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目VITEKMS介 工作環(huán)境要 開機(jī)關(guān)機(jī)程 所需試驗(yàn)材 對(duì)樣本的要 VITEKMS樣本準(zhǔn)備流 細(xì)菌、酵母菌樣本準(zhǔn) 樣本準(zhǔn)備注意事 分枝桿菌樣本準(zhǔn) 曲霉菌樣本準(zhǔn) 用VITEKMS鑒定微生 查看鑒定結(jié) 質(zhì)量控 VITEKMS........................................................................................................附錄1：VITEKMS檢測/分析信 附錄3：VITEKMS鑒定菌種表 VITEKMSVITEKMS(VITEKMassSpectrometryVITEK質(zhì)譜儀)，采用MALDI-TOF技術(shù)（Matrix-AssistedLaserDesorption/IonizationTimeofFlight，基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時(shí)間），用于臨床微生物的快速鑒定。MALDI-TO技術(shù)是近年發(fā)展起來的一種新型軟電離質(zhì)譜技術(shù)。質(zhì)譜儀主機(jī)由兩部分組成：基質(zhì)輔助激光解吸電離離子源（MALDI）和飛行時(shí)間質(zhì)量檢測器（TOF。MALDI的原理是用激光照射樣本與基質(zhì)形成的共結(jié)晶薄膜，基質(zhì)從激光中吸收能量傳遞給樣本中的生物分子，并將質(zhì)子轉(zhuǎn)移到生物分子而使生物分子發(fā)生電離。TOF的原理是離子在電場作用下加速飛過飛行管道，根據(jù)到達(dá)檢測器的飛行時(shí)間不同而被檢測，即待測離子的質(zhì)荷比（M/Z）與離子的飛行時(shí)間成正比。二、組成MSinstrument）、控制質(zhì)譜儀主機(jī)的VITEKMS工作站（VITEKMSAcquisition認(rèn)、傳輸?shù)龋┙M成。VITEKMSVITEK2系統(tǒng)連接，實(shí)現(xiàn)快速鑒定和藥敏試驗(yàn)。再加1ulVITEKMS-CHCA基質(zhì)），待干燥后放入VITEKMS儀器獲取細(xì)菌全細(xì)白（主要 寬700mm×深850mm×高 200VAC,50-60Hz,1,000VA，單 18℃—24℃(64°F—75°F) 小于70%，無凝結(jié)水重要提示：VITEKMS通常應(yīng)保持開機(jī)狀態(tài)，僅在緊急情況下才可關(guān)機(jī)，且關(guān)機(jī)時(shí)間不要超過24小時(shí)，否則可能發(fā)生真空系統(tǒng)油污染。打開 MS電源開關(guān)（不管VITEK 工作站電腦是否打開或關(guān)閉MS工作站電腦是否打開或關(guān)閉。一 所需材VITEKMS-DS48個(gè)點(diǎn)位，16個(gè)點(diǎn)位為一組；從上至下分的小點(diǎn)位只用于涂校準(zhǔn)菌株大腸埃希菌ATCC8739，用于該組所有菌株質(zhì)譜數(shù)據(jù)的校(a-Cyano-4-hydroxy-cinnamicacid二 校準(zhǔn)菌株：大腸埃希菌ATCC質(zhì)控菌：糞腸球 ATCCATCCMYA-(0.5二、培養(yǎng)基：臨床微生物常用培養(yǎng)基。注：臨床標(biāo)本和混合菌不能直接用于VITEKMS檢測。18724872247224962496點(diǎn)擊桌面的VITEKMSPrepStation圖標(biāo)，出現(xiàn)下圖。輸入用戶名和（下述用戶名 VITEKMSBacteria(Fungi(真菌)。默認(rèn)鑒定，可在Isolate框增加菌株號(hào)。1ulATCC8739位，更換新的1ul接種環(huán)再在選擇的樣本點(diǎn)位涂樣本菌。ATCC8739。注：大腸埃希菌ATCC8739需使用在血平板上的新鮮培養(yǎng)物（見附錄1發(fā)送至VITEKMS儀器。， 10μL2/3的菌量并直接加入含TFA的1μLVITEKMS樣本準(zhǔn)備工作站指定時(shí)間與環(huán)境相對(duì)濕度有關(guān))。然后加1μLVITEKMS-CHCA基質(zhì)。待完全干燥。50μL加樣頭從瓊脂平板上挑取足量的真菌(在加樣頭末端能夠看到即450μL1/10稀釋。渦旋震蕩數(shù)1μLVITEKMS樣本準(zhǔn)備工作站VITEKMSAcquisitionStation VITEKMSAcquisitionStation ，VITEKMS儀器開始部分減壓（能聽到閥門發(fā)出的脈沖和嘶嘶聲)且屏幕下 點(diǎn)擊按鈕（不要點(diǎn)Close按鈕，板架進(jìn)入VITEKMS首先檢測校準(zhǔn)點(diǎn)位的大腸埃希菌ATCC8739。如果校準(zhǔn)通過(與數(shù)據(jù)庫中的大腸埃希菌失?。c(diǎn)位變?yōu)榧t色），VITEKMS報(bào)告錯(cuò)誤信息，隨后檢測下一個(gè)樣本檢測組。待所有樣本點(diǎn)位檢測完成后，VITEKMS將校準(zhǔn)點(diǎn)位的大腸埃希菌ATCC8739作為內(nèi)質(zhì)控說 瀏覽質(zhì)譜。點(diǎn)擊按鈕，查看當(dāng)前點(diǎn)位質(zhì)譜（點(diǎn)擊Results框中的點(diǎn)位）或查看以前檢測點(diǎn)位質(zhì)譜（LabId輸入樣本號(hào)。進(jìn)入Myla軟件。點(diǎn)擊桌面的Myla點(diǎn)擊VITEKMSReview中的數(shù)字查看結(jié)果 好的鑒 160- 2->不能鑒定<高致病菌重要病原菌菌大腸菌 大腸菌：疑似志賀菌屬和大腸菌O157時(shí)MALDI-TOF質(zhì)譜分析法不能區(qū)別大腸菌和志賀菌。鑒定結(jié)果顯示為大腸菌時(shí)也可能是志賀菌，應(yīng)考慮患者的臨床情況和病史，并通過學(xué)試驗(yàn)確認(rèn)鑒定2個(gè)或多個(gè)靶板點(diǎn)位（指在同一個(gè)靶板上，則可能會(huì)涉及結(jié)果的整12用相同靶板用新的靶板用其它方法點(diǎn)選擇一個(gè)點(diǎn)位的鑒定結(jié)點(diǎn)確認(rèn)選擇的結(jié)VITEKMSATCC?ATCCMYA- VITEK一 更換干燥(打開位置[P-3]或埃埃[P-2]或[Q-2][P-1[Q-1]校準(zhǔn)點(diǎn)位 埃[P150]使用其它的方法重復(fù)鑒定例如VITEK?2、API試條，其它的生化或[Q201]技術(shù)支持或咨詢當(dāng)?shù)氐纳颷Q300]內(nèi)部確認(rèn)時(shí)不能鑒定測組的涂菌點(diǎn)位參見VITEKMS[Q301]內(nèi)部確認(rèn)時(shí)對(duì)校準(zhǔn)菌[Q302]內(nèi)部確認(rèn)時(shí)校準(zhǔn)菌株[P400]或[Q400][P401]或[Q401]技術(shù)支持或咨詢當(dāng)?shù)氐纳?37℃

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