植物生理生化試題材料

植物生理生化試題資料福建農(nóng)林大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院《植物生理生化實(shí)驗(yàn)》習(xí)題一、名詞講解：1、標(biāo)準(zhǔn)曲線：用標(biāo)準(zhǔn)溶液制成的曲線。先配制一系列不同樣濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液,在溶液吸取最大波長(zhǎng)下,?逐一測(cè)定吸光度,爾后用坐標(biāo)紙以溶液濃度為橫坐標(biāo),吸光度為縱坐標(biāo)作圖,若被測(cè)物質(zhì)對(duì)光的吸取吻合光的吸取定律,必然獲取一條經(jīng)過(guò)原點(diǎn)的直線,即標(biāo)準(zhǔn)曲線2、斐林（Folin）－酚試劑法：也稱(chēng)lowry法，它結(jié)合了雙縮脲試劑和酚試劑與蛋白質(zhì)的反響，是雙縮脲方法的進(jìn)一步發(fā)展，可利用其在650nm波長(zhǎng)下的特定吸取進(jìn)行比色測(cè)定。3、茚三酮顯色法：游離氨基酸與茚三酮共熱時(shí)，能定量生成紫色的二酮茚-二酮茚胺。其吸取峰在570nm，而且在一不如期范圍內(nèi)吸光度與游離氨基酸濃度成正比，因此可用分光光度法測(cè)定其含量。4、氮素代謝：氮素及含氮的活體物質(zhì)的同化異化和排泄，總稱(chēng)為氮素代謝5、淀粉酶：是水解淀粉和糖原的酶類(lèi)總稱(chēng)。6、真空浸透：指將葉片打孔放入注射器中，加水吞沒(méi)，排出空氣后用手指堵住前端小孔，同時(shí)把活塞向外抽拉，即可造成減壓而排出組織中的空氣，輕放活塞，水液即進(jìn)入組織的方法。7、離心技術(shù):是依照物質(zhì)顆粒在一個(gè)離心場(chǎng)中的沉降行為而發(fā)展起來(lái)的。它是分別細(xì)胞器和生物分子大分子物質(zhì)必備的手段之一，也是測(cè)定某些純品物質(zhì)的部分性質(zhì)的一種方法。8、電泳：各種生物大分子在必然pH條件下，能夠解離成帶電荷的顆粒，這種帶電顆粒在電場(chǎng)的作用下向相反電極搬動(dòng)的現(xiàn)象稱(chēng)為電泳9、同工酶：凡能催化同一種化學(xué)反響但其分子結(jié)構(gòu)和帶電性質(zhì)不同樣的一組酶稱(chēng)為同工酶10、遷移率：指帶電顆粒在單位電場(chǎng)強(qiáng)度下的泳動(dòng)速度。11、聚丙烯酰胺凝膠：是一種人工合成凝膠，0福建農(nóng)林大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院是以丙烯酰胺為單位，由甲叉雙丙烯酰胺交聯(lián)成的，經(jīng)干燥粉碎或加工成形制成粒狀，控制交聯(lián)劑的用量可制成各種型號(hào)的凝膠12、濃縮膠13、分別膠14、酶活力、比活力：也稱(chēng)為酶活性，是指酶催化必然化學(xué)反響的能力。15、種子生活力：指種子萌芽的潛藏能力或種胚所擁有的生命力。16、抗逆性：植物對(duì)困境的抵抗和忍耐能力，簡(jiǎn)稱(chēng)為抗性。17、呼吸速率：?jiǎn)挝粫r(shí)間鮮重或干重植物組織或原生質(zhì)釋放的CO2或吸取O2的量來(lái)表示18、光合速率：?jiǎn)挝粫r(shí)間、單位葉面積吸取CO2或放出O2的量。19、無(wú)土培養(yǎng)：不用土壤，用溶液培養(yǎng)植物的方法，包括水培和沙培等。20、超氧化物歧化酶（SOD）：寬泛存在動(dòng)，植物體內(nèi)，是一種除掉超氧陰離子自由基Ｏ2的酶。21、硝酸還原還原酶：是植物氮素同化的要點(diǎn)酶，它催化植物體內(nèi)的硝酸鹽還原為亞硝酸。22、引誘酶：又稱(chēng)適應(yīng)酶，指植物體內(nèi)本來(lái)不含有，但在特定外來(lái)物質(zhì)的引誘下誘導(dǎo)生成的酶。如硝酸還原酶可為NO3-所引誘生成。23、活性氧：較O2的化學(xué)性質(zhì)更加爽朗的O2的代謝產(chǎn)物或由其衍生的含氧物質(zhì)，包括.O2-、.OH、H2O2等24、生物自由基：泛指經(jīng)過(guò)生物體自己代謝產(chǎn)生的一些不牢固的、帶有節(jié)余電子的、化學(xué)活性很高的基團(tuán)或分子。二、填空：1、測(cè)定植物可溶性蛋白質(zhì)含量時(shí)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線是標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)濃度為橫坐標(biāo)，以_吸光值為縱坐標(biāo)。2、常用的測(cè)定植物可溶性蛋白質(zhì)含量的方法有：Folin-酚試劑法(Lowry法)、考馬斯亮藍(lán)法和紫外分光光度法3、用茚三酮顯色法測(cè)定植物組織氨基酸含量時(shí)，茚三酮溶液與氨基酸共熱生成_氨，氨__與茚三酮和還原性茚三酮反響，生成藍(lán)紫色的二酮茚胺。該化合物顏色的深淺與氨基酸的含量成_正比_，可經(jīng)過(guò)測(cè)定____570nm處的光密度，求出氨基酸的含量。1福建農(nóng)林大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院4、用滴定法測(cè)Vc含量時(shí)，若樣品自己帶有顏色，則需先將樣品用_________辦理。5、測(cè)定淀粉酶活性時(shí)，3，5－二硝基水楊酸試劑DNS）的作用是__與還原糖顯色生成棕紅色的3-氨基-5-硝基水楊酸和停止酶活性。6、在測(cè)定淀粉酶的活性時(shí)：α－淀粉酶不耐__酸__，β－淀粉酶不耐_____熱___。7、聚丙烯酰胺凝膠電泳分別過(guò)氧化物同工酶實(shí)驗(yàn)中，電泳存在三大效應(yīng)，分別是濃縮效應(yīng)、分子篩效應(yīng)和電荷效應(yīng)8、測(cè)定硝酸還原酶活性的方法有__活體法和離體法。。9、用活體法測(cè)定硝酸還原酶的資料，取樣前葉子需進(jìn)行一段時(shí)間的光合作用，以積累光合產(chǎn)物，產(chǎn)生更多NADH加速硝酸鹽的還原。10、植物呼吸速率常用的測(cè)定方法有__紅外線法CO2氣體解析法和改良半葉法等。11、葉綠素吸取光譜有紅光和藍(lán)紫光區(qū)兩個(gè)最強(qiáng)吸取區(qū)。12、類(lèi)胡蘿卜素吸取光譜最強(qiáng)吸取區(qū)在藍(lán)紫光區(qū)，它不但能夠吸取傳達(dá)光能，還擁有保護(hù)葉綠素_的作用。綠色，在反射光13、葉綠素溶液在透射光下呈下呈___暗紅色。14、缺N和缺Fe都能引起缺綠病，二者差異在于缺氮老葉發(fā)病，缺鐵嫩葉發(fā)病。15、水培時(shí)要采用黑色容器裝營(yíng)養(yǎng)，這是為了防止藻類(lèi)滋生。。法確定植物生長(zhǎng)的必16、常用_水溶液培養(yǎng)法需元素。__嫩______葉上。17、缺鈣癥第一會(huì)表現(xiàn)于植物的18、缺少必要元素鎂、氮、鉀等，均可引起植物產(chǎn)生缺綠病。19、植物光合速率測(cè)定方法有__該良半葉法和___CO2氣體解析法______________等。三、選擇：1、某蛋白質(zhì)pI為7.5，在pH6.0的緩沖液中進(jìn)行自由界面電泳，其泳動(dòng)方向?yàn)椋ǎ〢、向負(fù)極搬動(dòng)B、向正極搬動(dòng)C、不運(yùn)動(dòng)D、2福建農(nóng)林大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院同時(shí)向正極和負(fù)極搬動(dòng)2、進(jìn)行酶活力測(cè)準(zhǔn)時(shí)：（A）A、底物濃度必定極大于酶濃度B、酶濃度必定極大于底物濃度，、酶能提高反響的平衡點(diǎn)C、與底物濃度沒(méi)關(guān)3、蛋白質(zhì)分子中含有共軛雙鍵的酪氨酸、色氨酸等芳香族氨基酸。它們擁有吸取紫外光的性質(zhì)，其吸取巔峰在（D）波長(zhǎng)處A、260nmB、650nmC、540nmD、280nm用（4、Folin-酚試劑法(Lowry法)測(cè)定蛋白質(zhì)濃度時(shí)，B）波長(zhǎng)比色，測(cè)定光密度值。C、540nmA、260nmB、650nmD、280nm5、不連續(xù)聚丙烯酰胺凝膠電泳比一般電泳的分辨率高，是由于擁有以下哪一種效應(yīng)？（ABC）A、濃縮效應(yīng)B、電荷效應(yīng)C、分子篩效應(yīng)D、粘度效應(yīng)硝酸還原酶與亞硝酸還原酶(D)A.都是引誘酶B.硝酸還原酶不是引誘酶，而亞硝酸還原酶是C.都不是引誘酶D.硝酸還原酶是引誘酶，而亞硝酸還原酶不是7、酶的分別提純過(guò)程中，不正確的操作是C）。A、需在低溫下進(jìn)行，一般在0～5℃之間B、酶制劑制成干粉后可保存于4℃冰箱中C、需經(jīng)常使用巰基乙醇以防范酶蛋白二硫鍵發(fā)生還原D、提純時(shí)間盡量短8、在提取葉綠素時(shí)，研磨葉片晌加入少許CaCO3，其目的是（D）B.加速葉綠素溶解A.使研磨更充分C.使葉綠素a、b分別D.保護(hù)葉綠素10、一般而言，正常植物葉片的葉綠素與類(lèi)胡蘿卜素的比值為（B）D.1:3A.2:1B.3:1C.1:211、測(cè)定葉綠素總量時(shí)，分光光度計(jì)采用的波長(zhǎng)是（B錯(cuò)）應(yīng)（D652nm）A.663nmB.645nmC.430nmD.652nm3福建農(nóng)林大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院12、葉綠素卟啉環(huán)的中心原子是（C）A.CuB.FeC.MgD.Mn13、植物的幼嫩部分，虧缺以下哪一種元素時(shí)，缺素癥第一表現(xiàn)出來(lái)。（B）C.PD.NA.KB.CaB）14、以下元素中，屬于必要的大量元素有（A、鐵B、氮C、硼D、鋅15、高等植物的老葉由于缺少某一種元素而發(fā)病，下面元素屬于這一類(lèi)的有（A）A、氮B、鈣C、鐵16、呼吸作用的底物為(A)。B、CO2和A、有機(jī)物和O2H2OC、有機(jī)物和CO217、光合作用的底物為(B)。A、有機(jī)物和O2B、CO2和H2OC、有機(jī)物和CO218、在95%提取液中,葉綠素a在紅光區(qū)的最大吸收峰為(D)。B、649nmC、656nmD、A、470nm665nm19、小藍(lán)子法測(cè)定呼吸強(qiáng)度生成的白色積淀是(A)B、Ba(COO)2C、Ba(OH)2A、BaCO3D、CaCO320、TTC法測(cè)定種子生活力的試驗(yàn)中，活種子的現(xiàn)象為(A)。B、種胚全部未染色A、種胚全部染成紅色C、種胚全部染成黑色D、種胚非要點(diǎn)部位染色，而胚根和胚芽的尖端都不染色21、小籃子法測(cè)定呼吸強(qiáng)度中，若在滴準(zhǔn)時(shí)，外界CO2進(jìn)入呼吸測(cè)定裝置內(nèi)，會(huì)使測(cè)得的結(jié)果(A)。A、偏大B、偏小C、不變D、不必然三、簡(jiǎn)答題1、怎樣提高樣品測(cè)定的正確性?答：①正確采集代表性樣品②選擇合適的測(cè)定方法③減少測(cè)定誤差④正確記錄和辦理測(cè)定數(shù)據(jù)。2、植物質(zhì)料的取樣有哪些方法？4福建農(nóng)林大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院答：①原始樣品的取樣法：隨機(jī)取樣、對(duì)角線取樣。②平均樣品的采樣法：混淆取樣法、按比率取樣法。3、簡(jiǎn)述分光光度計(jì)的使用方法。答：①檢查721A型分光光度計(jì)的旋鈕和開(kāi)關(guān)，使其回復(fù)零點(diǎn)。②按要求接通電源，按下“T鍵”，打開(kāi)暗盒蓋和電源開(kāi)關(guān)，指示燈亮。預(yù)熱20分鐘。③調(diào)治波長(zhǎng)旋鈕至所需波長(zhǎng)。④取比色皿分別盛裝B、S、U液，置入檢測(cè)室（比色皿先用蒸餾水洗后，再用比色液潤(rùn)洗才能裝比色液）。液對(duì)準(zhǔn)光路。⑤調(diào)治面板“零位細(xì)調(diào)”，使指示為00.0，即透射比“T”的零點(diǎn)，同時(shí)“一”號(hào)閃躍。⑥合下檢測(cè)室蓋.調(diào)治“光量粗、細(xì)調(diào)”電位器，使指示為100.0，須屢次5、6兩點(diǎn)操作達(dá)到牢固。⑦按下“A”鍵，指示為“.000”同時(shí)“一”閃躍，若是指示讀數(shù)不是比值時(shí)，應(yīng)調(diào)治“消光調(diào)零“電位器，使其達(dá)到要求。⑧拉出或推入拉桿，使U、S液分別置于光路讀取A值，爾后搬動(dòng)拉桿，讀B管A值，如為0，則前述A值有效。⑨在穩(wěn)準(zhǔn)時(shí)，重復(fù)讀數(shù)一次，并按下“T”鍵。⑩打開(kāi)檢測(cè)室蓋，取出比色皿，傾去比色液于水槽中，用自來(lái)水沖洗干凈，倒置于表面皿（鋪有濾紙）中。11）關(guān)上電源開(kāi)關(guān)，拔出電源插頭，取出比色皿架，檢查檢測(cè)室內(nèi)可否有液體濺出，并擦凈。檢測(cè)室內(nèi)放入硅膠袋，合上蓋，套上儀器罩。請(qǐng)介紹3種常用的可溶性蛋白質(zhì)的測(cè)定方法。答：當(dāng)前常用的有以下幾種方法：雙縮脲法、Lowry法（Folin-酚試劑法）、Bradford法（考馬斯亮藍(lán)法）、紫外吸取法。（186-194頁(yè)）5、簡(jiǎn)述斐林－酚試劑法測(cè)定植物可溶性蛋白質(zhì)的原理。（188頁(yè)）答：Folin-酚試劑法也稱(chēng)Lowry法，斐林(Folin)一酚試劑法結(jié)合了雙縮豚試劑和酚試劑與蛋白質(zhì)的反應(yīng)，其中包括兩步反響：第一步是在堿性條件下，蛋白質(zhì)中的肽鍵與銅試劑作用生成紫紅色的蛋白質(zhì)一銅絡(luò)合物（雙縮脲反響）；第二步是此絡(luò)合物以及蛋白質(zhì)中酪氨酸和苯丙氨酸等芳香族氨基酸的殘基使磷鉬酸-磷鎢酸試劑（Folin試劑）還原，產(chǎn)生磷鉬藍(lán)和磷鎢5福建農(nóng)林大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院藍(lán)的深藍(lán)色混淆物質(zhì)，在必然的條件下，顏色深淺與蛋白含量成正相關(guān)。因此，可利用其在650nm波長(zhǎng)下的特定吸取進(jìn)行比色測(cè)定。6、植物組織可溶性蛋白質(zhì)含量的測(cè)定中，斐林－酚試劑法、考馬斯亮藍(lán)法兩種方法各有何優(yōu)缺點(diǎn)？答：①斐林－酚試劑法其長(zhǎng)處是：由于加入了Folin-酚試劑后使蛋白質(zhì)肽鍵顯色收效增強(qiáng)，從而減少了因蛋白質(zhì)種類(lèi)引起的誤差。其矯捷度比雙縮豚法高100倍。此法操作簡(jiǎn)略，適于蛋白質(zhì)含量較渺小的樣品測(cè)定。可檢測(cè)的最低蛋白質(zhì)含量達(dá)5ug，平時(shí)測(cè)定范圍5～100ug。0.02～0.50mg/mL蛋白質(zhì)，也可用于酪氨酸和色氨酸的定量測(cè)定。缺點(diǎn)是操作煩雜，耗時(shí)較長(zhǎng)，要精確控制操作時(shí)間，標(biāo)準(zhǔn)曲線不是嚴(yán)格的直線形式，且專(zhuān)一性差，攪亂物質(zhì)（酚類(lèi)、檸檬酸、Tris緩沖液、甘氨酸、糖類(lèi)、甘油等）很多。（189頁(yè)的注意事項(xiàng)）②考馬斯亮藍(lán)法是矯捷度更高的一種方法，長(zhǎng)處有：矯捷度高，比lowry法高4倍左右，最低檢測(cè)達(dá)15微克；測(cè)定迅速、簡(jiǎn)略，染色牢固；攪亂物質(zhì)少。缺點(diǎn)是用于不同樣蛋白質(zhì)測(cè)準(zhǔn)時(shí)有較大的誤差；仍有攪亂，如SDS、去污劑、Tritonx100等；標(biāo)準(zhǔn)曲線有略微的非線性。7、Folin-酚試劑法測(cè)定植物可溶性蛋白質(zhì)時(shí)受哪些因素的攪亂？答：Folin-酚試顯色反響是由絡(luò)氨酸、色氨酸和半胱氨酸引起的，因此樣品中若含有酚類(lèi)、檸檬酸和巰基類(lèi)化合物均有攪亂作用。其他，不同樣蛋白質(zhì)音絡(luò)氨酸、色氨酸含量的不同樣而使顯色強(qiáng)度稍有差異。8、用茚三酮顯色法測(cè)定植物組織氨基酸時(shí)，加入Vc的作用是什么？答：由于該反響的第一步是茚三酮的還原，而還原型茚三酮在含氧量高的情況下很簡(jiǎn)單再氧化，對(duì)反響有攪亂，因此，常在反響系統(tǒng)中加入還原劑，以阻止還原型茚三酮的再氧化。因此，9、茚三酮顯色法測(cè)定植物組織氨基酸時(shí)為什么要除掉蛋白質(zhì)？用10%乙酸除掉蛋白質(zhì)的原理是什么？答：由于蛋白質(zhì)和多肽中的游離氨基酸也會(huì)產(chǎn)生同樣反響，因此，對(duì)于含大量蛋白質(zhì)和多肽的樣品，應(yīng)先用蛋白質(zhì)積淀劑將其除掉。常用的蛋白質(zhì)積淀劑有10%乙酸、磺基水楊酸（SSA）、三氯乙酸（TCA）、過(guò)氯酸（PCA）等，其中以乙酸提取總氨基酸的收效較好。6福建農(nóng)林大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院原理:10%乙酸和蛋白質(zhì)反響使之積淀下來(lái)?）10、用茚三酮顯色法測(cè)定植物組織氨基酸時(shí)，為什么要用無(wú)氨蒸餾水？答:氨基酸與茚三酮反響的實(shí)質(zhì)是還原型茚三酮與另一分子茚三酮和一分子氨的縮合脫水反響。故，若蒸餾水中含有氨將使氨基酸含量增大。帶來(lái)誤差。11、測(cè)定植物組織中游離氨基酸總量有何生理意義？答:測(cè)定植物體內(nèi)游離氨基酸含量對(duì)研究植物在不同樣條件下及不同樣生長(zhǎng)發(fā)育時(shí)期氮代謝變化、植物對(duì)氮素的吸取、運(yùn)輸、同化及營(yíng)養(yǎng)情況等有重要意義。12、測(cè)定淀粉酶活性時(shí)，3，5二硝基水楊酸試劑DNS）的作用是什么？答:淀粉酶水解淀粉生成的麥芽糖，可用3，5–二硝基水楊酸試劑測(cè)定。由于麥芽糖能將后者還原生成3–氨基–5–硝基水楊酸的顯色基團(tuán)，在必然范圍內(nèi)其顏色的深淺與糖的濃度成正比，故可求出麥芽糖的含量。13、測(cè)定（α＋β）-淀粉酶總活力時(shí)，為什么要將淀粉酶原液稀釋成淀粉酶稀釋液后進(jìn)行反響。答：淀粉酶原液主若是用于鈍化β-淀粉酶，從而測(cè)定a-淀粉酶的活力。而淀粉酶稀釋液主若是用于測(cè)出（α＋β）-淀粉酶總活力，從而可得出β-淀粉酶的活力。14、測(cè)定淀粉酶活性時(shí)，為什么要將酶提取液和淀粉溶液分別放在40℃水浴中預(yù)保溫？答:由于a-淀粉酶的最適溫度在40℃～50℃之間，在這一溫度范圍內(nèi)a-淀粉酶的活性最強(qiáng)，催化淀粉的能力最強(qiáng)。因此，將酶提取液和淀粉溶液分別放在40℃水浴中預(yù)保溫，有利于淀粉酶活性的測(cè)定，減少誤差。15、測(cè)定硝酸還原酶活性的離體法和活體各有何特點(diǎn)？（125頁(yè)）答：活體法步驟簡(jiǎn)單,合適迅速、多組測(cè)定，重復(fù)性不好，應(yīng)在4℃離體法步驟復(fù)雜,但重復(fù)性較好。需要在低平易NADH的條件下進(jìn)行。16、為什么用活體法測(cè)定硝酸還原酶的資料，在取樣前要進(jìn)行一段時(shí)間的光合作用？答：由于測(cè)定前資料在進(jìn)行光合作用，會(huì)積累能7福建農(nóng)林大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院量物質(zhì)，可促進(jìn)硝酸還原酶的產(chǎn)生。17、活體法測(cè)植物體內(nèi)硝酸還原酶活力實(shí)驗(yàn)中，硝酸鹽還原過(guò)程為什么在黑暗中進(jìn)行？答：硝酸鹽還原過(guò)程應(yīng)在黑暗中進(jìn)行,以防亞硝酸鹽還原為氨。18、活體法測(cè)植物體內(nèi)硝酸還原酶活力實(shí)驗(yàn)中，怎樣判斷真空抽氣的終點(diǎn)？答：真空抽氣時(shí)，葉片完好消融沉入杯底，則代表葉片組織縫隙的氣體得以全部消除，那么就是真空抽氣的終點(diǎn)。19、用2,6-二氯酚靛酚滴定法測(cè)定維生素C含量時(shí)，為什么重申滴準(zhǔn)時(shí)間不高出2分鐘?答：維生素C擁有很強(qiáng)的還原性，若是滴準(zhǔn)時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，維生素C就會(huì)被空氣中的氧氣氧化，從而減少維生素C的含量，最后影響到維生素C含量的測(cè)定。000000000020、為什么用2,6-二氯酚靛酚滴定法測(cè)定維生素C含量時(shí)，要在測(cè)定的同時(shí)進(jìn)行2,6-二氯酚靛酚溶液的標(biāo)定?答：①是為了知道此時(shí)2，6-D染料的滴定度（每ml染料相當(dāng)于抗壞血酸的mg數(shù)）。②是由于2，6-D染料很不牢固，隨著時(shí)間的推移，其滴定度素來(lái)在變化中，因此只能現(xiàn)測(cè)現(xiàn)用。21、簡(jiǎn)述滴定法測(cè)定Vc含量的實(shí)驗(yàn)原理。（267頁(yè)）答：還原型抗壞血酸還原染料2，6-二氯靛酚，該染料在酸性中呈紅色，被還原后紅色消失。還原型抗壞血酸還原2，6-二氯靛酚后，自己被氧化成脫氫抗壞血酸。在沒(méi)有雜質(zhì)攪亂時(shí)，必然量的樣品提取液還原標(biāo)準(zhǔn)2，6-二氯靛酚的量與樣品中所含維生素C的量成正比。為了正確測(cè)定果蔬的抗壞血酸含量，在測(cè)定過(guò)程應(yīng)注意些什么？答：①驗(yàn)所用的蒸餾水必定是無(wú)氨水。②濾必定用干燥濾紙。③格掌握加入抗壞血酸的含量。④準(zhǔn)曲線應(yīng)在測(cè)定樣品的同時(shí)做，以減少操作及反響條件的誤差。⑤定要水沸騰后才能將試管放入加熱，而且水浴鍋的水位必然要高于試管內(nèi)試劑的高度。⑥管從開(kāi)水浴中取出，必然要冷水迅速冷卻后才能加入乙醇。（因加熱時(shí)形成的紅色還原型茚三銅，在冷卻過(guò)程被空氣的氧氧化而褪色，而茚三銅和氨基酸的藍(lán)紫色反8福建農(nóng)林大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院應(yīng)物仍留著，并變得更加明顯。）⑦銅和氨基酸反響生成的顏色在1小時(shí)內(nèi)保持牢固，因此要抓緊時(shí)間比色。⑧矯捷度在很大程度上與H離子濃度相關(guān)，最適pH4.5，應(yīng)嚴(yán)格控制。簡(jiǎn)述“過(guò)氧化物酶同工酶聚丙烯酰胺凝膠電泳”實(shí)驗(yàn)中所用的過(guò)硫酸銨、四甲基乙二胺、蔗糖、溴酚藍(lán)、H2O2等試劑的作用是什么？（181頁(yè)）答：①過(guò)硫酸銨的作用：使丙烯酰胺（Acr）和交聯(lián)劑甲叉丙烯酰胺（Bis）聚合成聚丙烯酰胺凝膠。②四甲基乙二胺（TEMED）的作用：作為丙烯酰胺（Acr）和交聯(lián)劑甲叉丙烯酰胺（Bis）聚合的加速劑。③蔗糖的作用：使同工酶沉在點(diǎn)樣孔底部，防范同工酶飄揚(yáng)。④溴酚藍(lán)的作用：能夠作為電泳進(jìn)度的指示分子，起指示作用。H2O2的作用：作為氧化物，使過(guò)氧化物酶同工酶催化H2O2分解，從而來(lái)進(jìn)行植物過(guò)氧化物酶同工酶的測(cè)定。24.什么叫同工酶？測(cè)定同工酶有什么意義？181頁(yè)）答：①同工酶：能催化同一種化學(xué)反響但其分子結(jié)構(gòu)和帶電性質(zhì)不同樣的一組酶。②（由于同一種酶可分布于多種臟器組織，它們之中的任何一個(gè)發(fā)生病變，都可引起酶在血清中的活力變化。除了少許組織專(zhuān)一性的酶之外，大多數(shù)血清酶不能夠特異地反響某個(gè)特定組織的病變。）而不同樣臟器或組織的同工酶譜型不同樣，當(dāng)其發(fā)生病變后，釋放到血清中的各種同工酶的比率也不一致，因此血清酶的同工酶譜型的改變能精確地反響出生病的部位和傷害的程度，提高了血清酶測(cè)定在反響組織病變上的專(zhuān)一性。25、聚丙烯酰胺凝膠電泳分別過(guò)氧化物同工酶實(shí)驗(yàn)中，電泳結(jié)束后怎樣進(jìn)行染色？電泳達(dá)成，將電泳槽取出，倒去緩沖液，取下凝膠管，放入培養(yǎng)皿中。用一個(gè)帶有長(zhǎng)針頭的注射器，吸滿水，將針頭沿管壁插入，同時(shí)慢慢地將注射器中的水推出，其實(shí)不斷轉(zhuǎn)動(dòng)凝膠管，將凝膠管擠脫出來(lái)，也可用洗耳球擠壓。取0.5ml聯(lián)苯胺母液＋H2O9.3ml0.2ml3％H2O2，混勻后倒入盛有凝膠條的培養(yǎng)皿。此時(shí)能夠看到膠條上出現(xiàn)藍(lán)色或棕褐色環(huán)，即過(guò)氧化9福建農(nóng)林大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院物酶帶，約十min后用自來(lái)水沖洗，這時(shí)藍(lán)色帶也慢慢變成棕褐色。26、簡(jiǎn)述聚丙烯酰胺凝膠電泳分別蛋白質(zhì)的原理?聚丙烯酰胺凝膠由丙烯酰胺和交聯(lián)劑甲叉雙丙烯酰胺在催化劑作用下聚合而成，擁有三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，其網(wǎng)孔大小可由凝膠濃度和交聯(lián)度加以調(diào)治。凝膠電泳兼有電荷效應(yīng)和分子篩效應(yīng)。被分別物質(zhì)由于所載電荷數(shù)量、分子大小和形狀的差異，因此在電泳時(shí)產(chǎn)生不同樣的泳動(dòng)速率而相互分別。利用特異性的顏色反響使待測(cè)酶著色，這樣即可在凝膠中展現(xiàn)出酶譜。過(guò)氧化物酶是植物體內(nèi)常有的氧化酶。植物體內(nèi)好多生理代謝過(guò)程常與它的活性及其同工酶的種類(lèi)相關(guān)。利用過(guò)氧化物酶能催化H2O2把聯(lián)苯胺氧化成藍(lán)色或棕褐色產(chǎn)物的原理，將經(jīng)過(guò)電泳后的凝膠置于有H2O2及聯(lián)苯胺的溶液染色，出現(xiàn)藍(lán)色或棕褐色部位即為過(guò)氧化物酶同工酶在凝膠中存在的地址，多條有色帶即構(gòu)成過(guò)氧化物酶同工酶譜。27、為什么說(shuō)無(wú)土培養(yǎng)是研究礦質(zhì)營(yíng)養(yǎng)的重要方法?無(wú)土種植是指不用天然土壤、而用營(yíng)養(yǎng)液來(lái)種植作物的方法,當(dāng)前主要用于蔬菜、花卉和樹(shù)木育苗。當(dāng)前生產(chǎn)上常用有水培、砂礫培等。無(wú)土種植與老例種植的差異，就是不用土壤，直接用營(yíng)養(yǎng)液來(lái)種植養(yǎng)物。為了固定植物，增添空氣含量，大多數(shù)采用礫、沙、泥炭、蛭石、珍珠巖、巖棉、鋸木屑等作為固定基質(zhì)。其長(zhǎng)處能夠有效地控制花卉在生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中對(duì)溫度、水分、光照、養(yǎng)分和空氣的最正確要求。由于無(wú)土種植花卉不用土壤，可擴(kuò)大種植范圍，加速花卉生長(zhǎng)，提高花卉質(zhì)量，節(jié)約肥水，節(jié)約人工操作，節(jié)約勞力和花銷(xiāo)。缺點(diǎn)是，一次性投資較大，需要增添設(shè)備，若是營(yíng)養(yǎng)源碰到污染，簡(jiǎn)單延長(zhǎng)，營(yíng)養(yǎng)液配制需要技術(shù)知識(shí)。無(wú)土種植的裝置無(wú)土種植所需裝置主要包括種植容器、貯液容器、營(yíng)養(yǎng)液輸排管道和循環(huán)系統(tǒng)。28、比較溶液培養(yǎng)和砂基培養(yǎng)的優(yōu)缺點(diǎn)。29、進(jìn)行溶液培養(yǎng)或砂基培養(yǎng)有時(shí)會(huì)失敗，主要原因何在?溶液培養(yǎng)時(shí)溶液是水，沒(méi)有固定性，無(wú)法給根系供應(yīng)支撐作用；溶液PH值會(huì)發(fā)生變化，控制根吸取10福建農(nóng)林大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院礦質(zhì)元素；簡(jiǎn)單造成污染，影響實(shí)驗(yàn)。沙基培養(yǎng)常出現(xiàn)無(wú)充分的水分供應(yīng)，而且沙基中簡(jiǎn)單含有礦質(zhì)元素影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。30、葉綠素a、b在藍(lán)光區(qū)也有吸取峰，可否用這一吸取峰波進(jìn)步行葉綠素a、b的定量解析？為什么？不能夠，由于類(lèi)胡蘿卜素的最大吸取帶在400～500的藍(lán)紫光區(qū)，不吸取紅光，為了消除類(lèi)胡蘿卜素的干擾，因此選擇葉綠素在紅光區(qū)的最大吸取峰；而且葉綠素的溶液呈綠色，易與藍(lán)紫光產(chǎn)生遮光收效，混淆實(shí)驗(yàn)收效。31、為什么提取葉綠素時(shí)干資料必然要用80%的丙酮，而新鮮的資料能夠用無(wú)水丙酮提??？由于葉綠素分子結(jié)構(gòu)的“頭部”是親水的，與蛋白質(zhì)結(jié)合很牢，需經(jīng)過(guò)水解作用才可被提取出來(lái)。而干資料中沒(méi)有水分，故提取葉綠素時(shí)干資料必然要用80%丙酮或95%乙醇提取，而新鮮的資料總含有水分，能夠贏無(wú)水丙酮或乙醇提取。32、測(cè)定呼吸速率有何意義？33、影響呼吸速率測(cè)定的因素有哪些？（同課本P136）答：1．內(nèi)部因素。不同樣種類(lèi)植物的呼吸速率不同樣,凡是生長(zhǎng)快的植物呼吸速率就高，生長(zhǎng)慢的呼吸速率就低；一般旱生植物，生長(zhǎng)緩慢，呼吸速率比水生植物低；陰生植物所處的光強(qiáng)度較弱，呼吸也較弱，呼吸速率比陽(yáng)生植物低。同一種植物在不同樣的生長(zhǎng)發(fā)育時(shí)期，呼吸速率也不同樣，一般在幼苗期、開(kāi)花期等生長(zhǎng)旺盛期，呼吸速率增高。同一種植物的不同樣器官，呼吸速率也不同樣，一般生殖器官比營(yíng)養(yǎng)器官高，幼嫩組織器官比衰老的組織器官高，種子內(nèi)胚的呼吸速率比胚乳高。多年生植物的呼吸速率還表現(xiàn)出季節(jié)周期性變化，在溫帶生長(zhǎng)的植物，春天呼吸速率最高，夏天略降低，秋天又上升，今后素來(lái)下降，到冬天降到最低點(diǎn)，這種周期性變化除了外界環(huán)境的影響外，與植物體的代謝強(qiáng)度、酶活性及呼吸底物的多寡也有親近關(guān)系。2.外界因素對(duì)呼吸速率的影響。（1）溫度：溫度呼吸作用的影響主要表現(xiàn)為溫度對(duì)呼11福建農(nóng)林大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院吸酶活性的影響。呼吸速率在必然范圍內(nèi)隨溫度的增高而增高，達(dá)到最高值后，連續(xù)增高溫度，呼吸速率反而下降。一般植物在0℃以下，呼吸作用很弱或幾乎停止，呼吸作用的最適溫度一般在25℃～35℃之間，呼吸作用的最高溫度，一般在35℃～45℃。呼吸作用的最低溫度因植物種類(lèi)不同樣有很大差異。呼吸作用的最適溫度總是比光合作用的最適溫度高。2）氧氣：氧是有氧呼吸路子運(yùn)轉(zhuǎn)的必要因素。從有氧呼吸來(lái)看，在氧濃度較低情況下，呼吸速率與氧濃度成正比，達(dá)到氧飽和點(diǎn)今后，則無(wú)促進(jìn)作用。氧濃度過(guò)高或過(guò)低都會(huì)對(duì)植物產(chǎn)生傷害。根系缺氧會(huì)控制根尖細(xì)胞分裂，影響根系內(nèi)物質(zhì)的運(yùn)輸，對(duì)植物生長(zhǎng)發(fā)育造成嚴(yán)重危害。3）二氧化碳二氧化碳是呼吸作用的最后產(chǎn)物，當(dāng)外界環(huán)境中二氧化碳濃度增高時(shí)，脫羧反響減慢，呼吸作用碰到控制。一些植物（如豆科）的種子由于種皮限制,使呼吸作用釋放的CO2難以釋出，種皮內(nèi)齊集起高濃度的CO2控制了呼吸作用，從而致使種子休眠。（4）水分植物組織的含水量與呼吸作用有親近的關(guān)系。在必然范圍內(nèi)，呼吸速率隨組織含水量的增添而高升。干燥種子的呼吸作用很略微，當(dāng)種子吸水后，呼吸速率迅速增添。因此，種子含水量是限制種子呼吸作用強(qiáng)弱的重要因素。對(duì)于整體植物來(lái)說(shuō)，湊近萎蔫時(shí)，呼吸速率有所增添，如萎蔫時(shí)間較長(zhǎng)，細(xì)胞含水量則成為呼吸作用的限制因素。影響呼吸作用的外界因素除了溫度、氧氣、二氧化碳、水分之外,呼吸底物的含量(如可溶性糖）、機(jī)械傷害、一些礦質(zhì)元素（如磷、鐵、銅等）對(duì)呼吸也有明顯影響。其他病原菌感染可使寄主的線粒體增添,多酚氧化酶活性提高，抗氰呼吸和PPP路子增強(qiáng)。在呼吸速率測(cè)定中哪些步驟簡(jiǎn)單出現(xiàn)誤差？應(yīng)怎樣防范。1）實(shí)驗(yàn)過(guò)程中應(yīng)該不時(shí)輕輕的搖動(dòng)，使溶液表面的BaCO薄膜破壞，有利于CO的充分吸取2）實(shí)驗(yàn)過(guò)程中還要防范口中呼出的氣體進(jìn)入瓶?jī)?nèi)3）應(yīng)該用無(wú)CO蒸餾水或煮沸過(guò)的冷開(kāi)水沖洗廣口瓶35、廣口瓶橡皮塞上加一堿石灰管有何作用？36、測(cè)定電解質(zhì)外滲量時(shí)，為什么要對(duì)資料進(jìn)行真12福建農(nóng)林大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院空浸透？37、在SOD測(cè)定中為什么設(shè)照光比較管和暗中空白管？設(shè)照光比較管是為了除掉日光燈的光質(zhì)差異；暗中空白管是在測(cè)定吸取峰時(shí)用來(lái)做空白比較的。38、影響SOD活力測(cè)定正確性的主要因素是什么？應(yīng)怎樣戰(zhàn)勝？主要因素是：１試管，所用試管的玻璃質(zhì)量要同樣，包括厚度，直徑，質(zhì)量２光照條件，光照條件要求一致，即照光時(shí)試管放的高度，背景等各外界條件因素要一致植物缺鎂和缺鐵表現(xiàn)癥狀有何異同?為什么？答：同樣點(diǎn)：缺鎂和缺鐵都表現(xiàn)缺綠癥。不同樣點(diǎn)：缺鎂出現(xiàn)的缺綠癥狀第一從下部老葉上表現(xiàn)出來(lái)，而缺鐵的缺綠癥狀第一從上部再生葉表現(xiàn)出來(lái)。原因是鎂是參加循環(huán)的元素，即可再利用元素，而鐵是不參加循環(huán)的元素，即不能再利用元素。簡(jiǎn)要介紹測(cè)定光合速率的三種方法及原理？測(cè)定光合速率的方法:（1）改良半葉法：主若是測(cè)定單位時(shí)間、單位面積葉片干重的增添量；（2）紅外線CO2解析法，其原理是CO2對(duì)