病原生物學(xué) 第十一章 腸道感染細(xì)菌

病原生物學(xué)第十一章腸道感染細(xì)菌第一頁(yè)，共64頁(yè)。醫(yī)學(xué)微生物學(xué)各論第二篇細(xì)菌學(xué)各論第十一章腸道感染細(xì)菌第二頁(yè)，共64頁(yè)。腸道感染細(xì)菌通過糞—口途徑進(jìn)行傳播的細(xì)菌主要包括——腸桿菌科細(xì)菌（最重要）——弧菌屬細(xì)菌——幽門螺桿菌和彎曲菌屬第三頁(yè)，共64頁(yè)。

腸桿菌科

是一大群生物學(xué)性狀相似的革蘭氏陰性短小桿菌，有的為致病菌，多為腸道內(nèi)正常菌群，可引起醫(yī)院感染。條件致病菌臨床可查到四十種以上。

第四頁(yè)，共64頁(yè)。包括——埃希菌屬——志賀菌屬——沙門菌屬——變形桿菌屬——克雷伯菌屬——摩根菌屬——枸櫞酸菌屬——腸桿菌屬——沙雷菌屬等致病菌腸道正常菌群條件致病菌醫(yī)院感染第五頁(yè)，共64頁(yè)。第六頁(yè)，共64頁(yè)。第七頁(yè)，共64頁(yè)。腸道桿菌共同特點(diǎn)形態(tài)結(jié)構(gòu)

G—小桿菌，鈍圓桿菌，無芽孢，多數(shù)有鞭毛及菌毛培養(yǎng)特性需氧或兼性厭氧營(yíng)養(yǎng)要求不高，普通培養(yǎng)基可生長(zhǎng)，菌落相似，形成灰白色中等大小S型菌落。腸道選擇培養(yǎng)基：

第八頁(yè)，共64頁(yè)。SS培養(yǎng)基（沙門志賀培養(yǎng)基）乳糖、中性紅指示劑、膽鹽、煌綠等抑制劑選擇抑制作用（強(qiáng)選）大腸埃希菌產(chǎn)酸桃紅色乳糖發(fā)酵菌落傷寒沙門菌無色乳糖不發(fā)酵菌落膽鹽、煌綠：抑制大腸埃希菌及G+菌，提高腸道致病菌檢出率乳糖發(fā)酵中性紅呈紅色乳糖不發(fā)酵第九頁(yè)，共64頁(yè)。生化反應(yīng)活躍，常用于鑒別腸道桿菌乳糖發(fā)酵試驗(yàn)重要試驗(yàn)初步鑒別腸道致病菌和腸道非致病菌腸道致病菌多數(shù)不發(fā)酵乳糖腸道非致病菌多數(shù)發(fā)酵乳糖抵抗力不強(qiáng)，60℃30min即可滅活易出現(xiàn)各種變異抗原結(jié)構(gòu)復(fù)雜菌體（O）抗原鞭毛（H）抗原表面（K、Vi）抗原

第十頁(yè)，共64頁(yè)。溶原性轉(zhuǎn)換生化反應(yīng)性變異通過耐藥性變異毒力性變異轉(zhuǎn)導(dǎo)接合易出現(xiàn)各種變異通過引起第十一頁(yè)，共64頁(yè)?？乖瓨?gòu)造復(fù)雜

鞭毛抗原（H）IgG菌體抗原（O）IgMK或Vi抗原第十二頁(yè)，共64頁(yè)。第一節(jié)埃希菌屬大腸桿菌:E.coli埃希菌屬：Escherichia第十三頁(yè)，共64頁(yè)。第十四頁(yè)，共64頁(yè)。生物學(xué)性狀形態(tài)染色符合腸桿菌特點(diǎn)，周毛菌，有菌毛培養(yǎng)特性符合腸桿菌特點(diǎn)S-S——桃紅色：乳糖發(fā)酵菌落生化反應(yīng)IMViC（++--）抗原O抗原（O1---O173）H抗原（H1---H56）K抗原（K1---K100）血清型表示法：O：K：H第十五頁(yè)，共64頁(yè)。致病性致病物質(zhì)除內(nèi)毒素、莢膜腸桿菌科共有的毒力因子外，大腸埃希菌具有獨(dú)特的毒力因子有：黏附素——具有高度特異性吸附、定植、致病第十六頁(yè)，共64頁(yè)。外毒素（由ETEC產(chǎn)生的腸毒素）（1）不耐熱腸毒素（LT），分LT-I和LT-Ⅱ兩型蛋白質(zhì)對(duì)熱不穩(wěn)定，與霍亂腸毒素相似

A亞單位——毒素活性成分機(jī)制

B亞單位——與腸上皮細(xì)胞受體（GM1神經(jīng)節(jié)苷脂） 結(jié)合B單位與受體結(jié)合→導(dǎo)致A進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)→激活腺苷酸環(huán)化酶ATPCAMP↑小腸液過度分泌腸腔積液、腹瀉第十七頁(yè)，共64頁(yè)。（2）耐熱腸毒素（ST），分STa、STb兩型為低分子多肽，對(duì)熱穩(wěn)定機(jī)制為激活細(xì)胞鳥苷酸環(huán)化酶，使cGMP↑導(dǎo)致腹瀉LT和ST同時(shí)存在，致病性要強(qiáng)第十八頁(yè)，共64頁(yè)。所致疾病：腸道外感染（內(nèi)源性感染）化膿性感染——定位轉(zhuǎn)移腹膜炎、闌尾炎、創(chuàng)傷感染、手術(shù)刀口感染、肺炎、敗血癥、新生兒腦膜炎等泌尿道感染——病原菌來自病人腸道（上行性）占泌尿道感染首位、女性多見（尿道炎、膀胱炎、腎盂腎炎等）第十九頁(yè)，共64頁(yè)。腸道感染——胃腸炎（腹瀉），（外源性感染）

腸產(chǎn)毒性大腸埃希菌（ETEC）：嬰幼兒、旅游者腹瀉，與霍亂功能相似腸侵襲性大腸埃希菌（EIEC）：成人腹瀉，與菌痢相似腸致病性大腸埃希菌（EPEC）：嬰兒腹瀉（水樣腹瀉）腸出血性大腸埃希菌（EHEC，O157）：出血性結(jié)腸炎，溶血性尿毒綜合征（HUS）腸集聚性大腸埃希菌（EAEC）：嬰兒腹瀉（持續(xù)性）第二十頁(yè)，共64頁(yè)。致病性大腸桿菌引起的腹瀉菌株

作用部位

所致疾病

致病機(jī)理

ETEC

小腸

旅行者腹瀉

嬰幼兒腹瀉

STLT

EPEC

小腸

嬰兒腹瀉

質(zhì)粒介導(dǎo)粘附和破壞上皮細(xì)胞

EIEC

大腸

菌痢樣腹瀉

質(zhì)粒介導(dǎo)侵襲和破壞

結(jié)腸粘膜上皮細(xì)胞

EHEC

大腸

出血性結(jié)腸炎

志賀毒素

EAEC小腸嬰兒水樣腹瀉集聚性黏附上皮細(xì)胞第二十一頁(yè)，共64頁(yè)。微生物學(xué)檢查與防治腸道外感染標(biāo)本→涂片、染色→分離培養(yǎng)→鑒定尿路感染時(shí)每ml尿含菌≥10萬(wàn)，有診斷價(jià)值腸道內(nèi)感染分離培養(yǎng)+生化反應(yīng)+血清分型+毒素測(cè)定+核酸檢測(cè)等衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)檢查衛(wèi)生學(xué)標(biāo)準(zhǔn)：每ml飲水中細(xì)菌總數(shù)≤100個(gè)，每1000ml水中大腸桿菌≤3個(gè)，每100ml瓶裝汽水、果汁中，大腸桿菌≤5個(gè)第二十二頁(yè)，共64頁(yè)。第二節(jié)志賀菌（痢疾桿菌）

第二十三頁(yè)，共64頁(yè)。生物學(xué)性狀形態(tài)染色符合腸桿菌特征，有菌毛，無鞭毛，無動(dòng)力是本菌與其它腸道致病菌主要區(qū)別點(diǎn)培養(yǎng)特性腸道鑒別培養(yǎng)基上的無色透明、乳糖不發(fā)酵菌落生化反應(yīng)葡萄糖（+）、乳糖（-）（宋內(nèi)志賀菌遲緩發(fā)酵乳糖）、H2S-、尿素（-）、動(dòng)力（-）抗原分類——根據(jù)O抗原分4群，40余型A群——痢疾志賀菌（10）B群——福氏志賀菌（13）C群——鮑氏志賀菌（18）D群——宋氏志賀菌（1）抵抗力比其它腸桿菌弱，尤其對(duì)酸敏感第二十四頁(yè)，共64頁(yè)。第二十五頁(yè)，共64頁(yè)。致病性與免疫性致病物質(zhì)侵襲力——菌毛：黏附腸黏膜上皮細(xì)胞——Ⅲ型分泌系統(tǒng)—穿透上皮細(xì)胞并擴(kuò)散、傳播內(nèi)毒素——強(qiáng)烈內(nèi)毒素，作用于局部并可吸附入血引起全 身癥狀外毒素——A群（Ⅰ、Ⅱ型）產(chǎn)生志賀毒素（ST）有3種生 物活性（1）腸毒素：類似ETEC毒素、霍亂腸毒素作用——水樣瀉（2）細(xì)胞毒性：對(duì)人肝細(xì)胞、腸黏膜細(xì)胞有毒性，引起變性壞死（3）神經(jīng)毒性：損傷動(dòng)物神經(jīng)系統(tǒng)（麻痹、死亡）第二十六頁(yè)，共64頁(yè)。細(xì)菌（菌毛）吸附腸黏膜上皮細(xì)胞穿入細(xì)胞并擴(kuò)散周圍及深入黏膜下層釋放內(nèi)毒素、外毒素腸局部黏膜炎癥（變性、壞死、脫落）出血、壞死、潰瘍膿血便/黏液血便刺激腸壁植物神經(jīng)腸蠕動(dòng)↑腸肌痙攣腺體分泌↑水分吸收↓腹痛、腹瀉刺激直腸肛門括約肌里急后重便數(shù)增加吸收入血發(fā)熱、白細(xì)胞↑高熱、休克中毒性腦病DIC死亡毒血癥中毒性菌痢第二十七頁(yè)，共64頁(yè)。所致疾病——細(xì)菌性痢疾傳染源：病人、帶菌者傳播途徑：經(jīng)口致病機(jī)制臨床類型急性菌痢中毒性菌痢慢性菌痢免疫力不牢固，易再感染第二十八頁(yè)，共64頁(yè)。微生物學(xué)檢查與防治微生物學(xué)檢查分離鑒定毒力實(shí)驗(yàn)快速診斷防治更有效的疫苗還在研制中，此菌極易出現(xiàn)耐藥性，依菌株。第二十九頁(yè)，共64頁(yè)。第三節(jié)沙門菌屬

是腸桿菌科中最復(fù)雜的菌屬，有2000種以上血清型對(duì)人類有致病性腸熱癥——傷寒沙門菌，甲型副傷寒沙門菌、肖氏沙門菌、希氏沙門菌食物中毒——鼠傷寒沙門菌、豬霍亂沙門菌、腸炎沙門菌敗血癥——豬霍亂沙門菌最常見第三十頁(yè)，共64頁(yè)。生物學(xué)性狀形態(tài)染色符合腸桿菌特點(diǎn)，多為周毛菌，有菌毛傷寒桿菌的周身鞭毛第三十一頁(yè)，共64頁(yè)。第三十二頁(yè)，共64頁(yè)。培養(yǎng)特性EMB、SS上呈無色透明乳糖不發(fā)酵菌落麥康凱培養(yǎng)基上的傷寒桿菌菌落第三十三頁(yè)，共64頁(yè)。生化反應(yīng)乳糖（-），葡萄糖（+）/+，多數(shù)H2S+，動(dòng)力+，尿素（-）抗原結(jié)構(gòu)O抗原——特異性低、穩(wěn)定、分群（組）H抗原——特異性高，不穩(wěn)定，分型Vi抗原（毒力抗原）——不穩(wěn)定，可阻止“O”凝集抵抗力不強(qiáng)第三十四頁(yè)，共64頁(yè)。致病性與免疫性致病物質(zhì)侵襲力菌毛——吸附Ⅲ型分泌系統(tǒng)——穿入細(xì)胞，擴(kuò)散Vi抗原——微莢膜（抗吞噬）內(nèi)毒素外毒素——個(gè)別（鼠傷寒沙門菌）產(chǎn)生，與ETEC腸毒素相似第三十五頁(yè)，共64頁(yè)。所致疾病菌毛穿入淋巴液胸導(dǎo)管第二次菌血癥遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)腸壁壞死、潰瘍高熱、肝脾腫大、玫瑰疹、白細(xì)胞↓等全身中毒癥狀肝脾腎淋巴結(jié)膽囊尿排菌糞便排菌發(fā)病期（1-4W）潛伏期2W腸熱癥傷寒沙門菌等經(jīng)口吸附小腸黏膜細(xì)胞上在腸壁、腸系膜淋巴組織中繁殖（致敏）血流（第一次菌血癥）腸出血、腸穿孔第三十六頁(yè)，共64頁(yè)。腸熱癥臨床過程潛伏期2W發(fā)病初期：第1W（第一次菌血癥）、高熱、肝脾腫大、皮疹、WBS↓等全身中毒癥狀，此期血液（80%）、骨髓（90%（+）有大量細(xì)菌發(fā)病極期：第2-4W，全身癥狀持續(xù)加重，此期血、骨髓中仍有菌，但糞便（60%）、尿（20%）、皮疹液中可查到細(xì)菌，由于Ⅳ型變態(tài)反應(yīng)——并發(fā)癥發(fā)生，血液抗體達(dá)到陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)——肥達(dá)反應(yīng)恢復(fù)期：第四周末，體溫下降，癥狀消失，恢復(fù)期帶菌1年（糞便仍陽(yáng)性），血液抗體仍高第三十七頁(yè)，共64頁(yè)。胃腸炎（食物中毒）

潛伏期短，6-24h，起病急，病程短2-4天，發(fā)熱、惡心、嘔吐、腹痛、腹瀉敗血癥

經(jīng)口感染，經(jīng)腸道入血，敗血癥癥狀明顯而腸道癥狀不明顯帶菌者

健康帶菌者，恢復(fù)期帶菌者免疫性

腸熱癥，病后免疫牢固，其它可重復(fù)感染第三十八頁(yè)，共64頁(yè)。微生物學(xué)檢查與防治分離培養(yǎng)與鑒定標(biāo)本采取腸熱癥：第1-2W，血、骨髓；第2-3W，糞便、尿食物中毒：糞便、嘔吐物、可疑食物敗血癥：血帶菌者：糞便分離鑒定：增菌（血、骨髓）→SS→生化反應(yīng)→血清鑒定第三十九頁(yè)，共64頁(yè)。血清學(xué)診斷——肥達(dá)反應(yīng)（Widal）原理用已知傷寒沙門氏菌O抗原及H抗原，以及引起副傷寒的沙門氏菌H抗原與待檢血清作凝集試驗(yàn)，測(cè)定待檢血清中有無相應(yīng)抗體及其效價(jià)。（TO、TH、PA、PB）方法：試管凝集法（定量）TO≥1：80，TH≥1：160，PA、PB均≥1：80才有意義動(dòng)態(tài)觀察：雙份血清抗體四倍升高有診斷意義第四十頁(yè)，共64頁(yè)。臨床意義O抗體（IgM），H抗體（IgG）O、H抗體均升高，患傷寒的可能性大O、H抗體不升高，患傷寒的可能性小只有H升高，則可能是預(yù)防接種過或非特異性回憶反應(yīng)，只有O升高而H不高，則可能是感染早期或其他沙門菌的交叉反應(yīng)。第四十一頁(yè)，共64頁(yè)。第四節(jié)霍亂弧菌霍亂弧菌屬弧菌屬（Vibrio），為一大群菌體短小，彎曲成弧，G-單毛菌，運(yùn)動(dòng)極活潑，分布廣泛，多存在于水中，對(duì)人有致病性主要為霍亂弧菌和副溶血弧菌第四十二頁(yè)，共64頁(yè)?；魜y弧菌的疫源地霍亂是一種烈性腸道傳染病，有3個(gè)疫源地印度恒河三角洲（O1群，古典生物型）：六次世界性大流行，始于1817年印尼蘇拉威西島（O1群，埃托生物型）：第七次世界大流行，始于1961年至今未停止，累及140多個(gè)國(guó)家孟加拉灣（O139，Beolgal）：始于1992年，危害相同WHO規(guī)定：疑為霍亂病例，三種同時(shí)檢測(cè)第四十三頁(yè)，共64頁(yè)。生物學(xué)性狀形態(tài)染色G—弧菌，單鞭毛，穿梭樣動(dòng)力，魚群狀排列，有菌毛，個(gè)別有莢膜，無芽胞第四十四頁(yè)，共64頁(yè)?；魜y弧菌的單鞭毛第四十五頁(yè)，共64頁(yè)。第四十六頁(yè)，共64頁(yè)。培養(yǎng)特性兼性厭氧，氧氣充分生長(zhǎng)良好營(yíng)養(yǎng)要求不高，故用pH8-9堿性培養(yǎng)基，耐堿不耐酸（pH7.4-9.6），形成光滑透明濕潤(rùn)的“水滴樣”菌落，分離（選擇）能在無鹽培養(yǎng)基中生長(zhǎng)（區(qū)別其它弧菌）第四十七頁(yè)，共64頁(yè)?；魜y弧菌在培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)狀況第四十八頁(yè)，共64頁(yè)。生化反應(yīng)觸酶、氧化酶（+），硝酸鹽還原（+），靛基質(zhì)（+）抗原分型

有200多個(gè)血清群，其中O1群、O139群可引起霍亂，其余不致病或僅引起胃腸炎等，O1群包括兩個(gè)血清型：古典生物型和埃托生物型（E1-Tor）抵抗力較弱怕干——干燥時(shí)易死亡，水環(huán)境中可存活兩周（水源性傳 播，水性爆發(fā)）怕酸——正常胃酸4min不耐熱——100℃，1-2min對(duì)消毒劑抗生素敏感第四十九頁(yè)，共64頁(yè)。致病性與免疫性致病物質(zhì)侵襲力鞭毛與黏液素酶鞭毛運(yùn)動(dòng)有利于細(xì)菌穿過黏膜表面黏液層黏液素酶液化黏液菌毛——使細(xì)菌定植于小腸霍亂腸毒素——最強(qiáng)烈的致瀉毒素其致病機(jī)制與ETEC的LT相似，但作用強(qiáng)烈得多第五十頁(yè)，共64頁(yè)?；魜y腸毒素的作用機(jī)制第五十一頁(yè)，共64頁(yè)。所致疾病——霍亂（甲類法定傳染病02）傳染源：病人糞便污染的水源或食品傳染途徑：經(jīng)口（暴飲暴食者）第五十二頁(yè)，共64頁(yè)。潛伏期：2-3d前驅(qū)期：不明顯，少數(shù)有輕度吐瀉、腹脹不適吐瀉期：劇烈吐瀉、米泔樣，每日數(shù)十次，持續(xù)2-3天，失水12000ml脫水期：嚴(yán)重吐瀉引起水電解質(zhì)紊亂，脫水酸中毒，腎衰、循環(huán)衰竭、休克、死亡表現(xiàn)：神志不安、淡漠“霍亂面容”呈脫水貌，眼窩下陷，舟狀腹，肌痙攣等恢復(fù)期：吐瀉停止、紊亂糾正、癥狀消失、病程平均為3-7天免疫力：病人愈后可獲得牢固免疫第五十三頁(yè)，共64頁(yè)。微生物學(xué)檢查與防治烈性傳染病（發(fā)病率高、流行迅速、死亡率高），早期、快速、準(zhǔn)確診斷（尤其首例）對(duì)防治蔓延意義重大1.標(biāo)本：“米泔樣”便及嘔吐物，專人護(hù)送，快速送檢，指定實(shí)驗(yàn)室2.直接涂片鏡檢懸滴法或暗視野顯微鏡，觀察穿梭樣運(yùn)動(dòng)3.分離培養(yǎng)鑒定4.快速診斷熒光菌球法，SPA

協(xié)同凝集試驗(yàn)第五十四頁(yè)，共64頁(yè)。防治加強(qiáng)國(guó)境檢疫，加強(qiáng)水源及糞便管理及時(shí)檢出病人，隔離封鎖疫區(qū)疫苗接種對(duì)癥治療，抗菌治療第五十五頁(yè)，共64頁(yè)。第五節(jié)副溶血弧菌

嗜鹽性弧菌，沿海地區(qū)常見，存在于近海海水、海泥、海產(chǎn)品中，1950年首發(fā)于日本大阪，主要引起食物中毒一、生物學(xué)性狀

1G—弧菌（多形性），單鞭毛2具有耐鹽性（與霍亂弧菌的顯著差別），在含有3.5%NaCl培養(yǎng)基中生長(zhǎng)良好，無鹽不長(zhǎng)，＞8%也不長(zhǎng)，在海水中可生存47天以上，在TCBS平板上形成綠色蔗糖不發(fā)酵菌落。3神奈川試驗(yàn)（KP）：在高鹽培養(yǎng)基上中使人或兔紅細(xì)胞發(fā)生溶血（β溶血）——耐熱性溶血毒素與致病性平行（KP+，KP-）。

第五十六頁(yè)，共64頁(yè)。二、致病性1.致病機(jī)制不甚明確（KP+為致病株、KP-不致?。㎏P+