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紙色譜技術(shù)中藥化學(xué)技術(shù)請用紙色譜法檢識(shí)板藍(lán)根乙醇提取液中的氨基酸。任務(wù)導(dǎo)入必備知識(shí)點(diǎn)紙色譜的原理和組成1紙色譜的應(yīng)用特點(diǎn)2紙色譜的操作步驟33定義原理組成以濾紙作為載體,濾紙中的水分(或根據(jù)需要加在濾紙上的溶液)為固定相,用適當(dāng)?shù)娜軇┫到y(tǒng)為流動(dòng)相進(jìn)行展開的色譜操作技術(shù)。屬于分配色譜,它是利用混合物中各成分在兩種互不相溶的溶劑中分配系數(shù)的不同達(dá)到分離的目的。一、紙色譜的原理和組成支持劑(載體)、固定相、流動(dòng)相與被分離成分。紙色譜技術(shù)一、紙色譜的原理和組成色譜濾紙的選擇原則:①濾紙應(yīng)有一定的純度和機(jī)械強(qiáng)度。②濾紙必須質(zhì)地均勻,全紙平整無折痕,以保證溶劑展開速度均勻。③色譜用濾紙分為快速、中速、慢速等規(guī)格。一、紙色譜的原理和組成色譜濾紙的規(guī)格快速----分離Rf值相差大的化合物或流動(dòng)相粘度大的情況
中速最常用慢速薄型濾紙------定性分析厚型濾紙------定量分析如:正丁醇一、組成——固定相濾紙是纖維素構(gòu)成的,通過氫鍵作用吸收的水分即為固定相。濾紙的特殊處理:分離親脂性較強(qiáng)的成分,常用二甲基甲酰胺、丙二醇代替水作固定相,改善分離效果。分離某些弱酸或弱堿性成分時(shí),可用不同pH值的緩沖溶液處理濾紙,或在展開劑中加入一定比例的酸或堿,以取得較好的分離效果。一、組成——流動(dòng)相選擇原則:展開劑的親水性或親脂性應(yīng)和被分離樣品的親水性或親脂性相適應(yīng)。常用的流動(dòng)相是與水能部分相溶的有機(jī)溶劑,如水飽和的正丁醇、正戊醇、酚等,有時(shí)加入少量有機(jī)酸、有機(jī)堿或一定比例的甲醇或乙醇。如欲分離極性大的化合物,可在展開劑中增加水、乙醇等極性溶劑的比例,以增大Rf值。二、紙色譜的應(yīng)用特點(diǎn)(1)紙色譜對親水性較強(qiáng)成分如氨基酸、糖類、苷類等的分離效果常比薄層色譜為好。(2)紙色譜展開往往時(shí)間較長,而且不能用腐蝕性強(qiáng)的顯色試劑。與薄層色譜法基本相似。點(diǎn)樣量一般是幾毫克至幾十毫克。注意:溶解樣品的溶劑盡量避免用水。點(diǎn)樣展開顯色結(jié)果計(jì)算比移值:方法與薄層色譜法基本相似。上行法展開最常用。展開前通常使濾紙預(yù)先被展開劑的蒸汽所飽和,然后再展開。先觀察有無顏色或熒光斑點(diǎn),
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