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成年綿羊體外胚胎生產(chǎn)技術(shù)操作規(guī)程2017-11-10發(fā)布2017-12-10實(shí)施新疆維吾爾自治區(qū)質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布I本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：新疆畜牧科學(xué)院生物技術(shù)研究所(新疆畜牧科學(xué)院中國(guó)-澳大利亞綿羊育種研究中心)、新疆維吾爾自治區(qū)畜牧總站、新疆華牛天俊種畜繁育工程有限公司。1文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。細(xì)胞進(jìn)行成熟培養(yǎng)、體外受精、體外培養(yǎng)，獲得可用的胚胎，并將胚胎移植至25.2激素處理方法放入海綿栓或CIDR(含孕激素陰道栓)之日，作為發(fā)情周期的第0天，在第9天開(kāi)始注射FSH,每天早、晚各注射1次，中間間隔約12h,連a)注射第5次FSH時(shí)開(kāi)始空腹(手術(shù)前空腹24h),禁飲禁食；d)用2%～4%碘酊消毒手術(shù)部位，并停留5min;e)用75%酒精對(duì)手術(shù)部位脫碘、晾干；g)避開(kāi)血管，用手術(shù)刀縱向切開(kāi)3mm～5mm長(zhǎng)的刀口，將皮下結(jié)締組織分離，暴露肌膜。再用i)用吸有抽卵液的10mL注射器抽取突出卵巢表面的卵泡，邊緣用紗布止血。回收卵泡液約6mL34海綿栓或CIDR(含孕激素)、促卵泡素、生理鹽水。75%酒精、碘酊、新潔爾滅、0.9%生理鹽水、青霉素、靜松靈、消炎粉。羊手術(shù)架、保定繩、刮毛刀、手術(shù)器械盤、手術(shù)刀柄、手術(shù)刀布?jí)K、止血鉗、10mL注射器(8號(hào)針頭)、持針鉗、圓針、三棱針、縫合線、圓底試管、恒溫水浴鍋。保溫杯、高壓滅菌吸水紙、10mL注射器(8號(hào)針頭)、刀片。臺(tái)、二氧化碳培養(yǎng)箱、99.99%高純二氧化碳、離心機(jī)、礦物油、0.1%透明質(zhì)酸酶。在TCM199-hepes液的基礎(chǔ)上，添加2%FBS、0.7mg/mL肝素鈉和100IU/mL雙抗。5兩水氯化鈣、1%NEAA、2%BAA、100IU/mL雙抗。體外受精液成分為在SOF液的基礎(chǔ)上，添加20%FBS、6IU/mL肝素鈉和100IU/ml慶大霉素。體外培養(yǎng)液成分為在SOF液的基礎(chǔ)上，添加3mg/mL牛血清6若用活體

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