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實(shí)驗(yàn)十三
當(dāng)歸抗大鼠血栓形成的作用【目的】①學(xué)習(xí)利用體外血栓形成儀進(jìn)行抗血栓形成的實(shí)驗(yàn)方法;②觀察當(dāng)歸抗血栓形成的作用,并分析其作用機(jī)制?!驹怼扛鶕?jù)流體力學(xué)原理,在一個(gè)恒速轉(zhuǎn)動(dòng)密閉圓環(huán)內(nèi)的血液被動(dòng)流動(dòng)是一個(gè)復(fù)雜的三維流動(dòng),這種產(chǎn)生的回流在圓環(huán)轉(zhuǎn)動(dòng)血液下降面上存在有向中心主流的沖擊,這種沖擊可以啟動(dòng)血小板聚集進(jìn)而形成血栓,而形成的血栓因重量的影響,使血液下降面的沖擊更加明顯。當(dāng)歸所含的\t"/kecheng/2013/_blank"阿魏酸能抑制體外血栓形成。小劑量阿司匹林抑制TXA2合成酶,減少TXA2的合成,可抑制血小板聚集,防止血栓?!静牧稀縿?dòng)物:大鼠,雌雄各半,體重200g左右;藥品:100%當(dāng)歸水煎液、0.25%阿司匹林混懸液、生理鹽水;試劑:1%硅油(用乙醚稀釋)、苦味酸溶液、麻醉乙醚;主要器材:體外血栓形成儀(YDA-IV型,北京宏潤(rùn)達(dá)科技發(fā)展有限公司)、2ml硅化注射器、硅化硅膠血栓管、天平、玻璃培養(yǎng)皿、濾紙、恒溫干燥箱、眼科鑷子、刻度尺、手術(shù)剪、秒表、大鼠灌胃器、鼠籠?!痉椒ā?/p>
每組取健康大鼠4只,稱重,標(biāo)記,隨機(jī)分為兩組(甲、乙組)。甲組給予100%當(dāng)歸水煎液,灌胃量為2ml/100g,每日1次,連續(xù)5日,乙組給予同容積的生理鹽水。實(shí)驗(yàn)時(shí),將動(dòng)物用乙醚麻醉后,剖腹。用硅化注射劑自腹主動(dòng)脈取血2ml以上用于測(cè)定。調(diào)節(jié)體外血栓儀,使其溫度恒定在370C,轉(zhuǎn)速為17r/min。將所取血液注入已經(jīng)標(biāo)好刻度線(1.8ml)的硅膠血栓管中,套緊血栓管裝入血栓形成儀中,啟動(dòng)儀器,用秒表計(jì)時(shí)。儀器轉(zhuǎn)動(dòng)15min后,停機(jī),取下血栓管環(huán),打開,將管內(nèi)血液以及已經(jīng)形成的血栓傾倒于鋪有濾紙的玻璃培養(yǎng)皿上。用眼科鑷子輕提起血栓頭,移放在另外干燥的濾紙上,測(cè)量血栓長(zhǎng)度(mm)。用濾紙將血栓表面血液吸干,將其放在已知重量的濾紙上,在天平上稱重,所得重量減去濾紙重量即為血栓的濕重(mg)。在上述血栓放置于640C恒溫干燥箱中烘干30min;取出后稱重所得重量為血栓干重(mg)。【結(jié)果】統(tǒng)計(jì)全班各組實(shí)驗(yàn)結(jié)果,比較用藥后體外血栓長(zhǎng)度、濕重及干重的變化。藥物對(duì)體外血栓形成的影響(±s;n=)組
別劑量(g/kg)血栓長(zhǎng)度(mm)血栓濕重(mg)血栓干重
(mg)生理鹽水當(dāng)歸【注意事項(xiàng)】①自動(dòng)物腹主動(dòng)脈取血易發(fā)生出血現(xiàn)象,操作應(yīng)小心;②每次注入血栓管的血液應(yīng)恒定量;③測(cè)定血栓長(zhǎng)度時(shí),切勿用力拖拉血栓;④測(cè)定血栓濕重時(shí),務(wù)必用濾紙吸干血栓表面的血液;⑤烤干血栓時(shí),須嚴(yán)格掌握考箱溫度和烘烤
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