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文檔簡介

高二生物酵母細(xì)胞的固定化課件第一頁,共四十九頁,編輯于2023年,星期二基礎(chǔ)知識(shí)(一)固定化酶的應(yīng)用實(shí)例

——生產(chǎn)高果糖漿(1)高果糖漿的生產(chǎn)原理:葡萄糖異構(gòu)酶果糖葡萄糖第二頁,共四十九頁,編輯于2023年,星期二(2)葡萄糖異構(gòu)酶固定:

將葡萄糖異構(gòu)酶固定在顆粒狀載體上,裝入反應(yīng)柱中。(3)高果糖漿的生產(chǎn)操作:

從反應(yīng)柱上端注入葡萄糖溶液,從下端流出果糖溶液,一個(gè)反應(yīng)柱可連續(xù)使用半年。

第三頁,共四十九頁,編輯于2023年,星期二2.固定化酶的反應(yīng)柱示意圖第四頁,共四十九頁,編輯于2023年,星期二(二)固定化細(xì)胞技術(shù)1.將酶或細(xì)胞固定化的方法第五頁,共四十九頁,編輯于2023年,星期二(二)固定化細(xì)胞技術(shù)1.將酶或細(xì)胞固定化的方法包埋法第六頁,共四十九頁,編輯于2023年,星期二(二)固定化細(xì)胞技術(shù)1.將酶或細(xì)胞固定化的方法將酶(或細(xì)胞)包埋在細(xì)微網(wǎng)格里包埋法第七頁,共四十九頁,編輯于2023年,星期二(二)固定化細(xì)胞技術(shù)1.將酶或細(xì)胞固定化的方法將酶(或細(xì)胞)包埋在細(xì)微網(wǎng)格里包埋法化學(xué)結(jié)合法第八頁,共四十九頁,編輯于2023年,星期二(二)固定化細(xì)胞技術(shù)1.將酶或細(xì)胞固定化的方法將酶(或細(xì)胞)包埋在細(xì)微網(wǎng)格里將酶(或細(xì)胞)相互連接起來包埋法化學(xué)結(jié)合法第九頁,共四十九頁,編輯于2023年,星期二(二)固定化細(xì)胞技術(shù)1.將酶或細(xì)胞固定化的方法將酶(或細(xì)胞)包埋在細(xì)微網(wǎng)格里將酶(或細(xì)胞)相互連接起來包埋法化學(xué)結(jié)合法吸附法第十頁,共四十九頁,編輯于2023年,星期二(二)固定化細(xì)胞技術(shù)1.將酶或細(xì)胞固定化的方法將酶(或細(xì)胞)包埋在細(xì)微網(wǎng)格里將酶(或細(xì)胞)相互連接起來將酶(或細(xì)胞)吸附在載體表面上包埋法化學(xué)結(jié)合法吸附法第十一頁,共四十九頁,編輯于2023年,星期二【比較】酶和細(xì)胞的固定方法和特點(diǎn)固定對(duì)象酶細(xì)胞適宜固定法化學(xué)結(jié)合法、物理吸附法包埋法特點(diǎn)體積小,固定一種酶。包埋法容易丟失體積大,固定一系列酶。難以化學(xué)結(jié)合和吸附第十二頁,共四十九頁,編輯于2023年,星期二2.固定化酶和固定化細(xì)胞的聯(lián)系與區(qū)別第十三頁,共四十九頁,編輯于2023年,星期二2.固定化酶和固定化細(xì)胞的聯(lián)系與區(qū)別聯(lián)系:應(yīng)用相同,都能催化某些反應(yīng)第十四頁,共四十九頁,編輯于2023年,星期二2.固定化酶和固定化細(xì)胞的聯(lián)系與區(qū)別聯(lián)系:應(yīng)用相同,都能催化某些反應(yīng)區(qū)別:1)固定化細(xì)胞技術(shù)操作容易,成本低,

容易回收;2)固定化細(xì)胞技術(shù)對(duì)酶活性影響更??;3)固定化細(xì)胞固定的一系列酶;4)由于大分子難以通過細(xì)胞膜,因此固

定化細(xì)胞的應(yīng)用有一定的限制;第十五頁,共四十九頁,編輯于2023年,星期二〖思考〗將谷氨酸棒狀桿菌生產(chǎn)谷氨酸的發(fā)酵過程變?yōu)檫B續(xù)的酶反應(yīng),應(yīng)當(dāng)固定(酶、細(xì)胞);若將蛋白質(zhì)變成氨基酸,應(yīng)當(dāng)固定(酶、細(xì)胞)。第十六頁,共四十九頁,編輯于2023年,星期二〖思考〗將谷氨酸棒狀桿菌生產(chǎn)谷氨酸的發(fā)酵過程變?yōu)檫B續(xù)的酶反應(yīng),應(yīng)當(dāng)固定(酶、細(xì)胞);若將蛋白質(zhì)變成氨基酸,應(yīng)當(dāng)固定(酶、細(xì)胞)。第十七頁,共四十九頁,編輯于2023年,星期二3.固定化細(xì)胞的材料:固定化細(xì)胞時(shí)應(yīng)當(dāng)選用不溶于水的多孔性載體材料,如明膠、瓊脂糖、海藻酸鈉、醋酸纖維素和聚丙烯酰胺等第十八頁,共四十九頁,編輯于2023年,星期二1.制備固定化酵母細(xì)胞(1)酵母細(xì)胞的活化:1g干酵母+10mL蒸餾水→50mL燒杯→攪拌均勻→放置1h,使之活化。2.實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)第十九頁,共四十九頁,編輯于2023年,星期二〖思考2〗活化是指什么?1.制備固定化酵母細(xì)胞(1)酵母細(xì)胞的活化:1g干酵母+10mL蒸餾水→50mL燒杯→攪拌均勻→放置1h,使之活化。2.實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)第二十頁,共四十九頁,編輯于2023年,星期二活化是指讓處于休眠狀態(tài)的微生物重新恢復(fù)正常生活狀態(tài)的過程?!妓伎?〗活化是指什么?1.制備固定化酵母細(xì)胞(1)酵母細(xì)胞的活化:1g干酵母+10mL蒸餾水→50mL燒杯→攪拌均勻→放置1h,使之活化。2.實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)第二十一頁,共四十九頁,編輯于2023年,星期二(2)配制CaCl2溶液:

0.83gCaCl2+150mL蒸餾水→200mL燒杯→溶解備用。第二十二頁,共四十九頁,編輯于2023年,星期二(3)配制海藻酸鈉溶液:0.7g海藻酸+10mL水→50mL燒杯→酒精燈微火(或間斷)加熱,并不斷攪拌,使之溶化→蒸餾水定容到10mL。第二十三頁,共四十九頁,編輯于2023年,星期二(3)配制海藻酸鈉溶液:0.7g海藻酸+10mL水→50mL燒杯→酒精燈微火(或間斷)加熱,并不斷攪拌,使之溶化→蒸餾水定容到10mL?!妓伎?〗微火加熱并不斷攪拌的目的是什么?第二十四頁,共四十九頁,編輯于2023年,星期二防止海藻酸鈉焦糊。(3)配制海藻酸鈉溶液:0.7g海藻酸+10mL水→50mL燒杯→酒精燈微火(或間斷)加熱,并不斷攪拌,使之溶化→蒸餾水定容到10mL?!妓伎?〗微火加熱并不斷攪拌的目的是什么?第二十五頁,共四十九頁,編輯于2023年,星期二(4)海藻酸鈉溶液與酵母細(xì)胞的混合:將溶化的海藻酸鈉溶液冷卻至室溫,加入活化酵母細(xì)胞液,攪拌后吸入到注射器中。第二十六頁,共四十九頁,編輯于2023年,星期二(4)海藻酸鈉溶液與酵母細(xì)胞的混合:將溶化的海藻酸鈉溶液冷卻至室溫,加入活化酵母細(xì)胞液,攪拌后吸入到注射器中?!妓伎?〗為什么要海藻酸鈉溶液冷卻后才能加入酵母細(xì)胞?第二十七頁,共四十九頁,編輯于2023年,星期二(4)海藻酸鈉溶液與酵母細(xì)胞的混合:將溶化的海藻酸鈉溶液冷卻至室溫,加入活化酵母細(xì)胞液,攪拌后吸入到注射器中?!妓伎?〗為什么要海藻酸鈉溶液冷卻后才能加入酵母細(xì)胞?防止高溫殺死酵母細(xì)胞。第二十八頁,共四十九頁,編輯于2023年,星期二(5)固定化酵母細(xì)胞:以恒定速度緩慢地將注射器中的溶液滴加到CaCl2溶液中,形成凝膠珠狀顆粒。第二十九頁,共四十九頁,編輯于2023年,星期二(6)沖洗:將固定的酵母細(xì)胞凝膠珠用蒸餾水沖洗2~3次。(二).固定化酵母細(xì)胞的發(fā)酵第三十頁,共四十九頁,編輯于2023年,星期二(二).固定化酵母細(xì)胞的發(fā)酵(6)沖洗:將固定的酵母細(xì)胞凝膠珠用蒸餾水沖洗2~3次。(7)發(fā)酵:150mL10%葡萄糖+固定化酵母細(xì)胞→200mL錐形瓶→密封→25℃發(fā)酵24h。第三十一頁,共四十九頁,編輯于2023年,星期二〖思考5〗發(fā)酵過程中錐形瓶為什么要密封?〖思考6〗錐形瓶中的氣泡和酒精是怎樣形成的?〖思考7〗在利用固定化酶或固定化細(xì)胞進(jìn)行生產(chǎn)的過程中,需要無菌操作嗎?第三十二頁,共四十九頁,編輯于2023年,星期二〖思考5〗發(fā)酵過程中錐形瓶為什么要密封?〖思考6〗錐形瓶中的氣泡和酒精是怎樣形成的?〖思考7〗在利用固定化酶或固定化細(xì)胞進(jìn)行生產(chǎn)的過程中,需要無菌操作嗎?酵母菌的酒精發(fā)酵需要缺氧條件。第三十三頁,共四十九頁,編輯于2023年,星期二〖思考5〗發(fā)酵過程中錐形瓶為什么要密封?〖思考6〗錐形瓶中的氣泡和酒精是怎樣形成的?〖思考7〗在利用固定化酶或固定化細(xì)胞進(jìn)行生產(chǎn)的過程中,需要無菌操作嗎?酵母菌的酒精發(fā)酵需要缺氧條件。酵母菌進(jìn)行無氧呼吸產(chǎn)生的。第三十四頁,共四十九頁,編輯于2023年,星期二〖思考5〗發(fā)酵過程中錐形瓶為什么要密封?〖思考6〗錐形瓶中的氣泡和酒精是怎樣形成的?〖思考7〗在利用固定化酶或固定化細(xì)胞進(jìn)行生產(chǎn)的過程中,需要無菌操作嗎?酵母菌的酒精發(fā)酵需要缺氧條件。酵母菌進(jìn)行無氧呼吸產(chǎn)生的。需要。第三十五頁,共四十九頁,編輯于2023年,星期二選修1-2AVSEQ05.DAT第三十六頁,共四十九頁,編輯于2023年,星期二例1.下列有關(guān)固定化技術(shù)的敘述,正確的是()A.固定化酶只是在細(xì)胞內(nèi)才能發(fā)揮作用B.固定化酶能提高酶的利用率C.酶的固定是酶分離純化的常用方法D.固定化酶的固定化方式就是吸附在

固體表面上。第三十七頁,共四十九頁,編輯于2023年,星期二例1.下列有關(guān)固定化技術(shù)的敘述,正確的是()A.固定化酶只是在細(xì)胞內(nèi)才能發(fā)揮作用B.固定化酶能提高酶的利用率C.酶的固定是酶分離純化的常用方法D.固定化酶的固定化方式就是吸附在

固體表面上?!痰谌隧摚菜氖彭?,編輯于2023年,星期二例2.關(guān)于固定化細(xì)胞的敘述,正確的是A.催化效率高,低耗能、低污染B.對(duì)環(huán)境的條件非常敏感,容易失活C.既能與反應(yīng)物充分接觸,又能與產(chǎn)物

分離D.成本低、操作簡單,但反應(yīng)效果可能

很低第三十九頁,共四十九頁,編輯于2023年,星期二例2.關(guān)于固定化細(xì)胞的敘述,正確的是A.催化效率高,低耗能、低污染B.對(duì)環(huán)境的條件非常敏感,容易失活C.既能與反應(yīng)物充分接觸,又能與產(chǎn)物

分離D.成本低、操作簡單,但反應(yīng)效果可能

很低√第四十頁,共四十九頁,編輯于2023年,星期二例3.溶解海藻酸鈉,最好采用______加熱的方法A.小火間斷B.小火持續(xù)

C.大火間斷D.大火持續(xù)第四十一頁,共四十九頁,編輯于2023年,星期二例3.溶解海藻酸鈉,最好采用______加熱的方法A.小火間斷B.小火持續(xù)

C.大火間斷D.大火持續(xù)√第四十二頁,共四十九頁,編輯于2023年,星期二例4.關(guān)于酵母菌的敘述,正確的是A.酵母菌在營養(yǎng)物質(zhì)充足時(shí)、環(huán)境適宜

時(shí),依靠有性生殖進(jìn)行繁殖B.酵母菌的代謝類型時(shí)異養(yǎng)厭氧型C.酵母菌的生物膜系統(tǒng)包括細(xì)胞膜、核

膜、各種的細(xì)胞器膜等膜D.用酵母菌釀酒時(shí),應(yīng)先密封后通氣第四十三頁,共四十九頁,編輯于2023年,星期二例4.關(guān)于酵母菌的敘述,正確的是A.酵母菌在營養(yǎng)物質(zhì)充足時(shí)、環(huán)境適宜

時(shí),依靠有性生殖進(jìn)行繁殖B.酵母菌的代謝類型時(shí)異養(yǎng)厭氧型C.酵母菌的生物膜系統(tǒng)包括細(xì)胞膜、核

膜、各種的細(xì)胞器膜等膜D.用酵母菌釀酒時(shí),應(yīng)先密封后通氣√第四十四頁,共四十九頁,編輯于2023年,星期二例5.將酵母菌的培養(yǎng)液由富氧狀態(tài)變?yōu)槿毖鯛顟B(tài),下面加快的一項(xiàng)是A.CO2的釋放B.丙酮酸的氧化

C.葡萄糖的利用D.ATP的形成第四十五頁,共四十九頁,編輯于2023年,星期二例5.將酵母菌的培養(yǎng)液由富氧狀態(tài)變?yōu)槿毖鯛顟B(tài),下面加快的一項(xiàng)是A.CO2的釋放B.丙酮酸的氧化

C.葡萄糖的利用D.ATP的形成√第四十六頁,共四十九頁,編輯于2023年,星期二例6.固定化酶的優(yōu)點(diǎn)是A.有利于增加酶的活性

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