藥物定量分析與分析方法驗證第七詳解演示文稿

藥物定量分析與分析方法驗證第七版詳解演示文稿目前一頁\總數(shù)六十九頁\編于十九點（優(yōu)選）藥物定量分析與分析方法驗證第七版目前二頁\總數(shù)六十九頁\編于十九點二、教學內容第一節(jié)定量分析方法的分類和特點。第二節(jié)定量分析樣品的前處理方法。第三節(jié)藥品質量標準分析方法驗證。目前三頁\總數(shù)六十九頁\編于十九點第一節(jié)定量分析方法的分類與特點目前四頁\總數(shù)六十九頁\編于十九點一、容量分析法（一）容量分析法的特點1、操作簡單、快速；2、耐用性高；3、比較準確（RSD＜0.2%）；4、方法專屬性差。目前五頁\總數(shù)六十九頁\編于十九點（二）容量分析法的計算

1、滴定度指每1mL某摩爾濃度的滴定液所相當?shù)谋粶y藥物的重量。例：碘苯酯含量測定“每1mL硫代硫酸鈉滴定液（0.02mol/L）相當于1.388mg的碘苯酯?！蹦壳傲揬總數(shù)六十九頁\編于十九點2、滴定度的計算對于以上反應，滴定度（T）可按下式進行計算(mg/mL)m：滴定液的摩爾濃度；M：被測藥物的分子量；a：滴定液的摩爾數(shù)；b：被測藥物的摩爾數(shù)。目前七頁\總數(shù)六十九頁\編于十九點

碘量法測定維生素C含量時，若維生素C的分子量為176.13，1mL碘滴定液（0.1mol/L）相當于維生素C的質量是多少？目前八頁\總數(shù)六十九頁\編于十九點3、藥物的百分含量計算（1）直接滴定法被測藥物的百分含量計算公式為：V：消耗滴定液的體積；T：滴定度W：供試品取用量目前九頁\總數(shù)六十九頁\編于十九點例1、鹽酸利多卡因的含量測定

稱取鹽酸利多卡因供試品0.2128g，溶解于冰醋酸，加適量醋酸汞試液，用非水溶液滴定法測定，消耗高氯酸（0.1016mol/L）7.59mL，計算其含量。每1mL高氯酸液（0.1mol/L）相當于27.08mg的鹽酸利多卡因。目前十頁\總數(shù)六十九頁\編于十九點例2、硫酸阿托品的含量測定

取本品0.4780g，加冰醋酸與醋酐各10mL，加結晶紫指示液2滴，用高氯酸滴定液（0.1012mol/L）滴定至溶液顯純藍色，消耗高氯酸滴定液（0.1012mol/L）6.92mL，空白試驗消耗高氯酸滴定液（0.1012mol/L）0.02mL，計算硫酸阿托品的含量。每1mL高氯酸滴定液（0.1mol/L）相當于67.68mg的（C17H23NO3)·H2SO4。目前十一頁\總數(shù)六十九頁\編于十九點習題1異煙肼的含量測定：取供試品0.2052g，置100mL量瓶中，加水稀釋至刻度，精密量取25mL，加水50mL，加鹽酸20mL與甲基橙指示劑1滴，用溴酸鉀滴定液（0.01733mol/L）滴定，消耗此溶液13.65mL，1mL溴酸鉀滴定液（0.01667mol/L）相當于3.429mg異煙肼，試計算異煙肼的含量。目前十二頁\總數(shù)六十九頁\編于十九點（2）間接滴定法①生成物滴定法例：葡萄糖酸銻鈉的含量測定目前十三頁\總數(shù)六十九頁\編于十九點②剩余滴定法VB0：空白試驗消耗滴定液B的體積；VBS：樣品測定試驗消耗滴定液B的體積；T：滴定液A對供試品的滴定度；F：滴定液B濃度校正因數(shù)。目前十四頁\總數(shù)六十九頁\編于十九點例3、阿司匹林的含量測定

精密稱取阿司匹林0.1742g，加中性乙醇20mL溶解，加酚酞指示液3滴，用氫氧化鈉滴定液（0.1mol/L）滴定至溶液顯粉紅色，再精密加入氫氧化鈉滴定液（0.1mol/L）40.00mL，置水浴中加熱15min，并時時振蕩，迅速放冷至室溫，用硫酸滴定液（0.0550mol/L）滴定至粉紅色剛剛消失，用去23.60mL?？瞻自囼炏耐涣蛩岬味ㄒ?9.86mL，計算阿司匹林的含量。每1mL氫氧化鈉滴定液（0.1mol/L）相當于0.00901g的C9H8O4。目前十五頁\總數(shù)六十九頁\編于十九點二、光譜分析法紫外可見分光廣度法1、特點（1）靈敏度高，可達10-4～10-7g/mL；（2）準確度高，RSD為2％～5％；（3）儀器價格較低廉，操作簡單，便于普及；（4）專屬性較差。目前十六頁\總數(shù)六十九頁\編于十九點2、朗伯－比耳定律（1）摩爾吸收系數(shù)：ε（2）百分吸收系數(shù)：3、儀器的校正和檢定4、對溶劑的要求

5、測定法220～240nm：≤0.40241～250nm：≤0.20251～300nm：≤0.10300nm以上：≤0.05吸收度讀數(shù)在0.3～0.7之間，誤差最小目前十七頁\總數(shù)六十九頁\編于十九點6、含量測定計算（1）對照品比較法Cx：供試品溶液的濃度；Ax：供試品溶液的吸收度；Cr：對照品溶液的濃度；Ar：對照品溶液的吸收度；D：稀釋體積；W：供試品取樣量。目前十八頁\總數(shù)六十九頁\編于十九點例4：

硫噴妥鈉的含量測定：取供試品0.2500g，用水溶解并稀釋至500mL，精密稱取1mL，用0.4％NaOH溶液定量稀釋至100mL作為供試液；另取硫噴妥對照品，用0.4％NaOH溶液配制濃度為5μg/mL作為對照品溶液。照分光光度法，在304nm波長出分別測得供試品和對照品的吸收度為0.495和0.550，已知1mg硫噴妥相當于1.091mg的硫噴妥鈉，試計算硫噴妥鈉的含量。目前十九頁\總數(shù)六十九頁\編于十九點（2）吸收度系數(shù)法目前二十頁\總數(shù)六十九頁\編于十九點例5、炔孕酮的含量測定

精密稱取炔孕酮供試品0.1g，加無水乙醇溶解并定量轉移至100mL容量瓶中，用無水乙醇稀釋至刻度，搖勻，精密量取1mL，置另一100mL容量瓶中，用無水乙醇稀釋至刻度，搖勻。照分光光度法，在240nm波長處測定吸收度為0.51。已知C21H28O2的吸收系數(shù)為520，計算炔孕酮的含量。目前二十一頁\總數(shù)六十九頁\編于十九點例6、對乙酰氨基酚的含量測定

取本品適量，置250mL容量瓶中，加0.4％氫氧化鈉溶液50mL，溶解后，加水至刻度，搖勻。精密量取該溶液5mL，置100mL容量瓶中，加0.4％氫氧化鈉溶液10mL，加水至刻度，搖勻。在257nm波長處測定吸收度為0.590。按其吸收系數(shù)（E1%1cm）為715計算其含量為99.66％，問取樣量為多少克？目前二十二頁\總數(shù)六十九頁\編于十九點（3）計算分光光度法維生素A的含量測定：三點校正法（4）比色法目前二十三頁\總數(shù)六十九頁\編于十九點三、色譜分析法☆按分離原理分為：吸附；分配；離子交換；排阻色譜☆按分離方法分為：PC；TLC；柱色譜；GC；HPLC目前二十四頁\總數(shù)六十九頁\編于十九點1、系統(tǒng)適用性試驗（1）理論塔板數(shù)（2）分離度（3）重復性（4）拖尾因子目前二十五頁\總數(shù)六十九頁\編于十九點（1）色譜柱的理論塔板數(shù)

重酒石酸去甲腎上腺素注射液：“理論塔板數(shù)按重酒石酸去甲腎上腺素峰計算不低于3000?！蹦壳岸揬總數(shù)六十九頁\編于十九點（2）分離度除另有規(guī)定外，分離度應大于1.5。目前二十七頁\總數(shù)六十九頁\編于十九點(3)重復性a.對照溶液連續(xù)進樣5次峰面積RSD≤2.0％80％對照溶液分別進樣3次平均校正因子RSD≤2.0％100％對照溶液120％對照溶液內標溶液b.目前二十八頁\總數(shù)六十九頁\編于十九點（4）拖尾因子W0.05h為0.05峰高處的峰寬；d1為峰頂點至峰前沿的距離。除另有規(guī)定外，T應在0.95～1.05之間。目前二十九頁\總數(shù)六十九頁\編于十九點2、HPLC含量測定方法（1）內標法藥物對照品內標物質溶液溶液藥物對照溶液測試目前三十頁\總數(shù)六十九頁\編于十九點藥物供試品內標物質藥物供試品溶液測試（1）內標法目前三十一頁\總數(shù)六十九頁\編于十九點例7、黃體酮的含量測定（1）內標溶液的制備：取乙烯雌酚25.0mg，置25mL量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻。（2）測定：取黃體酮對照品25.8mg，置25mL量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取該溶液與內標溶液各5mL，置25mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻。取5mL注入液相色譜儀，記錄色譜圖，量取峰高h對＝8.6cm，h對，內標＝3.4cm。另取樣品24.7mg，按同法測定記錄色譜圖，量取峰高h樣＝7.5cm，h樣，內標＝3.2cm。求黃體酮含量。目前三十二頁\總數(shù)六十九頁\編于十九點習題：

測定生物堿試樣中黃連堿的含量，稱取內標物和黃連堿對照品各0.2000g，配成混合溶液，測得峰面積分別為3.60和3.43cm2；稱取0.2400g內標物和試樣0.8560g，同法配制成溶液后，在相同色譜條件下測得峰面積為4.16和3.71cm2，計算試樣中黃連堿的含量。目前三十三頁\總數(shù)六十九頁\編于十九點（2）外標法測試CXAX測試CRAR目前三十四頁\總數(shù)六十九頁\編于十九點3、GC含量測定方法1、內標法2、外標法3、標準溶液加入法目前三十五頁\總數(shù)六十九頁\編于十九點第二節(jié)樣品分析的前處理方法目前三十六頁\總數(shù)六十九頁\編于十九點概述1、含金屬元素的有機藥物葡萄糖酸鈣乳酸鈣目前三十七頁\總數(shù)六十九頁\編于十九點葡萄糖酸銻鈉富馬酸亞鐵目前三十八頁\總數(shù)六十九頁\編于十九點2、含鹵素的有機藥物氧氟沙星三氯叔丁醇水合氯醛泛影酸目前三十九頁\總數(shù)六十九頁\編于十九點三氯叔丁醇碘他拉酸3、含鹵素藥物的不同連接方式目前四十頁\總數(shù)六十九頁\編于十九點硫柳汞鈉

4、含金屬藥物的不同連接方式水楊酸鎂十一烯酸鋅乙基汞硫代水楊酸鈉

目前四十一頁\總數(shù)六十九頁\編于十九點一、不經有機破壞的分析方法1、水解法2、還原法目前四十二頁\總數(shù)六十九頁\編于十九點1、酸水解后測定法例：十一烯酸鋅的含量測定本品與稀鹽酸共沸，水解生成十一烯酸和氯化鋅，用EDTA滴定液直接滴定鋅離子。(一）水解法目前四十三頁\總數(shù)六十九頁\編于十九點(一）水解法2、堿水解后測定法例：三氯叔丁醇的含量測定目前四十四頁\總數(shù)六十九頁\編于十九點（二）還原法

例：泛影酸的含量測定目前四十五頁\總數(shù)六十九頁\編于十九點碘他拉酸碘番酸膽影酸目前四十六頁\總數(shù)六十九頁\編于十九點二、經有機破壞的分析方法（一）濕法破壞1、硝酸-高氯酸法

適用范圍：血、尿、組織等生物樣品的破壞。

不足之處：對含氮雜環(huán)藥物的破壞不夠完全。2、硝酸-硫酸法

適用范圍：大多數(shù)有機物質的破壞（染料、中間體、藥物）

不足之處：不適用于含堿土金屬有機藥物的破壞。目前四十七頁\總數(shù)六十九頁\編于十九點3、硫酸-硫酸鹽（硫酸鉀）法加入硫酸鹽的目的：（1）提高硫酸的沸點，使樣品破壞完全；（2）防止硫酸在加熱過程中過早的分解為SO3而損失。適用范圍：含砷或含銻有機藥物的破壞分解。4、其它濕法硝酸-硫酸-高氯酸法硫酸-過氧化氫法硫酸-高錳酸鉀法目前四十八頁\總數(shù)六十九頁\編于十九點濕法破壞注意事項1、儀器為硅玻璃或硼玻璃制成的凱氏燒瓶；2、所用試劑及蒸餾水均應不含有被測定金屬離子或干擾測定的其他金屬離子；3、要進行空白試驗校正；4、在通風櫥內進行。目前四十九頁\總數(shù)六十九頁\編于十九點凱氏定氮法氮測定法第一法（常量法）第二法（半微量法）目前五十頁\總數(shù)六十九頁\編于十九點消解劑硫酸-硫酸鉀（或無水硫酸鈉）作用：提高硫酸的沸點，以提高消解溫度。催化劑汞或汞鹽、硒粉、銅鹽（硫酸銅）、二氧化錳等輔助氧化劑30％過氧化氫高氯酸目前五十一頁\總數(shù)六十九頁\編于十九點應用范圍本法適用于測定含有氨基或酰胺結構藥物的含量注意事項：（1）偶氮或肼結構→消解前加鋅粉還原（2）雜環(huán)→消解前加氫碘酸或紅磷還原（3）含氮量高（大于10％）→消解中加蔗糖或淀粉等作為還原劑目前五十二頁\總數(shù)六十九頁\編于十九點（二）干法破壞

適用范圍適用于含鹵素、硫、磷等有機藥物分析的前處理，亦用于某些藥物中硒及砷鹽的檢查。

1、高溫熾灼法2、氧瓶燃燒法目前五十三頁\總數(shù)六十九頁\編于十九點1、高溫熾灼法本法適用于含鹵素藥物的鑒別，亦用于含磷藥物的定量測定和藥物中砷鹽的檢查。（1）含碘藥物的鑒別（2）含氟、氯、溴等元素藥物的鑒別（3）含磷藥物的定量測定（4）砷鹽的檢查目前五十四頁\總數(shù)六十九頁\編于十九點（三）氧瓶燃燒法1、適用范圍：適用于含鹵素及含硫、磷、硒等有機藥物分析的前處理。2、儀器設備目前五十五頁\總數(shù)六十九頁\編于十九點3、實驗步驟取樣加吸收液，通氧氣吸收燃燒分析目前五十六頁\總數(shù)六十九頁\編于十九點4、吸收液（1）作用①定量吸收被測定元素；②將被測定元素轉變?yōu)橐子跍y定的價態(tài)。（2）吸收液的選擇供試品吸收液氟水氯水-NaOH溶液溴水-NaOH溶液-二氧化硫飽和溶液碘水-NaOH溶液-二氧化硫飽和溶液/水-NaOH溶液硒HNO3溶液（1→30）磷水硫水-濃H2O2目前五十七頁\總數(shù)六十九頁\編于十九點5、應用示例（碘苯酯的含量測定）

（1）測定方法取本品約20mg，精密稱定，照氧瓶燃燒法進行有機破壞。用氫氧化鈉試液2mL與水10mL為吸收液，待吸收完全后，加溴-醋酸溶液10mL，密塞，振蕩，放置數(shù)分鐘，加甲酸約1mL，用水洗滌瓶口并通入空氣流3～5min。加碘化鉀2g，密塞，搖勻，用硫代硫酸鈉滴定液（0.02mol/L）滴定，至終點時，加淀粉指示液，繼續(xù)滴定至藍色消失。并將滴定結果用空白試驗校正。每1mL硫代硫酸鈉滴定液（0.02mol/L）相當于1.388mg的C19H29IO2。目前五十八頁\總數(shù)六十九頁\編于十九點（2）原理目前五十九頁\總數(shù)六十九頁\編于十九點第三節(jié)藥品質量標準分析方法驗證需驗證的分析項目有：（1）鑒別試驗；（2）雜質定量或限度檢查；（3）原料藥或制劑中有效成分含量測定；（4）制劑中其他成分（如降解產物、防腐劑等）的測定；（5）藥品溶出度、釋放度等功能檢查中，其溶出量等測試方法也應做必要的驗證。目前六十頁\總數(shù)六十九頁\編于十九點驗證內容（1）準確度；（2）精密度；（3）專屬性；（4）檢測限；（5）定量限；（6）線性；（7）范圍；（8）耐用性。目前六十一頁\總數(shù)六十九頁\編于十九點一、準確度

是指用該方法測定結果與真實值或參考值接近的程度，用回收率（％）表示。

1、原料藥可用已知純度對照品或樣品進行測定；或與已建準確度的另一方法測定的結果進行比較。目前六十二頁\總數(shù)六十九頁\編于十九點2、制劑（1）模擬法（2