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學(xué)必求其心得,業(yè)必貴于專(zhuān)精學(xué)必求其心得,業(yè)必貴于專(zhuān)精學(xué)必求其心得,業(yè)必貴于專(zhuān)精1.下列有關(guān)平板劃線(xiàn)接種法的操作錯(cuò)誤的是()A.將接種環(huán)放在火焰上灼燒B.將已冷卻的接種環(huán)伸入菌液中蘸取一環(huán)液C.蘸取菌液和劃線(xiàn)要在火焰旁進(jìn)行D.劃線(xiàn)時(shí)要將最后一區(qū)的劃線(xiàn)與第一區(qū)的劃線(xiàn)相連2.有關(guān)涂布平板法,敘述錯(cuò)誤的是()A.首先將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋B.然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面C.再放在適宜條件下培養(yǎng)D.結(jié)果都可在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落3.平板冷凝后要將平板倒置,其原因是()A.接種時(shí)再拿起來(lái)方便B.在皿底上標(biāo)記日期等方便C.正著放置容易破碎D.防止皿蓋上的冷凝水落入培養(yǎng)基造成污染4.高溫滅菌的原理是()A.每種微生物生長(zhǎng)的最適溫度是一定的B.每種微生物對(duì)高溫環(huán)境都不適應(yīng)C.高溫破壞了細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)、核酸,影響其生命活動(dòng)D.高溫降低了環(huán)境中氧的濃度5.下列生物學(xué)實(shí)驗(yàn)操作,能夠順利達(dá)到實(shí)驗(yàn)?zāi)康牡氖?)A.在固體培養(yǎng)基上涂布稀釋的大腸桿菌培養(yǎng)液獲得單菌落B.在接種酵母菌的新鮮葡萄汁中通入無(wú)菌空氣制作果酒C.土壤浸出液接種于牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上篩選分解尿素的細(xì)菌D.在分離土壤中的尿素分解菌實(shí)驗(yàn)中,采集的土樣經(jīng)高溫滅菌后,可以用于制取土壤稀釋液6.欲從土壤中分離出能分解尿素的細(xì)菌,下列實(shí)驗(yàn)操作中不正確的是()A.將土壤用無(wú)菌水進(jìn)行一系列的梯度稀釋B.同一濃度的土壤稀釋液應(yīng)最多涂布三個(gè)平板C.可將未接種的培養(yǎng)基在相同條件下培養(yǎng)作為對(duì)照D.可用顯微鏡觀察計(jì)數(shù)來(lái)測(cè)量尿素分解菌的數(shù)量7.某學(xué)者欲研究被石油污染過(guò)的土壤中細(xì)菌數(shù)量,并從中篩選出能分解石油的細(xì)菌。下列操作錯(cuò)誤的是()A.利用平板劃線(xiàn)法對(duì)細(xì)菌進(jìn)行計(jì)數(shù)B.以石油為唯一碳源的培養(yǎng)基篩選C.采用涂布平板法分離菌種D.稱(chēng)取和稀釋土壤樣品時(shí)應(yīng)在火焰旁8.下列有關(guān)平板劃線(xiàn)操作的敘述中,不正確的是()A.第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物B.每次劃線(xiàn)前,灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線(xiàn)結(jié)束后,接種環(huán)上殘留的菌種C.在第二區(qū)域內(nèi)劃線(xiàn)時(shí),接種環(huán)上的菌種直接來(lái)源于菌液D.劃線(xiàn)結(jié)束后,灼燒接種環(huán),能及時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種,避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者9.用涂布平板法來(lái)統(tǒng)計(jì)樣品中活菌的數(shù)目,其結(jié)果與實(shí)際值相比()A.比實(shí)際值高B.比實(shí)際值低C.和實(shí)際值一致D.可能比實(shí)際值高,也可能比實(shí)際值低10.在做分離分解纖維素的細(xì)菌實(shí)驗(yàn)中,加入剛果紅應(yīng)該在()①制備培養(yǎng)基時(shí)②梯度稀釋時(shí)③倒平板時(shí)④涂布時(shí)⑤長(zhǎng)出菌落時(shí)A.①③B.②⑤C.③⑤D.④⑤11.(2017·重慶一中模擬)大腸桿菌是一種兼性厭氧菌,在無(wú)氧條件下,發(fā)酵能將葡萄糖轉(zhuǎn)換成多種有機(jī)酸并生成二氧化碳,某研究機(jī)構(gòu)利用“濾膜法”對(duì)受污染的河流水體進(jìn)行了大腸桿菌活菌數(shù)目的測(cè)定?;卮鹣铝邢嚓P(guān)問(wèn)題:(1)研究人員向葡萄糖蛋白胨培養(yǎng)液中加入適量的溴麝香草酚藍(lán)水溶液后,裝入圖甲所示的試管中,再將污水樣滴加進(jìn)去震蕩搖勻,適宜條件下培養(yǎng)一段時(shí)間后可觀察到溶液顏色的變化為_(kāi)___________________。(2)圖乙濾膜的孔徑應(yīng)________(填“大于”“小于”或“等于”)大腸桿菌.(3)制備圖乙中牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基時(shí),培養(yǎng)基的滅菌方法是____________,待培養(yǎng)基冷卻至________℃左右時(shí)進(jìn)行倒平板。(4)為了鑒別大腸桿菌菌落,可向培養(yǎng)基中加入______________染料,該研究機(jī)構(gòu)通過(guò)統(tǒng)計(jì)________色菌落的數(shù)目,計(jì)算出單位體積樣品中大腸桿菌數(shù)目。理論上他們的統(tǒng)計(jì)值要比實(shí)際值________(填“偏高"“偏低"或“相等”)理由是___________________12.(2017·昆明市調(diào)研)牛、山羊等反芻動(dòng)物的瘤胃中生活著多種厭氧微生物。為了分離出高效的纖維素分解菌,科學(xué)家從牛瘤胃中獲取內(nèi)容物,經(jīng)過(guò)選擇培養(yǎng)后,接種在鑒別培養(yǎng)基上初篩分離得到5個(gè)菌株,觀察結(jié)果如下:菌株編號(hào)透明圈直徑R菌株直徑rR/r10.40。31.321.10.61。732.00.82。542.10。92.350.550.31。8回答下列問(wèn)題:(1)將選擇培養(yǎng)后的菌種接種在經(jīng)__________________法滅菌的鑒別培養(yǎng)基上。培養(yǎng)基成分中的纖維素能與________形成紅色復(fù)合物,該培養(yǎng)基屬于__________(填“液體”或“固體”)培養(yǎng)基。(2)據(jù)表分析,________號(hào)菌株最可能具有較高產(chǎn)纖維素酶的能力且酶活性也較高,理由是______________。為確定此結(jié)論可繼續(xù)進(jìn)行實(shí)驗(yàn),對(duì)纖維素酶分解纖維素后所產(chǎn)生的________進(jìn)行定量測(cè)定。13.(2017·東莞模擬)從自然界微生物中篩選某菌種的一般步驟是采集菌樣→富集培養(yǎng)→純種分離→性能測(cè)定。富集培養(yǎng)指創(chuàng)設(shè)僅適合待分離微生物旺盛生長(zhǎng)的特定環(huán)境條件,使其群落的數(shù)量大大增加,從而分離出所需微生物的培養(yǎng)方法。(1)接種前要對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行______________處理。在整個(gè)微生物的分離和培養(yǎng)過(guò)程中,一定要注意在________條件下進(jìn)行.(2)不同微生物的生存環(huán)境不同,獲得理想微生物的第一步是從適合的環(huán)境采集菌樣,然后再按一定的方法分離、純化。如培養(yǎng)纖維素分解菌的菌樣應(yīng)從______________的環(huán)境中采集.(3)從土壤中篩選纖維素分解菌需要配制________培養(yǎng)基(按用途分類(lèi)),該培養(yǎng)基中需要加入纖維素粉作為唯一的________.(4)經(jīng)過(guò)梯度稀釋后,要將樣品均勻涂布在用于鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上,在該培養(yǎng)基中需要加入的特殊染料是________,當(dāng)形成菌落以后可以根據(jù)菌落周?chē)欠癞a(chǎn)生________來(lái)篩選纖維素分解菌。某同學(xué)在純化土壤中的細(xì)菌時(shí),發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上的菌落連成一片,最可能的原因是________。

答案精析1.D[將微生物的接種工具,如接種環(huán)、接種針或其他的金屬用具,直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒,可以迅速?gòu)氐椎販缇?,A正確;接種環(huán)必須冷卻后,才可以伸入菌液中蘸取一環(huán)液,否則會(huì)燒傷或燒死微生物,B正確;蘸取菌液和劃線(xiàn)要在火焰旁進(jìn)行,防止空氣中的雜菌,C正確;劃線(xiàn)時(shí)要避免最后一區(qū)的劃線(xiàn)與第一區(qū)相連,因?yàn)樽詈笠粎^(qū)是細(xì)菌最稀少的,而第一區(qū)是細(xì)菌最致密的,如果連在一起則有可能影響單個(gè)菌落的分離效果,D錯(cuò)誤。]2.D3.D[微生物實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)的關(guān)鍵在于防止雜菌污染,平板冷凝后,要將平板倒置,其原因是防止皿蓋上的冷凝水落入培養(yǎng)基造成污染,故選D。]4.C[蛋白質(zhì)是生命活動(dòng)的主要承擔(dān)者,遺傳物質(zhì)DNA控制蛋白質(zhì)的合成,高溫會(huì)破壞蛋白質(zhì)和核酸的空間結(jié)構(gòu),使它們變性失活,因此高溫滅菌的原理是:破壞了細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)、核酸,影響其生命活動(dòng),C項(xiàng)正確.]5.A[在固體培養(yǎng)基上涂布稀釋后的菌液能夠得到單個(gè)菌落,A項(xiàng)正確;在接種酵母菌的新鮮葡萄汁中通入無(wú)菌空氣,有利于酵母菌進(jìn)行有氧呼吸大量繁殖,不利于制作果酒,B項(xiàng)錯(cuò)誤;牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基是普通的培養(yǎng)基沒(méi)有選擇功能,應(yīng)在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基上篩選尿素分解菌,C項(xiàng)錯(cuò)誤;在分離土壤中的尿素分解菌實(shí)驗(yàn)中,采集的土樣經(jīng)高溫滅菌后,土樣中的微生物全部被殺死,不能用于制取土壤稀釋液,D項(xiàng)錯(cuò)誤。]6.B[為防止土壤浸出液濃度過(guò)高,不能獲得單菌落,要將土壤用無(wú)菌水進(jìn)行一系列的梯度稀釋,A正確;同一濃度的土壤稀釋液應(yīng)至少涂布三個(gè)平板,防止偶然因素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響,B錯(cuò)誤;可以將未接種的培養(yǎng)基在相同條件下培養(yǎng)作為對(duì)照,以判斷培養(yǎng)基滅菌是否徹底,C正確;可以用顯微鏡觀察計(jì)數(shù)來(lái)測(cè)量尿素分解菌的數(shù)量,D正確。]7.A[分離菌種常用的接種方法是平板劃線(xiàn)法和涂布平板法,但對(duì)活菌進(jìn)行計(jì)數(shù)常用涂布平板法而不能用平板劃線(xiàn)法,所以A項(xiàng)錯(cuò)誤。閱讀題干可知實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖呛Y選出能分解石油的細(xì)菌,培養(yǎng)基的配方應(yīng)以石油為唯一碳源,所以B項(xiàng)正確。對(duì)微生物進(jìn)行分離和計(jì)數(shù),應(yīng)該用涂布平板法,所以C項(xiàng)正確.微生物的分離和培養(yǎng)的關(guān)鍵技術(shù)是無(wú)菌技術(shù),因此在微生物的分離和培養(yǎng)的過(guò)程中稱(chēng)取和稀釋土壤等活動(dòng)要在火焰旁進(jìn)行,所以D項(xiàng)正確。]8.C[平板劃線(xiàn)操作中,接種環(huán)取菌種前灼燒的目的是避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物,以后每次劃線(xiàn)前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線(xiàn)后殘留的菌種。劃線(xiàn)結(jié)束仍需灼燒接種環(huán),是為了能及時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種,避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。從第二次劃線(xiàn)開(kāi)始,每次劃線(xiàn)時(shí)接種環(huán)上的菌種直接來(lái)源于上次劃線(xiàn)的末端。]9.B[用涂布平板法對(duì)樣品中活菌數(shù)目進(jìn)行統(tǒng)計(jì),只是一種估測(cè),根據(jù)此方法的實(shí)驗(yàn)過(guò)程可知,在某一稀釋度下涂布的平板菌體數(shù)具有一定的偶然性,并不是絕對(duì)均勻的,所以取若干個(gè)平板菌落數(shù)量的平均值比較接近樣品中菌體數(shù)的真實(shí)值。用涂布平板法來(lái)統(tǒng)計(jì)樣品中活菌的數(shù)目有可能幾個(gè)細(xì)菌同時(shí)在一起,當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí),平板上觀察到的只是一個(gè)菌落,而樣品稀釋度無(wú)論多高都很難使其中的細(xì)菌都單個(gè)分布于培養(yǎng)基上,故計(jì)數(shù)結(jié)果比實(shí)際值低。]10.C[常用的剛果紅染色法有兩種:一種是先培養(yǎng)微生物,再加入剛果紅進(jìn)行顏色反應(yīng);另一種是在倒平板時(shí)就加入剛果紅。綜上所述,C項(xiàng)正確。]11.(1)藍(lán)色→綠色→黃色(2)小于(3)高壓蒸汽滅菌50(4)伊紅美藍(lán)黑偏低兩個(gè)或多個(gè)大腸桿菌連在一起時(shí),平板上只能觀察到1個(gè)菌落解析(1)大腸桿菌細(xì)胞呼吸產(chǎn)生的二氧化碳?xì)怏w可使溴麝香草酚藍(lán)水溶液由藍(lán)變綠再變黃。(2)圖乙濾膜的孔徑應(yīng)小于大腸桿菌,否則大腸桿菌會(huì)漏掉.(3)牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基一般采取高壓蒸汽滅菌法,滅菌后一定要等冷卻到50℃左右時(shí)才能倒平板。(4)為了鑒別大腸桿菌菌落,可向培養(yǎng)基中加入伊紅美藍(lán)染料,可以將大腸桿菌菌落染成黑色。由于多個(gè)菌落連在一起時(shí)會(huì)出現(xiàn)重疊現(xiàn)象,所以統(tǒng)計(jì)值比真實(shí)值要小.12.(1)高壓蒸汽滅菌剛果紅固體(2)33號(hào)菌株R/r的值較大葡萄糖解析(1)微生物的培養(yǎng)基一般用高壓蒸汽滅菌法滅菌.培養(yǎng)基成分中的纖維素能與剛果紅形成紅色復(fù)合物,該培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基。(2)據(jù)表分析,3號(hào)菌株R/r的值較大,其最可能具有較高產(chǎn)纖維素酶的能力且酶活性也較高。13.(1)高壓蒸汽滅菌無(wú)菌(2)富含纖維素(3)選擇碳源(4)剛果紅透明圈菌液濃度過(guò)高(土壤溶液稀釋不夠)解析(1)按照微生物的需求配制的培養(yǎng)基要進(jìn)行高壓蒸汽滅菌,取菌種的接種環(huán)要進(jìn)行灼燒滅菌、操作要在酒精燈的火焰附近進(jìn)行,培養(yǎng)要在無(wú)菌的恒溫箱內(nèi)。因此,全部的實(shí)驗(yàn)過(guò)程要在無(wú)菌條件下完成.(2)篩選菌種應(yīng)從適于目的菌種生長(zhǎng)、繁

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