度的增大，單位體積中的微生物細(xì)胞數(shù)量減少，細(xì)胞得以分散。第33頁，課件共55頁，創(chuàng)作于2023年2月傾注法合適稀釋度的菌懸液與滅完菌冷卻到50-55°C的培養(yǎng)基混合均勻，倒入無菌培養(yǎng)皿，冷卻形成平板后，培養(yǎng)。操作較麻煩。熱敏感微生物的影響明顯；影響嚴(yán)格好氧微生物的生長；表面菌落與培養(yǎng)基內(nèi)菌落形態(tài)影響菌落形態(tài)的判別。分散均勻，計(jì)數(shù)準(zhǔn)確。第34頁，課件共55頁，創(chuàng)作于2023年2月細(xì)菌學(xué)標(biāo)準(zhǔn)革蘭陰性桿菌落計(jì)數(shù)﹥105cfu/ml或革蘭陽性球菌菌落計(jì)數(shù)﹥104cfu/ml，應(yīng)同時(shí)報(bào)告鑒定結(jié)果及藥敏試驗(yàn)結(jié)果。菌落計(jì)數(shù)低于此標(biāo)準(zhǔn)，并不能完全排除尿路感染。這多見于以下幾種情況：1.應(yīng)用抗菌藥物；2.采尿時(shí)消毒劑混入尿中3.尿頻，細(xì)菌停留時(shí)間短；4.大量輸液或使用利尿劑使尿液稀釋；5.尿液PH。第35頁，課件共55頁，創(chuàng)作于2023年2月泌尿系統(tǒng)感染常見細(xì)菌大腸埃希菌第36頁，課件共55頁，創(chuàng)作于2023年2月泌尿系統(tǒng)感染常見細(xì)菌銅綠假單胞菌第37頁，課件共55頁，創(chuàng)作于2023年2月銅綠假單胞菌細(xì)長革蘭陰性桿菌，極單鞭毛，嚴(yán)格需氧，氧化利用葡萄糖藍(lán)綠色水溶性綠膿素和黃綠色青膿素血平板上形成大而扁平，濕潤，邊緣不齊，有金屬光澤，有生姜?dú)馕兜幕揖G色菌落，并形成透明溶血環(huán)最適生長溫度35℃，4℃不生長，42℃生長MAC第38頁，課件共55頁，創(chuàng)作于2023年2月O/F試驗(yàn)（氧化型）硝酸鹽還原試驗(yàn)（＋）第39頁，課件共55頁，創(chuàng)作于2023年2月泌尿系統(tǒng)感染常見細(xì)菌肺炎克雷伯菌莢膜染色第40頁，課件共55頁，創(chuàng)作于2023年2月肺炎克雷伯菌粘絲試驗(yàn)第41頁，課件共55頁，創(chuàng)作于2023年2月肺炎克雷伯菌KIA（AA＋-）、MIU（－－＋）

肺炎克雷伯菌IMViC試驗(yàn)（－－＋＋）第42頁，課件共55頁，創(chuàng)作于2023年2月第43頁，課件共55頁，創(chuàng)作于2023年2月泌尿系統(tǒng)感染常見細(xì)菌鮑曼不動(dòng)桿菌第44頁，課件共55頁，創(chuàng)作于2023年2月鮑曼不動(dòng)桿菌嚴(yán)格需氧、無動(dòng)力、氧化酶陰性、硝酸鹽還原陰性的革蘭染色陰性球桿菌。似雙球菌，不易脫色，易誤認(rèn)陽性菌；血平板培養(yǎng)24小時(shí)后，菌落半透明到不透明，凸起，邊緣整齊，無色素形成；大多數(shù)菌株麥康凱平板上生長良好，呈無色或淡粉紅色第45頁，課件共55頁，創(chuàng)作于2023年2月變形桿菌革蘭染色陰性、無芽胞、無莢膜、周身鞭毛、運(yùn)動(dòng)活潑、兩端鈍圓的小桿菌。0.4～0.6×1.0～3.0微米。兼性厭氧。普通固體培養(yǎng)基上遷徙生長。自然界中存在極廣，健康人和動(dòng)物的腸道中，條件致病菌。

變形桿菌遷徙生長現(xiàn)象（普通瓊脂平板）

變形桿菌菌落特征（MAC）第46頁，課件共55頁，創(chuàng)作于2023年2月變形桿菌KIA（KA++）MIU（++/-+）變形桿菌苯丙氨酸脫氨酶試驗(yàn)（＋）第47頁，課件共55頁，創(chuàng)作于2023年2月根據(jù)典型的遷徙現(xiàn)象,迅速分解尿素，苯丙氨酸脫氨酶陽性，KIA為KA++，IMViC為-/++--，可鑒定為變形桿菌。第48頁，課件共55頁，創(chuàng)作于2023年2月泌尿系統(tǒng)感染常見細(xì)菌腸球菌、鏈球菌、葡萄球菌第49頁，課件共55頁，創(chuàng)作于2023年2月腸球菌腸球菌：營養(yǎng)要求低，正常寄居皮膚、上呼吸道、消化道和泌尿生殖道，引起的感染有尿路感染、心內(nèi)膜炎等，罹患者多為老年人、女性、體弱或腫瘤患者。糞腸球菌所致感染中最為常見的，絕大部分為院內(nèi)感染。第50頁，課件共55頁，創(chuàng)作于2023年2月葡萄球菌革蘭陽性菌屬約占泌尿感染的25％，以葡萄球菌最常見，主要是金黃色葡萄球菌。表皮葡萄球菌：導(dǎo)管相關(guān)。第51頁，課件共55頁，創(chuàng)作于2023年2月不同方法采集的尿標(biāo)本培養(yǎng)結(jié)果評(píng)價(jià)標(biāo)本來源菌落數(shù)CFU/ml結(jié)果評(píng)