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微生物的營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)與死亡問(wèn)題演示文稿1目前一頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于十八點(diǎn)2優(yōu)選微生物的營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)與死亡問(wèn)題目前二頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于十八點(diǎn)第一節(jié)微生物的營(yíng)養(yǎng)問(wèn)題微生物的營(yíng)養(yǎng)素微生物的營(yíng)養(yǎng)類型營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的輸送微生物培養(yǎng)基問(wèn)題(略)目前三頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于十八點(diǎn)一、微生物的營(yíng)養(yǎng)需求
微生物活細(xì)胞是個(gè)新陳代謝動(dòng)力系統(tǒng),它要活下去,就必須不斷從環(huán)境中吸收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),通過(guò)物質(zhì)代謝和能量代謝,以實(shí)現(xiàn)生長(zhǎng)和繁殖,同時(shí)向環(huán)境排出“廢物”。微生物的這種物質(zhì)交換對(duì)工業(yè)發(fā)酵至關(guān)重要。營(yíng)養(yǎng)素(nutrients):指微生物在生命活動(dòng)中從環(huán)境中吸取的用以提供能量、調(diào)節(jié)代謝及合成細(xì)胞物質(zhì)(甚至包括發(fā)酵產(chǎn)物)的原材料。這些營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)必須能直接地或經(jīng)降解后可以跨膜進(jìn)入細(xì)胞。營(yíng)養(yǎng)(過(guò)程)nutrition:微生物吸收和利用營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的過(guò)程。目前四頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于十八點(diǎn)營(yíng)養(yǎng)素的分析可把營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)大致分為元素營(yíng)養(yǎng)和能源營(yíng)養(yǎng)元素營(yíng)養(yǎng)中研究得最透徹的是碳源,能源營(yíng)養(yǎng)可以是化學(xué)物質(zhì),也可以是非化學(xué)物質(zhì)如光能。一般把為模塊分子(buildingblock)生物合成提供碳骨架(carbonskeletons)的基質(zhì),通常稱為碳源;而為生命活動(dòng)提供吉布斯自由能(其中只有一部分能被微生物細(xì)胞轉(zhuǎn)化成代謝能)和還原力的基質(zhì)稱為能源。元素營(yíng)養(yǎng)和元素代謝在細(xì)胞生理的研究中仍具有重要地位。舉例:P、Mn、Se(大骨節(jié)?。┠壳拔屙?yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于十八點(diǎn)8種常量元素的一些生理功能及生長(zhǎng)需求量元素生理功能生長(zhǎng)需求量mol/L)CNHOSPKMg細(xì)胞有機(jī)物質(zhì)的組成部分,常作能源蛋白質(zhì)、核酸和輔酶的組成部分組成細(xì)胞的有機(jī)物質(zhì)和水組成細(xì)胞的有機(jī)物質(zhì)和水,有氧呼吸蛋白質(zhì)和某些輔酶的組分核酸、磷脂、核苷酸和某些輔酶組分細(xì)胞中主要的無(wú)機(jī)陽(yáng)離子、某些酶的輔助因子許多酶、葉綠素(光合微生物)的輔助因子,存在于細(xì)胞壁和細(xì)胞膜>10-210-3--10-410-4~10-310-4~10-310-4~10-3這個(gè)8種常量元素組成了細(xì)菌和真菌干重的98%(平均值)目前六頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于十八點(diǎn)營(yíng)養(yǎng)元素元素營(yíng)養(yǎng)以C
、O、H、N
含量最多(占細(xì)胞干重的90%~95%),這4種元素具有共同的化學(xué)性質(zhì)是:可通過(guò)共享電子(共有電子對(duì))而迅速形成共價(jià)鍵。單純由C和H組成的生物分子呈非極性,與水親和力低,使生物體與水環(huán)境之間形成一定的界面,這是生命誕生和存在的必要條件。O、N、S等的參與引起有機(jī)分子電荷分布不均勻,使分子出現(xiàn)極性,能與水分子形成氫鍵而表現(xiàn)親水性。N參加主鏈結(jié)構(gòu)可改善大分子的機(jī)械性能,O、S、P等可在有機(jī)分子間或分子內(nèi)形成橋式連接,影響分子的形狀和性能。目前七頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于十八點(diǎn)元素組成:
C、H、O、N、P、S、K、Na、Ca、Mg、Fe、Mn、Cu、Co、Zn、Mo(大體16種)。其中C、H、O、N、P占細(xì)胞干重的97%。物質(zhì)組成:
水:約占細(xì)胞濕重的90%。
有機(jī)物:蛋白質(zhì)、碳水化合物、脂類、核酸、維生素以及它們的合成中間體和降解物。
無(wú)機(jī)鹽:參與有機(jī)物組成及單獨(dú)存在于細(xì)胞原生質(zhì)內(nèi)的無(wú)機(jī)鹽等灰分物質(zhì)中的元素。微生物細(xì)胞的化學(xué)組成目前八頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于十八點(diǎn)影響微生物細(xì)胞化學(xué)組成的因素微生物的種類:硫細(xì)菌、鐵細(xì)菌、海洋細(xì)菌含有較多的S、Fe、Cl和Na。菌齡:幼齡菌中含氮量較高。培養(yǎng)條件:在氮源豐富的環(huán)境中生長(zhǎng)的微生物含氮量較高。(培養(yǎng)富Se酵母、靈芝等)目前九頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于十八點(diǎn)一些微生物細(xì)胞的元素組成目前十頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于十八點(diǎn)部分發(fā)酵產(chǎn)品的元素組成紅霉素頭孢霉素目前十一頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于十八點(diǎn)二、微生物的營(yíng)養(yǎng)類型
一般根據(jù)碳源營(yíng)養(yǎng)將微生物分為:異養(yǎng)型微生物和自養(yǎng)型微生物。前者從有機(jī)化合物中獲取組成細(xì)胞的碳(所有的真菌、多數(shù)細(xì)菌及原生動(dòng)物),后者從CO2中獲取碳(CO2的固定,藻類和幾種細(xì)菌),也有兼養(yǎng)型微生物。A
微生物營(yíng)養(yǎng)類型的分類(一)分類標(biāo)準(zhǔn)營(yíng)養(yǎng)類型能源光能營(yíng)養(yǎng)型phototroph化能營(yíng)養(yǎng)型chemotroph(無(wú)機(jī)、有機(jī))氫供體無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)型lithotroph有機(jī)營(yíng)養(yǎng)型organotroph目前十二頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于十八點(diǎn)分類標(biāo)準(zhǔn)營(yíng)養(yǎng)類型碳源(同化作用)自養(yǎng)型autotroph(碳架物質(zhì)由細(xì)胞自身從CO2還原生成)異養(yǎng)型heterotroph(碳架物質(zhì)從其它有機(jī)物供給)
異化作用需氧型/厭氧型
生長(zhǎng)因子原養(yǎng)型(prototroph)/野生型(wildtype)營(yíng)養(yǎng)缺陷型auxotroph
合成氨基酸能力氨基酸自養(yǎng)型aminoacidautotroph氨基酸異養(yǎng)型aminoacidheterotroph
取食方式滲透營(yíng)養(yǎng)型osmotroph吞噬營(yíng)養(yǎng)型phagotroph
取得死或活有機(jī)物腐生saproghytism寄生parasitismB
微生物營(yíng)養(yǎng)類型的分類(二)目前十三頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于十八點(diǎn)C微生物的營(yíng)養(yǎng)類型(三)營(yíng)養(yǎng)類型能源氫供體基本碳源實(shí)例光能無(wú)機(jī)自養(yǎng)型(PLA)光無(wú)機(jī)物CO2紫硫細(xì)菌、綠硫細(xì)菌、藻類光能有機(jī)異養(yǎng)型(POH)光有機(jī)物CO2及簡(jiǎn)單有機(jī)物紅螺細(xì)菌化能無(wú)機(jī)自養(yǎng)型(CLA)無(wú)機(jī)物無(wú)機(jī)物CO2硝化細(xì)菌、硫化細(xì)菌化能有機(jī)異養(yǎng)型(COH)有機(jī)物有機(jī)物有機(jī)物絕大多數(shù)細(xì)菌和全部真核微生物目前十四頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于十八點(diǎn)細(xì)菌、放線菌、酵母菌、霉菌沒(méi)有專門(mén)的攝食和排泄“器官”,各種化學(xué)物質(zhì)進(jìn)出細(xì)胞主要依賴于細(xì)胞質(zhì)膜的功能。盡管細(xì)胞壁對(duì)物質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞有一定的障礙。(G+細(xì)胞壁能阻止10000Da的葡聚糖,真菌只允許分子質(zhì)量相對(duì)較小的化合物通過(guò)細(xì)胞壁)注意:存在于水相中的化學(xué)物質(zhì)如何跨過(guò)疏水的膜?這些化合物如何克服濃度梯度向高濃度運(yùn)輸?三、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的跨膜輸送目前十五頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于十八點(diǎn)微生物是通過(guò)細(xì)胞膜的滲透和選擇吸收作用而從外界吸取營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的。被動(dòng)吸收
簡(jiǎn)單擴(kuò)散(順濃度梯度)促進(jìn)擴(kuò)散(借助載體,不耗能)主動(dòng)吸收
主動(dòng)運(yùn)輸(耗能,借助載體)基團(tuán)移位(耗能,借助載體,結(jié)構(gòu)有變化)原生動(dòng)物——膜泡運(yùn)輸營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的跨膜輸送基本類型目前十六頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于十八點(diǎn)A簡(jiǎn)單擴(kuò)散
simplediffusion無(wú)載體蛋白參與下,單純依靠物理擴(kuò)散方式輸送營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。特點(diǎn):輸送動(dòng)力:濃度梯度輸送方向:順濃度梯度輸送物質(zhì):一些非極性小分子如:O2、N2、苯等一些不帶電荷但顯極性的小分子如:水、尿素、NH3、甘油、CO2、脂肪酸和某些醇等目前十七頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于十八點(diǎn)B促進(jìn)擴(kuò)散facilitateddiffusion在特異性載體蛋白的協(xié)助下,不消耗能量的一類擴(kuò)散性運(yùn)輸方式。普遍存在于真核生物,原核生物中僅有幾例。特點(diǎn):
輸送動(dòng)力:濃度梯度
輸送方向:順濃度梯度
載體蛋白:需要,具有特異性
輸送物質(zhì):真核微生物對(duì)許多糖類的吸收、大腸桿菌對(duì)甘油的吸收及運(yùn)動(dòng)發(fā)酵單胞菌和牛鏈球菌對(duì)葡萄糖的吸收。
輸送機(jī)制:被輸送的物質(zhì)與相應(yīng)的載體之間存在一種親和力。一些細(xì)菌通常有不同的載體蛋白分別來(lái)完成AA、糖、維生素和無(wú)機(jī)鹽等物質(zhì)的運(yùn)輸。思考:載體---蛋白質(zhì)---誘變---輸送增強(qiáng)或削弱目前十八頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于十八點(diǎn)涉及物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)的一些載體多樣性主要促進(jìn)超家族(majorfacilitatorsuperfamily)目前十九頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于十八點(diǎn)核苷和核苷酸轉(zhuǎn)運(yùn)家族目前二十頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于十八點(diǎn)革蘭氏陰性細(xì)菌糖特異孔結(jié)構(gòu)家族目前二十一頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于十八點(diǎn)C主動(dòng)運(yùn)輸activetransport
在消耗能量的同時(shí),實(shí)現(xiàn)溶質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)的濃縮,而且跨膜前后沒(méi)有任何化學(xué)變化發(fā)生的輸送機(jī)制。特點(diǎn):
輸送動(dòng)力:代謝能量
輸送方向:逆濃度梯度(由低到高)
載體蛋白:需要,具有特異性
輸送物質(zhì):氨基酸、某些糖、Na、K
等。
輸送機(jī)制:代謝能量改變底物與載體之間的結(jié)合力。目前二十二頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于十八點(diǎn)目前二十三頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于十八點(diǎn)D
基團(tuán)移位grouptranslocation被輸送的基質(zhì)分子在膜內(nèi)經(jīng)受了共價(jià)的改變,以被修飾的形式進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)的輸送機(jī)制(需要載體、代謝能、酶)。特點(diǎn):
輸送動(dòng)力:代謝能量,PEP上的高能磷酸鍵
輸送方向:逆濃度梯度
載體蛋白:磷酸轉(zhuǎn)移酶系統(tǒng)
被輸送物質(zhì)在輸送前后的存在狀態(tài):在細(xì)胞膜內(nèi)被磷酸化目前二十四頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于十八點(diǎn)輸送機(jī)制:磷酸轉(zhuǎn)移酶系統(tǒng)(PTS)
酶Ⅰ:非特異性,存在于細(xì)胞質(zhì)中酶Ⅱ:特異性(誘導(dǎo)型),存在于膜上因子Ⅲ:特異性,存在于細(xì)胞質(zhì)中
HPr(組氨酸蛋白質(zhì)/熱穩(wěn)定蛋白質(zhì)):非特異性,存在于細(xì)胞質(zhì)中葡萄糖的跨膜輸送目前二十五頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于十八點(diǎn)目前二十六頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于十八點(diǎn)E
膜泡運(yùn)輸Membranevesicletransport通過(guò)趨化性運(yùn)動(dòng)靠近營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),將它吸附到膜表面,形成膜泡,并進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)。胞吞作用:顆粒物質(zhì)胞飲作用:活細(xì)胞不靠滲透性而靠膜的凸或凹攝取溶液狀態(tài)物質(zhì)的現(xiàn)象。目前二十七頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于十八點(diǎn)四種物質(zhì)運(yùn)輸方式的比較目前二十八頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于十八點(diǎn)F真核微生物細(xì)胞內(nèi)化學(xué)物質(zhì)的跨膜輸送不帶電的分子包括極性和非極性小分子容易透過(guò)線粒體內(nèi)膜如:水、氧、二氧化碳、氨、甲酸、乙酸、丙酸、丁酸等帶電的分子或離子需借助載體通過(guò)線粒體內(nèi)膜如:磷酸鹽、硫酸鹽、ADP、ATP、PYR、TCA環(huán)中的有機(jī)酸、Glu、Asp、Orn(鳥(niǎo)氨酸)、Cit(瓜氨酸)、?;鈮A、PEP等NAD(P)+/NADPH、NADH、CoA和?;鵆oA不能跨過(guò)線粒體內(nèi)膜目前二十九頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于十八點(diǎn)G代謝中間產(chǎn)物排出細(xì)胞的機(jī)制氨基酸的釋出微生物細(xì)胞內(nèi)氨基酸庫(kù)(AApool)內(nèi)存在最多的氨基酸是谷氨酸。近年來(lái)的研究表明:谷氨酸棒桿菌中Glu、Lys、Ile及Thr的釋出以及大腸桿菌中Glu、Thr的釋出都是借助載體的輸送過(guò)程。但即使借助載體輸送,膜脂質(zhì)雙層分子結(jié)構(gòu)的組成及分子排列的緊密程度仍會(huì)影響到Glu的排出。谷氨酸的吸收是主動(dòng)運(yùn)輸過(guò)程。目前三十頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于十八點(diǎn)核苷酸的釋出借助于細(xì)胞形態(tài)的改變(Mn++)胞外酶的釋出是由信號(hào)肽決定,分泌蛋白被連接上一段分泌載體(信號(hào)肽),將酶定位在膜外。如何構(gòu)建這種“信號(hào)肽”載體?有利于某些酶的分泌目前三十一頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于十八點(diǎn)如何促進(jìn)特定物質(zhì)的輸入和輸出?(或吸收和分泌)物質(zhì)輸送與工業(yè)生產(chǎn)的相關(guān)性(營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收和發(fā)酵產(chǎn)物的合成與分泌)
能量的來(lái)源(ATP、膜電位)主動(dòng)輸送--→耗能→代謝→生長(zhǎng)→產(chǎn)物合成→工業(yè)生產(chǎn)思考與討論
之一物質(zhì)輸送問(wèn)題目前三十二頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于十八點(diǎn)加入解偶聯(lián)劑如:2,4-二硝基苯酚
破壞質(zhì)膜內(nèi)外的質(zhì)子梯度,使一些物質(zhì)不能輸送,能量問(wèn)題?加入電子傳遞鏈抑制劑如:KCN
CN-與Fe++形成絡(luò)合物破壞細(xì)胞色素加入能量轉(zhuǎn)移抑制劑如:寡酶素
阻塞ATP酶的“質(zhì)子井”,使能量合成受阻競(jìng)爭(zhēng)及飽和效應(yīng)
推測(cè)輸送過(guò)程有載體參與營(yíng)養(yǎng)物輸送前后性質(zhì)變化---泡囊試驗(yàn)
推測(cè)輸送過(guò)程有酶參與思考與討論之二營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的輸送機(jī)制探討目前三十三頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于十八點(diǎn)一般的載體是蛋白質(zhì),具有蛋白質(zhì)的一切屬性。載體與酶是有區(qū)別的(前者不發(fā)生共價(jià)變化)載體有天然的,由DNA編碼,經(jīng)轉(zhuǎn)錄、翻譯產(chǎn)生,可用遺傳手段修飾。載體是可調(diào)控的(可誘導(dǎo)產(chǎn)生、活性可調(diào))載體可人工構(gòu)建(諸如:潔霉素、短桿菌肽)細(xì)胞物質(zhì)運(yùn)輸及代謝中有哪些載體呢?5
思考與討論之三物質(zhì)輸送的載體問(wèn)題目前三十四頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于十八點(diǎn)第二節(jié)微生物的生長(zhǎng)問(wèn)題生長(zhǎng):個(gè)體體積的增大及細(xì)胞原生質(zhì)總量的增加。繁殖:個(gè)體數(shù)量的增多。群體生長(zhǎng):包含了個(gè)體生長(zhǎng)和繁殖休眠與死亡Microbialgrowthcurveinaclosedsystem目前三十五頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于十八點(diǎn)一、微生物個(gè)體細(xì)胞的生長(zhǎng)A細(xì)菌的生長(zhǎng)與繁殖目前三十六頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于十八點(diǎn)B絲狀菌的生長(zhǎng)與繁殖
曲霉菌分生孢子形成的過(guò)程目前三十七頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于十八點(diǎn)二、微生物生長(zhǎng)的測(cè)定A直接計(jì)數(shù)法顯微計(jì)數(shù)法酵母菌、霉菌孢子:血球計(jì)數(shù)器細(xì)菌:Petroff-Hausser或
Helber計(jì)數(shù)器
目前三十八頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于十八點(diǎn)B電子自動(dòng)計(jì)數(shù)法
Coulter電子計(jì)數(shù)器可測(cè)定細(xì)胞數(shù)、細(xì)胞大小分布。細(xì)胞呼吸熵、活化能、氧化還原電位目前三十九頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于十八點(diǎn)C間接計(jì)數(shù)法薄膜過(guò)濾計(jì)數(shù)法微孔濾膜如硝化纖維素薄膜適用:量大、含菌濃度低的樣品目前四十頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于十八點(diǎn)平板菌落計(jì)數(shù)法
適用:?jiǎn)渭?xì)胞或單孢子菌懸液方法:傾注平板、涂布平板
CFU:colony-formingunit目前四十一頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于十八點(diǎn)
MPN(Mostprobablenumber)將樣品作10倍系列稀釋,接種液體試管,培養(yǎng)后記錄出現(xiàn)生長(zhǎng)的試管數(shù),查表并計(jì)算。例:某一細(xì)菌在稀釋法中的生長(zhǎng)情況如下
稀釋度10-410-510-610-710-8
重復(fù)數(shù)55555
生長(zhǎng)管數(shù)55410
數(shù)量指標(biāo)“541”,查統(tǒng)計(jì)分配表原菌液中的活菌數(shù)=1.7×106
個(gè)/dLD液體稀釋法(或然率法)目前四十二頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于十八點(diǎn)E其他方法測(cè)定細(xì)胞物質(zhì)的量測(cè)定細(xì)胞干重法比濁法測(cè)定細(xì)胞總含氮量法
霉菌菌絲長(zhǎng)度的測(cè)定菌落直徑測(cè)定法:
U型管測(cè)定法:目前四十三頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于十八點(diǎn)比濁法目前四十四頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于十八點(diǎn)三、微生物群體生長(zhǎng)規(guī)律A細(xì)菌生長(zhǎng)曲線growthcurve
將少量細(xì)菌接種到一恒定容積的新鮮液體培養(yǎng)基中,在適宜條件下培養(yǎng),定時(shí)取樣測(cè)定細(xì)胞密度(CFU),以活細(xì)胞數(shù)的對(duì)數(shù)對(duì)培養(yǎng)時(shí)間所作出的曲線稱為生長(zhǎng)曲線。目前四十五頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于十八點(diǎn)細(xì)菌群體生長(zhǎng)曲線
目前四十六頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于十八點(diǎn)1延遲期(lagphase
調(diào)整期)活細(xì)胞數(shù):基本不變細(xì)胞生理特點(diǎn):分裂遲緩、代謝活躍出現(xiàn)的原因:調(diào)整代謝,適應(yīng)新環(huán)境影響因素:菌種的遺傳性;種齡;接種量;培養(yǎng)基組分及培養(yǎng)條件縮短措施:擴(kuò)大接種量,保持培養(yǎng)基成分的一致性目前四十七頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于十八點(diǎn)2對(duì)數(shù)期logphase/exponentialphase活細(xì)胞數(shù):呈幾何級(jí)數(shù)增加細(xì)胞的生理特點(diǎn):細(xì)胞生長(zhǎng)速率最大;細(xì)胞進(jìn)行平衡生長(zhǎng);酶系活躍,代謝旺盛目前四十八頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于十八點(diǎn)在最適條件下幾種微生物的世代時(shí)間目前四十九頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于十八點(diǎn)3平衡期stationaryphase活細(xì)胞數(shù):動(dòng)態(tài)平衡出現(xiàn)原因:營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消耗;有生理毒性代謝產(chǎn)物的積累;環(huán)境條件(pH,氧化還原電位)的改變對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)不利細(xì)胞生理特點(diǎn):分裂速度降低;活細(xì)胞數(shù)達(dá)到最大值;開(kāi)始積累儲(chǔ)藏物質(zhì);積累發(fā)酵產(chǎn)物;芽孢細(xì)菌產(chǎn)生芽孢目前五十頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于十八點(diǎn)4衰亡期declinephase/deathphase活細(xì)胞數(shù):逐漸下降細(xì)胞生理特點(diǎn):細(xì)胞內(nèi)顆粒更加明顯,出現(xiàn)液泡細(xì)胞出現(xiàn)異常形態(tài)細(xì)胞死亡伴隨自溶目前五十一頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于十八點(diǎn)B真菌的生長(zhǎng)曲線酵母菌的生長(zhǎng)曲線:與細(xì)菌相似絲狀真菌的生長(zhǎng)曲線
三個(gè)時(shí)期
各期特征生長(zhǎng)停滯期孢子萌發(fā)前的時(shí)期迅速生長(zhǎng)期菌絲伸長(zhǎng)及分枝衰退期菌絲體干重下降伴隨自溶目前五十二頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于十八點(diǎn)葡萄糖和乳糖共存時(shí)大腸桿菌的二次生長(zhǎng)曲線麥芽糖和蔗糖共存時(shí)釀酒酵母的二次生長(zhǎng)曲線C多種碳源及復(fù)合培養(yǎng)基存在下的微生物的生長(zhǎng)目前五十三頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于十八點(diǎn)四微生物的培養(yǎng)A分批培養(yǎng)batchculture
將微生物置于一定容積的培養(yǎng)基中,經(jīng)過(guò)培養(yǎng)生長(zhǎng),最后一次收獲的培養(yǎng)方法。搖瓶培養(yǎng)發(fā)酵罐培養(yǎng)目前五十四頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于十八點(diǎn)B補(bǔ)料分批培養(yǎng)
適用對(duì)象:底物對(duì)菌體生長(zhǎng)或產(chǎn)物形成具有抑制作用方法:階段式補(bǔ)料連續(xù)補(bǔ)料----流加發(fā)酵
目前五十五頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于十八點(diǎn)C連續(xù)培養(yǎng)continuousculture
當(dāng)微生物以分批培養(yǎng)的方式培養(yǎng)到對(duì)數(shù)期后,向培養(yǎng)器中不斷補(bǔ)充新鮮營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),并以同樣速度排出培養(yǎng)物,使微生物的增殖速度及培養(yǎng)基中的總菌量保持不變的培養(yǎng)方法。目前五十六頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于十八點(diǎn)分批培養(yǎng)與連續(xù)培養(yǎng)的關(guān)系目前五十七頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于十八點(diǎn)連續(xù)培養(yǎng)裝置目前五十八頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于十八點(diǎn)恒濁連續(xù)培養(yǎng)概念:不斷調(diào)節(jié)流速而使培養(yǎng)液的濁度(菌體密度)保持恒定的連續(xù)培養(yǎng)方法反應(yīng)器:恒濁器(turbidostat)目的:不斷提供具有一定生理狀態(tài)的細(xì)胞,得到以最高生長(zhǎng)速率進(jìn)行生長(zhǎng)的培養(yǎng)物。應(yīng)用:獲得大量的菌體獲得與菌體生長(zhǎng)相平衡的代謝產(chǎn)物。
目前五十九頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于十八點(diǎn)連續(xù)發(fā)酵的應(yīng)用
連續(xù)發(fā)酵的優(yōu)點(diǎn)
提高設(shè)備利用率便于自動(dòng)化控制產(chǎn)品質(zhì)量較穩(wěn)定節(jié)省人力、物力,水、電、氣負(fù)荷均衡連續(xù)發(fā)酵的缺點(diǎn)菌種易退化易污染雜菌營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)利用率低于分批發(fā)酵目前六十頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于十八點(diǎn)D同步培養(yǎng)物synchronousculture
在同一時(shí)刻,所有的細(xì)胞都處于細(xì)胞周期中的同一階段的培養(yǎng)物叫同步培養(yǎng)物。
Synchronouscultureisaformofcultureonwhichallthecellspaththroughthesamestageofthecellcycleatthesametime。用途:種子液、誘變育種、細(xì)胞融合、生理試驗(yàn)?zāi)壳傲豁?yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于十八點(diǎn)機(jī)械法:依據(jù)處于不同生長(zhǎng)階段的細(xì)胞的大小不同密度梯度離心分離法過(guò)濾分離法
調(diào)整生理?xiàng)l件的同步法——誘導(dǎo)法
溫度調(diào)整法:亞適溫度/最適溫度營(yíng)養(yǎng)條件調(diào)整法:營(yíng)養(yǎng)豐富培養(yǎng)基/無(wú)N培養(yǎng)基用最高穩(wěn)定期細(xì)胞接種誘導(dǎo)芽孢或孢子萌發(fā)抑制DNA合成抑制蛋白質(zhì)合成獲得同步培養(yǎng)物的方法目前六十二頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于十八點(diǎn)A細(xì)胞的生長(zhǎng)和產(chǎn)物的得率得率系數(shù):表示消耗單位重量的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)所形成的細(xì)胞量或產(chǎn)物的數(shù)量。碳源消耗:細(xì)胞合成、產(chǎn)物合成、細(xì)胞維持乙醇發(fā)酵:葡萄糖理論轉(zhuǎn)化率:2mol乙醇/mol葡萄糖實(shí)際轉(zhuǎn)化率:90%~95%菌體生長(zhǎng)與發(fā)酵產(chǎn)物生成目前六十三頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于十八點(diǎn)發(fā)酵產(chǎn)物的類型及其發(fā)酵特點(diǎn)
偶聯(lián)型、部分偶聯(lián)型、非偶聯(lián)型劃分的依據(jù):
發(fā)酵產(chǎn)物形成的速度和菌體生長(zhǎng)速度之間的關(guān)系。B營(yíng)養(yǎng)消耗及產(chǎn)物形成目前六十四頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于十八點(diǎn)代謝產(chǎn)物的積累與菌體生長(zhǎng)平行產(chǎn)物生成的速率為:dp/dt=mX/Yp/c產(chǎn)物生成的比速率:qp=dp/Xdt=m/Yp/c
式中Yp/c:每克細(xì)胞的產(chǎn)物克數(shù)(g產(chǎn)物/g細(xì)胞)
產(chǎn)物菌體類:酵母、蘑菇菌絲、蘇云金桿菌糖類厭氧發(fā)酵:酒精發(fā)酵
(1)與生長(zhǎng)偶聯(lián)的產(chǎn)物的生物合成目前六十五頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于十八點(diǎn)偶聯(lián)型發(fā)酵目前六十六頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于十八點(diǎn)發(fā)酵特點(diǎn):菌體生長(zhǎng)一段時(shí)間后產(chǎn)物才開(kāi)始合成,合成速率與生長(zhǎng)速率有一段平行期,生長(zhǎng)速率減低或停止后產(chǎn)物繼續(xù)較快合成。產(chǎn)物生成速率為:
dp/dt=adX/dt+bX產(chǎn)物生成的比速率:
qp
=am+b
(2)與生長(zhǎng)部分偶聯(lián)的產(chǎn)物的生物合成目前六十七頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于十八點(diǎn)部分偶聯(lián)型發(fā)酵目前六十八頁(yè)\總數(shù)七十七頁(yè)\編于十八點(diǎn)發(fā)酵特點(diǎn):菌體生長(zhǎng)速度減低或停止后產(chǎn)物較快合成產(chǎn)物生成的速率:
dp/dt=bX產(chǎn)物生成的比速率:qp=
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