土壤有效磷測(cè)定

土壤中有效磷的測(cè)定-NY/T1121.7-2014A碳酸氫鈉提取——鉬銻抗比色法適用于石灰性、中性土壤PH26.5方法提要由于浸提液（0.5MNaHCO3）提高了C032-離子的活性，使其與Ca2+形成CaC03沉淀，從而降低了Ca2+的活性，使一定量活性較大的Ca-P被浸出，同時(shí)也可使比較活性的Fe—P和AI-P通過(guò)水解作用而浸出（由于碳酸鹽的堿溶液，也降低了鋁和鐵離子的活性，有利于磷酸鋁和磷酸鐵的提取。此外,NaHCO3堿溶液中存在著0H-、HC03-、CO32-等陰離子均能置換吸附態(tài)的磷酸鹽H2P04-。），從而增加了碳酸氫鈉提取中性和石灰性土壤速效磷的能力。由于浸出液中Ca、Fe、Al濃度較低，不會(huì)產(chǎn)生磷的再沉淀；浸出液中的磷可用鉬銻抗比色法定量測(cè)定。主要儀器設(shè)備千分之一電子天平；恒溫水浴振蕩器；150ml塑料瓶和50ml塑料小燒杯；錐形瓶（或比色管）:50mL或25mL比色管；紫外分光光度計(jì)；試劑1氫氧化鈉：10%（m/V）溶液；（調(diào)節(jié)浸提劑pH至8.5）2碳酸氫鈉浸提劑［c（NaHCO3）=0.50mol?L-1,pH=8.5］稱取42.0gNaHCO3溶于950mL水中，用10%氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH至8.5（用酸度計(jì)測(cè)定），用水稀釋至1L。貯存于塑料瓶中備用。如貯存期超過(guò)20d,使用時(shí)須重新校正pH。3酒石酸銻鉀［K（Sb0）C4H406?l/2H20］：0.30%（m/V）溶液;（提供三價(jià)銻離子，作用是生成的三元雜多酸比磷鉬酸銨具有更強(qiáng)的吸光作用；同時(shí)，加快抗壞血酸的還原反應(yīng)?）4抗壞血酸（C6H806左旋，比旋光度+21-22°，分析純）（還原劑，抗壞血酸主要優(yōu)點(diǎn)是生成的顏色穩(wěn)定，干擾離子的影響較小，適用范圍較廣，但顯色慢，需要加溫。如果溶液中有一定的三價(jià)銻存在時(shí)，則大大加快了抗壞血酸的還原反應(yīng)，在室溫下也能顯色。5鉬銻貯備液：稱取10.0g鉬酸銨［（NH4）6Mo7024?4H20］溶于300mL約60°C水中，冷卻。另取181mL濃硫酸，緩緩注入800mL水中，攪勻，冷卻。然后將稀硫酸注入鉬酸銨溶液中，攪勻，冷卻。再加入100mL0.3%酒石酸涕鉀溶液，最后用水稀釋至2L，盛于棕色瓶中備用。（提供一定酸度和三價(jià)銻離子）6顯色劑：稱取0.5g抗壞血酸溶于100mL鉬銻貯備液中。此溶液有效期不長(zhǎng)，建議現(xiàn)用現(xiàn)配。7磷標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液［c（P）=100ug?mL-1］：稱取105C烘干2h的磷酸二氫鉀（優(yōu)級(jí)純）0.4390g，用水溶解后，加入5mL濃硫酸（防長(zhǎng)霉菌，可使溶液長(zhǎng)期保存），轉(zhuǎn)入1L容量瓶中，用水定容。此貯備溶液在冰箱中可長(zhǎng)期保存。8磷標(biāo)準(zhǔn)工作溶液［c（P）=5ug?mL-1］：吸取5.00mL磷標(biāo)準(zhǔn)貯備液于100mL容量瓶中，加水定容。此工作溶液不宜久存。分析步驟有效磷的浸提：稱取過(guò)2mm篩的風(fēng)干土2.50g—置于150ml塑料瓶中一加入50.0ml浸提劑一恒溫（251C）振蕩（18020轉(zhuǎn)/分）301min-取出一干過(guò)濾于50ml塑料燒杯（棄去最初濾液）2.顯色：吸取濾液10.00mLf于干燥的50mL錐形瓶或25mL比色管中一加入5.00mL顯色劑一輕搖以除去C02-加水定容至刻度（若為50mL錐形瓶應(yīng)加水10.00mL）f再搖勻［最后顯色液酸的濃度為0.45mol/L,（l/2H2SO4）］-顯色30min（室溫高于20°C）以上標(biāo)準(zhǔn)曲線：分別準(zhǔn)確吸取5ug?mL-1P標(biāo)準(zhǔn)溶液0、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL于25mL比色管（或容量瓶）中一加入10.0mL浸提劑一加入5.0mL顯色劑一輕搖以除去CO2一加水定容至刻度一再搖勻一顯色30min以后一于880nm波長(zhǎng)處比色.4、比色用1cm光徑比色皿在波長(zhǎng)880nm處，以標(biāo)準(zhǔn)系列溶液的零濃度調(diào)節(jié)儀器零點(diǎn)進(jìn)行比色，測(cè)量吸光度。從校準(zhǔn)曲線上查出含磷量。數(shù)據(jù)處理有效磷（P）,mg?kg-1=C?V?D/m式中：C一從校準(zhǔn)曲線上求得待測(cè)樣品溶液中磷的含量，卩g?mL-1；m—風(fēng)干試樣質(zhì)量，g;V—顯色液體積，25mL；D—分取倍數(shù)，即試樣提取液體積/顯色時(shí)分取的體積，（本試驗(yàn)為50/10）；平行測(cè)定結(jié)果以算術(shù)平均值表示，保留小數(shù)點(diǎn)后一位。精密度平行測(cè)定結(jié)果的允許誤差測(cè)定值(P,mg?kg-1)測(cè)定值(P,mg?kg-1)允許差(P,mg?kg-1)<1010?20>20<1010?20>20絕對(duì)差值W1.0相對(duì)相差＜5%由光源室,單色器、試樣室、光電管暗盒,電子系數(shù)及數(shù)字顯示器等組成其原理:利用分光器（將光源發(fā)出的復(fù)合光分解為單色光）出射的單色光,通過(guò)一定厚度的比色皿,透射光由光電管接受,經(jīng)電子線路放大器,由表頭指示或具微機(jī)處理裝置的儀器打印機(jī)得到吸光值或透光率,推算出被測(cè)成分的濃度。注意事項(xiàng)1）如果土壤有效磷含量較高，應(yīng)吸取少量的濾液，并加浸提劑補(bǔ)足至10.0mL后顯色，計(jì)算時(shí)按所吸取濾液的分取倍數(shù)計(jì)算。2）用NaHC03溶液浸提有效磷時(shí)，溫度影響較大。應(yīng)嚴(yán)格控制浸提溫度。3）土樣經(jīng)風(fēng)干和貯存后，測(cè)定的有效磷含量可能稍有改變，但一般無(wú)大影響。4）由于銻磷鉬雜多酸在常溫（20°C—25°C）下易被抗壞血酸還原為磷鉬藍(lán)。所以顯色溫度以20C為宜。5）操作所用的玻璃器皿，可用1+5的鹽酸浸泡2h,或用不含磷酸鹽的洗滌劑刷洗6）如果用容量瓶或比色管顯色，搖勻時(shí)應(yīng)小心，不要濺出溶液。7）振蕩后立即搖勻過(guò)濾，否則放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng),磷被再固定8）比色前，為消除誤差，需測(cè)得比色皿的校正值，具體方法是：將比色皿洗凈后加蒸餾水，放入比色槽推入光路，讀取吸光值，再以吸光度最小的比色皿作參比（即調(diào)節(jié)吸光度為零），測(cè)其他的比色皿的吸光值。編上號(hào)，做好記錄，作為比色皿校正值，在測(cè)定樣品顯色液時(shí)，哪個(gè)樣品用的是哪只比色皿要記錄好，在計(jì)算時(shí)，要扣除校正值后再查工作曲線。每一次往比色皿中倒入顯色液時(shí)，要用顯色液洗二三遍。一般先測(cè)顏色淺的，倒顯色液于皿中容積2/3處，外面用擦鏡紙吸干并擦拭干凈，比色結(jié)束后將比色皿洗凈再浸入盛有純水的燒杯中。長(zhǎng)期不用時(shí)，洗凈、淋干放回比色盒，用前再用稀酸溶液和純水浸洗干凈。比色皿用后可用溫?zé)岬?40-50°C)的2%的碳酸鈉浸泡后洗凈，以除去吸附的磷鉬藍(lán)顯色物，必要時(shí)可用稀硝酸或鉻酸洗液浸泡片刻后洗凈。干擾離子的消除：主要有砷、硅、Fe3+硅的干擾可控制酸度抑制之。磷鉬雜多酸在較高酸度下形成(0.4-0.8mol?L-1,H+),而硅鉬酸則在較低酸度下生成(0.1-0.4mol?L-1,H+)。土壤中的砷含量很低，而且砷鉬酸還原速度較慢，靈敏度比磷低，不致影響磷的測(cè)定結(jié)果。而Fe3+影響溶液的氧化還原勢(shì)，抑制藍(lán)色的生成。而抗壞血酸能與Fe3+絡(luò)合，保持溶液的氧化還原勢(shì)。顏色在8小時(shí)內(nèi)可保持穩(wěn)定B鹽酸-氟化銨——鉬銻抗比色法適用于酸性土壤中有效磷的測(cè)定PH<6.5方法提要用酸性氟化銨提取，形成氟鋁化銨和氟鐵化銨絡(luò)合物，少量的鈣離子則生成氟化鈣沉淀，磷酸根離子則被釋放提取到溶液中。反應(yīng)式為：3NH4F+3HF+A1P04—H3P04+(NH4)3A1F63NH4F+3HF+FeP04—H3P04+(NH4)3FeF6顯色原理同碳酸氫鈉浸提方法試劑氟化銨-鹽酸浸提劑［c(NH4F)=0.03mol?L-l-c(HCl)=0.025mol?LT］稱取l.llg氟化銨溶于400mL水中，加入2.1mL鹽酸，用水稀釋至1L。貯存于塑料瓶中備用。酒石酸銻鉀［K(Sb0)C4H406?1/2H2O］：0.50%(m/V)溶液；鉬銻貯備液：稱取10.0g鉬酸銨［(NH4)6Mo7024?4H20］溶于300mL約60°C水中，冷卻。另取126mL濃硫酸，緩緩注入400mL水中，攪勻，冷卻。然后將稀硫酸注入鉬酸銨溶液中，攪勻，冷卻。再加入100mL0.5%酒石酸涕鉀溶液，最后用水稀釋至1L,盛于棕色瓶中備用。5%硫酸溶液:吸5mL濃硫酸緩慢加入90mL水中，冷卻后稀釋至100mL.1:3氨水溶液.顯色劑：稱取1.5g抗壞血酸溶于100mL鉬銻貯備液中。此溶液有效期不長(zhǎng)，建議現(xiàn)用現(xiàn)配。磷標(biāo)準(zhǔn)貯備液和標(biāo)準(zhǔn)工作溶液：同0lsen法二硝基酚指示劑：稱0.2g2,4或2,6二硝基酚溶于100mL水中.硼酸溶液:3%。稱取30g硼酸溶于900mL熱水中，冷卻后稀釋至1L。(主要為了和氟離子形成絡(luò)合物,避免氟對(duì)磷的測(cè)定干擾)和腐蝕玻璃儀器.絡(luò)合反應(yīng)為:4F-+H3B03+3H+(BF4)-+3H20分析步驟1.有效磷的提取：稱取過(guò)2mm篩的風(fēng)干土5.00g—置于150ml塑料瓶中一加入50.0ml浸提劑一恒溫（251°C）振蕩（18020轉(zhuǎn)/分）30lmin—干過(guò)濾于50ml塑料燒杯（棄去最初濾液）；同時(shí)做空白。2.顯色：吸取濾液5.00?10.00mLf于50mL容量瓶中一加入10.0mL硼酸溶液一搖勻—加水至30ml左右一加2滴二硝基酚指示劑一稀酸和稀堿調(diào)節(jié)溶液剛顯微黃色一加5.00mL顯色劑一加水定容至刻度一再搖勻［最后顯色液酸的濃度為0.45mol/L,（1/2H2SO4）］一顯色約30min（室溫高于20C）標(biāo)曲的繪制：分別準(zhǔn)確吸取5ug?mLTP標(biāo)準(zhǔn)溶液0、1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0mL于50mL容量瓶中一加入10.0